兽医生物制品是根据免疫学原理
兽用生物制品概述
兽用生物制品概述兽用生物制品是根据免疫学原理，利用微生物、寄生虫及其代谢产物或免疫应答产物制备的一类物质。
这类物质专供相应疾病的诊断、预防和治疗之用。
从狭义上讲，可将用于畜禽疾病的诊断、检疫、治疗和免疫预防的诊断液、疫苗和抗血清统称为兽用生物制品。
一、生物制品简史自11世纪起，我国就有峨嵋山人用天花病人的痂皮接种儿童鼻内或皮肤划痕以预防天花的记载，以后又相继传到日本和欧洲，这种种痘术被视为生物制品创制及主动免疫的雏型。
1976年英国医生詹纳根据种痘术的启示，用牛痘浆或痘痂给人接种预防天花，发明了牛痘疫苗，在英语中也由牛痘（Vaccinia）而延伸为疫苗(Vaccine）。
其后，法国免疫学家巴斯德在1881年及其之后的工作中，用理化方法以及生物学方法，减低病原微生物毒力，相继研制成了用减毒株制成的炭疽芽孢苗、连续通过兔体获得的减毒狂犬病疫苗以及减毒禽霍乱和猪丹毒，为免疫学和生物制品学奠定了基础。
1889年耶森等从白喉杆菌培养物滤液中分离到白喉菌素，免疫小鼠和家兔后在血清中发现有中和白喉菌素的物质，从而创制了抗毒素血清，用于治疗感染，使之获得被动免疫，这一血清学的发现为以后制备各种被动免疫血清提供了科学依据。
贝菲福和科勒在1898年提出制造灭活苗的方法。
罗曼在1923年用加热或福尔马林溶液使一些细菌的蛋白毒素（如破伤风毒素）失去毒性，但免疫原性不变，并命名为类毒素，用以免疫动物获得保护。
此后，又相继研制出了明矾、氢氧化铝和矿物油等作佐剂，为提高生物制品的免疫效果起到了重要作用。
值得一提的是活德菲等人在本世纪30年代用鸡胚增殖鸡痘病毒获得成功，首次成功地在实验室大量增殖病毒，为病毒疫苗的研制奠定了基础。
冈德氏1949年又用鸡胚组织培养技术，为生物制品的研制开辟了一个新途径。
1975年科勒和密尔斯坦又创造了淋巴细胞杂交瘤技术，从而使单克隆抗体的研制得到蓬勃发展。
自20世纪80年代起基因工程技术迅速发展，获得了大量基因重组疫苗和遗传工程疫苗新制品，把生物制品的研制推向了现代高新技术领域。
1兽用生物的制品概念根据免疫学原理
1兽用生物制品概念根据免疫学原理，利用病原体（微生物和寄生虫）及其代谢产物或免疫应答产物制备的一类生物制剂。
2疫苗由病原体(微生物和寄生虫)及其代谢产物制成的用于主动免疫的生物制品称为疫苗。
3.一般灭活苗菌、毒种应是标准强毒或免疫原性优良的弱毒株，经人工大量培养后，用理化方法将其杀死（灭活）后制成灭活苗，需加佐剂提高其免疫力。
4.自家灭活苗是指从患病动物自身病灶中分离出来的病原，经培养、灭活后制成，再用该动物本身。
用于治疗慢性、反复发作而用抗生素治疗无效的细菌性或病毒性感染。
如顽固性葡萄球菌感染。
5.脏器灭活苗（组织灭活苗）利用病死动物含病原微生物脏器制成乳剂，加甲醛等灭活脱毒所制成的疫苗。
如兔病毒性出血症，肝脏中含毒量较高。
6.弱毒苗微生物自然强毒株通过物理（温度、射线等）、化学（醋酸铊、吖啶黄等）或生物（非敏感动物、细胞、鸡胚等）处理，并经连续传代和筛选，培养而成的丧失或减弱对原缩主动物致病力，，但仍保存良好免疫原性和遗传特性的毒株或从自然界筛选的具有良好免疫原性的自然弱毒株，经培养增殖后制备的疫苗。
7.类毒素由有关细菌产生的外毒素，用适当浓度的甲醛使之脱毒而制成的生物制品。
8.抗病血清为含高效价特异性抗体的动物血清制剂，能用于治疗或紧急预防相应病原体所致疾病，又称被动免疫制品。
9.免疫原性刺激机体免疫系统产生特异性免疫应答的能力10. 免疫反应原性与相应的应答产物在体内外发生特异性结合的能力11.抗原：一类能刺激机体免疫系统使之产生特异性免疫应答，并能与相应的应答产物在体内外发生特异性结合的物质。
12.抗原决定族抗原分子中决定抗原特异性的特殊化学集团，又称为表位13.免疫球蛋白是指具有抗体活性或化学结构与抗体相关的球蛋白14.抗体（antibody,Ab)是B细胞识别抗原后增殖分化为桨细胞所产生的一种蛋白质，主要存在于血清等体液中，能与相应抗原特异性地结合，具有免疫功能。
15.抗原递呈细胞在免疫应答过程中能够摄取、加工、处理抗原，并将抗原信息提呈给特异性淋巴细胞的一类免疫细胞.16.灭活与灭活剂微生物学意义上灭活有两层面含义：、1、是指破坏或杀死微生物使其成为没有生命物质的过程。
生物制品的运输、保存和使用—生物制品的使用
氢氧化铝、矿物油、卡介苗
5.免疫途径
• 非注射途径
– 经口投喂；口、鼻腔喷雾；点眼；皮肤
• 注射途径
– 肌肉 – 皮下 – 皮内 – 腹膜内 – 卵内或胚胎内 – 靜脉内
6.免疫策略
• 通常注射2次，年度追加注射 • 新生幼畜通常由母畜免疫而获得母源抗
程序：成年公母猪一年一次，仔猪7-15日龄一次， 后备配种前一次。
11.猪传染性萎缩性鼻炎（AR）
猪AR是由支气管败血波氏杆菌和产毒素多杀性巴氏杆菌引 起的一种慢性呼吸道传染病。
其特征为：鼻炎、颜面变形，鼻甲骨下卷曲萎缩。打喷嚏， 流鼻血。 防制：可用抗生素治疗。
