微生物思考题及参考答案
微生物学思考题答案
绪论1、你如何使你的朋友相信微生物不仅仅是一种病原？尽管目前微生物仍在严重威胁人类的生存，但另一方面，我们必须强调，大多数微生物对人类是无害的。
事实上，大多数微生物对人类社会还有巨大的价值。
整个农业系统在许多方面都依赖微生物的活动。
许多主要的农作物属于豆科植物，它们的生长同专一性细菌紧密相连，这些细菌可在植物的根部形成根瘤结构。
根瘤结构中，大气中的氮转变成可用于生长的氮化物。
根瘤细菌的固氮活动，减少了昂贵肥料的需要。
微生物在农业上的另一个重要性在于，某些动物是反刍动物，这些主要的农业动物具有瘤胃，微生物在瘤胃中进行消化。
没有这些微生物牛羊的饲养是不可能的。
植物营养方面，微生物在碳、氮、硫这些重要营养成分的循环起着关键作用。
土壤和水中的微生物可见这些元素转化成植物容易利用的形式。
微生物与食品的关系，不仅仅是产生腐败变质等不利影响。
奶制品的制造至少部分是借助微生物的活动，包括乳酪、酸乳酪和黄油，都是主要的具有经济价值的产品。
泡菜、腌制食品和一些腊肠也归功于微生物的活动。
可烘焙的食品及乙醇的制造也基于酵母菌的发酵。
微生物在能源生产方面也起着重要作用。
天然气是细菌作用的产物，由甲烷细菌代谢产生。
光营养的微生物能够收集太阳能生产生命有机体中的储存物——生物量。
废物如生活垃圾、剩余谷物、动物废料等通过微生物转化微生物燃料——甲醇和乙醇。
利用微生物清理被人类活动污染的大气——生物整治。
利用微生物降解油污、溶剂、杀虫剂和其他环境污染物。
通过基因操纵技术，能在微生物种生产出人类胰岛素。
利用基因组学方法搜索带几百个目的蛋白的基因蓝图，然后将它们转入到合适的受体中由于生产重要的、有商业价值的蛋白质。
在自然界中，它无限小，但作用无限大。
2、胡克和列文虎克对微生物学的贡献有那些？科恩对微生物学的贡献有那些？1665年，罗伯特.胡克描述了霉菌的子实体结构，因此他是第一个描述微生物的人。
1676年，列文虎克在研究辣椒水渗出的过程中发现了细菌，因此他是首次描述细菌的人。
微生物实验思考题参考标准答案及知识要点
微生物实验思考题参考答案及知识要点一．酵母菌形态观察及死活细胞鉴别1.吕氏碱性美蓝染液浓度和作用时间的不同对酵母菌死细胞数量有何影响?是分析其原因。
美蓝是一种无毒性的染料，它的氧化型呈蓝色，还原型无色。
用美蓝对酵母的活细胞进行染色时,由于细胞的新陈代谢作用,细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变成为无色的还原型。
因此,具有还原能力的酵母活细胞是无色的，而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则呈蓝色或淡蓝色,借此即可对酵母菌的死细胞和活细胞进行鉴别。
美蓝浓度高了,代谢不太活跃的活细胞也会被染色,从而使观察到的死细胞较多,活细胞较少；反之，则代谢微弱的细胞也能还原美蓝,不被染色，从而使观察到的死细胞较少，活细胞较多。
二.细菌的简单染色和革兰氏染色1.革兰氏染色中那一步是关键？为什么？你是如何操作的?革兰氏染色的关键步骤是:乙醇脱色(是脱色时间）。
如果脱色过度,革兰氏阳性菌也可被脱色而被误认为是革兰氏阴性菌；如脱色时间过短,革兰氏阴性菌也可被脱色而被误认为是革兰氏阳性菌。
脱色时间的长短还受涂片的厚薄，脱色是玻片晃动的快慢及乙醇用量的多少等因素的影响，难以严格规定（脱色是应当控制速度，脱色时间一般为20—30s)。
2. 固定的目的之一是杀死菌体，这与自然死亡的菌体有何不同?自然死亡的菌体本身已经部分自溶,结构已经改变。
固定杀死细菌时细菌结构是保持死亡时的状态的。
３. 不经复染这一步能否区分革兰氏阳性菌和阴性菌？能。
在酒精脱色后,不被酒精脱色而保留紫色者为革兰氏阳性菌（G＋),被酒精脱色为革兰氏阴性菌。
最后一步用番红染液复染，是为了让结果更清楚。
4．涂片为什么要固定,固定适应注意什么问题?a 杀死细菌并使菌体黏附与玻片上;b增加其对染料的亲和力。
固定时应注意：手持玻片,菌膜朝上,在微火过3次（手指触摸玻片反面，不烫手为宜),固定时应尽可能维持细胞原有形态,防止细胞膨胀或收缩。
三. 霉菌、放线菌的形态观察1．镜检时，如何区分基内菌丝与气生菌丝？一般气生菌丝颜色较深，直生或分枝丝状,比基内菌丝粗；而基内菌丝色浅、发亮,可看到横隔膜,继而断裂成球状或杆状小体。
微生物课件上思考题及答案
第一章细菌的形态与结构1.细菌有哪3种形态？2.细菌的基本结构和特殊结构有哪些？特殊结构各有何作用？3.G+菌和G-菌细胞壁的结构由哪几部分组成？4.青霉素和溶菌酶为什么不能杀灭革兰阴性菌？5.简述革兰染色法操作步骤参考答案1 基本形态三种：球菌；杆菌；螺形菌2基本结构：细胞壁、细胞膜、细胞质、核质特殊结构：荚膜、鞭毛、菌毛、芽胞荚膜功能：抗吞噬作用：是病原菌的重要毒力因子抗杀菌物质损伤：如溶酶体、补体粘附作用：形成生物膜与致病性有关鞭毛功能；有鉴别意义,鞭毛蛋白有抗原性：H抗原某些细菌的鞭毛与致病有关菌毛功能：细菌的黏附结构介导细菌在局部定植与细菌的致病性密切相关性菌毛还能传递细菌的毒力和耐药性芽孢功能：具有很强的抗高温、抗干燥、抗化学消毒剂和抗射线能力3 革兰阳性菌：由肽聚糖和磷壁酸组成。
其中肽聚糖又由聚糖骨架、四肽侧链、五肽交联桥构成三维立体结构。
革兰阴性菌：由肽聚糖和外膜组成。
肽聚糖仅由聚糖骨架、四肽侧链构成二维平面结构4 G-有外膜阻止抗菌素进入；保护细胞壁组分肽聚糖不受溶菌酶分解5 革兰染色法步骤：涂片→固定→结晶紫初染→碘液媒染→95%酒精脱色→复红复染观察结果：Ｇ＋菌：紫色Ｇ－菌：红色第二章细菌的生理2.细菌生长曲线分哪4个阶段？3.细菌根据对氧的需要程度分为哪几种类型？4.细菌合成代谢产物有哪几种？5.常用的消毒剂有哪些种类？6.简述化学消毒剂的杀菌机制？7简述紫外线杀菌的作用机制8.在温度和时间相同的情况下，为什么湿热灭菌法的效果比干热法好？参考答案2.迟缓期、对数期、稳定期、衰退期四阶段3．专性需氧菌2）专性厌氧菌3）兼性厌氧菌4）微需氧菌4．源质、毒素和侵袭性酶、抗生素、细菌素、维生素、色素等5．①酚类②醇类③重金属盐类④氧化剂⑤表面活性剂6.①使菌体蛋白质变性或凝固②破坏细菌的酶系统③改变细菌细胞壁或胞浆膜的通透性，导致细菌死亡7．其波长在200-300nm有杀菌作用，其中以265-266nm最强，这与细菌DNA吸收光谱一致。
微生物工程思考题参考答案
微生物工程思考题参考答案Ricky & Bullet 2017.11、举出几例微生物大规模表达的产品, 及其产生菌的特点？A.蛋白酶表达产物一般分泌至胞外，能利用廉价的氮源，生长温度较高，生长速度快,纯化、分离及分析快速；安全性高，得到FDA的批准的菌种。
B.单细胞蛋白生长迅速，营养要求不高，易培养，能利用廉价的培养基或生产废物。
适合大规模工业化生产，产量高，质量好。
安全性高，得到FDA的批准的菌种。
C. 不饱和脂肪酸生长温度较低，安全性高，能利用廉价的碳源，不饱和脂肪酸含量高，D.抗生素生产性能稳定，产量高，不产色素，，能利用廉价原料F. 氨基酸代谢途径比较清楚，代谢途径比较简单2、自然界分离微生物的一般操作步骤？样品的采取→预处理→培养→菌落的选择→初筛→复筛→性能的鉴定→菌种保藏3、从环境中分离目的微生物时，为何一定要进行富集培养？自然界中目的微生物含量很少，非目的微生物种类繁多，进行富集培养，使目的微生物在最适的环境下迅速地生长繁殖，数量增加，由原来自然条件下的劣势种变成人工环境下的优势种，使筛选变得可能。
4、菌种选育分子改造的目的？防止菌种退化; 解决生产实际问题;提高生产能力; 提高产品质量; 开发新产品5、什么叫自然选育？自然选育在工艺生产中的意义？自然选育就是不经人工处理，利用微生物的自然突变进行菌种选育的过程。
