4-果蝇的伴性遗传及三点试验

sn3 w + +
m sn3 m sn3 + + + +
m sn3 m + + + sn3 +
sn3 w + +
F1雄蝇
m
sn3
w 2种雄配子
m
sn3
w
测交的意义
实验材料
黑腹处（男女）果蝇
野生型（19#）：+ + + 红眼、长翅、直刚毛
突变体（6#） ：w m sn
白眼、小翅、焦刚毛
实验步骤
7天后，麻醉、观察全部F2成虫性状。
实验结果
1、伴性遗传观察数据表
任选1对基因 对F1、F2观 察数据进行 X2测验，并
结合伴性遗
传理论对测 验结果进行 分析
2、三点测验观察数据表
（注：观察统计个体总数应不少于300只）
根据结果确定3个基因之间的遗传关系 遗传作图 确定3个基因之间的排列顺序 计算3个基因之间的遗传距离 绘制连锁图
遗传学实验课
三、果蝇的伴性遗传及三点试验
第5 周
模式生物--果蝇
2n = 8
实验目的
学习果蝇杂交技术，分析遗传数据
进一步认识伴性遗传的特点
掌握三点测验的原理与方法 掌握遗传图谱绘制原理与方法
实验原理
伴性遗传：遗传基因位于性染色体上的遗传现象
基因的连锁交换与基因定位
遗传作图
1、同一条染色体上的基因连锁
2、同源染色体的非姊妹染色单体之间发生交换， 产生 重组型配子 3、重组率 (重组型配子占总配子的百分比) 反映交换率。 如果2个基因间只发生一次交换，重组率=交换率； 如发生2次或2次以上交换，重组率<交换率 4、基因间距离越远，越易发生交换，交换率越高
果蝇的遗传图谱
三点测交
野生型(+++) × 三隐性突变体（abc） 三因子杂种（abc/+++）× 三隐性突变体（abc）
第5 周
微核率的大小与用药剂量或辐射累积效应呈正相关，因 此，微核是常用的遗传毒理学指标之一。 实验步骤
浸种催芽 用高盐或重金属其中一种液体处理根尖，设对照（自来水），三 次重复，室温放置30分钟； 用自来水冲洗干净，放回铺有滤纸的培养皿，带回宿舍培养24h 后，带到实验室滴加固定液固定，用于观察。
室大量、快速繁殖。
植物原生质体分离与培养的意义
细胞壁的再生与形成过程 细胞生理学研究：如质膜的表面特征、离子的吸收与 转运、激素及抑制剂的作用机理等 外源物质的摄取：如病毒、细菌、细胞器、蛋白质等
植物细胞转基因：显微注射、基因枪、载体
体细胞融合：远缘杂交
性细胞的分离与培养：性细胞的功能、离体受精
注：能否将正交组合雄性个体的观察数据与反交组合的观察 数据合并计算？
思考
1、果蝇杂交操作中应注意哪些事项？（收集处女蝇 、接入亲本蝇后培养瓶要平放、及时释放亲本蝇）
2、测交的定义。若进行常染色体基因三点测验，在 程序设计上与本实验有何差别？ 3、重组值与遗传图距的关系
下周实验
1、释放三点试验亲本
2种亲本类型 6种重组类型 三因子的顺序及遗传距离
三点测交基因型模式图
P w m sn w m sn × + + +
F1
w m sn + + +
×
w m sn
F2
测交后代：2种亲本类型 6种重组类型
三点测交中F1配子的基因型
m sn3 F1雌蝇 + m 8 种 雌 配 子 m + + + + + + + w + w + + + + w w + + w m sn3 w m sn3 w
实验步骤
取生长肥嫩的蚕豆叶片，由镊子小心撕去下表皮
剪成0.5X0.5cm的小块，约10块，置青霉素小 瓶中，叶背面朝下，加 2 ml 混合酶液（2%纤 维素酶 + 2%果胶酶），37℃培养箱中暗培养 酶解 1.5 h
取酶解液置载玻片上，盖上盖玻片，显微镜观察
遗传学实验课
二、蚕豆根尖微核检测
遗传学实验课
第5周
内 容
一、蚕豆叶肉细胞原生质体分离 二、蚕豆根尖微核检测 三、果蝇的伴性遗传及三点试验
遗传学实验课
一、蚕豆叶肉细胞原生质体分离
第5 周
实验目的
了解植物原生质体的有关知识
学习酶法分离植物原生质体的方法
实验原理
植物原生质体：是除去细胞壁以后的裸露细胞。 主要特点：无细胞壁，具有细胞全能性，可在实验
一个号，将亲本蝇在麻醉瓶中麻醉，在观察镜下辨
明雌雄，迅速转入平放于固定在实验台上的相应培 养瓶，待麻醉的果蝇苏醒后，再将瓶放正即可； 每组同学将果蝇的3间婚房放置于25℃温室中培养；
今天的试验到此结束
7天后，F1幼虫出现，倒出亲本果蝇；
7天后，麻醉、观察全部F1成虫性状，并每组合各选
5对接入新的培养瓶中继续培养； 7天后，F2幼虫出现，倒出F1亲本果蝇；
2、数量性状的观测分析
源自文库
植物原生质体分离的方法
机械法：高渗溶液处理后，研磨，得到球形原生质体
酶解法：纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶
渗透压稳定剂：甘露醇、山梨醇等
质膜稳定剂：氯化钙、葡萄糖硫酸钾
实验材料 蚕豆叶片
蚕豆：拉丁学名： Vicia faba Linn ，别称： 胡豆、佛豆、胡 豆、川豆、倭豆、罗汉豆 ， 双子叶植物，我国四川分布最多， 次为云南和湖南
组合设计，在培养瓶上做好标记：
正交：野生型(+++) × 三隐性突变体（abc） 1瓶
解读：19#雌性（5头）与6#雄性（5头）共处一室，看能 发生什么故事? 反交：三隐性突变体（abc） × 野生型(+++) 2瓶
解读：6#雌性（5头）与19#雄性（5头）共处一室，看能
发生什么故事?
2个同学为1组，首先把观察镜调试好，一人负责