疫苗：A、支气管败血波氏杆菌Ⅰ项菌灭活菌苗。 B、支气管败血波氏杆菌＋D型产毒素多杀 性巴氏
缺点: 在体内不复制，接种剂量为刺激免疫反应的全部剂量。 通常需要2次以上注射7-14天开始产生；21天达到较高水 平。 副反应：局部和全身（过敏等）
猪场常用的灭活苗
• 口蹄疫 • 喘气病 • 大肠杆菌 • 萎缩性鼻炎 • 细小病毒 • 传染性胃肠炎/流行性腹泻 • 蓝耳病灭活苗 • 细菌性疾病灭活苗：链球菌、副猪嗜血
3.猪传染性胃肠炎
猪传染性胃肠炎（TGE） 猪流行性腹泻（PED） —— TP二联疫苗
猪传染性胃肠炎是由TGE病毒引起的猪的一种 急性胃肠道传染病。
猪流行性腹泻是由PED病毒引起的猪的一种高 度接触性肠道传染病。
该病10日令内仔猪死亡率100％，成年猪几乎 不死。
我国哈兽研成功研制的——TP二联灭活苗经后 海穴接种，灭活苗主动免疫保护率为96％、被动 免疫保护率为85.1％。
将病原体杀死或致弱=> 疫苗
免疫学在兽医学中的应用PPT课件
亚单位疫苗
亚单位是只提取病原体的有效结构抗原成 分加佐剂制成的疫苗。亚单位苗比全病毒全菌苗 更安全，但制造较困难，价格较贵。
基因工程疫苗
应用工具酶，将病原微生物DNA中编码有效 蛋白抗原的基因切出，与质粒DNA重组，转入细 胞，通过细胞的大量繁殖，表达生产的重组亚单 位疫苗。
诊断液（diagnostic agent）
死苗（Killed vaccine）
死苗又称灭活疫苗（inactivated vaccine）。它是将免疫原性优良的病原微生物， 经人工培养大量增殖后，用化学或物理的方法杀 死，加佐剂而成。死苗安全，保存条件没有活苗 那么严格，但在杀死过程中免疫原性损失较大， 通常仅引起有限的体液免疫，因而免疫效果较活 苗差。且用量较大，成本较高。
2．诊断抗体（diagnostic antibody agent）
诊断抗体是用已知细菌或病毒免疫试验动物制备 的免疫血清，或单克隆抗体，或它们的标记物等，用 于检测或鉴定抗原的生物制品，称为诊断抗体。例如 沙门氏菌诊断血清，抗体致敏红细胞，荧光抗体，酶 标抗体等。
为使免疫学诊断试剂更便利，试剂更规格，结果 更准确，按检验各种抗原或抗体所需的诊断液及配合使 用的稀释液等配制成成套装盒，称为诊断试剂盒。
死疫苗与活疫苗的比较
区别点 制剂特点 接种剂量与特点 保存及有效期 免疫效果
死疫苗 死，强毒株 量较大，2~3次 易保存，约1年 较低， 维持数月~2年
活疫苗 活减毒株 量较小，1次 不易保存，4℃数周 较高， 维持3~5年甚至更长
菌苗、疫苗（用细菌等微生物制成的制 品）,分死、活疫苗
• 死疫苗 • 微生物毒力较强 • 已被杀死 • 易保存，较稳定 • 接种剂量大，2-3次 • 免疫效果较低，持续1
兽医生物制品的历史、现状及发展趋势
生 物 制 晶 ，以 期 能够 达 到预 防 治 疗 疾 病 的 Ｈ的 。
１ 兽 医生 物 制 品 发 展 起 源 ｌ 世 纪 ， 法 国 学 者研 制 的 火 活 疫 苗 是 川 加 热 杀 死 的 猪 乱 沙 门 是 杆 制 成 的疫 茁 （８ ４ １ ８ ） 免 疫 鸽 被 免疫 的 鸽 １８～ ８６， ｒ后 获 得 了 免 疫 保 护 ， 能 耐 受 强 毒 猪 霍 乱 沙 门 氏 杆 菌 的 攻
兽医生物制品是根据免疫学原理 ，利用微 生物 、寄生 虫及其 代谢产物 或免 疫应 符产物 制备 的一类 生物制 剂 ，
用 于 动 物 传 染 性 疾 病 或 其 他 相 关 疾 病 的 预 防 诊 断 和 治
疗 。狭 义 上 讲 ，生 物 制 品主 要 指 疫 苗 、抗 ｍ 清 及诊 断 液 ；广义上讲 ，生物 制 品还应包 括 多种Ｊ 液制剂 、抗 生 ｉ ｆ 【 素 、脏 器制 剂及 非特 性 免疫 制 剂（ 干扰 素 、微生 态制
学的奠基人之 ‘ 路易・ 巴斯德（ｏ ｉ Ｐ ｓ ｕｅ发明了禽霍乱 Ｌ ｕｓ ａｔ ｒ） ｅ 疫苗 、炭疽 高温减毒 苗和 狂犬病 干燥 脊髓 疫苗 ，使疫苗 的研 究进入 了一个崭 新 的阶段 。在此 阶段 ，疫苗 的， 产 土 是极 为原始 的 ，产量 小质 量差 。 要 是利 用 肉汤 全培养 物 制造 的疫 苗 ，川 于 动物 或 人 体 后 常 产生 严 重 的剐 作
３ 次，或者直 母 狐拒绝交 配为Ｊ 。复配能提高繁殖力 ， 卜
所 以 配 种 员 必 须 认 真 坚 持 母 狐 的 复 配 工 作 在 狐 的 配旰 巾
４２ 人 工授 精 法 是我 吲 迅速 推 广应 川 的。 先进 技 ． 项 术 。其优 点是 ：（ ）可利用 优 良种狐基 的扩 散和 品种 １
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•兽医生物制品复习题•一、基本概念：1.兽医生物制品: 是根据免疫学原理，利用微生物、寄生虫及其代谢产物或免疫应答产物制备的一类物质，专供相应的疫病诊断、治疗或预防之用。
