课题1菊花的组织培养
课题1菊花的组织培养
2009年上学期
C、结果分析与评价 1、对接种操作中污染情况的分析
接种3～4 d后，在接种操作中被杂菌污染的 培养物会表现出被污染的现象。适时统计污 染率，分析接种操作是否符合无菌要求。
正常苗
污染苗
2、是否完成了对植物组织的脱分化和再分化
观察实验结果，看看是否培养出了愈伤组织， 记录多长时间长出愈伤组织。统计更换培养 基后愈伤组织进一步分化成根和芽的比例和 时间。
3、灭菌 分装好的培养基连同其他器械一起进行高 压蒸汽灭菌 （二）外植体消毒
1、选材：菊花茎段，取生长旺盛的嫩枝 2、消毒
①流水冲洗 菊花茎段用流水冲洗后可加少许洗衣粉， 用软刷轻轻刷洗，刷洗后在流水下冲洗 20min左右。
② 酒精处理 用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入 体积分数为70％的酒精中摇动2－3次，持续 6－7s，立即将外植体取出，在无菌水中清 洗。 ③消毒液处理
（六）栽培 幼苗移栽后，每天观察并记录幼苗的生长情 况，适时浇水、施肥，直至开花。
操作的？ ①培养基的灭菌 （高压蒸汽灭菌） ②外植体的消毒 （酒精、氯化汞） ③接种的无菌操作 （酒精、酒精灯——灼烧） ④无菌箱中的培养； ⑤移栽到消过毒的环境中生 存一段时间。
思 考 在整个过程中，是如何来实现无菌
思 考 （P33）
你能说出各种营养物质的作用吗？同专题2 中微生物培养基的配方相比，MS培养基的配 方有哪些明显的不同？
微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必 需的无机盐；蔗糖提供碳源，同时能够维持 细胞的渗透压；甘氨酸、维生素等物质主要 是为了满足离体植物细胞在正常代谢途径受 到一定影响后所产生的特殊营养需求。
同一植物材料的年龄、保存时间的长短 会影响实验结果
菊花的组织 培养一般选 择：未开花 植株的茎上 部新萌生的 侧枝。
《专题3 课题1 菊花的组织培养》教学设计
《菊花的组织培养》教学设计方案（第一课时）一、教学目标1. 知识与技能：学生能够描述植物组织培养的过程，理解植物组织培养在生物技术中的应用价值。
2. 过程与方法：学生能够通过实验操作，掌握植物组织培养的基本步骤和注意事项。
3. 情感态度与价值观：学生能够体验科学实验的周密性和科学精神，培养探究精神和创新能力。
二、教学重难点1. 教学重点：学生能够通过实验操作，掌握植物组织培养的基本步骤和注意事项。
2. 教学难点：理解植物组织培养在生物技术中的应用价值，探究植物组织培养的原理。
三、教学准备1. 准备实验器械：培养皿、剪刀、镊子、琼脂、菊花的组织样品等。
2. 准备教材和参考书籍：包括植物组织培养的相关教材和参考书籍。
3. 安排实验过程：设计实验流程，对学生进行分组，明确各自的任务和要求。
4. 讲解实验注意事项：包括实验器械的消毒、实验操作的规范性等。
四、教学过程：本节课的教学设计主要包括以下四个环节：1. 引入课题：通过展示菊花的图片，引导学生观察菊花的形态，让学生对菊花有直观的认识，同时提出问题：菊花是如何发展的？我们能否通过组织培养技术来培育菊花呢？2. 组织学习：起首，我们将了解组织培养的基本观点和原理。
接着，我们将通过观看相关视频，学习如何进行菊花的组织培养。
在此过程中，我们将介绍培养基的成分、灭菌等基本操作，以及接种、培养等关键步骤。
3. 实践活动：在了解了基本的组织培养技术后，我们将进行实践活动。
学生将分组，每组选择一种菊花品种，按照组织培养的步骤进行操作。
在此过程中，教师将进行指导，解答学生的疑问，确保学生能够正确地进行操作。
4. 效果展示与讨论：学生完成实践活动后，将展示各组的效果，分享经验，讨论遇到的困难和解决方案。
教师将对学生的操作进行点评，并对菊花的组织培养进行总结。
此外，学生也将了解菊花组织培养在农业生产中的应用前景和发展趋势。
此外，为了增强学生对菊花的兴趣和了解，教学过程还可以穿插以下内容：1. 扩展阅读：推荐学生阅读有关菊花的科普文章或书籍，了解菊花的品种、发展环境、栽培技术等方面的知识。
课题1菊花的组织培养
MS固体培养基成分及比例
(一)制备MS固体培养基
（四）培养
1、愈伤组织的培养
从接种外植体到出现愈伤组织需经过2周时间。2 周之内可以看到外植体上逐渐长出乳白色或黄色 的瘤状愈伤组织。首次培养愈伤组织时，恒温箱 的门应该关闭不必见光，因为在无光条件下愈伤 组织长的更快。2周后，培养基成分接近耗尽，必 须更换培养基，进行继代培养.