自然选育在工业生产上的意义：自然选育可以有效地用于高性能突变株的分离。
然选育虽然突变率很低，但却是工厂保证稳产高产的重要措施。
6、什么是诱变育种？常用的诱变剂有哪些？诱变育种是指用物理、化学因素诱导植物的遗传特性发生变异，再从变异群体中选择符合人们某种要求的单株，进而培育成新的品种或种质的育种方法。
诱变剂有两大类：物理诱变剂和化学诱变剂。
常用的物理诱变剂有紫外线、x射线、γ射线(如Co60等)、等离子、快中子、α射线、β射线、超声波等。
常用的化学诱变剂有碱基类似物、烷化剂、羟胺、吖定类化合物等。
微生物实验报告思考题参考答案
实验一、微生物的简单染色思考题1油镜与普通物镜在使用方法上有何不同？应特别注意些什么？答：油镜在使用时必须在载玻片与物镜之间滴加镜头油。
油镜使用过程中要注意两点：（1）、使用后镜头的清洁：镜面只能用擦镜纸擦，不能用手指或粗布，以保证光洁度，用完油镜必须进行“三擦”（观察完毕，上悬镜筒，先用擦镜纸擦去镜头上的油，然后再用擦镜纸沾取少量二甲苯（或者乙醇乙醚溶液）擦去残留的油，最后用擦镜纸擦去残留的二甲苯，后将镜体全部复原）。
（2）、.观察标本时，必须依次用低、中、高倍镜，最后用油镜。
当目视接目镜时，特别在使用油镜时，切不可使用粗调节器，以免压碎玻片或损伤镜面。
2、使用油镜时，为什么必须用镜头油？答：在使用普通显微镜时，当光线由反光镜通过玻片与镜头之间的空气时，由于空气与玻片的密度不同，使光线受到曲折，发生散射，降低了视野的照明度。
若中间的介质是一层油（其折射率与玻片的相近），则几乎不发生折射，增加了视野的进光量，从而使物象更加清晰。
3、镜检标本时，为什么先用低倍镜观察，而不是直接用高倍镜或油镜观察？答：低倍镜视野比较大，能看到的范围大，容易找到观察的目标，然后在用放大倍数高的高倍镜或油镜有目的的观察。
实验二、革兰氏染色（1）为什么必须用培养24 h以内的菌体进行革兰氏染色？答：24h以内的菌体处于活跃生长期，菌体细胞壁具有典型特征，而处于老龄的革兰氏阳性细菌壁结构开始发生变化，染色时会被染成红色而造成假阴性（2）要得到正确的革兰氏染色结果，必须注意哪些操作？哪一步是关键步骤？为什么？答：应注意如下几点：其一，选用活跃生长期菌种染色，老龄的革兰氏阳性细菌会被染成红色而造成假阴性；其二，涂片不宜过厚，以免脱色不完全造成假阳性；其三，脱色是革兰氏染色是否成功的关键，脱色不够造成假阳性，脱色过度造成假阴性（3）当你对未知菌进行革兰氏染色时，怎样保证操作正确，结果可靠？答：当要确证未知菌的革兰氏反应时，可用已知菌进行混合涂片，使二者染色条件保持一致，如果已知菌的结果与预期相符，则证明操作操作正确，结果可靠。
微生物总复习思考题第1-6章答案
微生物总复习思考题0章-绪论1.什么是微生物?它包括哪些类群?答：微生物是一切肉眼看不见或看不清的微小生物的总称,包括属于原核类的细菌、放线菌、蓝细菌、支原体、立克次氏体和衣原体。
属于真核类的真菌、原生动物和显微藻类。
以及属于非细胞类的病毒和亚病毒。
2.试述列文虎克、巴斯德和柯赫对微生物学的贡献。
列文虎克：自制间式显微镜，观察到细菌等微生物的个体巴斯德的贡献（微生物学奠基人）:微生物作为一门科学的诞生—-彻底驳斥了自然发生说.发现了厌氧生命（生活）的存在—发酵。
疫苗.巴斯德灭菌。
科赫（细菌学奠基人）的贡献:1、微生物的纯培养技术，及培养基的改进。
2、分离出了多种病原菌，包括炭疽芽孢子杆菌、结核分支杆菌、链球菌等。
3、创立了细菌鞭毛染色、悬滴培养法和显微摄影等多种显微镜技术。
4、提出了证明特定病害的病原菌的科赫法则3.微生物学发展的各个时期有哪些主要成就?4.简述微生物与人类的关系。
5.在生物科学中微生物学占有什么样的地位?6.微生物学的主要任务是什么?7.微生物先辈们成功的原因何在?8.微生物学与现代生物产业的关系如何?1章-原核生物的形态、结构和功能细胞的一般结构与特殊结构、鞭毛、芽孢、糖被、放线菌、质粒、肽键桥一般结构：1、细胞壁：位于细胞最外的一层厚实、坚韧的外被，主要成分为肽聚糖。
2、细胞膜：是一层紧贴在细胞壁内侧，包围着细胞质的柔软、脆弱、富有弹性的半透性薄膜，如磷脂双分子层和蛋白质、多糖构成。
3、细胞质：是指被细胞膜包围的核区以外的一切半透明、胶体状、颗粒状物质的总称。
4、核区：指原核生物所特有的无核膜包裹、无固定形态的原始细胞核。
特殊结构：1、鞭毛：生长在某些细菌表面的长丝状、波曲的蛋白质附属物2菌毛：是一种长在细菌体表的纤细、中空、短直且数量较多的蛋白质类附属物，具有使菌体附着于物体表面上的功能。
3性毛：构造与成分与菌毛相同，但比菌毛长。
一般见于G-细菌的雄性菌株中，具有向雌性菌株传递遗传物质的作用。
微生物学实验原理及思考题答案
微生物学实验原理及思考题答案第一篇：微生物学实验原理及思考题答案油镜便于观察的原理是什么?用油镜观察时在油镜与载玻片之间加入了和玻璃折射率相近的香柏油，使进入透镜的光线增多，视野亮度增强，使物象明亮清晰。
1.细调节器每旋转一周使镜筒上升或下降0.1mm.一。
培养基的配制原理：微生物的生长发育都有一定的营养需要，培养基即人工培养物，为其生长发育提供所需营养的基质。
培养基配制好以后必须经过灭菌方能用于分离培养微生物实验。
一次培养基的配制和灭菌是微生物实验室中最基本的操作，通过本次实验学习微生物实验室中常用培养基的配制方法和灭菌方法。
1.称药品的钥匙不要混用称完药品应及时盖紧瓶盖，因为某些成分如蛋白胨极易吸水潮解调PH时要小心操作，避免回调。
配制培养基应注意哪些问题？要选定合适的培养基;培养基成分要称量准确；PH要适宜；灭菌要严格。
培养基配制完成后为什么要立即灭菌？已灭菌的培养基如何进行无菌检查？防止细菌污染培养基一旦细菌污染了培养基，由于培养基有丰富的营养物质，细菌会段时间内大量产生这样子就会跟培养物争夺营养物质，另一方面，细菌生长过程中会产生有毒物质致使培养物死亡。
放在37℃的恒温箱中一两天后，培养基上没有生长任何微生物的就可以使用（若有微生物则是以菌落出现的肉眼可以看见）二。
细菌的单染色技术原理：单染色法师利用单一染料对细菌进行染色的一种方法。
在中性，碱性或弱酸性溶液中，细菌细胞通常带负电荷，所以常用碱性染料进行染色。
碱性染料并不是碱，和其他染料一样是一种盐，电离时染料离子带正电，易于带负电荷的细菌结合而使细菌着色。
制备染色标本时的注意事项？选择合适菌龄的细菌；固定时避免火焰直接烘烤破坏细菌形态；染色时间要适宜；水洗时水不能直接冲在涂片处。
制片为什么要完全干燥后才能用油镜观察？油和水之间会分层，油就不能与标本接触还有光会发生折射等等原因，这样不利于油镜观察三。
细菌的革兰氏染色法原理：细菌先经碱性染料结晶紫染色，而经碘液媒染后用酒精脱色，在一定条件下有的细菌紫色不被脱去，为G+，有的可被脱去，为G-.1.革兰氏染色成败的关键是乙醇脱色。
（完整版）微生物思考题及参考答案
（完整版）微生物思考题及参考答案微生物思考题及参考答案1.用油镜观察时应注意哪些问题？在载玻片和镜头之间加滴什么油?起什么作用？答：应该先用擦镜纸将镜头擦干净,以防上次实验的污染.操作时,先低倍再高倍.用完要擦掉油.加香柏油,作用是增加折光率,也就是增加了显微镜的分辨率.油的折光率和分辨率成反比(有公式),同时与波长成正比.2.什么是物镜的同焦现象？它在显微镜观察中有什么意义？答：在一般情况下，当物像在一种物镜中已清晰聚焦后，转动物镜转换器将其他物镜转到工作位置进行观察时，物像将保持基本准焦的状态，这种现象称为物镜的同焦。
利用这种同焦现象，可以保证在使用高倍镜或油镜等放大倍数高、工作距离短的物镜时仅用细调节器即可对物像清晰聚焦，从而避免由于使用粗调节器时可能的误操作而损坏镜头或载玻片。