2.疫苗：凡接种动物后能产生自动免疫和预防疾病的一类生物制剂均称为疫苗，包含细菌性菌苗、病毒性疫苗和寄生虫性虫苗。
3.活疫苗：可以在免疫动物体内繁殖；能刺激机体产生全面的系统免疫反应和局部免疫反应；免疫力持久，有利于清除局部野毒；产量高、生产成本低。
但是，该类疫苗残毒在自然界动物群体内持续传递后有毒力增强和返祖危险；有不同抗原的干扰现象；要求在低温、冷暗条件下运输和储存。
它包括传统的弱毒疫苗及现代的基因缺失疫苗、基因工程活载体疫苗及病毒抗体复合疫苗等。
4.灭活疫苗：该类疫苗由完整病毒（或细菌）经灭活剂灭活后制成，其关键是病原体灭活。
既要使病原体充分死亡，丧失感染性或毒性，又要保持病原体免疫原性。
目前，常用的灭活剂有甲醛、乙酰乙烯亚胺（AEI）、乙烯亚胺（BEI）和β-丙酸内酯等。
该类疫苗历史较久，制备工艺比较简单。
目前我国已有很多商品化灭活疫苗，如猪口蹄疫、鸡减蛋综合征和兔出血症等灭活疫苗。
5.重组活疫苗：通过基因工程技术，将病原微生物致病性基因进行修饰、突变或缺失，从而获得弱毒株。
由于这种基因变化，一般不是点突变（经典技术培育的弱毒株基因常为点突变），故其毒力更为稳定，返突变机率更小，如猪伪狂犬病基因缺失疫苗。
6.基因工程活载体疫苗：是指用基因工程技术将致病性微生物的免疫保护基因插入到载体病毒或细菌（通常为疫苗毒（菌）株）的非必需区，构建成重组病毒（或细菌），经培养后制备的疫苗。
该类疫苗不仅具有活疫苗和死疫苗的优点，而且对载体病毒或细菌以及插入基因相关病原体的侵染均有保护力。
同时，一个载体可表达多个免疫基因，可获得多价或多联疫苗。
目前，常用的载体病毒或细菌有痘病毒、腺病毒、疱疹病毒、大肠杆菌和沙门氏菌等。
7.亚单位疫苗：是指病原体经物理或化学方法处理，除去其无效的毒性物质，提取其有效抗原部分制备的一类疫苗。
兽药市场营销
1、兽药：是用以预防、治疗和诊断畜禽等动物疾病的物质总称。
2、生物制品：根据免疫学原理，利用微生物、寄生虫或其代谢产物以及动物或人的血液、组织等生物材料为原料，通过生物学、生物化学以及生物工程学的方法加工制成的一类制品。
3、疫苗：由病原微生物、寄生虫及其组分或代谢产物所制成的，接种机体后能产生自动免疫，预防疾病的一类生物制剂。
4、市场细分：是根据整体市场上客户需求的差异性，以影响客户需求和欲望的某些因素为依据，将一个整体市场划分为两个或两个以上的客户群体，每一个需求特点相类似的客户群就构成一个细分市场（或子市场），各个不同的细分市场，客户群之间则有明显的需求差别。
5、市场预测：是根据历史资料、已有的知识经验和市场调查所获得的市场信息，运用科学的方法和手段，对市场供求变化等因素进行细致的分析研究，并推断未来一定时间市场上各种变量的水平和发展趋势，从而为制定计划目标和营销决策提供可靠的依据。
6、产品市场生命周期：指产品从投入市场到被淘汰为止所经历的时间和阶段。
7、销售渠道：是产品从生产者到客户的所有权转移（或协助所有权转移）所经过的组织和个人体系。
8、促销：又叫“销售促进”，是指通过人员或非人员的方法传播产品信息，帮助客户认识，熟悉某种产品，并促进其产生购买意愿的活动的总称。
9、市场营销：企业识别目前尚未满足的需求和欲望，选择和决定企业为其服务的目标市场，通过适当产品、劳务、计划为目标市场服务的一系列活动。
10、市场环境:与企业有潜在关系的内部、外部力量或机构所构成的体系。
11、市场定位：指设计一定的营销组合，以影响潜在客户对一个品牌、产品线或一个组织的全面认识和感知。
12、市场调查:是指企业运用科学的方法，有目的、有计划、有步骤地收集记录、整体分析及传递有关市场方面的各种信息和情报资料的复杂运动过程。
13、取脂定价策略：指企业为新产品制定相当高的最初价，并采集高价上市策略，然后随时间推移逐渐降价的策略。
新版兽医生物制品学
（4）合成肽疫苗
• 合成肽疫苗是一种仅含抗原决定簇的小肽; • 即用人工方法按天然蛋白的氨基酸顺序合成
保护性短肽，然后与载体蛋白连接后加佐剂 所制成的疫苗。
（5）转基因植物可食疫苗
• 利用分子生物学技术，将病原微生物的抗原 基因导入植物，并在植物中表达出活性蛋白;
• 人或动物食用含有该种抗原的转基因植物， 激发肠道免疫系统，从而产生针对相应病原 微生物的免疫能力。
目的基因表达
以获得的表达产物作为免疫原制成的疫苗， 称为基因工程亚单位疫苗。
例如： • 大肠杆菌菌毛基因工程亚单位疫苗 • 口蹄疫基因工程亚单位疫苗 • 乙型肝炎基因工程亚单位疫苗
（2）基因工程活疫苗
基因工程技术
病原微生物
删除其致病基因或部分片段
获得毒力丧失或降低的毒株
减毒彻底、不易力返祖、安全 遗传性能更稳定
血液制品(白蛋白、丙种球蛋白)
其他生物制品 —— 非特异性免疫制品(干扰素、胸腺肽)
微生态制品(促菌生)
2、按制备方法分类
普通制品 —— 利用一般生产方法制备的，
未经浓缩、纯化处理
