ch维生素测定VC测定
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维生素C广泛存在于植物组织中，新鲜的水果、蔬菜，特别是枣、 辣椒、苦瓜、柿子叶、猕猴桃、柑橘等食品中含量尤为丰富。 自然 界存在的有L-型、D-型两种，D-型的生物活性仅为L-型的1/10。
ch维生素测定VC测定
VC测定方法综述
无色结晶态的维生素C性状稳定、水溶液不稳定(在有氧或碱性环境 中极易被氧化破坏，Cu2+、Fe3+等金属离子可加速其氧化破坏)。
第十章 维生素的测定 ——维生素C的测定
ch维生素测定VC测定
VC测定方法综述
维生素C是极易溶于水、微溶于乙醇的一种分子结构最简单 的维生素。维生素C是一种己糖醛基酸，有防治坏血病的功能， 所以在医药上常把它叫做抗坏血酸。
绝大多数维生素C在小肠远端由钠依赖主动转运系统吸收， 被动简单扩散吸收数量较少，且随摄入量增大其吸收率下降。
ch维生素测定VC测定
荧光法
仪器
荧光分光光度计或具有350nm及430nm 波长的荧光计；捣碎机。
试样的制备
称取100 g鲜样,加100mL偏磷酸-乙酸溶液， 倒入捣碎机内打成匀浆，先取少量样品加入1滴 百里酚蓝，若显红色(pH=1.2)，即用偏磷酸-冰醋 酸溶液定容至100 mL；若显黄色(pH=2.8)，即用 偏磷酸-冰醋酸-硫酸溶液定容至100 mL，定容后 过滤备用。
坏血病（幼儿ch维舌生素素C毒性很低，日常膳食极少过量，推荐量RNI 100mg UL1000mg。 一次口服数g时可能出现高渗性腹泻、腹胀 摄入量≥500mg/d可能↑尿中草酸盐排泄↑尿路结石危险 患葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏的病人大量Vit C静脉注射或一次口 服≥6g时可能发生溶血
ch维生素测定VC测定
荧光法
原理：试样中还原型抗坏血酸经活性炭氧化 为脱氢抗坏血酸后，与邻苯二胺反应生成有 荧光的喹唔啉，其荧光强度与抗坏血酸的浓 度在一定条件下成正比，以此测定食品中抗 坏血酸和脱氢抗坏血酸的总量。
ch维生素测定VC测定
荧光法
试剂
①偏磷酸-冰醋酸溶液：称取15g偏磷酸，加入40mL冰醋酸，加水 稀释至500mL过滤后，贮存于冰箱中； ②硫酸：0.15mol/L ③偏磷酸-乙酸-硫酸溶液：称取15g偏磷酸，加入40mL冰醋酸， 用0.015mol·L-1硫酸稀释至500mL； ④乙酸钠溶液：称取500g乙酸钠溶解并稀释至1L； ⑤硼酸-乙酸钠溶液：称取硼酸9g，加入35mL乙酸钠溶液，用水 稀释至1000mL； ⑥邻苯二胺溶液：称取20mg邻苯二胺盐酸盐溶于100mL水中；
ch维生素测定VC测定
荧光法
试剂
⑦抗坏血酸标准溶液：准确称取0.500g抗坏血酸溶于偏磷酸—冰 醋酸溶液中，定容至500mL容量瓶中，吸取上述溶液5mL，再用 偏磷酸—冰醋酸溶液定容至50mL； ⑧抗坏血酸标准使用溶液：100μg/mL ⑨百里酚蓝指示剂(麝香草酚蓝)：变色范围pH1.2(红)～2.8(黄)； ⑩活性炭：取50g活性炭加入250mL10%盐酸，加热至沸，减压过 滤，用蒸馏水冲洗活性炭，检查滤液中无铁离子为止，于110～ 120℃烘干。
VC测定方法综述
维生素C在体内能进行可逆氧化。维生素C 的氧化还原特性决定了
它是一种电子供体。维生素C的所有生理功能几乎都与还原作用有
关
1.作为酶的辅因子或辅底物参与多种重要的生物合成
包括胶原蛋白、肉碱、某些神经介质和肽激素的合成及酪氨酸代
谢等。
2.抗氧化作用
参与O2-·、OCl3·、OH·、NO·、NO2·等自由基的清除，保护DNA、 Pro和膜结构免受损伤
3.对Fe吸收、转运和储存、叶酸转变为四氢叶酸、胆固醇转变为胆
酸从而降低血胆固醇均有作用
4.其他
对其它维生素，包括B族维生素、维生素A、维生素E有节省作用，
还可抑制N-亚硝基化合物的合成而预防癌症。
维生素C能保持巯基酶的活性和谷胱甘肽的还原状态，起解毒作用
等。
ch维生素测定VC测定
VC测定方法综述
维生素C具有较强的还原性，对光敏感，氧化后的产物称为脱氢抗 坏血酸，仍然具有生理活性，进一步水解则生成2,3-二酮古乐糖酸， 失去生理作用。食品分析中的所谓总抗坏血酸是指抗坏血酸和脱氢抗 坏血酸二者的总量，不包括二酮古乐糖酸和进一步的氧化产物。
氧化
水解
还原型抗坏血酸