2、营养成分（培养基） （1）植物组织培养常用的培养基？ MS培养基
（2）MS培养基的主要成分？
大量元素：C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S 微量元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co 有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等
培养基中的各种成分的作用是什么？
大量元素和微量元素提供植物细胞需要的各种无机
盐；蔗糖提供碳源的同时维持细胞渗透压；甘氨酸、
维生素等物质主要是满足离Βιβλιοθήκη 植物细胞的特殊营养物质需求
微生物培养基以有机营养为主，
课本33页旁栏思考：MS培养基则需提供大量无机营养
3、植物激素
（1）关键激素是什么？ （2）两种激素的使用顺序不同，结果不同 （3）两种激素的用量比不同，植物发育方向不同
4、pH、温度、光照等
蛭石
珍珠岩
珍珠岩：固体基质型，含水量高、蓄水性强、 透性好，适合栽培. 3、移栽 幼苗长壮后，移栽到土壤中.
（六）栽培
幼苗移栽后，每天观察并记录幼苗的生长情 况，适时浇水、施肥，直至开花.
在整个操作过程中，是如何来实现无菌环境的？
1、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌）
2、外植体的消毒（酒精、氯化汞）
在愈伤组织继代培养期间，将恒温箱的门打开， 让愈伤组织见光，愈伤组织见光后颜色可以转为 绿色.
学案5：3.1菊花的组织培养
课题1 菊花的组织培养【学习目标】1.植物组织培养的基本原理。
2.植物组织培养的基本技术。
3.进行菊花或其他植物的组织培养。
【知识梳理】一、基础知识(一)植物的组织培养的基本过程1.植物组织培养的原理（1）细胞分化：个体发育中细胞在上出现稳定性差异的过程。
根本原因：在特定的时间和空间条件下，的选择性表达。
（2）细胞全能性：生物体的细胞，具有使后代细胞形成的能力。
植物细胞表现全能性条件：和其他外界条件。
2.植物组织培养的基本过程：离体的植物器官或组织片段。
脱分化（去分化）：高度分化的植物组织或细胞产生的过程。
愈伤组织：通过细胞分裂形成的，其细胞排列疏松而无规则，高度液泡化呈无定形状态的。
再分化：愈伤组织继续进行培养重新分化成等器官的过程。
（二）影响植物组织培养的因素1.外植体的选取①不同植物的组织培养难度一般选择植物的部分（生命力旺盛，分裂分化能力强；含有的病毒少），比如等；保存时间越短，材料生命力越旺盛；保存时间越长，越容易受到污染。
例如：菊花的组织培养一般选择。
2.培养基的配制(MS培养基)MS培养基主要成分大量元素：微量元素：有机物：植物激素：3.不同植物激素浓度、使用顺序和使用量用量比例与根、芽的分化4.pH、温度、光照等条件也很重要。
例如菊花组织培养的条件：pH= 、温度、控制在、每日光照二、实验操作（一）制备1.配制各种母液2.配置培养基菊花的茎段的组织培养比较容易，不必添加3.灭菌（二）消毒(三）接种1.接种室消毒2.无菌操作在火焰旁完成，每次使用器械后，都需要用灭菌，接种后立即盖好瓶盖。
3.材料的切取和接种（四）培养（五）移栽【课前热身】1.判断下列说法的正误(1)二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后可得到稳定遗传的植株()(2)培育草莓脱毒苗所采用的主要技术是植物组织培养()(3)脱分化过程不需要植物激素，植物激素只有在再分化过程中发挥作用()(4)由于植物细胞都具有全能性，所以菊花的组织培养实验中选材不会影响实验的结果()(5)制备好的MS培养基用于植物组织培养时，需要加入植物激素()(6)被子植物的花粉发育要经过小孢子四分体时期、双核期和单核期等阶段()(7)单倍体植株的形成有两种途径，两种途径主要取决于培养基中植物激素的种类及其浓度配比()(8)如果通过植物组织培养从愈伤组织中提取某种成分，应先使用生长素后使用细胞分裂素()2.