精 制 品 —— 将原材料用物理或化学方法去除无效成分,
并进行适当浓缩
单价制剂 —— 只利用一种微生物的单一血清型
多价制剂 —— 利用一种微生物的若干血清型
第十三章 畜禽防疫
第一章 兽医生物制品概述
生物制品技术
• 是一种既古老而又充满时代信息的技术， 并与生命健康息息相关。
一、兽医生物制品的概念
根据免疫学原理，以微生物、寄生虫及其代 谢产物或免疫应答产物，以及动物组织等生物 材料为原料，通过生物学、生物化学或生物工
程学等方（法加b工i制o备lo的g一类ic生a物l制）剂。
兽医生物制品学.doc
兽医生物制品学：是以预防兽医学和生物工程学理论为基础，研究动物传染病和寄生虫病的免疫预防、诊断和治疗用生物行制品的制造理论和技术、生产工艺、制品质量检验与控制及保藏和使用方法，以增强动物机体特异性和非特异性免疫力，及时准确诊断动物疫病，并给予特异性治疗，防止疫病传播的综合性应用学科。
兽医生物制品：是根据免疫学原理，利用微生物、寄生虫及其代谢产物或免疫应答产物制备的一类物质，专供相应的疫病诊断、治疗或预防之用。
疫苗：凡接种动物后能产生自动免疫和预防疾病的一类生物制剂均称为疫苗，包含细菌性疫苗、病毒性疫苗和寄生虫行疫苗。
兽医生物制品学的应用：免疫预防；诊断；治疗生物制品安性质分类：疫苗、类毒素、诊断制品、抗病血清、微生物制剂、副免疫制品。
疫苗安抗原的性质和制备工艺分为：活疫苗、死疫苗、基因疫苗活疫苗与死疫苗的优缺点比较：活疫苗可以在免疫动物体内繁殖，能刺激机体产生全面的系统免疫反应和局部免疫反应；免疫力持久，有利于清除局部野毒；产量高，生产成本低。
但是该类疫苗残毒在自然界动物群体内持续传递后有毒力增强和返祖危险；有不同抗原的干扰现象；要求在低温、冷暗的条件下运输和储存。
死疫苗不能在免疫动物体内繁殖，比较安全，不发生全身性副作用，无毒力返祖现象；有利于多价或多联等混合疫苗；制备稳定，受外界环境影响小，有利于保存和运输。
但该类疫苗生产成本高，需多次免疫。
而且一般只能诱导机体产生体液免疫和免疫记忆，故常需用佐剂或携带系统来增强其免疫效果。
灭活：指破坏微生物的生物学活性、繁殖能力和致病性，但尽可能不影响其免疫原性。
或指破坏诊断血清或待检血清中的补体活性，以避免补体对诊断试验的干扰作用。
用于灭活微生物的化学试剂或药物。
微生物致弱：是指通过各种方法使病原微生物的致病性降低或丧失，但其它生物学活性以及免疫原性并未发生本质性改变。
灭活剂：用于灭活微生物的化学试剂或药物灭活剂的种类：1.甲醛溶液2.常用烷化剂：3.苯酚：4.结晶紫甲基青莲甲紫5.β-丙酰内酯影响灭活作用的因素（1）灭活剂特异性（2）微生物种类与特性（3）灭活剂浓度（4）灭活剂温度（5）灭活时间（灭活时间与灭活剂浓度和作用温度密切相关）（6）酸碱度（在微酸性时灭活速度慢，抗原性保持较好；碱性时灭活速度快，担抗原性易受破坏（7）有机物存在。
生物制品的基本知识
7,猪流行性感冒 该病是由猪流感病毒引起的猪的一种急性,高度接触性呼吸 道传染病. 临床上以突然发病,发热,咳嗽,呼吸困难,衰竭然后迅速 康复. 猪流感无特效药,只有对症治疗. 疫苗:猪流行性感冒灭活苗,国外已经研制成功.国内已经 进入疫苗审批程序.
8,猪链球菌病 该病是由各种致病性链球菌感染引起的一种人畜共患的传染 病.败血症,化脓性淋巴结炎,脑膜炎,关节炎为主要特征. 猪链球菌 型菌珠可导致人类的脑膜炎,败血症,心内膜炎, 严重可致人死亡. 防制:抗生素有一定效果. 弱毒苗是由C群链球菌制备的.(我公司有) 灭活苗是由链球菌二型菌株制备的. 也可用本场分离的菌株制备的灭活苗效果更加.
9,大肠杆菌病 大肠杆菌病是由致病性大肠埃希氏菌的血清型引起的多种动 物不同疾病的统称.以新生幼畜动物为主的肠道传染病. 仔猪黄痢:(早发性大肠杆菌病)五日龄内发生.有高发病 率和死亡率. 仔猪白痢:(迟发性大肠杆菌病)10-30日龄5天,各 分别注射疫苗,常用的有:A,仔猪大肠杆菌三价灭活苗, 带有K88,K99,987P菌毛抗原.(im) B,仔猪大肠杆菌 K88,K99双基因工程灭活苗.(耳根 或 in) C,仔猪大 肠杆菌K88,LTB双基因工程灭活苗.(im 或 口服)
一什么是生物制品一什么是生物制品生物制品是根据免疫学原理用微生物细菌病毒生物制品是根据免疫学原理用微生物细菌病毒立克次氏体以及微生物的毒素等动物的血液组织立克次氏体以及微生物的毒素等动物的血液组织制成的用以预防治疗以及诊断人或动物传染病的一制成的用以预防治疗以及诊断人或动物传染病的一类药品
生物制品的基本知识
一,什么是生物制品
生物制品是根据免疫学原理,用微生物(细菌,病毒,立 克次氏体以及微生物的毒素等),动物的血液,组织制成 的,用以预防,治疗以及诊断人或动物传染病的一类药品. 其中包括:供预防传染病发生的菌苗,疫苗,类毒素;供 治疗或紧急预防用的抗菌血清,抗病毒血清,抗病毒素, 噬菌体,干扰素等;和供诊断传染病用的各种抗原抗体诊 断液等.
