微生物培养方法PPT讲稿

• 稀释涂布平扳法：
•
主要用于分离菌种并计数
微生物的营养
• 培养基：碳源、氮源、水、无机盐等。 • 适宜的环境条件：温度、pH、氧气等。 • 自养型：无机碳源；异养型：有机碳源。
细菌
• (1)结构：单细胞的原核生物，有球形，杆
形，螺旋形。
• 基本结构：细胞壁、细胞膜、细胞质、
拟核。
• 特殊结构：荚膜、鞭毛、菌毛、芽胞。 • • (3)繁殖: 二分裂。
接种、划线
• 灼烧接种环→ • 取菌液→ • 划线分离→
接种、划线
划线分离
①
②
③
为什么通过划线分离可得到单菌落？
划线分离
•倒置后做好标记，写在培养皿侧面
我们的实验结果
培养
恒温37℃培养
为什么要倒置培养？
配制菌悬液
得10-2,
10-3, 10-4的菌悬液
1g土壤
1个99ml无菌水
2个9ml无菌水
微生物培养方法课件
微生物的种类
• 非细胞：病毒； • 原核细胞：细菌、蓝藻、放线菌、支原体等。 • 真核细胞：真菌、原生生物、藻类等。
• 细菌：大肠杆菌、乳酸菌等 • 真菌：酵母菌、霉菌； • 原生生物：草履虫、变形虫等。
微生物的特点
• 体积小，面积大 • 吸收多，转化快 • 生长旺，繁殖快； • 适应强，易变异; • 分布广，种类多。
稀释菌悬液 （10-4）
高浓度→低浓度，换枪头
接种
• 取200ul菌悬液(10-4)
涂布分离
低浓度→高浓度，可不用换枪头
涂布分离
涂布前后三角刮刀需要灼烧吗？
37℃倒置培养
按浓度捆成一摞
恒温37℃培养
10-4 、 10-3,、 10-2
常见接种方法
• 平板划线法：
•
主要用于分离、纯化培养
固体培养基 按
ຫໍສະໝຸດ Baidu
用
途
半固体培养基
不 同
划
液体培养基
分
鉴别培养基 选择培养基
分
无菌技术
• 消毒：不能杀死芽孢和孢子。
•
煮沸、紫外线、化学药剂
• 灭菌：能杀死芽孢和孢子。
•
高压蒸汽灭菌、灼烧、干热、过滤。
实验操作——微生物的培养
配制培养基 包器材
菌种扩增
灭菌
倒平板 接种 培养
观察记录
配制培养基
LB培养基: 蛋白胨： 10g 酵母粉： 5g NaCl： 10g 琼脂： 20g 将上述物质溶解后， 用蒸馏水定容至
1000ml， 分装后及时灭菌。
包器材
灭菌
高压蒸汽灭菌 ：
通过加热使菌体内蛋白质凝固变性，从而达到杀菌目的。
条件：压力100 kPa 温度121 ℃ 时间15-30 min
菌种扩增
•摇床震荡培养12h（于LB液体培养基中）
本图来自十一学校
实验用具
• LB固体培养基 • 大肠杆菌菌液（LB
液体培养基）
• 培养皿 • 接种环 • 酒精棉 • 酒精灯 • 镊子、火柴、记号
笔
接种前准备
• 用肥皂洗手并使用酒精消毒。 • 顺序：
点燃酒精灯→酒精棉擦拭双手→酒精棉擦拭桌面
倒平板
接种、划线
• 灼烧接种环→ • 取菌液→ • 划线分离→
烧至暗红
接种、划线
• 灼烧接种环→ • 取菌液→ • 划线分离→
菌液膜
菌落
• 菌落： 单个细菌用肉眼是看不见的，当单
个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时， 便会形成一个肉眼可见的，具有一定形态 结构的子细胞群落。
• 菌落是菌种鉴定的重要依据。不同种
类的细菌菌落的大小，形状光泽度颜色硬 度透明度都不同。
培养基的种类及应用
按化学组成不同划分：合成培养基/天然培养基
按 物 理 状 态 不 同 划