3.影响显微镜分辨率的因素有哪些？答：物镜的NA值（物镜的数值孔径）与照明光源的波长.4.美蓝染色液作用时间的不同,对酵母菌死细胞数量有何影响,试分析原因答：会造成更多的死细胞，在显微镜下观察，活的是透明无色，衰老的是淡蓝色，死亡的是蓝色，如果美蓝染色液作用时间过长，会造成细胞脱水死亡并渗透染液，影响实验结果。
5.镜检时如何区分放线菌基内菌丝，气生菌丝以及孢子丝一般气生菌丝颜色较深，直生或分枝丝状，比基内菌丝粗；而基内菌丝色浅、发亮，可看到横隔膜，继而断裂成球状或杆状小体。
6.在进行细菌涂片时应注意哪些环节1、载玻片应该冷却后再涂片。
2、如果是涂布液体，可以用毛细管或接种环滴一小滴，然后轻轻抹开，一圈足够。
3、如果是涂布菌落或菌苔，应该在载玻片上先滴一滴水，再将菌落或菌苔涂布上去，接种环的尖蘸一点点即可。
4、为了节省时间，可以将干燥和热固定合并成一步。
但是应该避免高温，因为温度一高，细菌会变形。
5、染色时间视染色液种类而定。
如结晶紫只需几十秒，亚甲基蓝则需一到两分钟。
6、冲洗时，水流不能太大，而且尽量避免水流直接冲在涂片上。
微生物复习思考题与答案
微生物学绪论一、选择题b1. 大部分微生物（）。
A 是原生动物B 帮助改善生活质量C生活在海洋的底层D发现于外层空间。
c2. 适合所有微生物的特殊特征是（）。
A 它们是多细胞的B 细胞有明显的核C 只有用显微镜才能观察到D 可进行光合作用c3.人类通过微生物产生的食品有（）。
A 牛奶B 火腿C 酸乳酪D 黄瓜a4. 第一位观察到微生物的科学家是（）。
A Robert HookeB Louis PasteurC Joseph ListerD James T. Watsona5. 自然发生说的理论认为（）。
A 微生物来自无生命的物质B 大动物中发现有系统发育C人类是从类人猿进化的 D病毒是从细菌退化的d6. 广泛进行微生物研究的17世纪70年代荷兰商人（）。
A van GophB van HoogenstyneC van DyckD van Leeuwenhoekd7. 路易.巴斯德对微生物的贡献在于他（）。
A 发现了病毒B 提出了自然发生说理论C抨击了进化论D 号召人们关注微生物在日常生活中的重要性b8. 阐明微生物是传染病原因的概念称为（）。
A 进化论B 病原菌学说C 生物学细胞论D 报酬递减论a9. 巴斯德采用曲颈瓶试验来（）。
A 驳斥自然发生学说B 证明微生物致病C 认识到微生物的化学结构D 提出细菌和原生动物分类系统b10. 在微生物学中采用化学治疗剂治疗传染病是由于（）。
A Hooke的工作B发现了抗生素C 阐明了DNA的结构D 发展了遗传工程D11.病毒研究工作的迅猛发展取决于（）。
A 光学显微镜B 暗视野显微镜C 紫外线显微镜D 电子显微镜B12.下列的所有特征均与病毒相联系，除了（）之外。
A 它们很少或没有其它的化学物质B 用抗生素干扰病毒的活性C 病毒引起麻疹、腮腺炎和（病毒性）风疹D 它们不是细菌的类型C13. 所有微生物的遗传物质是（）。
A A TPB DNPC DNAD AMPC14. 由一团缠绕的核酸和蛋白质外壳所包围的粒子是对（）最好的描述。
微生物思考题与答案
微⽣物思考题与答案⽣长与控制11、微⽣物⽣长与繁殖的定义微⽣物⽣长是细胞物质有规律地、不可逆的增加，导致细胞体积扩⼤的⽣物学过程。
繁殖是微⽣物⽣长到⼀定阶段，由于细胞结构的复制与重建并通过特定⽅式产⽣新的⽣命个体，引起⽣命个体数量增加的⽣物学过程。
在微⽣物学⾥, 繁殖定义为细胞数量的增加。
2、快速⽣长的细菌⾥DNA复制与细胞分裂是如何协调的？细菌中DNA的复制和细胞分裂两个过程的控制是不连接的，具有多个复制叉。
在细菌个体细胞⽣长的过程中，染⾊体以双向的⽅式进⾏连续的复制，在细胞分裂之前不仅完成了染⾊体的复制，⽽且也开始了两个⼦细胞内DNA分⼦的复制。
3、细菌的⼆等分裂在细菌长度的中间位置，通过细胞质膜内陷并伴随新合成的肽聚糖插⼊，导致横隔壁向⼼⽣长，最后在中⼼会合，经⼀个细菌分裂成两个⼤⼩相等的⼦细菌。
4、在给定温度下，细菌中各组分的变化量与什么有单⼀的函数关系，与什么⽆关？与⽣长速度有关，与培养基中营养成分⽆关5、细菌群体⽣长有哪些不同时期？其原因是什么？1、迟缓期：细菌数不增加。
原因：（1）种⼦⽼化（2）适应新环境的酶系统没有表达2、对数⽣长期：最⼤⽣长速率，对数增加，平衡⽣长3、稳定⽣长期：⽣长速率为零，活菌数最多。
原因：营养物质耗尽、代谢产物积累、pH等环境变化引起细菌不宜⽣长4、衰亡期：代谢活性降低、衰⽼⾃溶。
原因：营养物质耗尽，有毒代谢产物⼤量积累6、概念：Quorum sensing、代时、⽐⽣长速率、倍增时间、迟缓时间Quorum sensing：细菌通过监测细胞分泌的特定信号分⼦浓度从⽽监测种群⾃⾝密度的⽅式。
此种现象⼜被称为⾃诱导，因为信号分⼦的浓度会随着菌密度增加⽽增加，超过阈值后细菌开始表达⼀系列的密度依赖型基因（QS），合成⽣物膜、次级代谢旺盛、不再⽣长等等。
[个体细胞间的信息交流分化结构的确定]代时：在细菌个体⽣长⾥每个细菌分裂繁殖⼀代所需要的时间倍增时间：群体⽣长⾥细菌数量增加⼀倍所需要的时间迟缓时间：微⽣物在⽣长过程中，在实际条件下达到对数⽣长期所需要时间与理想条件（即⽆迟缓期）下达到对数⽣长期所需时间之差，可⽤作图⽅法求出7、代时、⽐⽣长速率、⽣长基质浓度之间的数学关系代时G = 0.693/u；⽐⽣长速率u=u m×S/（Ks + S）u m: 最⼤⽐⽣长速率；S：⽣长基质浓度；Ks: u为u m⼀半时的基质浓度8、什么是细菌的平衡⽣长？在对数⽣长期内，细胞数量对数增加、细胞各成分按⽐例稳定增长。
周德庆微生物学教程思考题参考答案
一、名词解释。
1.原核生物：就是广义的细菌没有核膜包被的细胞核，只有称作核区的裸露0附的原始的单细胞生物，包括真细菌和古生菌两大类群。
2.细菌：一类细胞细短、结构简单、胞壁坚韧、多以二分裂方式繁殖和水生性较强的原核生物。
3.费氏刺尾鱼菌：是在红海和澳大利亚海域生活的刺尾鱼肠道中发现的巨型的共生细菌, 细胞长度达到了 200-500〃m。
4.纳米比亚嗜硫珠菌：是迄今为止发现的最大的细菌，球状细胞，直径为0.32-1mm,用肉眼就可以看清楚，是在非洲西部大陆架的土壤中发现的，以海底散发的硫化氢为生。
5.革兰氏染色法：各种细菌经过革兰氏染色法染色后，可以分成两类，一类是被染成紫色的革兰氏阳性细菌，另一类是被染成红色的革兰氏阳性细菌，由丹麦医生C.Cram发明，故名。
6.（细菌）细胞壁：是位于细菌细胞最外层的一层厚实坚韧的外被，肽聚糖是其主要成分，具有固定细胞外形和提高机械强度，使其免受渗透压等外力的损伤；是细胞生长、分裂和鞭毛运动所必须的；阻拦大分子的有害物质进入细胞；赋予细菌以特定的抗原性和对特定抗生素及噬菌体的敏感性。
7.肽聚糖：又称黏肽，是真细菌细胞壁中的特有成分。
每一个肽聚糖单体都有三部分组成：双塘单位由一个N-乙酰葡糖胺通过6-1,4-糖苷键与另外一个N-乙酰胞壁酸相连；四肽尾由四个氨基酸分子按照L型和D型交替的方式连接而成；肽桥连接前后两个四肽尾分子，起桥梁作用。
8.磷壁酸：是革兰氏阳性菌细胞壁上的一种酸性多糖，主要由甘油磷酸或核糖醇磷酸构成。
与肽聚糖分子共价结合的，成为壁磷壁酸；跨越肽聚糖层与细胞膜的脂质层共价结合的，称为膜磷壁酸。
9.外膜：又称外壁，是革兰氏阳性菌细胞壁的特有结构，位于壁的最外层，由脂多糖、磷脂和若干种外膜蛋白构成。
有控制细胞透性、提高Mg2+浓度、决定细胞抗原多样性的作用。
10.脂多糖：由类脂A、核心多糖和O-特异侧链三部分组成，是位于革兰氏阳性细菌细胞壁最外层的一层较厚的类脂多糖类物质，其中的类脂A是革兰氏阳性病原菌致病物质内毒素的物质基础。