下列有关植物组织培养技术的叙述，正确的是()A.经脱分化和再分化过程形成的幼芽细胞不具有细胞全能性B.在愈伤组织培养过程中加入聚乙二醇，可获得染色体加倍的细胞C.利用纤维素酶和果胶酶去除外植体的细胞壁有利于脱分化的发生D.培养基中生长素和细胞分裂素的比例将影响愈伤组织分化的方向【参考答案】1. × √ × × √ × √ √2. 答案D解析幼芽细胞含有本物种全套遗传物质，具有细胞全能性；愈伤组织细胞含有细胞壁，加入聚乙二醇不能诱导细胞融合，因此不能获得染色体加倍的细胞；用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁可用于原生质体融合；生长素和细胞分裂素比例的不同将诱导愈伤组织向不同方向分化。
菊花的组织培养教学设计
菊花的组织培养教学设计
菊花是一种常见的花卉植物，具有优美的花朵和独特的香气，因此备受人们爱慕。
菊花的组织培养教学设计是培养学生对植物生长和发育过程的理解，同时也可以培养学生的动手能力和观察力。
下面将从不同的角度详细介绍菊花的组织培养教学设计。
一、实验目的
1.1 培养学生对植物生长发育过程的理解。
1.2 培养学生的动手能力和观察力。
1.3 培养学生的科学实验能力和团队合作意识。
二、实验材料和设备
2.1 菊花幼苗或者种子。
2.2 培养基和培养皿。
2.3 显微镜和其他实验仪器。
三、实验步骤
3.1 准备菊花幼苗或者种子，进行消毒处理。
3.2 将菊花组织置于培养基中，控制培养条件。
3.3 观察菊花组织的生长发育过程，记录实验数据。
四、实验结果分析
4.1 分析菊花组织在不同培养条件下的生长情况。
4.2 比较不同培养基对菊花组织生长的影响。
4.3 探讨菊花组织培养实验的意义和应用价值。
五、实验总结与展望
5.1 总结菊花组织培养实验的主要内容和方法。
5.2 展望菊花组织培养实验的未来发展方向。
5.3 探讨如何将菊花组织培养实验与植物生长发育课程相结合，提高教学效果。
通过以上内容的介绍，可以看出菊花的组织培养教学设计是一个综合性实验项目，既可以培养学生的实验技能，又可以增加他们对植物生长发育过程的认识。
希翼通过这样的教学设计，能够激发学生对植物科学的兴趣，培养他们对科学的探索精神和创新能力。
专题3 课题1 菊花的组织培养导学案
专题3 植物的组织培养技术课题1 菊花的组织培养【课标要求】尝试植物的组织培养。
【考纲要求】植物的组织培养。
【学习目标】1.熟记植物组织培养的基本原理，菊花组织培养过程中使用的无菌操作技术。
2.大胆质疑，小组合作，熟悉植物组织培养的基本过程，归纳总结影响植物组织培养的因素。
3.激情投入，全力以赴，了解植物组织培养技术在生产中的应用。
【使用说明与学法指导】1.先认真观看实验视频，再参考教材P32—36的内容，明确回答预习案和探究案设定的问题。
2.问题回答时间：20—30分钟；预习自测时间：10—15分钟。
3.课下和早早读期间，背诵“记忆一箩筐”。
预习案（25分钟内完成）1、植物组织培养的理论基础？植物体细胞发育成完整植株的条件？2、细胞分化的概念？为什么已经分化了的细胞要在离体的条件下发育成完整的植株不容易？3、愈伤组织的结构特点？脱分化和再分化的概念？4、植物组织培养的基本过程包括哪几个步骤？5、不同使用顺序对实验结果的影响不同用量比例对发育方向的影响6、实验室一般使用什么来制备MS培养基？具体操作步骤包括？7、将菊花茎段插入培养基时应注意什么？为什么？8、在接种时，你打算做几个重复组？你打算设置对照实验吗？9、在移栽生根的菊花试管苗之前，应进行的操作是？探究案（20分钟内完成）探究点一：离体的植物组织和细胞培养常用的MS培养基，常常需要添加什么物质？你能说出MS培养基中各种营养物质的作用吗？同专题2中微生物培养基的配方相比，MS培养基的配方有哪些明显的不同？探究点二：归纳总结影响植物组织培养的因素。
