鱼鳞胶原蛋白提取及抗氧化活性

提取物与应用
白，具有多种生物学活性，是医药、化工、食 品、化妆品、材料、饲料等行业广泛应用的生物 性原料。目前，天然胶原蛋白主要来源于畜类及 禽类动物组织。但由于疯牛病、口蹄疫、禽流感 等疾病的爆发，使陆生哺乳动物胶原蛋白的安全 性受到质疑。因此，胶原蛋白新资源的开发成为 目前研究的热点[1]。 我国水产丰富，在加工鱼产品同时产生大量 下脚料，其中鱼鳞约占总质量5%，通常均被当作 垃圾丢弃。据估计，我国每年丢弃的鱼鳞约有30 万t [2]。蛋白质是鱼鳞的主要组成成分，约占总质 量的70%，其中主要是胶原蛋白和鱼鳞硬蛋白。 本文通过水提法及酸法提取鱼鳞胶原蛋白，比较 其提取率及抗氧化活性，为鱼鳞的进一步开发利 用奠定基础。 1 材料与方法 1.1 材料 鱼鳞取自海口市菜市场；昆明种小鼠：雌雄 各半，体重18~20 g，由广东省医学实验动物中心 提供。超氧化物歧化酶(SOD)测试盒、过氧化氢酶 (CAT)测试盒：南京建成生物工程研究所产品。 1.2 方法 1.2.1 鱼鳞胶原蛋白提取 1.2.1.1 鱼鳞前处理 新鲜鱼鳞清水冲洗 → 烘干 →1%盐酸溶液脱钙→清水、蒸馏水冲洗→调pH值 →烘干，备用。 1.2.1.2 水提法提取鱼鳞胶原蛋白 取适量经处 理鱼鳞，捣碎，按1 : 30比例加入蒸馏水，100 ℃ 水浴30 min，80 ℃水浴1.5 h，4 ℃、8000 r/min 离心20 min，取上清，冷冻干燥后即得水提法鱼 鳞胶原蛋白。 1.2.1.3 酸法提取鱼鳞胶原蛋白 取适量经处理鱼 鳞，捣碎，按1:30比例分别加入0.5%、1%、2%、 3%盐酸及0.5%、1%、2%、3%醋酸，4 ℃放置3 d，4 ℃、8000 r/min离心20 min，取上清，冷冻干 燥、备用。 1.2.1.4 酸法加热提取鱼鳞胶原蛋白 取适量经处 理鱼鳞，捣碎，按1:30比例分别加入0.5%、1%、 2%、3%盐酸及0.5%、1%、2%、3%醋酸，4 ℃放 置12 h，100 ℃水浴30 min，4 ℃、8000 r/min离心 20 min，取上清，冷冻干燥、备用。 1.2.1.5 胶原蛋白含量测定 采用对二甲基氨基苯 甲醛比色法测定胶原蛋白特征氨基酸——羟脯氨
提取物与应用
食品科技
FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY 2012年 第 37卷 第 10期
鱼鳞胶原蛋白提取及抗氧化活性 初探
朱 伟1,2，张 歆1，黄山凌子1 (1.海南大学海洋学院制药工程系，海口 570228； 2.牡丹江医学院药学院，牡丹江 157011)
摘要：比较鱼鳞胶原蛋白提取方法，观察其体内外抗氧化作用，为鱼鳞开发利用奠定基础。通 过水提法、酸法及酸法与热水提取相结合的方法提取鱼鳞胶原蛋白，体外观察鱼鳞胶原蛋白对 超氧阴离子(·O2-)、羟自由基(·OH)的清除作用。体内观察水提法胶原蛋白对小鼠血清、肝脏、 大脑中SOD、CAT含量的影响。结果表明：水提法及酸法与热水相结合的方法得到的胶原蛋白提 取率明显优于酸法的提取率，3种方法得到的胶原蛋白对·O2-、·OH均具有良好的清除作用， 并呈一定的剂量依赖关系；水提法得到的胶原蛋白能明显提高小鼠血清、肝脏、大脑中的SOD、 CAT含量。水提法可很好提取鱼鳞胶原蛋白，且得到的胶原蛋白具有显著的抗氧化生物活性。 关键词：鱼鳞胶原蛋白；提取；抗氧化活性 中图分类号：TS 254.9 文献标志码：A 文章编号：1005-9989(2012)10-0204-03
胶原蛋白(Collagen)是由3条多肽链组成的螺
旋形纤维状蛋白质，是动物结缔组织中重要的蛋
收稿日期：2011-11-15 作者简介：朱伟(1971—)，男，浙江绍兴人，博士，副教授，研究方向为免疫药理学。
பைடு நூலகம்
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食品科技
2012年 第 37卷 第 10期 FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY
Abstract: Acid-soluble collagens (ASC) and water-soluble collagens (WSC) were isolated from fish scale, and the antioxidant activity of fish scale collagen was studied. Pyrogallol autoxidation method was used to measure the scavenging activity of fish scale collagen on superoxide anion radical(·O2-). The Fenton reaction system was performed to study the scavenging activity of fish scale collagen on hydroxyl radical (·OH). Furthermore, the contents of SOD, CAT in serum, liver and cerebrum were detected in vivo. The results showed that fish scale collagen had ability to scavenge ·O2- and ·OH in a dose-dependent manner in vitro. WSC could obviously enhance the contents of SOD and CAT in serum, liver and cerebrum. WSC exhibited the distinctive antioxidant function. Key words: fish scale collagen; isolation; antioxidant activity
Isolation and antioxidant activity of fish scale collagen
ZHU Wei1,2 , ZHANG Xin1, HUANG SHAN Ling-zi1
(1.Department of Pharmaceutical Engineering, Ocean College, Hainan University, Haikou 570228; 2.Mudanjiang Medical College, Mudanjiang 157011)