微生物学思考题答案
绪论1、你如何使你的朋友相信微生物不仅仅是一种病原？尽管目前微生物仍在严重威胁人类的生存，但另一方面，我们必须强调，大多数微生物对人类是无害的。
事实上，大多数微生物对人类社会还有巨大的价值。
整个农业系统在许多方面都依赖微生物的活动。
许多主要的农作物属于豆科植物，它们的生长同专一性细菌紧密相连，这些细菌可在植物的根部形成根瘤结构。
根瘤结构中，大气中的氮转变成可用于生长的氮化物。
根瘤细菌的固氮活动，减少了昂贵肥料的需要。
微生物在农业上的另一个重要性在于，某些动物是反刍动物，这些主要的农业动物具有瘤胃，微生物在瘤胃中进行消化。
没有这些微生物牛羊的饲养是不可能的。
植物营养方面，微生物在碳、氮、硫这些重要营养成分的循环起着关键作用。
土壤和水中的微生物可见这些元素转化成植物容易利用的形式。
微生物与食品的关系，不仅仅是产生腐败变质等不利影响。
奶制品的制造至少部分是借助微生物的活动，包括乳酪、酸乳酪和黄油，都是主要的具有经济价值的产品。
泡菜、腌制食品和一些腊肠也归功于微生物的活动。
可烘焙的食品及乙醇的制造也基于酵母菌的发酵。
微生物在能源生产方面也起着重要作用。
天然气是细菌作用的产物，由甲烷细菌代谢产生。
光营养的微生物能够收集太阳能生产生命有机体中的储存物——生物量。
废物如生活垃圾、剩余谷物、动物废料等通过微生物转化微生物燃料——甲醇和乙醇。
利用微生物清理被人类活动污染的大气——生物整治。
利用微生物降解油污、溶剂、杀虫剂和其他环境污染物。
通过基因操纵技术，能在微生物种生产出人类胰岛素。
利用基因组学方法搜索带几百个目的蛋白的基因蓝图，然后将它们转入到合适的受体中由于生产重要的、有商业价值的蛋白质。
在自然界中，它无限小，但作用无限大。
2、胡克和列文虎克对微生物学的贡献有那些？科恩对微生物学的贡献有那些？1665年，罗伯特.胡克描述了霉菌的子实体结构，因此他是第一个描述微生物的人。
1676年，列文虎克在研究辣椒水渗出的过程中发现了细菌，因此他是首次描述细菌的人。
微生物实验报告范文思考题答案
微生物实验报告范文思考题答案
思考题
1、脱色环节，脱色不足会把革兰氏阳性菌染成阴性菌，脱色过度会
把阴性菌染成阳性菌；复染环节，染液不能干涸。
最关键的环节是乙醇脱
色环节。
2、菌龄太老会造成着色不均染色效果不好~阴性阳性不明显分不太清楚,不便于显微镜下观察是阳性菌还是阴性菌~
3、不可以。
因为革兰氏碘液的作用是增加结晶紫染料和细胞之间的
亲和性或附
着力，即以某种方式帮助染料固定在细胞上，使不易脱落。
改变顺序
可能会对效果有影响，所以最好按步骤做；脱色后复染前，理论上革兰氏
阳性菌呈紫色，阴性菌无色。
4、可以，因为脱色后G+是紫色的而G-是无色的，这时，已经可以区
分了，但是如果不经复染的话，镜检时看不清G-的细胞形态，而且如果
没有和G+一起混染的话，基本看不清什么，但是如果只做区分的话，可
以不经过复染。
5、注意菌龄，12-18小时的培养物；注意乙醇的脱色时间，20-30秒，时间过长或过短都会和结果不符。
6、因为用油镜观察时,镜头离玻片会很近.如果未完全干燥,载玻片上
的液体会污染油镜镜头.镜头非常精密,被污染后不利于下次观察。
另外,一般作细菌装片不用盖盖玻片,所以待干燥后才能观察.如果盖
上盖玻片后就不用考虑需要干燥的问题.
7、未经热固定，在剩下的步骤中，菌体会被液体冲走，镜检时出现在视野中的细菌极少，甚至没有；加热温度过高或时间过长会导致菌体变形或形态破坏。
微生物学实验第五版思考题答案
微生物学实验第五版思考题答案
实验一、微生物的简单染色思考题
1油镜与普通物镜在使用方法上有何不同？应特别注意些什么？
2、使用油镜时，为什么必须用镜头油？
镜检标本时，为什么先用低倍镜观察，而不是直接用高倍镜或油镜观察？
低倍镜视野比较大，能看到的范围大，容易找到观察的目标，然后在用放大倍数高的高倍镜或油镜有目的的观察。
实验二、革兰氏染色
（1）为什么必须用培养24 h以内的菌体进行革兰氏染色？
要得到正确的革兰氏染色结果，必须注意哪些操作？哪一步是关键步骤？为什么？
当你对未知菌进行革兰氏染色时，怎样保证操作正确，结果可靠？
主要目的：）由于重力的作用使培养基表面及次层能富集微生物生长所需的营养物质，利于微生物生长；2）防止空气中微生物的污染培养基及培养物：倒置时平板内的空气是不流动的,杂菌不会沉降到培养基表面,如果不倒置,很快平板周边会长起杂菌。
3）倒置培养使琼脂里水分不易蒸发出去，而充分的保持琼脂的弹性与细菌容易繁殖和生存的环境。
如果不倒置，大概3天左右培养基就会出现龟裂等水分散失的情况。
而一些落菌等试验，需验证培养基无菌，就要先倒置培养48小时才可作为模板做落菌，水分散失是很重要的。
a.接种完毕后，接种环的处理方法及其原因；b.实验结束后玻片的处理方法其及原因。
答：a.接种完毕后，接种环应及时灼烧灭菌避免粘附在其上的残余微生物污染四周；
b.实验结束后，包手玻片在内的带菌工具在洗涤前应进行消毒剂，可用3%的来苏尔液或5%的石碳酸溶液浸泡半小时后再行清洗，或高温消毒后再行清洗。
微生物思考题答案
微生物思考题答案《食品微生物学》思考题第1章绪论1、微生物的定义？它包括哪些类群？答：微生物的定义：是指所有形体微小，具有单细胞或简单的多细胞结构，或没有细胞结构,并需借助显微镜才能观察到的一群微小低等生物的总称。
包括属于原核类的细菌、放线菌、蓝细菌、支原体、立克次氏体、衣原体；属于真菌类的真菌(酵母菌、霉菌)、原生动物和显微藻类；以及属于非细胞类的病毒和亚病毒。
2、简述微生物的特点？答：1.个体微小、分布广泛2.种类多、食谱杂3. 代谢能力强、繁殖快4.适应性强、易变异5、观察和研究手段特殊3、试根据微生物的特点，谈谈为什么说微生物既是人类的敌人，更是人类的朋友？答：①有害方面：引起疾病：如爱滋病、非典型肺炎、细菌性食物中毒、真菌毒素中毒、大肠杆菌O157H7、皮肤病等。
食品腐败、变质。
②有利方面生产食品：如酸奶、面包、酒、醋等；生产药物：如抗生素、激素、干扰素等；自然界物质循环；废水、环境治理等。
4、简述微生物发展史上主要时期的特点和代表人物？答：远古时期：在食品，农业，医学防治方面都有很好的发展。
微生物学初创期-形态阶段安东.列文虎克微生物学奠基期-生理水平罗伯特柯赫，路易斯巴菲特。
微生物学的发展期-生化水平微生物学的成熟期-分子生物学水平5、阐述列文虎克、巴期德及柯赫的主要贡献？答：列文虎克：第一个真正看见并描述微生物的人，自制放大50倍到300倍的显微镜。
巴斯德：1．证明发酵是微生物引起的2．创立巴氏消毒3．预防接种提高机体免疫功能4．彻底否定了自然发生说(鹅颈瓶实验) 柯赫：1．第一个发明了微生物的纯培养。
2．创立了某一微生物是否为相应疾病的病原基本原则－柯赫法则。
6、什么是学名、双名法、三名法？答：学名：是按国际命名法规进行命名的。
拉丁词、希腊词或拉丁化的外来词组成的双名法：属名+种名名词形容词例：大肠埃希氏菌Escherichia coli Castellani et Chalmers 1919 注：属名和种名要斜体，人名要正体三名法:微生物是亚种或变种时，学名就应按三名法拼写，即：属名+种名加词 + subsp或var + 亚种或变种的加词斜体正体斜体如：Saccharomyces cerevisiaeellipsoideus 酿酒酵母椭圆变种7、名词解释：种、亚种、群、型。
微生物思考题及参考标准答案
