尿液干化学检查分析

六、胆红素BIL
• 原理:以偶氮反应为基本原理。在强酸介质 中胆红素与重氮盐发生偶联反应,生成红色 偶氮化合物。 • 方法学评价:过量的维c和亚硝酸盐可抑制 偶氮反应而呈假阴性,而大量的氯丙嗪和高 浓度的盐酸苯偶氮吡啶的代谢产物在酸性 条件下会呈假阳性反应。尿标本保存不当， 尿胆红素遇光分解。
七、尿胆原URO
九、血红蛋白BLD
• 原理:采用红细胞类过氧化物酶法。血红蛋白中的 亚铁血红素具有过氧化物酶样作用,可以催化过氧 化氢放出新生态氧,进一步氧化指示剂而产生颜色 变化。 • 方法学评价:高浓度维c对试验有抑制作用,导致结 果偏低或假阴性;浓缩尿或高蛋白尿也可减低反应 的敏感性。清洗剂如次氯酸盐和尿道中细菌产生 的过氧化氢酶可能引起假阳性结果。试纸法可检 出微量血红蛋白和破坏的红细胞,而镜检法可能为 “阴性”。结果配合显微镜检查结果,并结合临床 资料进行分析,更有价值。
白细胞、红细胞、亚硝酸盐
• 主要涉及泌尿生殖系统的疾病。当白细胞 或红细胞出现阳性结果,或者亚硝酸出现阳 性时,一般与泌尿系统感染及邻近器官疾病 有关。比如膀胱炎、肾盂肾炎、尿路结石、 前列腺炎、尿道炎、盆腔炎、创伤等。
比重、葡萄糖、酮体
• 这三项结果出现阳性,可能与内泌系统疾病 有关,如糖尿病、肾性糖尿病、糖尿病酮症、 妊娠呕吐、腹泻、脑血管意外等。
四、葡萄糖 GLU
• 原理:采用葡萄糖-过氧化酶法。尿中葡萄糖在试纸上的葡萄 糖氧化酶催化下,与O2生成葡萄糖酸内脂和过氧化氢,试纸上 的过氧化物酶进一步将过氧化氢分解为水并放出新生态氧使 色素原氧化产生颜色的变化，颜色深浅与葡萄糖浓度成正比。 • 方法学评价:葡萄糖氧化酶法具有特异性强,灵敏度高 (1.67~2.78mmol/L)。适用于常规及过筛检查尿中的葡萄糖。而对乳 糖、半乳糖、果糖等其他还原糖不发生反应。高比重尿液可 使尿葡萄糖反应性减低。低糖高维C时，维C与试剂发生竞 争性抑制反应,造成假阴性,如果使用了大剂量维生素治疗,5h 内最好不要做尿糖检查。尿酮体过高>500ml/L,尿液搁置时 间过长，细菌分解也会引起假阴性。一些强氧化性物质（漂 白粉、次亚氯酸等）或尿比重过低时，会导致假阳性。
二 尿沉渣镜检
即尿液有形成分显微镜检查
镜检方法
• 用较弱光线，以低倍镜将涂 片全貌观察一遍，然后，计 数20个低倍视野所见的管型， 10个高倍视野所见的各类细 胞
报告方式
1.分数报告法 细胞成分： 最低 ~ 最高/HPF 管型成分： 最低 ~ 最高/LPF
2.加号报告法 以有形成分占视野面积 来判定， 1/4 视野为 + ， 满视野为 ++++ 。多用于 细胞数极多和结晶、 粘液丝、脂肪滴、细菌 等的报告。
• 混合性血尿：以上两组血尿的混合。
镜检内容：白细胞
• 白细胞：体积较RBC为大，呈圆球形，外 形完整、无明显退行性变，胞浆清楚、细 胞浆内颗粒清晰可见，常分散存在。
• 脓细胞：死亡的中性粒细胞，外形不规则， 结构模糊，浆内充满粗大颗粒，核不清楚， 细胞常粘连成团，细胞间界限不明显。
尿沉渣白细胞参考值
十一、维生素C
• 维C具有1,2-烯二醇还原性基团，在酸性条件下将 氧化态粉红色的2,6二氯酚靛酚还原为无色的2,6-二 氯二对酚胺。颜色由绿或深蓝至粉红。 • 主要对隐血（≥90mg/L） • 胆红素（ ≥250mg/L ） • 亚硝酸盐（ ≥250mg/L ） • 葡萄糖（ ≥500mg/L ） • 也会使白细胞检测产生假阴性
• 正常尿液中可偶然见到1～2个 WBC/HPF，如每个高倍视野见到5 个或5个以上白细胞为增多。
镜检内容：上皮细胞
• 来源：肾小管、肾盂、输尿管、膀胱、尿 道等处上皮细胞脱落。 • 类型： 立方上皮细胞——肾小管 移行上皮细胞——肾盂、肾盏、输尿管、 膀胱 及部分尿道 假复层柱状上皮细胞——尿道中段 复层鳞状上皮细胞——尿道外口、阴道
五、尿酮体KET