浅谈兽用生物制品贮存、使用中存在的问题
次 ０ｄ 称疫苗） 和类 毒素 ；供 治疗或紧 急 运输 １ ，１ 之 内必须用完 。就 目前 的客观条 预 防用 的抗病血清和抗 毒素 ；以及供 诊断用 的各 件 下 ，冻干疫苗夏 季运输 很难做到 每次运 输都有 苗、疫 苗 种诊 断液 。其贮藏条件 和使用原则 与一般药 品不 冷 冻条件 。在销售 各个环 节 中运输温 度 的变化 是 目前不好避免 的事情 ，如 果销售商 的冷链 设施差 同，各 自有其特殊规 定 。
［ 收稿 日期］ ０ ６ ０ — ３ ２ ０ — ８ ２
射 的水平 ，有 的还造 成免疫 猪发病 ，反而影 响猪
２ ｏ １ ｏ ６ ０
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兽药 天，其 结果会 降低免疫效 抗病血清 除用作治疗外 ， 果 。
注射 反应 ，而 且 还 可 能 减 弱机 体 产 生 抗 体 的机
反 复冰 冻 与 融化 对任 何微 能 ，从而减低 预防注射 的效果 。所 以，究 竟哪些 生物 都具有很大 的破 坏力 。活 疫苗 和诊断液尽 量 菌苗或疫苗 可 以同时注 射不会 彼此抑制而 获得 良 避 免反复冻融 。反复冻融 的危害数据 见表 ｌ 。 １３ 冻 干苗 不能冷 藏 包装运 输 ． 好 的效果 ，哪些不可 以同时注射 还必须通 过试验 一 般来 说 ，疫 来证 明。例 如有 的人将 猪瘟疫 苗和 口蹄疫 疫苗 同 时注射 ，结果两种 疫苗的抗 体效价都低 于单独注
维普资讯
残谈兽 用 生物制 品贮存 、谈 用 中存在 的 问题
李 惠兰
１ ６） ０ （ 宁省动物 防疫站 ，辽宁 沈 阳 １ １ １ 辽
中图分类号 Ｓ５．９ ８ ９ ７ ７ 文献标识码 Ｃ
文章编 号 １ ７— ６ ２ ２ ０ ） ０ ４ － ２ ２ ９ ９ （０ ６ １－ ０ ５ ０ ６ ０
兽医生物制品学
兽医生物制品学第一讲绪论一、兽医生物制品学的概念1、兽医生物制品学（veterinary biologicology）以预防兽医学和生物工程学理论为基础，研究动物传染病和寄生虫病的免疫预防、诊断和治疗用生物性制品的制造理论和技术、生产工艺、制品质量检验与控制及保藏和使用方法，以增强动物机体特异性和非特异性免疫力，及时准确诊断动物疫病，并给予特异性治疗，防止疫病传播的综合性应用学科。
2、兽医生物制品(veterinary biologics)是根据免疫学原理，利用微生物、寄生虫及其代谢产物或免疫应答产物制备的一类物质，专供相应的疫病诊断、治疗或预防之用。
二、兽医生物制品学的应用：免疫预防、诊断、治疗1、免疫预防：18-19世纪,牛瘟在法国和南美引起大量牛只死亡；牛肺疫曾在亚非地区包括我国广泛流行；1956年周泰冲、袁庆志等研制成功的中国系（C系）猪瘟兔化弱毒疫苗。
口蹄疫多价灭活疫苗已被成功应用，特别是口蹄疫在欧洲的控制和扑灭、其中部分应归功于O型、A型、C型口蹄疫三价灭活疫苗的有效应用。
2、诊断：猪瘟、猪伪狂犬病、鸡新城疫及传染性法氏囊病等ELISA抗体检测试剂盒已在普遍使用。
3、治疗：有些动物传染病的免疫血清、痊愈血清和卵黄抗体等生物制品具有帮助动物机体杀死、抑制或消除病原体的致病作用。
三、生物制品的发展史（一）经验时期时间：十一世纪-1798年主要事件：1、十一世纪我国的“痘症防御法”。
2、1400年，我国甘肃牧区的“灌花”预防牛瘟。
（二）实验时期时间：1798年-1945年主要事件：1、1798年Jenner（秦纳）：天花疫苗的由来及效果的研究。
2、疫苗技术研究：1881－1885Pasteur(巴斯德）培养鸡霍乱陈旧物、高温培养炭疽、兔体传代狂犬病毒，首创弱毒疫苗。
1886Salmon首创灭活技术并培育成功灭活疫苗。
1888外毒素的脱毒技术，研制成功类毒素。
1890 德国人Behring和日本人北里（Kitasato）将白喉外毒素注射给动物，发现抗毒素。
兽医生物制品名词解释重点
兽医生物制品：根据免疫学原理，利用微生物、寄生虫及其代谢产物或免疫应答物制备的一类物质。
作为诊断、治疗、预防特定传染病或其它疾病的制剂。
【1】普通制品：利用一般生产方法制备的，未经浓缩、纯化处理所制成的。
精制品：将原材料用物理或化学方法去除无效成分,并进行适当浓缩所制成的。
单价制剂：只利用一种微生物的单一血清型多价制剂：利用一种微生物的若干血清型多联苗：一次注射可以预防多种疾病的疫苗。
疫苗：由病原微生物、寄生虫及其组分或代谢产物制成，接种动物后能产生主动免疫，从而预防疾病的一类生物制剂。
传统疫苗：利用微生物或寄生虫或代谢产物等完整个体制成的疫苗。
死疫苗又称灭活苗：是将病原体经理化方法灭活后，丧失感染性保持其免疫原性制成的疫苗。
弱毒苗：将微生物的自然强毒株通过化学、物理或生物学方法，使其对原宿主动物致病力丧失或只引起亚临床感染，但仍保存良好抗原性；以此人工致弱的毒株制备的疫苗。
类毒素：是用细菌产生的外毒素经甲醛处理，去除毒性作用，保留抗原性后精制而成。
亚单位疫苗：是指提取微生物有效抗原部分，利用一种或几种亚单位结构成分制成的疫苗。
基因工程亚单位疫苗：是指它只含有病原体的一种或几种抗原基因，通过基因重组技术转入适当的细菌、酵母菌或哺乳动物细胞，以获得的表达产物作为免疫原制成的疫苗。
基因工程活疫苗：病原微生物通过基因工程技术删除其致病基因或部分片段从而获得毒力丧失或降低的毒株而制成的疫苗。
基因缺失疫苗：利用基因工程技术，使致病的病原体基因组中某个或某些与致病性相关的基因或非必要糖蛋白缺失构建而成。