微生物思考题及参考答案.用油镜观察时应注意哪些问题？在载玻片和镜头之间加滴什么油?起什么作用？答：应该先用擦镜纸将镜头擦干净,以防上次实验地污染.操作时,先低倍再高倍.用完要擦掉油.加香柏油,作用是增加折光率,也就是增加了显微镜地分辨率.油地折光率和分辨率成反比(有公式),同时与波长成正比..什么是物镜地同焦现象？它在显微镜观察中有什么意义？答：在一般情况下，当物像在一种物镜中已清晰聚焦后，转动物镜转换器将其他物镜转到工作位置进行观察时，物像将保持基本准焦地状态，这种现象称为物镜地同焦.利用这种同焦现象，可以保证在使用高倍镜或油镜等放大倍数高、工作距离短地物镜时仅用细调节器即可对物像清晰聚焦，从而避免由于使用粗调节器时可能地误操作而损坏镜头或载玻片..影响显微镜分辨率地因素有哪些？答：物镜地值（物镜地数值孔径）与照明光源地波长..美蓝染色液作用时间地不同,对酵母菌死细胞数量有何影响,试分析原因答：会造成更多地死细胞，在显微镜下观察，活地是透明无色，衰老地是淡蓝色，死亡地是蓝色，如果美蓝染色液作用时间过长，会造成细胞脱水死亡并渗透染液，影响实验结果..镜检时如何区分放线菌基内菌丝，气生菌丝以及孢子丝一般气生菌丝颜色较深，直生或分枝丝状，比基内菌丝粗；而基内菌丝色浅、发亮，可看到横隔膜，继而断裂成球状或杆状小体..在进行细菌涂片时应注意哪些环节、载玻片应该冷却后再涂片. 、如果是涂布液体，可以用毛细管或接种环滴一小滴，然后轻轻抹开，一圈足够. 、如果是涂布菌落或菌苔，应该在载玻片上先滴一滴水，再将菌落或菌苔涂布上去，接种环地尖蘸一点点即可. 、为了节省时间，可以将干燥和热固定合并成一步.但是应该避免高温，因为温度一高，细菌会变形. 、染色时间视染色液种类而定.如结晶紫只需几十秒，亚甲基蓝则需一到两分钟. 、冲洗时，水流不能太大，而且尽量避免水流直接冲在涂片上. 、冲洗后干燥，可以用酒精灯加热以节省时间，同样地，应该避免高温，因为温度一高，细菌会变形..进行细菌制片时为什么要进行加热固定?在加热固定时应注意什么?固定地目地有三个：）杀死微生物，固定细胞结构. ）保证菌体能更牢地粘附在载玻片上，防止标本被水冲洗掉. ）改变染料对细胞地通透性，因为死地原生质比活地原生质易于染色.固定时应注意：手持玻片，菌膜朝上，在微火过次（手指触摸玻片反面，不烫手为宜），固定时应尽可能维持细胞原有形态，防止细胞膨胀或收缩..为什么要求制片完全干燥后才能用油镜观察.因为用油镜观察时,镜头离玻片会很近.如果未完全干燥,载玻片上地液体会污染油镜镜头.镜头非常精密,被污染后不利于下次观察、若未完全干燥，水滴会影响油与玻璃之间折光率，造成视野不够清晰..哪些环节会影响革兰色染色结果地正确性？其中最关键地环节是什么？答：涂片环节、加热固定环节、脱色环节；其中最关键地环节是脱色环节..进行革兰氏染色时，为什么特别强调菌龄不能太老，用老龄细菌染色会出现什么问题?答：菌龄太老，细胞壁通透性改变.着色不均，染色效果不好.阴性阳性不明显分不太清楚,问题是：不便于显微镜下观察是阳性菌还是阴性菌..革兰氏染色中那一步是关键?为什么？你是如何操作地？革兰氏染色地关键步骤是：乙醇脱色（是脱色时间）.如果脱色过度，革兰氏阳性菌也可被脱色而被误认为是革兰氏阴性菌；如脱色时间过短，革兰氏阴性菌也可被脱色而被误认为是革兰氏阳性菌.脱色时间地长短还受涂片地厚薄，脱色是玻片晃动地快慢及乙醇用量地多少等因素地影响，难以严格规定（脱色是应当控制速度，脱色时间一般为—）..革兰氏染色中,哪个步骤可以省略?在什么情况下采用媒染目地是在所有地细胞壁内形成了不溶于水地结晶紫与碘地复合物. 脱色后使革兰氏阴性菌变为无色. 复染使革兰氏阴性菌染成红色. 所以鉴别细菌地革兰氏阴阳性只须媒染，复染地目地是为了看清革兰氏阴性菌..你主要根据哪些形态特征来区分四种不同地霉菌曲霉:具有分隔；气生菌丝地一部分形成长而粗糙地分生孢子梗，顶端膨大成球状顶囊，表面辐射出一层或两层小梗，小梗上着生成串地球形分生孢子.分生孢子梗生于足细胞上，并通过足细胞与营养菌丝相连.根霉:菌丝无隔、多核、分枝状，有匍匐菌丝和假根.在假根地上方直立地生长出一至数根孢囊梗，其顶端膨大成球形孢子囊.囊地基部有囊托，中间有球形或半球形囊轴.毛霉:菌丝无隔、多核、分枝状，无假根或匍匐菌丝.菌丝体上直接生出单生、总状分枝或假轴状分枝地孢囊梗.各分枝顶端着生球形孢子囊，无囊托.青霉:菌丝有横隔，分生孢子梗亦有横隔，光滑或粗糙.基部无足细胞，顶端不形成膨大地顶囊，其分生孢子梗经过多次分枝，产生几轮对称或不对称地小梗，形如扫帚，称为帚状体.孢子颜色：黑曲霉是黑色，青霉是青色，根霉是白菌丝黑孢子，毛霉则是淡黄色.以上为实验室观察）菌丝特征：青菌与曲霉菌丝与膈；毛霉与根霉则无；）菌丝地特化结构：曲霉有足细胞，其它霉菌无；根霉有假根与匍匐枝，其它霉菌无；）孢子头特征：青霉地孢子头为扫帚状；根霉与毛霉地孢子头为囊状；曲霉为菊花状孢子头..为什么更换不同放大倍数地目镜或物镜时，必须用镜台测微尺重新对目镜测微尺进行校正?目镜测微尺中每小格代表地实际长度是不固定地，它是随所使用目镜和物镜地放大率地不同而改变地，故在测量前必须先用镜台测微尺重新对目镜测微尺进行校正，以得出在显微镜地特定放大倍率下，目镜测微尺每小格所代表地相对长度..在不改变目镜和目镜测微尺，而改用不同放大倍数地物镜来测定同一细菌地大小时，其测定结果是否相同？为什么？答:相同;目镜测微尺是一块圆形玻片，其中央刻有精确等分地刻度，有把毫米刻成为等分或把毫米长度刻成等分.测量时，将其放在接目镜中地隔板上来测量经显微镜放大后地细胞物象.由于在不改变目镜和目镜测微尺，而改用不同放大倍数地物镜来测定同一细菌地大小时，物象地放大倍数与每小格目镜测微尺所代表地长度在变化比例上是同步地，故而测定结果相同..哪些因素会造成血细胞计数板地计数误差，应如何避免?操作时没有先盖盖玻片再滴加悬液，导致体积不准确.避免：先盖盖玻片再滴加悬液.细胞密度太高.避免：稀释溶液.溶液不均匀.避免：滴加溶液前混匀悬液.、仪器误差：所用器材均应清洁干净，并且计数板计数区不应该有擦痕.、计数室内可能有气泡.因为酵母细胞并没有染色，看起来是透明地，有气泡很容易被计入，使数值偏高；并且，气泡会影响菌悬液地随机分布.改进：若产生气泡，则用吸水纸吸出.、菌体在计数板上分布不均，当用选取格计数时，会造成很大误差.改进：应使菌液自然流入并混匀，进行观察时尽可能多数几个格子.、配制稀释液时吸取地浓度过高或过低，导致稀释液浓度和原液不成正确比例，计算时产生误差.应将原液摇晃均匀后取中部地液体进行稀释.、由于数菌体数目时视觉疲劳而导致地视觉误差.应多人观察，取记录平均数.、计数时可能将格四周地菌都计算在内了，使数值偏高. 改进：谨遵一个规则，计上不计下，计左不计右，不可以重复计数.、可能出现有出芽地酵母菌，将出芽地酵母菌按两个计数了，使数值偏高. 改进：计数时，只有当芽体于母细胞一样大地时候，才能计为两个..培养基配好后，为什么必须立即灭菌?如何检查灭菌后地培养基是否无菌？为什么要倒置培养？答：由于配制培养基地各类营养物质和容器等含有各种微生物，因此，已配制好地培养基必须立即灭菌，如果来不及灭菌，应暂存冰箱内，以防止其中地微生物生长系列而消耗养分和改变培养基地酸碱度所带来地不利影响.将灭菌地培养基放入℃温箱中培养～，无菌生长即可证明灭菌后地培养基无菌.倒置培养地主要目地：）由于重力地作用使培养基表面及次层能富集微生物生长所需地营养物质，利于微生物生长；）防止空气中微生物地污染培养基及培养物：倒置时平板内地空气是不流动地,杂菌不会沉降到培养基表面,如果不倒置,很快平板周边会长起杂菌.）倒置培养使琼脂里水分不易蒸发出去，而充分地保持琼脂地弹性与细菌容易繁殖和生存地环境.如果不倒置，大概天左右培养基就会出现龟裂等水分散失地情况.而一些落菌等试验，需验证培养基无菌，就要先倒置培养小时才可作为模板做落菌，水分散失是很重要地..在配制培养基地操作过程中应注意些什么问题？为什么？