探究点三：总结组织培养过程中的无菌操作技术。
探究点四：在植物组织培养的过程中，为什么要进行一系列的消毒、灭菌，并且要求无菌操作？预习自测（8分钟内完成）1、植物组织培养是指A．离体的植物器官或细胞培育成愈伤组织 B．愈伤组织培育成植株C．离体的植物器官、组织或细胞培养成完整植物体 D．愈伤组织形成高度液泡化组织2、细胞具有全能性的原因是A.生物体细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能B.生物体的每一个细胞都具有全能性C.生物体的每一个细胞都含有个体发育的全部基因D.生物体的每一个细胞都是由受精卵发育来的3、植物细胞表现出全能性的必要条件是A.导入其他植物细胞的基因B.将成熟的细胞核移植到去核的卵细胞中C.用适当浓度的秋水仙素处理D.脱离母体后，给予适宜的营养和适宜的温度等外界条件4、下列关于愈伤组织的说法中不正确的是A.愈伤组织的细胞能够进行细胞分裂B.用叶培养形成的愈伤组织细胞能够进行光合作用C.培养愈伤组织的培养基中应含有有机养料D.人们可以从愈伤组织中提取所需物质5、植物组织培养过程中的脱分化是指A.植物体的分生组织通过细胞分裂产生新细胞B.未成熟的种子经过处理培育出幼苗的过程C.植物的器官、组织或细胞，通过离体培养产生愈伤组织的过程D.取植物的枝芽培育成一株新植物的过程6、在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中，下列哪一项条件是不需要的A.消毒灭菌B.适宜的温度C.充足的光照D.适宜的养料和激素7、甘薯种植多年后易积累病毒而导致品种退化。
菊花的组织培养实验设计
菊花的组织培养实验设计引言概述：菊花的组织培养实验是一项重要的研究工作，通过培养菊花组织，可以获得大量的优质菊花种苗，为菊花的繁殖和栽培提供了新的途径。
本文将详细介绍菊花的组织培养实验设计，包括材料准备、培养基配方、培养条件、培养步骤和结果分析等五个部分。
一、材料准备1.1 菊花材料的选择：选择菊花的优质品种作为实验材料，确保实验结果的准确性和可靠性。
1.2 菊花茎段的获取：从健康的菊花植株中选择茎段作为培养的材料，茎段的选择应具备一定的生长活力。
1.3 杀菌用具的准备：准备好消毒酒精、无菌培养器皿、无菌手套等杀菌用具，确保实验环境的无菌。
二、培养基配方2.1 基本培养基的配制：根据菊花的生长特性，配制适合菊花组织培养的基本培养基，包括植物激素和营养物质的添加。
2.2 辅助培养基的添加：根据实验需求，可以添加一些辅助培养基，如生长调节剂、抗生素等，以促进菊花组织的生长和发育。
2.3 pH值和温度的调节：调节培养基的pH值和温度，使其适合菊花组织的生长和发育。
三、培养条件3.1 光照条件的控制：菊花组织培养需要适当的光照条件，可以选择自然光或人工光源，保持适当的光照强度和光照时间。
3.2 温度和湿度的控制：菊花组织培养需要适宜的温度和湿度条件，一般在25-28摄氏度的温度下，相对湿度保持在60-70%。
3.3 氧气和二氧化碳的供应：菊花组织培养需要充足的氧气和适量的二氧化碳供应，可以通过通风和培养器的设计来实现。
四、培养步骤4.1 材料表面消毒：将菊花茎段放入消毒酒精中浸泡，然后用无菌水洗净，使其表面彻底消毒。
4.2 茎段切割和培养：将消毒后的茎段切割成适当的大小，放入培养基中进行培养，培养基中应包含适量的植物激素和营养物质。