重组载体疫苗：将目的病原保护性抗原的基因序列插入到另一种微生物的无毒株或弱毒株基因组中，并让插入的外源性基因正常表达，构建成重组载体疫苗株。
核酸疫苗：是将一种或多种抗原编码基因克隆到真核表达质粒载体上，将构建的重组质粒直接注入到体内而激活机体免疫系统。
合成肽疫苗：用人工方法按天然蛋白的氨基酸顺序合成保护性短肽，然后与载体蛋白连接后加佐剂所制成的疫苗。
兽用生物制品技术
兽用生物制品概述第一节兽用生物制品分类与命名原则兽用生物制品是根据免疫学原理，利用天然或人工培养的微生物、寄生虫及其代谢产物或免疫应答产物制备的一类物质，专供相应的疫病诊断、治疗或预防之用。
一.兽用生物制品的分类兽用生物制品种类繁多，按不同的标准分类有不同的归类。
本书依据生物制品的性质、用途和制法等将其分为疫苗、类毒素、诊断制剂、免疫血清、免疫调节剂、微生态制剂。
1.疫苗凡接种动物后能产生主动免疫和预防疾病的一类生物制剂均称为疫苗。
（1）活疫苗又称弱毒疫苗，它是微生物自然强毒株通过物理、化学或生物处理，并经连续传代和筛选，培养而成的丧失或减弱对原宿主动物致病力，但仍保存良好免疫原性和遗传特性的毒株，或从自然界筛选的具有良好免疫原性的自然弱毒株，经培养增殖后制备的疫苗。
其优点是可以在免疫动物体内繁殖；能刺激机体产生全面的系统免疫反应和局部免疫反应；免疫力持久，有利于清除局部野毒；产量高、生产成本低。
缺点：是疫苗残毒在自然界动物群体内持续传递后有毒力增强和返祖危险；有不同抗原的干扰现象；要求在低温、冷暗条件下运输和储存。
（2）灭活疫苗又称死疫苗，用标准强毒或免疫原性良好的弱毒株，经人工大量培养后，用理化方法将其灭活后制成的疫苗。
其优点是微生物不能在免疫动物体内繁殖，安全性好；不存在毒力返祖现象；有利于制备多价或多联等混合疫苗；制品稳定，受外界环境影响小，有利于保存运输。
缺点是该类疫苗免疫剂量大，生产成本高，有时需多次免疫；有的疫苗存在过敏反应；一般只能诱导机体产生体液免疫和免疫记忆，故常需要用佐剂来增强其免疫效果。
（3）单价疫苗利用同一种微生物菌（毒）株或同一种微生物中的单一血清型菌（毒）株的增殖培养物制备的疫苗。
（4）多价疫苗指用同一种微生物中若干血清型菌（毒）的增殖培养物制备的疫苗。
（5）多联疫苗利用不同种类微生物增殖培养物，按免疫学原理和方法组合而成的疫苗。
（6）同源疫苗指利用同种、同型或同源微生物株制备，又应用于同种类动物免疫预防的疫苗。
生物制品
25死疫苗：不能在动物体内繁殖，比较安全，不发生全身性副作用，无毒力返祖现象，有利于制备多价或多联等混合疫苗
26多价苗：指用同一种微生物中若干血清型菌（毒）株的增殖培养物制备的疫苗。
27抗血清：含有针对某种病原的特异性抗体的血清。
3禽胚培养法是用来培养某些对禽胚敏感的动物病毒的一种培养方法，可用于多种病毒的分离、培养、滴度的测定、中和试验以及抗原制备，也广泛用于生物制品的研究和生产
4细胞培养：cell culture用机械的方法(剪碎)或化学的方法(胰酶)，使动物组织或传代细胞分散成单个细胞悬液后，给以相应的营养和温度等条件，在体外进行培养
5、试比较弱毒疫苗和灭活疫苗的优缺点？活疫苗优点;可以在免疫动物体内繁殖；能刺激机体产生全面的系统免疫反应和局部免疫反应；免疫力持久，有利于清除局部野毒；产量高、生产成本低。缺点：有毒力增强和返祖危险；有不同抗原的干扰现象；要求在低温、冷暗条件下运输和储存。灭活苗优点：比较安全，不发生全身性副作用，无毒力返祖现象；有利于制备多价或多联等混合疫苗；制品稳定，受外界环境影响小，有利于保存运输。缺点：死疫苗不能在免疫动物体内繁殖；疫苗免疫剂量大，生产成本高，需多次免疫；只能诱导机体产生体液免疫和免疫记忆，故常需要用佐剂或携带系统来增强其免疫效果。。弱毒疫苗只需要很小的剂量就可刺激动物体产生强烈的免疫反应，而且免疫维持时间长，一般可达1年甚至更长时间。而灭活疫苗诱导机体产生的免疫应答较弱且免疫维持时间短。但弱毒疫苗保存条件较严格，运输不如灭活疫苗方便。
2影响灭活作用的因素有哪些？1灭活剂特异性2微生物种类与特性3灭活剂浓度4灭活剂温度5灭活时间（灭活时间与灭活剂浓度和作用温度密切相关）6酸碱度（在微酸性时灭活速度慢，抗原性保持较好；碱性时灭活速度快，担抗原性易受破坏7有机物存在
兽医生物制品学
佐剂：传统讲：当一种物质先于抗原或与抗原混合或同时注射于动物体内，能非特异性地改变或增强机体对该抗原的特异性免疫应答，发挥其辅佐作用者，都称之为佐剂新概念：凡是可增强抗原特异性免疫应答的物质均称为佐剂。
保护剂：又称稳定剂，指一类能防止生物活性物质在冷冻真空干燥时受到破坏的物质。
保护剂是保护微生物和寄生虫等活力和免疫力及酶和激素等生物活性的一类物质，还包括细菌或病毒的营养液、赋形剂和抗氧化剂。
联苗：指利用不同微生物增殖培养物，按免疫学原理和方法组合而成。
异源疫苗：用不同微生物的菌株制备的疫苗，接种动物后能使其获得对疫苗并未含有的病原体产生抵抗力。
用同一种中一种型微生物菌株制备的疫苗，接种动物后能使其获得对异型病原体的抵抗力。
元代细胞：由新鲜组织经剪碎并用胰酶消化后制备的细胞。
填空：诊断液可分为诊断抗原、诊断抗体两类。
GMP涉及的范围十分广泛，主要包括人员、厂房设备和原料、管理制度和要求三个方面。
细菌的生长曲线可分为：延缓期、对数期、稳定期和衰亡期。
病毒培养方法可分为：动物接种、细胞培养、鸡胚培养。
根据微生物学控制程度将实验动物分为四级：普通级动物、无菌级动物、SPF动物、清洁级动物。
灭活的方法包括：物理学灭活和化学灭活。
根据佐剂在体内存留的时间将佐剂分为：贮存型和非贮存型。
冻干保护剂通常由三类物质组成：营养液、赋形剂、抗氧化剂。