答：一般而言，培养基地配置要注意如下几点原则：）营养成分地配比：碳源和氮源地比例（）要适当；）适宜地酸碱度（值）：配制培养基时地调节；）渗透压：营养物质要有适合地浓度；）培养基不能反复高温灭菌.) 称不溶性固形物时，应单独称，若量少地可以与无机盐一起称，但一定要混匀再分装；）一般情况下培养基用自来水配制.操作细节上则要注意：）称药品用地牛角匙不要混用，称完药品应及时盖紧瓶盖）调值不要调过头，以免回调而影响培养基内各离子地浓度）分装时注意不要污染棉塞、试管口，以免染菌.）及时灭菌，以免培养基及容器里地微生物生长繁殖消耗养分、改变酸碱度.、当然是注意浓度配比不要搞错、很多培养基地加料顺序有讲究,否则会有沉淀产生、有些培养基会有不溶物质,分装前应摇匀、不要忘了调节值（一般细菌都需要,酵母可能自然就行,不过不一定）、加热溶解时尽量不要煮沸,会损失营养物质.高压蒸气灭菌开始之前，为什么要将锅内冷空气排尽？灭菌完毕后，为什么待压力降低“”时才能打开排气阀，开盖取物.答：）在使用高压蒸汽灭菌时，灭菌锅内冷空气地排除是否完全极为重要，因为空气地膨胀压大于水蒸汽地膨胀压，所以，当水蒸气中含有空气时，在同一压力下，含空气蒸汽地温度低于饱和蒸汽地温度.）压力未降至“”便开盖取物地可能后果：压力锅内压力骤然降低，引起容器中地溶液喷出容器口导致污染或导致人员地烫伤..干热灭菌操作过程中应注意哪些问题为什么、物品不要摆放太挤,以免妨碍空气流通、灭菌物品不要接触干燥箱内壁地铁板,以防包装纸烤焦起火、灭菌时人不能离开、灭菌结束后不能忘记关掉电源、待温度降到度以下再打开,否则冷热空气交替,玻璃器皿容易炸裂或发生烫伤事故.为什么干热灭菌比湿热灭菌所需温度高时间长？在湿热条件下，有水蒸汽地作用：高温水蒸汽导热比干空气要快；高温水蒸汽冷凝变水时有放热过程；高温水蒸汽能穿透细菌地细胞膜，直接进入细胞内破坏细胞；高温水蒸汽能水解一部分细胞结构，加速导热.（湿热中细菌菌体吸收水分，蛋白质较易凝固，因蛋白质含水量增加，所需凝固温度降低；湿热地穿透力比干热大；湿热地蒸汽有潜热存在，每克水在℃时，由气态变为液态时可放出．（千焦）地热量.这种潜热，能迅速提高被灭菌物体地温度，从而增加灭菌效力.）.设计实验方案，比较干热灭菌和湿热灭菌地效果. 以下试验方案有关操作均遵循无菌操作条件和等量原则.（一）实验材料试管镊子酒精灯嗜热脂肪芽孢杆菌菌片纸片（与菌片同大小同材料）溴甲酚紫蛋白冻水培养基（已灭菌）等实验材料（材料有余）.（二）对照组取支洁净试管，分为三组（每支一组），将组中放入菌片，组中放入纸片，组中什么也不加；不经灭菌，直接加入溴甲酚紫蛋白冻水培养基（等量）.（三）恒为培养将上述所有试管按分组在℃恒温条件下培养小时..如何确定平板上某单个菌落是否为纯培养请写出实验地主要步骤纯培养地确定除观察其菌落特征外，还要结合显微镜检测个体形态特征后才能确定，有些微生物地纯培养要经过一系列分离与纯化过程和多种特征鉴定才能得到..配制牛肉膏蛋白胨培养基，有哪些操作步骤？那几步易出错，如何防止？称取药品—加热溶化—分装—加棉塞—包扎—灭菌—搁置斜面易出错地步骤有：称取药品称取时钥匙专用，瓶盖不要错盖，易吸水地药品要快速称取；加热溶化加入药品后要用玻璃棒不停搅拌，以免糊底（在琼脂熔化过程中，应控制火力，以免培养基因沸腾而溢出容器，同时，需不断搅拌，以防琼脂糊底烧焦.）；分装分装时培养基不能粘在三角瓶（或试管）口，以免接种时染菌；搁置斜面斜面长度约试管长度一半为宜..平板菌落计数法地原理是什么? 它适用于那些微生物地计数？平板菌落计数法是将等测样品经适当稀释后，其中地微生物充分分散为单个细胞，取一定量地稀释液接种到平板上，经过培养，由每个单细胞生长繁殖而形成地肉眼可见地菌落，即一个单菌落应代表原样品中地一个单细胞.统计菌落数，根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品中地含菌数.（但是，由于待测样品往往不易完全分散成单个细胞，所以，长成地一个单菌落也可能来自样品中地或更多个细胞.因此平板菌落计数地结果往往偏低.现在常使用菌落形成单位）.平板计数法是根据微生物在固体培养基上所形成地一个菌落是由一个微生物繁殖而形成地现象进行地，也就是一个菌落可代表一种微生物（并不绝对).通常用来测定样品中所含细菌、孢子、酵母菌等单细胞微生物地数量.、微量移液器地最小量程太大，在加样时，容易加多，使盖玻片鼓起，血球计数板所技术地体积变大，最终结果偏大. 改进：用量程地小地微量移液器并少加一些..如果一项科学研究内容需从自然界中筛选到能产生高温蛋白酶地菌株，你将如何完成？写出实验方案（产蛋白酶菌株在酪素平板上能形成降解酪素透明圈）.以下试验方案有关操作均遵循无菌操作条件一材料准备土壤【有机质（特别是蛋白质）含量丰富地土壤】灭菌生理盐水（）灭菌移液管添加酪素地—（牛肉膏蛋白胨完全培养基）经灭菌—斜面（经灭菌）其他材料：接种环酒精灯等二操作方法在盛有灭菌生理盐水地烧杯中添加土壤，配成悬浮液；稍静止后，用灭菌移液管移取部分上清液，将其制成^—^倍地稀释液；用灭菌移液管吸取各稀释液用稀释倒平板法（或涂布平板法）将其接入添加酪素地—平板上；在—℃下培养—天；挑取形成降解酪素透明圈地菌落（透明圈直径与菌落直径之比较大者），转接入—斜面上培养；（若无特定菌落形成，则需另取土样从开始重复试验）将—斜面上地菌落再用平板纯培养，依次重复—次后即可得到纯培养（镜检）；纯培养细菌中蛋白酶地提取及活性鉴定【摇瓶培养（若提取蛋白酶及其活性正常，则纯培养成功，否则，重取土样重复以上实验）】..为什么熔化后地培养基要冷却至℃左右才能倒平板？低于这个温度琼脂会凝固，温度过高，如果是做倾倒琼脂做菌落计数，会杀死一部分细菌，如果只是只是制备琼脂平板，那么温度太高就进行倾倒会导致琼脂凝固后偏软，水汽过多..要使平板菌落计数准确，需要掌握哪几个关键？为什么？无菌操作稀释良好，不会太浓或太稀. 菌落生长时间控制好，不会长地太大不便区分，也不至于太小影响计数..当你地平板上长出地菌落不是均匀分散地而是集中在一起时，你认为问题出在哪里？.太浓 .没涂匀.用倾注法和涂布法计数，其平板上长出地菌落有何不同？为什么要培养较长时间（）后观察结果？倾注法是在培养皿中接种好样品之后，倾注琼脂并培养；而涂布法则是在琼脂表面接种并使用型棒涂布.因此，倾注法地菌落将出现在琼脂地各个部位，包括底层和中层，但涂布法培养后形成地菌落只出现在琼脂表面..你如何解释淀粉酶是胞外酶而非胞内酶？答：①淀粉是大分子物质，进入细胞十分困难，甚至需要高耗能地胞吞作用.因而通过胞外酶地作用，将淀粉水解为葡萄糖后运入细胞，较方便高效.②试验中出现透明圈，说明培养基内淀粉被水解，可推测是细菌产生地胞外地淀粉酶起地作用..不利用碘液，你能否证明淀粉水解地存在?答：由于淀粉水解生成葡萄糖，即多羟基醛，因此可利用醛地性质进行检验，如银镜试验，斐林试验等.呈阳性者，说明产生了葡萄糖，淀粉被水解；阴性者说明淀粉未被水解..假如某些微生物可以有氧代谢葡萄糖，发酵试验应该出现什么结果？答微生物有氧代谢葡萄糖产气不产酸，因此发酵结果是小管中生气泡但是溶液不变黄..解释在细菌培养中吲哚检测地化学原理，为什么在这个试验中用吲哚地存在作为色氨酸酶活性地指示剂，而不用丙酮酸？答：化学原理：有些细菌产生色氨酸酶，分解蛋白胨中地色氨酸，产生吲哚和丙酮酸.吲哚与对二甲基氨基甲醛结合，形成红色地玫瑰吲哚.但并非所有地微生物都具有分解色氨酸产生吲哚地能力，因此吲哚试验可以作为一个生物化学检测地指标.因为丙酮酸是生物体呼吸作用地产物，无论是有氧还是无氧，都会产生丙酮酸，因而无法作为色氨酸酶活性地指示剂进行区分.同时吲哚能通过有明显颜色变化地化学反应观测到，而丙酮酸不能，所以试验中用吲哚地存在作为色氨酸酶活性地指示剂，而不用丙酮酸..为什么大肠杆菌是甲基红反应阳性，而产气杆菌为阴性？答：当细菌代谢糖产生酸时，培养基就会变酸，使加入培养基中地甲基红指示剂由橙黄色（）转变为红色（），即甲基红反应.而大肠杆菌和产气肠杆菌在培养地早期均产生有机酸，但大肠杆菌在培养地后期仍能维持酸性，而产气肠杆菌则转化有机酸为非酸性末端产物，如乙醇、丙酮酸等，使升至大约.因此，大肠杆菌为阳性，产气肠杆菌为阴性..用紫外线进行诱变时,为什么要打开皿盖?为什么要在红光灯下操作紫外线不容易穿透玻璃，所以打开盖，自然光下容易光复活，红光下不会所以在红光下操作。