• 原理:采用亚硝基铁氰化钠法。尿中的丙酮或乙酰 乙酸与试纸上的亚硝基铁氰化钠反应,产生浅紫色 到深紫色变化。 • 方法学评价:对乙酰乙酸的灵敏度为100ml/L,对丙 酮的灵敏度为700ml/L,与B-羟丁酸不反应。早期 酮症排出的B羟丁酸占酮体总量的78%,因而对早 期酮症检出不敏感。由于丙酮和乙酰乙酸具有挥 发性,故标本应新鲜,最好在采集后30内测定。肉 眼血尿等有明显颜色变异的尿和含大量左旋多巴 代谢物、肌酐、肌酸的标本可出现假阳性。
胆红素、尿胆原
• 一项或两项结果出现阳性,一般表示肝胆系 统疾病,如病毒性肝炎、肝硬化、溶血性疾 病胆石症、胆管癌等。另外还可用于黄疸 型疾病的鉴别断:肝细胞性黄疸尿胆红素和 尿胆原都为阳性;而溶血黄疸只有尿胆原为 阳性;阻塞性黄疸只有尿胆红素呈性。
PH、比重、维生素
• 这三个项目不能单独用于诊断但是可作为许多疾病的过筛试验,临 床诊断价值不大。重要的是,它们可以对干化学试验进行监测。当 出现阳性结果时,有可能干扰尿蛋白、葡萄糖、红细胞和白细胞测 定的敏感性。检验人员在签发检验结果时,应注这些指标,是不是 对测定的标本产生了干扰;如有干扰, 要想办法排除,并进行复查。 • PH>9:蛋白质假阳性，PH<3:蛋白质假阴性 • VitC(>500mg/L):可致葡萄糖假阴性，尿潜血假阴性，亚硝酸盐 假阴性，白细胞酯酶假阴性（具有抗VitC能力的试纸除外） • 比重：高比重尿会使尿亚硝酸盐反应敏感性降低，会使白细胞酯 酶假阴性 • 高蛋白尿（4+）：可使白细胞酯酶假阴性
二、尿比重SG
• 原理:采用多聚电解质离子解离法。高分子电解质—甲 基乙烯基醚和顺丁烯二酸的共聚体是弱酸性(—COOH基) 离子交换体，而尿中含有以Nacl为主的电解质,在水中解离 为Na+和cl-,可与离子交换体中的氢离子(H+)置换,在水溶液 中放出H+。随着尿液中不断增加的H+浓度,使得指示剂溴 麝香草酚蓝的颜色发生改变。 • 参考范围：1.015-1.025 • 方法学评价:其优点是不受高浓度的葡萄糖、尿素、放射 造影剂的影响，该方法灵敏度略低,只能按0.005的梯度色阶 表达结果,精密度差,测试范围窄,并且受强酸强碱性尿和高 蛋白质尿的影响,不适宜小儿及肾脏浓缩稀释功能严重减 低者使用。不能作为评价肾功能变化的指标。
• 3.定量报告法 （ /ml /ul）
镜检内容
• 细胞 (RBC、WBC、上皮细胞、吞噬 细胞) • 管型 透明管型、细胞管型、颗粒管型、 蜡样管型、结晶管型、细胞管型等 • 结晶（常见结晶、病理性结晶）
镜检内容：红细胞
• 在未经染色的新鲜尿沉渣中，红细胞呈淡 黄色，轻度反光，双凹盘样。 • 在浓缩的高渗尿液中，红细胞皱缩、变小、 呈棘形。 • 在稀释或低渗尿液中，血红蛋白逸出，红 细胞肿胀呈影细胞。
尿沉渣红细胞参考值及血尿定义
• 正常人：4～7/HPF可偶见一个红细胞 。
• 肉眼血尿：每升尿液中含血量超过1ml，肉眼可见 到不同程度混浊红色的尿液。 • 显微镜血尿：血液含量在0.1%以下，外观无血色， 镜下红细胞平均≥３/HPF的尿液。
血尿分类
• 均一红细胞血尿：RBC外形及大小正 常，形态较为一致。 • 非均一红细胞血尿：RBC大小不等， 呈两种以上的多形性变化。
鳞状上皮细胞
镜检内容：管型
• 管型是在肾小管管腔内形成的。当肾小球 滤过膜通透性增强时，肾小管内大量的蛋 白质不能完全重吸收。 • 当蛋白质到达远端肾小管及集合管时，由 于水分的吸收，酸度的增加及软骨素硫酸 脂的存在，促使蛋白质凝固形成管型，即 透明管型。
• 原理:采用改良Ehrlich醛反应法。在强酸性条件 下,尿胆原与试纸中二氯苯胺重氮盐产生偶联反应, 生成樱红色缩合物,试剂模块发生黄色到红色的改 变。 • 方法学评价:尿胆原排出后很容易氧化为尿胆素, 故应尽快测定。应用大量抗生素、维生素和尿中 含有高浓度亚硝酸盐或甲醛时容易抑制试验,出现 假阴性结果。使用氯噻嗪类、非那吡啶类、对-氨 基硫酸和磺胺等药物时,可出现假阳性。
十、白细胞LEU
