离体小肠平滑肌的运动
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功能学自主设计实验
实验目的:观察钙离子浓度对小肠平滑肌运动的影响
实验原理:消化道平滑肌生理特性:兴奋性,传导性,收缩性,自律性
1.兴奋性较低,收缩缓慢;
2.自动节律性,频率慢且不稳定;
3.紧张性;较大伸展性
4.对电刺激不敏感,但对牵张、温度和化学刺激特别敏感。而平滑肌对钙离子浓度较为敏感,钙离子浓度的变化对小肠平滑肌运动有较为显著的作用
实验动物:家兔(2个小肠)
药品与器材:PowerLab 8s主机,桥式放大器,张力换能器,气泵,麦氏浴槽,10~15ml 试管,滴管。
台式液,维拉帕米注射液2ml:5mg(2小瓶),10%葡萄糖酸钙(2小瓶),蒸馏水
实验步骤:1.准备工作(加入台氏液,调节温度至38℃,加热,备用)
2.标本制备,取一段长3—4cm的肠管,一端用恒温浴槽中心管内的有机玻璃
板下端的蛙心夹固定,另一段用小钩钩住,通过丝线连于张力换能器上,此相
连的丝线必须与水平面垂直,且不能与浴槽中心管内壁接触,以免摩擦而影响
记录效果
3.分别用蒸馏水将10%葡萄糖酸钙稀释成2%、1%、0.4%的葡萄糖酸钙,
备用
3.启动计算机,连接仪器,调节参数,开始记录小肠平滑肌的收缩节律
观察项目:1.正常自动节律收缩
2. 加 1~2滴0.4%葡萄糖酸钙,记录,换台式液3次
加1~2滴1%葡萄糖酸钙,记录,换台式液3次
加1~2滴2%葡萄糖酸钙,记录,换台式液3次
加1~2滴10%葡萄糖酸钙,记录,换台式液3次
3 . 1~2 滴维拉帕米注射液2ml:5mg,记录。
再加1~2滴10%葡萄糖酸钙,记录,换台式液3次实验结果:
图1(正常自动节律收缩)
图2(加0.4%葡萄糖酸钙后收缩节律)
图3(加1%葡萄糖酸钙后收缩节律)
图4(加2%葡萄糖酸钙后收缩节律)
图5(加10%葡萄糖酸钙后收缩节律)
图6(先加维拉帕米,再加1%葡萄糖酸钙的收缩节律)
从图1~5中可看出钙离子浓度增加使小肠平滑肌收缩增强,且钙离子浓度越高,小肠收缩也越强
从图6可看出加入维拉帕米后,小肠平滑肌收缩明显减弱甚至不发生收缩,而后加入10%葡萄糖酸钙情况仍未改善
结果分析:1.在正常情况下,机体中的细胞外液中存在较多的Ca2+,而Ca2+则是肌肉
收缩的必要条件。平滑肌细胞兴奋→肌膜被激活→细胞外Ca2+进入膜内,而且肌浆网释
放Ca2+ →[Ca2+]i浓度升高→Ca2+与钙调蛋白结合(1分子钙调蛋白结合4个Ca2+) →肌球蛋白激酶活化→ATP分解释放能量→横桥获能处于高自由能→横桥牵动细肌丝滑动→平滑肌收缩。若缺乏Ca2+,平滑肌的收缩就会受阻,自动节律的运动也会减弱;相反,若是钙离子浓度增加,平滑肌收缩就会加强,自动节律运动也会增强。
2.浴槽中加入葡萄糖酸钙2滴后,离体肠管活动增强,描记曲线出现收缩幅度增加。这是因为加入葡萄糖酸钙后,细胞外液Ca2+浓度升高,则Ca2+内流增加,使得细胞内液中Ca2+浓度升高,Ca2+与钙调蛋白结合增加,促进了横桥的激活。因而收缩力增加。同时也说明了若是加入的溶液钙离子浓度逐渐增大,小肠平滑肌收缩也会增强
3.在浴槽中先加入维拉帕米注射液2ml:5mg, 再加入10%葡萄糖酸钙,小肠平滑肌收缩先明显减弱,后无变化。因为维拉帕米为钙通道阻滞剂,加入维拉帕米后使Ca2+通道不能打开,钙离子无法内流发挥作用,肠肌收缩减弱甚至不收缩。这时候再加入钙离子,
Ca2+通道仍关闭导致不能通过钙离子,因此平滑肌的收缩程度没有改变
结论:1、消化道平滑肌具有自律性,但其收缩缓慢,节律性不规则。
2.消化道平滑肌的活动易受钙离子浓度的影响。其中钙离子浓度的增加能使小肠平滑肌的自动节律性运动加强,平滑肌收缩增强。但若加入钙通道阻滞剂,会导致收缩减弱甚至收缩节律消失,即使再增加钙离子浓度也无法改变。