效力检验的内容包括：免疫原性、免疫持续期、抗原的热稳定性和抗原量的测定。
口蹄疫疫苗主要包括两大类：弱毒疫苗和灭活疫苗。
猪丹毒活疫苗主要包括两大类：灭活疫苗和活疫苗。
判断：1.错铝胶佐剂即能诱导体液免疫，又能明显的诱导细胞免疫。
2.对抗独特型疫苗实际上是一种免疫蛋白。
3.对弗氏佐剂属于油乳佐剂。
4.对抗病毒血清多用同种动物来制备。
5.对母原抗体对弱毒疫苗的免疫影响很大。
6.错用青霉素治疗炭疽是一种特异性治疗方法。
7.错弱毒苗和灭活苗可以混合使用。
8.错生物制品中中的抗原量越多越好。
第二章 兽医生物制品概述 wang
基因工程亚单位疫苗
基因重组技术
病原体的某个或 某几个抗原基因
转入 适当细菌、酵母或哺乳动物细胞
目的基因表达
以获得的表达产物作为免疫原制成的疫苗，称为基因工程亚单 位疫苗。 如：乙型肝炎基因工程亚单位疫苗 口蹄疫基因工程亚单位疫苗
行之有效的免疫方法”。
• 经过一百多年的努力，1980年世界卫生组织宣布
全球消灭了天花。
• 1870年，法国科学家巴斯德发明了第一个细菌减
毒活疫苗——鸡霍乱疫苗。巴斯德将此归纳为对
动物接种什么细菌就可以使其不受该病菌感染的
免疫接种原理，从而奠定了疫苗的理论基础。因
此人们把巴斯德称为疫苗之父。
• 第二代疫苗——亚基疫苗的出现，克服了第一代 疫苗潜在致病性的问题。 天然或重组成分为主。
有排出疫苗毒的可能，存在污染的 不排毒，无污染危险 危险 可能存在其他传染因子 灭活过程中可将传染因子破坏
疫苗合用（联苗）较困难
运输、保存要求条件高 通常制成冻干苗以利保存
容易制成联苗或多价苗
运输、保存方便 均为湿苗
类毒素
又称脱毒毒素。是指细菌生长繁殖过程中产生
的外毒素，经化学药品（甲醛）处理后，成为无毒
• 60年代，我国育成牛肺疫兔化弱毒株，后来逐渐 推广应用牛肺疫兔化弱毒疫苗、牛肺疫兔化绵羊 适应弱毒疫苗和牛肺疫兔化藏系绵羊化弱毒疫苗。 • 1996年在全国消灭牛肺疫，而牛肺疫兔化弱毒疫 苗为世界公认。
猪瘟
• 20世纪50年代我国成功培育猪瘟兔化弱毒株，控制
了我国猪瘟的流行。
• 此外，许多重要禽病疫苗也广泛在养鸡场使用。
（三）按物理性状分类
兽用生物制品的现状、问题及对策
自 １ 世 纪起 ，我 国就 有峨嵋山人用天花病人 的痂 皮鼻 １ 内或皮肤划痕 的力式接种儿意 以预防天花 的记 载 ， ’ 以后 又相
继传 到 日本 和欧洲 这种种痘术被视为生物制 品创制及 主动
毒株若 同样具有上述遗传特性 ，也同样可 以制备弱 毒疫 苗。
如鸡新城疫Ⅳ系苗 、 禽霍乱“ ０ ０ 弱毒菌苗等。 １１” ｆ 价疫苗 ： ３ 惮 利用一种微生物菌（ ） 毒 株或同一种微生物中 的 单一血清型菌（ ） 毒 株的培养物制备的疫苗。如新城疫 Ｉ 系苗 、 传染性支气管炎 Ｈ１０ ２ 弱毒苗 、 鸡马证克氏病 Ｃ Ｉ９ ８ Ｖ １８ 苗等 。 ｆ落； ４ 价疫苗 ： 用同一种微生物中若 干血清型菌（ ） 毒 株的 增 殖 培 养 物 制 备 的 疫 苗 ， 如 鸡 马 立 克 氏 病 多 价 苗 （Ｂ ＋ Ｖ ） 口蹄疫 Ａ、 鼠化弱毒疫苗等。 Ｓ ＩＨ Ｔ 、 Ｏ ｆ 多联 疫苗 ： 南两 种或两 种 以上 的不 同微 生物培 养 ５ ） 凡
Байду номын сангаас
获得成功 。 首次成功地在实验室大量增殖病毒 ， 为病毒疫苗 的 研制奠定 了基础。冈德氏 １４ ９ ９年又用鸡胚组织培养技术 ， 为
生物制 品的研制开辟 了一个新途径 。自 ２ 世纪 ８ 年代起基 ０ ０ 因工程技术迅速发展 ，获得了大鼍基 囚重组疫苗和遗传工程 疫苗新制品， 把生物制品的研制推 向了现代高新技术领域。生
２ 兽 用 生 物 制 品分 类
生物制品 由于微牛物种类 、 动物种类 、 制备 方法 、 毒株性
状、 应用对象等不 同而品种繁杂。按其性质 、 用途和制造方法
可分 为疫苗 、 类毒素 、 诊断 制剂 、 抗血清 、 微生态 制剂等 几大 类 。在此 只对防制 动物疫病 的重要生物制品疫苗进行简述 。 凡具有 良好免疫原性 的微生物 ， 经繁殖和处理后制成 的 制品 ， 接种动物后 能产生相应 免疫力 、 能预 防疾 病的一类 生 物制剂均称为疫苗 ， 包括细菌性疫苗 、 病毒性疫苗 ， 以及寄生
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兽医生物制品是根据免疫学原理，利用微生物、寄生虫及组分或免疫应答治疗的生物制剂。
凡是由病原微生物，寄生虫以及其组分或代谢产物所制成的，用于人工自动免疫的一类生物制剂均称为疫苗。
包括常规疫苗与新型疫苗。
用所预防的病原体本身或其弱毒苗或无毒变种所制成的疫苗叫做同源疫苗。
利用具有类属保护性抗原的非同种微生物所制成的疫苗叫做异源疫苗。
类毒素：将有关细菌长生的外毒素，用适当的浓度的甲醛溶液使之脱毒而制成的生物制品称为类毒素。
诊断制品：诊断疾病、群体检验、免疫检测和病原鉴定的一类生物制品。
抗病血清：又称高免血清，为含有高效价特异性抗体的动物血清制剂，能用于治疗或紧急预防相应病原体所致的疾病。
抗毒素：用类毒素和毒素为抗原制备的血清称为抗毒素。
按照生物制品的性质可分为疫苗、诊断制品、抗病血清、微生态制剂和副免疫制品5大类。
免疫应答：是动物机体免疫系统识别各类异物，并将其杀死、降解和排除的过程。
负责体液免疫的是B淋巴细胞。
体液免疫的过程分为1.感应阶段、2.反应阶段和3.效应阶段。
常用的灭活剂:1.甲醛（其中36%~40%的水溶液俗称福尔马林，甲醛的灭活浓度不同，需氧菌一般为0.1%~0.2%，厌氧菌一般为0.4%~0.5,%，病毒灭活的浓度常为0.05%~0.4%，）
