手把手教你设计引物(图文并茂)

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3. 选择PTEN-001中的TRANSCRIPT进入,点击左侧cDNA

4. 然后点击CONFIGURE THIS PAGE进入设置你要显示的内容

5. 除了第一栏SHOWEXONS选择YES外,其他的都选择NO,然后取个名字保存SAVE CONFIGURATION AS

6. 然后在左侧栏点击DOWNLOADVIEW AS RTF可下载你要的cDNA序列,这个文件可以用WORD打开,不同的颜色代表一个

7. 然后根据可以根据你感兴趣的序列设计引物了,比如我在分别在第6和第7外显子分别设计上下游引物。选取并复制第6和第7

8. 登陆 /tools/primer-blast/,粘贴这段序列,设置好RANGE和PCR产物的大小,然后在下面点击GET PRIMERS,可以在线设计并比对引物

9.最后选择一个比较特异性的引物,条带大小要尽量单一,其他的基因序列尽量不要比对到

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