ch维脱生氢素测抗定坏VC血测酸定
血中维生素C水平受肾清除率的限制，血浆维生素C 的最高 浓度不会超过肾阈值（renal threshold），维生素C可逆浓度转 运至许多细胞中，并在其中形成高浓度积累，但不同组织的积 累相差很大，以垂体、肾上腺等组织和血液中的白细胞和血小 板Vit C浓度最高，为血浆维生素C的80倍以上
ch维生素测定VC测定
表 常见食物维生素C含量
ch维生素测定VC测定
表 中国居民膳食维生素C推荐摄入量（RNI）
ch维生素测定VC测定
VC测定方法综述
准确测定维生素C的含量，对饮食健康、医疗保健都具有 十分重要的意义。维生素C的测定方法很多，各种方法各有特 点，近年来报道的测定方法主要有滴定法、分光光度法、高效 液相色谱法等，常用的方法有2,6-靛酚滴定法(还原型VC)、 2,4-二硝基苯肼比色法(总VC)、碘量法、碘酸法、荧光分光光 度法和高效液相色谱法等。
常用的滴定法方法简单，但在滴定有色物质终点不易判断， 分光光度法操作费时，高效液相色谱法是目前发展较快的一种 方法，方法灵敏，选择性好，有较好的发展前景。毛细管电泳 法是近几年新兴的分析方法，具有效率高、分析时间短、样品 处理简单等特点，但有待于进一步完善。
ch维生素测定VC测定
VC测定方法综述
★GB 541318-2010 食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中维 生素C 的测定 荧光法 ★GBT 9695.29-2008 肉制品 维生素C含量测定 ★SNT 0869-2000 进出口饮料中维生素C的测定方法 2,6-二氯靛酚滴定法 ★GB/T5009.86-2003蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定 荧光法(第一法) 2,4-二硝基苯肼比色法(第二法)
多数哺乳动物可通过古洛糖酸内酯氧化酶合成维生素C，人 类、灵长类动物缺乏该酶而不能合成 1.缺乏症 坏血病（scurvy）
早期有疲劳、倦怠、皮肤瘀点或瘀斑、毛囊过度角化，其中 毛囊周围轮状出血具有特异性，继而牙龈肿胀出血，重者皮下、 肌肉、关节出血 其它症状：抵抗力下降，伤口愈合迟缓，关节疼痛、关节腔 积液等
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VC测定方法综述
无色结晶态的维生素C性状稳定、水溶液不稳定(在有氧或碱性环境 中极易被氧化破坏，Cu2+、Fe3+等金属离子可加速其氧化破坏)。
第十章 维生素的测定 ——维生素C的测定
ch维生素测定VC测定
VC测定方法综述
维生素C是极易溶于水、微溶于乙醇的一种分子结构最简单 的维生素。维生素C是一种己糖醛基酸，有防治坏血病的功能， 所以在医药上常把它叫做抗坏血酸。
绝大多数维生素C在小肠远端由钠依赖主动转运系统吸收， 被动简单扩散吸收数量较少，且随摄入量增大其吸收率下降。
ch维生素测定VC测定
荧光法
仪器
荧光分光光度计或具有350nm及430nm 波长的荧光计；捣碎机。
试样的制备
称取100 g鲜样,加100mL偏磷酸-乙酸溶液， 倒入捣碎机内打成匀浆，先取少量样品加入1滴 百里酚蓝，若显红色(pH=1.2)，即用偏磷酸-冰醋 酸溶液定容至100 mL；若显黄色(pH=2.8)，即用 偏磷酸-冰醋酸-硫酸溶液定容至100 mL，定容后 过滤备用。
坏血病（幼儿ch维舌生素素C毒性很低，日常膳食极少过量，推荐量RNI 100mg UL1000mg。 一次口服数g时可能出现高渗性腹泻、腹胀 摄入量≥500mg/d可能↑尿中草酸盐排泄↑尿路结石危险 患葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏的病人大量Vit C静脉注射或一次口 服≥6g时可能发生溶血
ch维生素测定VC测定
荧光法
原理：试样中还原型抗坏血酸经活性炭氧化 为脱氢抗坏血酸后，与邻苯二胺反应生成有 荧光的喹唔啉，其荧光强度与抗坏血酸的浓 度在一定条件下成正比，以此测定食品中抗 坏血酸和脱氢抗坏血酸的总量。
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荧光法
试剂