烷化剂（浓度为0.05%）或0.02%
结晶紫
影响灭活效果的因素：微生物的种类及特性，灭火剂的种类及特性，灭火剂的浓度，温度，PH值，时间，有机物质。
冻干保护剂的组成：低分子物质，高分子物质，抗氧化剂。
影响冻干保护剂效能的因素:保护剂种类，保护剂组分浓度，保护剂配制方法，保护剂PH值. 佐剂：凡是可以增强抗原免疫应答的物质均称为佐剂。
佐剂选择的标准：
佐剂物质应安全、无毒、无致癌性，也不应是辅助致癌物，不能诱导、促进肿瘤形成。
佐剂物质应有较高的纯度，有一定的吸附力，最好吸附性强
佐剂物质应该具有在动物内降解吸收的性质，不宜长时间留存而诱发组织损伤
佐剂物质不应诱发动物自身超敏性，不含有与动物有交叉反应的抗原物质
佐剂应易于保存并且稳定，当与疫苗共同保存时不应发生变质，并且不出现可引起不良反应的物质。
佐剂的作用原理
对抗原的作用
(增加抗原分子表面积
(增强T细胞和B细胞的协同作用
(延长抗原在组织内的贮存时间
对抗体的作用
(引起细胞浸润
(加速淋巴细胞的转化
(膜和胞浆的变化
细胞功能的改变
常用的兽医免疫佐剂
(氢氧化铝胶佐剂
(明矾佐剂
(弗氏佐剂、油乳佐剂
共熔点的概念：实质物质上的凝固点也就是该物质的熔化点，故又称此温度为共熔点
冻干的程序：(预冻(干燥a升华干燥阶段b 解吸干干燥阶段(冻干曲线与时间a冻干曲线是冻干箱板层温度与时间之间的曲线b预冻速率，预冻最低温度，预冻时间，冷凝器降温时间，抽真空时间，预冻结束时间，冻干全程时间，4.加塞与压盖5.冻干机的清洗和消毒。
高压蒸汽灭菌器主要用于溶液、培养基、氢氧化铝胶、玻璃器皿、用具、衣服等的消毒。
一般干热灭菌多按160~170摄氏度下工作2h的规定进行。
尸体处理：1、高压蒸汽消毒法，2、焚烧尸体和脏器法，3、高温无害化处理法。
菌（毒）种的概念：本书特指兽医生物制品菌（毒）种，主要指应用于兽医生物制品生产、检定和研究的细菌菌种、病毒毒种，也包括生物分类地位在原虫以下的生物种类。
菌（毒）种的分类：1、按毒力分：(强毒菌种(弱毒菌种按用途分a直接生产用菌种b工具菌种c 检定用菌种d 标准菌株
菌种的鉴定 1.菌种的标准：来源清楚，资料完整；生物学特性典型；遗传性状稳定；毒力在规定范围内毒力鉴定：半数致死量LD50 半数感染量ID50 禽胚半数致死量ELD50 禽胚半数感染量EID50 组织细胞半数感染量TCID50 2.抗原性鉴定3.稳定性鉴定
弱菌种的选育:1.自然弱毒株的选育2.人工致弱强毒株
细菌的繁殖规律分为迟缓期、对数期、稳定期和衰退期。
需氧菌的分离培养(画线接种法(倾注培养法
细菌的规模化培养技术：(固体表面培养法(液体静置培养法(液体深层通气培养法4.透析培养法5.连续培养法
病毒的生长条件与增值规律：(病毒生长条件(病毒增值规律，吸附·侵入·脱壳·生物合成·装配·释放
禽胚接种：把处理好的病毒毒种接种到相应的禽胚中，在兽医生物制品生产中，常用的接种途径有4种，即绒毛尿囊膜接种·羊膜腔接种和卵黄囊接种，应当根据不同的病毒和不同的目的选用适宜的接种途径
影响禽胚增殖病毒的因素：(种蛋质量(孵化技术(接种技术
细胞培养方法：(静置培养(转瓶培养(悬浮培养④微载体培养⑤中空纤维细胞培养⑥微囊化细胞培养。
实验动物概念：实验动物是指经人工饲养，对其携带的微生物、寄生虫实行控制，遗传背景明确或者来源清楚，用于科学研究、教学、生产、验定以及其他科学实验的动物。
实验动物的分类：1、普通级动物（CV动物）2、清洁级动物（CL动物）3、无特定病原体动物（SPF动物）4、无菌动物（CF动物）5、悉生动物（CN动物）
实验动物接种：1、皮下接种2、皮内接种3、肌肉接种4、腹腔接种5、静脉接种6、脑内接种
实验动物概念：实验动物是指经人工饲养，对其携带的微生物、寄生虫实行控制，遗传背景明确或者来源清楚，用于科学研究、教学、生产、验定以及其他科学实验的动物。
实验动物的分类：1、普通级动物（CV动物）2、清洁级动物（CL动物）3、无特定病原体动物（SPF动物）4、无菌动物（CF动物）5、悉生动物（CN动物）
实验动物接种：1、皮下接种2、皮内接种 3、肌肉接种 4、腹腔接种 5、静脉接种 6、脑内接种
培养基分类
根据培养基原料分类：1、合成培养基 2、天然培养基
根据培养基物理状态分类：1、固体培养基 2、液体培养基 3、半固体培养基
细菌计数技术：（1）显微镜直接计数法
（2）活菌计数法：1、倾注平板培养法 2、平板表面散布法 3、微量点板计数法
（3）比浊计数法：1、比浊管比浊法 2、分光光度计法
细菌性灭活苗的制造：菌种复苏——培养基配置——菌液——灭活——加佐剂——灭活菌苗——检验
毒种的分类：1、原始种子 2、基础种子 3、生产种子
诊断制剂主要有诊断用抗原、诊断用抗体（血清）和标记抗体。
检测未知抗原，也可进行动物疫病的诊断。
诊断用抗原（1）血清反应抗原：1、凝集反应抗原 2、沉淀反应抗原 3、补体结合反应抗原（2）变态反应抗原：细菌内寄生菌变态反应
抗体标记技术：1、放射性同位素标记抗体 2、荧光素标记抗体 3、酶标记抗体（胶体）4、免疫程序的制定（分为两个阶段：一：基础免疫二：高度免疫）
菌种应用冻干或者其他适宜方法保存于2—8摄氏度下。
单克隆抗体：抗原决定簇的抗体。
灭活菌、血清、诊断液等保持在2—15摄氏度，不能过热，也不能低于0°。
冻结苗应该在-20摄氏度以下的保温条件下保存
卵黄抗体的检验和保存：效力检验：即攻毒36h发病3—5只，在经8—12h后恢复正常，至观察结束时应至少存活9只，判为合格。
检验合格的卵黄抗体于-15摄氏度下冷冻保存。