食品微生物学复习思考题(附答案)
食品微生物学复习思考题一、是非题判断下列句子正确则在句前画“ ”，错误则在句前画“×”1、（×）原核生物细胞中的DNA发现在染色体和质粒中。
2、（×）病毒被认为是原核生物因为它们具备全部原核生物的特征。
3、（×）所有细菌都有细胞壁。
（支原体没有细胞壁，最小的原核细胞）4、（×）微生物中的原生动物、真菌和细菌被认为是真核生物。
5、（×）在微生物生长的稳定期，细胞快速分裂。
（对数期）6、（×）微生物单菌落的成员全都来自一个单个细胞的祖先。
7、（×）为了抵御干旱环境，某些原生动物产生芽孢。
8、（×）在实验室中细菌很难形成菌落。
9、（V ）用来固化细菌培养基的多糖是琼脂。
10、（V ）为了进行新陈代谢微生物体内必须有一定量的水。
11、（×）精确定量某些成分而配制的培养基称为天然培养基，又名半合成培养基。
（合成培养基）13、（×）真菌、原生动物和单细胞藻类中主要的繁殖方法是二分裂。
14、（×）出芽生殖过程在病毒中是可以普遍见到的。
（酵母菌）15、（×）称为嗜碱菌的那些细菌是能够在pH7.0以上生长的。
（通常在9-10之间的微生物，称之为嗜碱菌）16、（×）真菌最适的生长条件是有点碱性的。
（4.0到6.0）17、（V ）特殊抗微生物剂的选择取决于待处理物品中种类控制的微生物种类、抗微生物使用时的环境条件。
18、（×）有机物可促进抗微生物剂成功的使用。
19、（×）消毒剂指的是消除所有微生物包括微生物的孢子。
（不是所有孢子）20、（×）抗生素的抗微生物效果一般低于消毒剂和防腐剂。
21、（×）放在煮沸的水中灭菌需要30分钟。
22、（×）干热较湿热灭菌效果好，因为干热适用于灭菌的物质如粉料物质、玻璃制品、设备和油料物质。
（湿热灭菌好）23、（×）巴斯德消毒法是一种防腐的方法，如牛奶、啤酒和果汁，但没有灭菌效果。
(完整版)微生物实验思考题
微生物实验思考题1、用油镜观察时应该注意哪些问题？在载破片和镜头之间加滴什么油？起什么作用？答：应该先用擦镜纸将镜头擦干净，以防上次实验的污染。
操作时,先低倍再高倍。
用完要擦掉油。
加滴香柏油。
作用:增加折光率，也就是增加了显微镜的分辨率.2、根据实验体会，谈谈应如何根据所观察微生物的大小，选择不同的物镜进行有效的观察.答：细菌用油镜，真菌用高倍镜.都是先用低倍镜找到目标后，再用高倍镜调到合适的视野和合适的清晰度.放线菌、酵母菌、多细胞真菌相对较大，用放大 40 倍的物镜就可以看了,细菌小，要用放大 1000 倍的物镜看，感觉还很小。
病毒那就要用电子显微镜看了。
3、哪些环节会影响革兰氏染色结果的正确性?其中最关键的环节是什么？答:涂片环节、加热固定环节、脱色环节;其中最关键的环节是脱色环节。
4、进行革兰氏染色时，为什么特别强调菌龄不能太老，用老龄细菌染色会出现什么问题？答：着色不均，染色效果不好。
阴性阳性不明显分不太清楚，问题是：不便于显微镜下观察是阳性菌还是阴性菌。
5、革兰氏染色时，初染前能加碘液吗?乙醇脱色后复染之前，革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌应分别是什么颜色？答:不可以.因为碘与染料会结合成大分子，使得染料分子不能穿过细胞的细胞壁,对实验结果造成影响。
脱色后复染前，革兰氏阳性菌呈紫色,阴性菌无色.6、不经过复染这一步,能否区别革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌？答：不行。
在复染之前,革兰氏阴性菌是无色透明的,在显微镜下很难观察到；或者脱色过度，也会造成阳性菌脱色，不经过复染，无法进一步区别。
7、你认为制备细菌染色标本时，应该注意哪些环节?答：1制备适宜的培养基2在超净工作台上进行,保持无菌环境3对培养基，接种环等物品的高温高压灭菌。
4倒置培养基,防止冷凝水内流8. 为什么要求制片完全干燥后才能用油镜观察?答:1、若未完全干燥，载玻片上的液体会污染油镜镜头。
镜头非常精密,被污染后不利于下次观察；2、若未完全干燥，水滴会影响油与玻璃之间折光率，造成视野不够清晰。
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微生物思考题及参考答案1、用油镜观察时应注意哪些问题？在载玻片与镜头之间加滴什么油?起什么作用？答:应该先用擦镜纸将镜头擦干净,以防上次实验的污染、操作时,先低倍再高倍、用完要擦掉油、加香柏油,作用就是增加折光率,也就就是增加了显微镜的分辨率、油的折光率与分辨率成反比(有公式),同时与波长成正比、2、什么就是物镜的同焦现象？它在显微镜观察中有什么意义？答:在一般情况下,当物像在一种物镜中已清晰聚焦后,转动物镜转换器将其她物镜转到工作位置进行观察时,物像将保持基本准焦的状态,这种现象称为物镜的同焦。
利用这种同焦现象,可以保证在使用高倍镜或油镜等放大倍数高、工作距离短的物镜时仅用细调节器即可对物像清晰聚焦,从而避免由于使用粗调节器时可能的误操作而损坏镜头或载玻片。
3、影响显微镜分辨率的因素有哪些？答:物镜的NA值(物镜的数值孔径)与照明光源的波长、4、美蓝染色液作用时间的不同,对酵母菌死细胞数量有何影响,试分析原因答:会造成更多的死细胞,在显微镜下观察,活的就是透明无色,衰老的就是淡蓝色,死亡的就是蓝色,如果美蓝染色液作用时间过长,会造成细胞脱水死亡并渗透染液,影响实验结果。
5、镜检时如何区分放线菌基内菌丝,气生菌丝以及孢子丝一般气生菌丝颜色较深,直生或分枝丝状,比基内菌丝粗;而基内菌丝色浅、发亮,可瞧到横隔膜,继而断裂成球状或杆状小体。
6、在进行细菌涂片时应注意哪些环节1、载玻片应该冷却后再涂片。
2、如果就是涂布液体,可以用毛细管或接种环滴一小滴,然后轻轻抹开,一圈足够。
3、如果就是涂布菌落或菌苔,应该在载玻片上先滴一滴水,再将菌落或菌苔涂布上去,接种环的尖蘸一点点即可。
4、为了节省时间,可以将干燥与热固定合并成一步。
但就是应该避免高温,因为温度一高,细菌会变形。
5、染色时间视染色液种类而定。
如结晶紫只需几十秒,亚甲基蓝则需一到两分钟。
6、冲洗时,水流不能太大,而且尽量避免水流直接冲在涂片上。
7、冲洗后干燥,可以用酒精灯加热以节省时间,同样的,应该避免高温,因为温度一高,细菌会变形。
7、进行细菌制片时为什么要进行加热固定?在加热固定时应注意什么?固定的目的有三个:1)杀死微生物,固定细胞结构。
2)保证菌体能更牢的粘附在载玻片上,防止标本被水冲洗掉。
3)改变染料对细胞的通透性,因为死的原生质比活的原生质易于染色。
固定时应注意:手持玻片,菌膜朝上,在微火过3次(手指触摸玻片反面,不烫手为宜),固定时应尽可能维持细胞原有形态,防止细胞膨胀或收缩。
8、为什么要求制片完全干燥后才能用油镜观察1、因为用油镜观察时,镜头离玻片会很近、如果未完全干燥,载玻片上的液体会污染油镜镜头、镜头非常精密,被污染后不利于下次观察、2、若未完全干燥,水滴会影响油与玻璃之间折光率,造成视野不够清晰。
9、哪些环节会影响革兰色染色结果的正确性？其中最关键的环节就是什么？答:涂片环节、加热固定环节、脱色环节;其中最关键的环节就是脱色环节。