4.3 培养条件的控制：将培养器放置在适当的光照条件下，保持适宜的温度和湿度，同时定期通风和补充培养基。
五、结果分析5.1 菊花组织的生长情况：观察菊花组织在培养过程中的生长情况，包括生长速度、形态特征等。
菊花的组织培养实验设计
菊花的组织培养实验设计引言概述菊花是一种常见的欣赏植物，其花朵色采丰富，形态优美，深受人们爱慕。
为了研究菊花的生长发育规律以及促进其繁殖，进行菊花的组织培养实验是一种有效的方法。
本文将详细介绍菊花组织培养实验的设计。
一、实验材料准备1.1 选择适宜的菊花组织在进行菊花组织培养实验时，需要选择健康、无病虫害的菊花植株作为实验材料。
可以选择嫩芽、叶片或者花蕾等组织进行培养。
1.2 准备无菌工作环境在进行组织培养实验时，需要准备无菌工作环境，包括无菌培养室、无菌操作台、无菌培养器具等，以确保实验的无菌条件。
1.3 配制培养基根据菊花组织培养的需要，可以选择适宜的培养基，如MS培养基、B5培养基等，并添加适当的植物生长调节剂，如激素等。
二、组织切割和接种2.1 组织切割将选取的菊花组织进行切割，保持组织的完整性，避免受损，以提高组织培养的成功率。
2.2 组织接种将切割好的菊花组织放入含有培养基的培养器具中，进行组织接种，确保组织与培养基充分接触，促进组织生长。
2.3 培养条件控制在组织接种后，需要控制培养条件，如光照、温度、湿度等，以促进组织生长和分化。
三、培养过程管理3.1 培养器具清洁在培养过程中，需要定期清洁培养器具，避免细菌和真菌的污染，影响组织的生长。
3.2 培养基更换随着培养时间的推移，培养基中的营养物质会逐渐耗尽，需要定期更换新的培养基，以维持组织生长所需的营养。
3.3 组织生长监测在培养过程中，需要定期观察和记录组织的生长情况，包括组织的形态、颜色、生长速度等，以及时调整培养条件。
四、组织分化和再生4.1 组织分化诱导通过调节培养基中植物生长调节剂的浓度和种类，可以诱导菊花组织进行分化，形成新的器官或者植株。
4.2 再生植株培养对分化成功的组织进行再生培养，培养出新的植株，为菊花的繁殖提供新的途径。
4.3 植株移栽将再生的植株移栽到适宜的生长环境中，进行后续的生长观察和繁殖。
五、实验结果分析5.1 记录实验数据在实验过程中，需要详细记录实验数据，包括组织的生长情况、分化情况、再生植株数量等，以便后续的结果分析。
菊花的组织培养实验设计
菊花的组织培养实验设计引言概述：菊花的组织培养是一种常见的实验方法，它可以用来研究菊花的生长发育、遗传变异以及植物组织的再生能力等。
本文将介绍一种菊花的组织培养实验设计，包括实验材料的准备、实验步骤的安排以及实验结果的分析等。
一、实验材料的准备1.1 菊花的种子：选择健康、无病虫害的菊花种子作为实验材料。
1.2 培养基：准备含有适当濃度的植物激素的培养基，如MS培养基。
1.3 高温消毒器具：为了防止细菌和真菌的污染，需要准备高温消毒的器具，如高温培养箱。
二、实验步骤的安排2.1 种子表面消毒：将菊花的种子表面进行消毒处理，以杀灭种子表面的细菌和真菌。
2.2 菊花的离体培养：将消毒后的种子放置在含有培养基的培养皿中，进行离体培养。
2.3 培养条件的调节：调节培养皿中的温度、光照和湿度等条件，以促进菊花的生长和发育。
三、实验结果的分析3.1 菊花的生长情况：观察菊花在培养基上的生长情况，包括根系的形成、茎的生长以及叶片的展开等。
3.2 菊花的再生能力：观察菊花在培养基上的再生能力，包括新芽的形成、花蕾的发育以及花朵的开放等。
3.3 菊花的遗传变异：通过观察不同菊花品种在培养基上的生长情况和形态变化，分析菊花的遗传变异情况。
四、实验注意事项4.1 实验环境的准备：实验室应保持整洁，避免细菌和真菌的污染。
4.2 实验操作的规范：实验操作要严格按照实验步骤进行，避免误操作导致实验结果的偏差。
