硫酸安普霉素

硫酸安普霉素

Liusuan Anpumeisu

Apramycin Sulfate

本品为4-O-﹝（2R,3R，4aS,6R，7S，8R，8aR）-3-氨基-6-（4-氨基-4-脱氧基-ａ-D-吡喃葡萄糖苷）-8-羧基7-甲氨基-全氢化吡喃葡萄糖［3，2-b］-2-脱氧链霉胺硫酸盐。按干燥品计算，每1mg的效价不得少于550安普霉素单位。

【性状】本品为微黄色或黄褐色粉末；有引湿性。

本品在水中易溶，在甲醇、丙酮、三氯甲烷或乙醚中几乎不溶。

【鉴别】（1）取本品与安普霉素标准品，分别加水制成每1ml中约含1mg 安普霉素的溶液。照薄层色谱法（附录33页）试验，吸取上述两种溶液各5ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲醇－三氯甲烷－浓氨溶液（6：2：4）为展开剂，展开，晾干，在105℃加热5分钟，放冷，置碘蒸气中显色。供试品溶液所显主斑点的位置和颜色应与标准品溶液的主斑点相同。

（2）在有关物质测定项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与标准品溶液主峰的保留时间一致。

（3）本品的水溶液显硫酸盐的鉴别反应（附录24页）。

即：①取供试品溶液，滴加氯化钡试液，即生成白色沉淀；分离，沉淀在盐酸或硝酸中均不溶解。

②取供试品溶液，滴加醋酸铅试液，即生成白色沉淀；分离，沉淀在醋酸铵试液或氢氧化钠试液中溶解。

③取供试品溶液，加盐酸，不生成白色沉淀。

以上（1）、（2）两项可选做一项。

【检查】有关物质取本品适量，精密称定，加水溶解并稀释制成每1ml 中约含5mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取适量,用水定量稀释制成每1ml 中约含0.25mg的溶液，摇匀，作为对照溶液；另取安普霉素标准品，精密称定，加水溶解并稀释制成每1ml中约含3.5mg的溶液，作为鉴别试验用标准品溶液。照高效液相色谱法（附录36页）测定，用磺酸基键合硅胶（Venusil SCX-F）为填充剂，以枸橼酸钠溶液（取枸橼酸钠2.0g，加苯酚溶液①0.08ml与硫二甘醇0.5ml，加水溶解并稀释成100ml，用盐酸调节pH值至4.25）为流动相A；以枸

橼酸钠溶液（取枸橼酸钠4.0g，氯化钠4.0g与苯酚溶液0.08ml，加水溶解并稀释成100ml，用盐酸调节pH值至7.4）为流动相B；柱后衍生反应温度为120℃；以茚三酮②溶液为衍生化试剂；按下表进行线性梯度洗脱；检测波长为568nm。取对照溶液20 ul注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高约为满量程，精密量取供试品溶液、对照溶液、标准品溶液各20ul，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。供试品溶液色谱图中如有杂质峰，单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的2.8倍（14%），其他单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的0.8倍（4%），各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的6倍（30%），供试品溶液色谱图中任何小于对照溶液主峰面积0.04倍的峰可忽略不计。

时间（分钟）流动相A（%）流动相B（%）

0 75 25

3 75 25

9 0 100

30 0 100

31 75 25

41 75 25

干燥失重取本品，在60℃干燥至恒重，减失重量不得过10.0%（附录78页）。

炽灼残渣不得过1.0%。（附录80页）。

重金属取炽灼残渣项下遗留的残渣，依法检查（附录75页第二法），含重金属不得过百万分之二十。

【含量测定】精密称取本品适量，加灭菌水溶解并定量稀释制成每1ml中约含1000单位的溶液，照抗生素微生物检定法（附录121页管碟法或浊度法）测定。1000安普霉素单位相当于1mg的C21H41N5O11。

【类别】氨基糖苷类抗生素。

【贮藏】密闭，干燥处保存。

【制剂】（1）硫酸安普霉素可溶性粉（2）硫酸安普霉素预混剂

①苯酚溶液：取苯酚8g，加2ml的水使溶解，即得。

②茚三酮溶液：取乙二醇甲醚1000ml，通入氮气流2～3分钟后，在持续通入氮气流下，加茚三酮10g与还原茚三酮1g，使溶解；再加醋酸盐缓冲液（取54.44g醋酸钠，加水50ml使溶解，加冰醋酸10ml，混匀，用冰醋酸调节pH值至5.5，用水稀释成100ml）200ml，再加水650ml和20%聚氧乙烯（23）十二烷基醚（聚氧乙烯月桂醚）4ml，即得。