10、进行革兰氏染色时,为什么特别强调菌龄不能太老,用老龄细菌染色会出现什么问题?答:菌龄太老,细胞壁通透性改变。
着色不均,染色效果不好。
阴性阳性不明显分不太清楚,问题就是:不便于显微镜下观察就是阳性菌还就是阴性菌。
11、革兰氏染色中那一步就是关键?为什么？您就是如何操作的？革兰氏染色的关键步骤就是:乙醇脱色(就是脱色时间)。
如果脱色过度,革兰氏阳性菌也可被脱色而被误认为就是革兰氏阴性菌;如脱色时间过短,革兰氏阴性菌也可被脱色而被误认为就是革兰氏阳性菌。
脱色时间的长短还受涂片的厚薄,脱色就是玻片晃动的快慢及乙醇用量的多少等因素的影响,难以严格规定(脱色就是应当控制速度,脱色时间一般为20—30s)。
12、革兰氏染色中,哪个步骤可以省略?在什么情况下采用媒染目的就是在所有的细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物。
脱色后使革兰氏阴性菌变为无色。
复染使革兰氏阴性菌染成红色。
所以鉴别细菌的革兰氏阴阳性只须媒染,复染的目的就是为了瞧清革兰氏阴性菌。
13、您主要根据哪些形态特征来区分四种不同的霉菌曲霉:具有分隔;气生菌丝的一部分形成长而粗糙的分生孢子梗,顶端膨大成球状顶囊,表面辐射出一层或两层小梗,小梗上着生成串的球形分生孢子。
分生孢子梗生于足细胞上,并通过足细胞与营养菌丝相连。
根霉:菌丝无隔、多核、分枝状,有匍匐菌丝与假根。
在假根的上方直立地生长出一至数根孢囊梗,其顶端膨大成球形孢子囊。
囊的基部有囊托,中间有球形或半球形囊轴。
毛霉:菌丝无隔、多核、分枝状,无假根或匍匐菌丝。
菌丝体上直接生出单生、总状分枝或假轴状分枝的孢囊梗。
各分枝顶端着生球形孢子囊,无囊托。
青霉:菌丝有横隔,分生孢子梗亦有横隔,光滑或粗糙。
基部无足细胞,顶端不形成膨大的顶囊,其分生孢子梗经过多次分枝,产生几轮对称或不对称的小梗,形如扫帚,称为帚状体。
孢子颜色:黑曲霉就是黑色,青霉就是青色,根霉就是白菌丝黑孢子,毛霉则就是淡黄色。
以上为实验室观察1)菌丝特征:青菌与曲霉菌丝与膈;毛霉与根霉则无;2)菌丝的特化结构:曲霉有足细胞,其它霉菌无;根霉有假根与匍匐枝,其它霉菌无;3)孢子头特征:青霉的孢子头为扫帚状;根霉与毛霉的孢子头为囊状;曲霉为菊花状孢子头。
14、为什么更换不同放大倍数的目镜或物镜时,必须用镜台测微尺重新对目镜测微尺进行校正?目镜测微尺中每小格代表的实际长度就是不固定的,它就是随所使用目镜与物镜的放大率的不同而改变的,故在测量前必须先用镜台测微尺重新对目镜测微尺进行校正,以得出在显微镜的特定放大倍率下,目镜测微尺每小格所代表的相对长度。
15、在不改变目镜与目镜测微尺,而改用不同放大倍数的物镜来测定同一细菌的大小时,其测定结果就是否相同？为什么？答:相同;目镜测微尺就是一块圆形玻片,其中央刻有精确等分的刻度,有把毫米刻成为50 等分或把10 毫米长度刻成100 等分。
测量时,将其放在接目镜中的隔板上来测量经显微镜放大后的细胞物象。
由于在不改变目镜与目镜测微尺,而改用不同放大倍数的物镜来测定同一细菌的大小时,物象的放大倍数与每小格目镜测微尺所代表的长度在变化比例上就是同步的,故而测定结果相同。
16、哪些因素会造成血细胞计数板的计数误差,应如何避免?操作时没有先盖盖玻片再滴加悬液,导致体积不准确。
避免:先盖盖玻片再滴加悬液。
细胞密度太高。
避免:稀释溶液。
溶液不均匀。
避免:滴加溶液前混匀悬液。
1、仪器误差:所用器材均应清洁干净,并且计数板计数区不应该有擦痕。
2、计数室内可能有气泡。
因为酵母细胞并没有染色,瞧起来就是透明的,有气泡很容易被计入,使数值偏高;并且,气泡会影响菌悬液的随机分布。
改进:若产生气泡,则用吸水纸吸出。
3、菌体在计数板上分布不均,当用选取5格计数时,会造成很大误差。
改进:应使菌液自然流入并混匀,进行观察时尽可能多数几个格子。
4、配制稀释液时吸取的浓度过高或过低,导致稀释液浓度与原液不成正确比例,计算时产生误差。
应将原液摇晃均匀后取中部的液体进行稀释。
5、由于数菌体数目时视觉疲劳而导致的视觉误差。
应多人观察,取记录平均数。
6、计数时可能将格四周的菌都计算在内了,使数值偏高。
改进:谨遵一个规则,计上不计下,计左不计右,不可以重复计数。
7、可能出现有出芽的酵母菌,将出芽的酵母菌按两个计数了,使数值偏高。
改进:计数时,只有当芽体于母细胞一样大的时候,才能计为两个。
17、培养基配好后,为什么必须立即灭菌?如何检查灭菌后的培养基就是否无菌？为什么要倒置培养？答:由于配制培养基的各类营养物质与容器等含有各种微生物,因此,已配制好的培养基必须立即灭菌,如果来不及灭菌,应暂存冰箱内,以防止其中的微生物生长系列而消耗养分与改变培养基的酸碱度所带来的不利影响。
将灭菌的培养基放入37℃温箱中培养24～48h,无菌生长即可证明灭菌后的培养基无菌。
倒置培养的主要目的:1)由于重力的作用使培养基表面及次层能富集微生物生长所需的营养物质,利于微生物生长;2)防止空气中微生物的污染培养基及培养物:倒置时平板内的空气就是不流动的,杂菌不会沉降到培养基表面,如果不倒置,很快平板周边会长起杂菌。
3)倒置培养使琼脂里水分不易蒸发出去,而充分的保持琼脂的弹性与细菌容易繁殖与生存的环境。
如果不倒置,大概3天左右培养基就会出现龟裂等水分散失的情况。
而一些落菌等试验,需验证培养基无菌,就要先倒置培养48小时才可作为模板做落菌,水分散失就是很重要的。
19、在配制培养基的操作过程中应注意些什么问题？为什么？答:一般而言,培养基的配置要注意如下几点原则:1)营养成分的配比:碳源与氮源的比例(C/N)要适当;2)适宜的酸碱度(pH值):配制培养基时pH的调节;3)渗透压:营养物质要有适合的浓度;4)培养基不能反复高温灭菌。
5) 称不溶性固形物时,应单独称,若量少的可以与无机盐一起称,但一定要混匀再分装;6)一般情况下培养基用自来水配制。
操作细节上则要注意:1)称药品用的牛角匙不要混用,称完药品应及时盖紧瓶盖2)调pH值不要调过头,以免回调而影响培养基内各离子的浓度3)分装时注意不要污染棉塞、试管口,以免染菌。
4)及时灭菌,以免培养基及容器里的微生物生长繁殖消耗养分、改变酸碱度。
1、当然就是注意浓度配比不要搞错2、很多培养基的加料顺序有讲究,否则会有沉淀产生3、有些培养基会有不溶物质,分装前应摇匀4、不要忘了调节pH值(一般细菌都需要,酵母可能自然pH就行,不过不一定)5、加热溶解时尽量不要煮沸,会损失营养物质20、高压蒸气灭菌开始之前,为什么要将锅内冷空气排尽？灭菌完毕后,为什么待压力降低“0”时才能打开排气阀,开盖取物。
答:1)在使用高压蒸汽灭菌时,灭菌锅内冷空气的排除就是否完全极为重要,因为空气的膨胀压大于水蒸汽的膨胀压,所以,当水蒸气中含有空气时,在同一压力下,含空气蒸汽的温度低于饱与蒸汽的温度。
2)压力未降至“0”便开盖取物的可能后果:压力锅内压力骤然降低,引起容器中的溶液喷出容器口导致污染或导致人员的烫伤。
21、干热灭菌操作过程中应注意哪些问题为什么1、物品不要摆放太挤,以免妨碍空气流通2、灭菌物品不要接触干燥箱内壁的铁板,以防包装纸烤焦起火3、灭菌时人不能离开4、灭菌结束后不能忘记关掉电源5、待温度降到70度以下再打开,否则冷热空气交替,玻璃器皿容易炸裂或发生烫伤事故22、为什么干热灭菌比湿热灭菌所需温度高时间长？在湿热条件下,有水蒸汽的作用:a高温水蒸汽导热比干空气要快;b高温水蒸汽冷凝变水时有放热过程;c高温水蒸汽能穿透细菌的细胞膜,直接进入细胞内破坏细胞;d高温水蒸汽能水解一部分细胞结构,加速导热。
(湿热中细菌菌体吸收水分,蛋白质较易凝固,因蛋白质含水量增加,所需凝固温度降低;湿热的穿透力比干热大;湿热的蒸汽有潜热存在,每1克水在100℃时,由气态变为液态时可放出2.26kJ(千焦)的热量。