①偏磷酸-冰醋酸溶液：称取15g偏磷酸，加入40mL冰醋酸，加水 稀释至500mL过滤后，贮存于冰箱中； ②硫酸：0.15mol/L ③偏磷酸-乙酸-硫酸溶液：称取15g偏磷酸，加入40mL冰醋酸， 用0.015mol·L-1硫酸稀释至500mL； ④乙酸钠溶液：称取500g乙酸钠溶解并稀释至1L； ⑤硼酸-乙酸钠溶液：称取硼酸9g，加入35mL乙酸钠溶液，用水 稀释至1000mL； ⑥邻苯二胺溶液：称取20mg邻苯二胺盐酸盐溶于100mL水中；
ch维生素测定VC测定
荧光法
试剂
⑦抗坏血酸标准溶液：准确称取0.500g抗坏血酸溶于偏磷酸—冰 醋酸溶液中，定容至500mL容量瓶中，吸取上述溶液5mL，再用 偏磷酸—冰醋酸溶液定容至50mL； ⑧抗坏血酸标准使用溶液：100μg/mL ⑨百里酚蓝指示剂(麝香草酚蓝)：变色范围pH1.2(红)～2.8(黄)； ⑩活性炭：取50g活性炭加入250mL10%盐酸，加热至沸，减压过 滤，用蒸馏水冲洗活性炭，检查滤液中无铁离子为止，于110～ 120℃烘干。
VC测定方法综述
维生素C在体内能进行可逆氧化。维生素C 的氧化还原特性决定了
它是一种电子供体。维生素C的所有生理功能几乎都与还原作用有
关
1.作为酶的辅因子或辅底物参与多种重要的生物合成
包括胶原蛋白、肉碱、某些神经介质和肽激素的合成及酪氨酸代
谢等。
2.抗氧化作用
参与O2-·、OCl3·、OH·、NO·、NO2·等自由基的清除，保护DNA、 Pro和膜结构免受损伤
3.对Fe吸收、转运和储存、叶酸转变为四氢叶酸、胆固醇转变为胆
酸从而降低血胆固醇均有作用
4.其他
对其它维生素，包括B族维生素、维生素A、维生素E有节省作用，
还可抑制N-亚硝基化合物的合成而预防癌症。
维生素C能保持巯基酶的活性和谷胱甘肽的还原状态，起解毒作用
等。
ch维生素测定VC测定
VC测定方法综述
维生素C具有较强的还原性，对光敏感，氧化后的产物称为脱氢抗 坏血酸，仍然具有生理活性，进一步水解则生成2,3-二酮古乐糖酸， 失去生理作用。食品分析中的所谓总抗坏血酸是指抗坏血酸和脱氢抗 坏血酸二者的总量，不包括二酮古乐糖酸和进一步的氧化产物。
氧化
水解
还原型抗坏血酸
ch维脱生氢素测抗定坏VC血测酸定
血中维生素C水平受肾清除率的限制，血浆维生素C 的最高 浓度不会超过肾阈值（renal threshold），维生素C可逆浓度转 运至许多细胞中，并在其中形成高浓度积累，但不同组织的积 累相差很大，以垂体、肾上腺等组织和血液中的白细胞和血小 板Vit C浓度最高，为血浆维生素C的80倍以上
ch维生素测定VC测定
表 常见食物维生素C含量
ch维生素测定VC测定
表 中国居民膳食维生素C推荐摄入量（RNI）
ch维生素测定VC测定
VC测定方法综述
准确测定维生素C的含量，对饮食健康、医疗保健都具有 十分重要的意义。维生素C的测定方法很多，各种方法各有特 点，近年来报道的测定方法主要有滴定法、分光光度法、高效 液相色谱法等，常用的方法有2,6-靛酚滴定法(还原型VC)、 2,4-二硝基苯肼比色法(总VC)、碘量法、碘酸法、荧光分光光 度法和高效液相色谱法等。
常用的滴定法方法简单，但在滴定有色物质终点不易判断， 分光光度法操作费时，高效液相色谱法是目前发展较快的一种 方法，方法灵敏，选择性好，有较好的发展前景。毛细管电泳 法是近几年新兴的分析方法，具有效率高、分析时间短、样品 处理简单等特点，但有待于进一步完善。
ch维生素测定VC测定
VC测定方法综述
★GB 541318-2010 食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中维 生素C 的测定 荧光法 ★GBT 9695.29-2008 肉制品 维生素C含量测定 ★SNT 0869-2000 进出口饮料中维生素C的测定方法 2,6-二氯靛酚滴定法 ★GB/T5009.86-2003蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定 荧光法(第一法) 2,4-二硝基苯肼比色法(第二法)
多数哺乳动物可通过古洛糖酸内酯氧化酶合成维生素C，人 类、灵长类动物缺乏该酶而不能合成 1.缺乏症 坏血病（scurvy）
早期有疲劳、倦怠、皮肤瘀点或瘀斑、毛囊过度角化，其中 毛囊周围轮状出血具有特异性，继而牙龈肿胀出血，重者皮下、 肌肉、关节出血 其它症状：抵抗力下降，伤口愈合迟缓，关节疼痛、关节腔 积液等