• 原理:采用粒细胞酯酶法。中性粒细胞特异性地含有一种酯 酶,而这种酯酶在红细胞、淋巴细胞、血小板、血清、肾脏 及上皮细胞中均不存在。试纸反应基质是吲哚酚酯,在酯酶 作用下将其转变为吲哚酚,再与重氮盐发生反应,形成紫色缩 合物。 • 方法学评价:该试验仅与尿液中的粒细胞反应,既可与完整的 粒细胞反应,也可与脓细胞反应以及破坏后的粒细胞所释放 出的酯酶成分反应。当尿中出现以淋巴细胞或单核细胞为主 的白细胞时,可呈阴性。尿中白细胞少于10~25/ul;尿中出现 过高的葡萄糖、蛋白质或高比重尿会造成反应的敏感性减低 或出现假阴性。尿中的先锋霉素类药物、乙哚酸、高浓度草 酸、四环素等药物都可使反应的敏感性减低或出现假阴性。 • 尿标本被阴道分泌物污染，或者尿中污染甲醛、在酸性尿环 境中呈NIT
• 原理:采用亚硝酸盐还原法。尿中含有的亚硝酸盐在酸性 环境中先与对氨基苯磺酸反应,形成重氮盐,再与α-萘胺结 合而产生粉红色偶氮化合物。 • 方法学评价:尿液必须新鲜,无外界污染,最好用晨尿或在膀 胱中潴留4h以上的尿液。出现阳性结果意味着尿液中细 菌数量在10万/ml以上。阴性结果并不表明尿液中无细菌, 可能为非硝酸盐还原性细菌引起的尿道感染;也可能为尿 液在膀胱中潴留不足4h或饮食中缺乏硝酸盐等情况。高 比密尿液或含有大量维c的标本可减低反应的敏感性。
三、尿蛋白PRO
• 原理:采用PH 指示剂蛋白质误差的原理。在一定条件下 （3.2时),由于蛋白质离子对带相反电荷指示剂(溴酚蓝）离 子吸引而造成溶液中指示剂进一步电离, 当超越缓冲范围时， 可使指示剂改变颜色。 • 方法学评价:对清蛋白的敏感性明显高于球蛋白，不与血红 蛋白，本周蛋白和黏蛋白反应,因此阴性的结果并不能排除 这些蛋白质的存在。对清蛋白测定的敏感性约在0.15~0.30g/L。 混浊尿不影响测定结果和判断,但肉眼血尿、血红蛋白尿、 黄疸尿等显著异常的尿色会影响到对结果的判别。该试验方 法对标本的酸碱性非常敏感。强酸性(pH<3) 强碱性(PH>9), 前者导致假阴性后者导致假阳性。含高浓度青霉素，庆大霉 素、磺胺、含碘造影剂导致假阴性。如服用奎宁和嘧啶等药 物时,尿液可呈强碱性,超出了试剂带本身的缓冲能力,可造成 干化学法假阳性。含非那吡啶、聚乙烯吡咯酮、有机碘造影 剂的尿样、被某些清洁剂和消毒剂污染的尿标本会出现假阳 性。
尿液干化学及沉渣 镜检
原理、影响因素和临床意义
一尿干化学概述
• 1956年美国人发明了以葡萄糖氧化酶和过 氧化物酶为基础检测葡萄糖的第一条“浸 入即读”的干化学试纸。发展到今天已经 成为一次可以测十几个项目的多联试纸带。 检测手段也由目测发展到半自动、全自动。 具有快速、简便、用量少的优点，但是同 时也存在着影响因素多，检测不精确等缺 点。
一、尿液酸碱度PH
• 原理:采用酸碱指示剂法。尿中pH可使试纸测定 区中的甲基红和溴麝香草酚蓝两种指示剂发生颜 色改变,可表达pH5（黄色）~pH7（绿色）~pH9 （蓝色）的变色范围。参考范围PH4.5-8.0（随机 尿） • 方法学评价:尿标本必须新鲜,时间过长的尿液可 滋生细菌,如变形杆菌等,可分解尿素产生氨,使尿 液变碱;含过多碳酸氢盐时并放置时间过久也可导 致挥发,使酸度增高。测定具有一定的局限性:结 果间隔大,每级间隔0.5；测定范围小，从 pH5~pH9,不适宜精确测定尿的酸碱度。但因携带 方便,无需设备,检查方便且便于实现自动化,适合 于过筛试验。
临床意义
• 目前尿液干化学分析一般都可同时获得十 几项参数的结果。可以将某些项目进行简 单组合,用于快速分析患者的尿检情况,并根 据出现阳性结果的具体内容,初步判别患者 的疾病情况。
比重、蛋白质、红细胞、白细胞
• 一般会涉及泌尿系统、循环系统的疾病,这 些项目中的一项或多项结果出现阳性,特别 是蛋白质和红细胞同时出现阳性时,常见于 一些与肾脏疾病有关的病理改变。如各种 急慢性肾小球肾炎、肾盂肾炎、各种病因 造成的肾损伤、泌尿系肿瘤、结核，还可 能与多发性骨髓瘤、自身免疫病、溶血疾 病、高热、中毒等有关。