4.3 实验结果的记录：实验过程中要及时记录实验结果，以便后续的数据分析和讨论。
综上所述，本文介绍了一种菊花的组织培养实验设计，包括实验材料的准备、实验步骤的安排以及实验结果的分析等。
通过这种实验方法，可以深入研究菊花的生长发育、遗传变异以及植物组织的再生能力等方面的问题。
希望本文能为菊花的组织培养实验提供一定的参考和指导。
菊花的组织培养优质课件ppt
体 组
脱分化
愈 伤 再分化
芽
织 或 细
细胞分 裂素≈
组 织
根 细胞分裂
植 物 体
胞 生长素
素<生长素
不需要光
需要光
从使用情况来看，闭胸式的使用比较 广泛。 敞开式 盾构之 中有挤 压式盾 构、全 部敞开 式盾构 ，但在 近些年 的城市 地下工 程施工 中已很 少使用 ，在此 不再说 明。
（三）植物组织培养的理论基础---细胞全能性
ABCDE
BADCE
ABCDE
ABCDE
从使用情况来看，闭胸式的使用比较 广泛。 敞开式 盾构之 中有挤 压式盾 构、全 部敞开 式盾构 ，但在 近些年 的城市 地下工 程施工 中已很 少使用 ，在此 不再说 明。
血红蛋白基因开启
红细胞
合成血红蛋白
肌动蛋白基因关闭 (不合成肌动蛋白)
肌细胞
血红蛋白基因关闭 合成肌动蛋白 肌动蛋白基因开启 (不合成血红蛋白)
2、稳定性
造血干细胞 原红细胞 早幼红细
胞 中幼红细胞 晚幼红细胞 成
熟红细胞 死亡
3、不可逆性
从使用情况来看，闭胸式的使用比较 广泛。 敞开式 盾构之 中有挤 压式盾 构、全 部敞开 式盾构 ，但在 近些年 的城市 地下工 程施工 中已很 少使用 ，在此 不再说 明。
细胞分化是
否意味着细胞
中遗传物质的
植物组织培养
从使用情况来看，闭胸式的使用比较 广泛。 敞开式 盾构之 中有挤 压式盾 构、全 部敞开 式盾构 ，但在 近些年 的城市 地下工 程施工 中已很 少使用 ，在此 不再说 明。
（一）植物组织培养概念
在无菌和人工控制条件下，将离体的 植物器官、组织、细胞，培养在人工配置 的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导 其脱分化产生愈伤组织再分化形成丛芽， 最终形成完整的植株。
课题菊花的组织培养
是
。
答案：（1） aB Ab （2）纤维素酶 （3）聚乙二醇 （4）愈伤组织 （5）2 甲、乙两烟草品种旳花粉 48 AaBb 7/16
专题知识归纳
菊花旳组织培养
植物组 织培养
月季旳花药培养
概念：
原理：细胞旳全 基础：
能性
条 件 ： 脱分化
再分化
植物组织培养旳基本过 外植体
愈伤组织
胚状体
程：
外植体旳选择
• 2.你能说出MS培养基中多种营养物质旳作用吗？ 同专题2中微生物培养基旳配方相比，MS培养基 旳配方有哪些明显旳不同？
提醒：微量元素和大量元素提供植物细胞生活所 必需旳无机盐；蔗糖提供碳源，同步能够维持细 胞旳渗透压；甘氨酸、维生素等物质主要是为了 满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响 后所产生旳特殊营养需求。微生物培养基以有机 营养为主。与微生物旳培养不同，MS培养基则需 提供大量无机营养，无机盐混合物涉及植物生长 必须旳大量元素和微量元素两大类。
• 取甲乙两品种旳花粉分别培养成植株，将它们旳叶肉细胞制成原 生质体，并将两者相混，使之融合，诱导产生细胞团。然后，放 到不小于800勒克斯光照下培养，成果有旳细胞团不能分化，有 旳能分化发育成植株。请回答下列问题：
• （1）甲、乙两烟草品种旳花粉旳基因型分别为 和 。
• （2）将叶肉细胞制成原生质体时，使用 破除细胞壁。
• 3．基因型为AaBb旳水稻（24条染色体）旳花药经过无菌操作， 接入试管后，在一定条件下培养形成试管苗。
• （1）愈伤组织是花粉细胞不断分裂后形成旳不规则旳细胞团，
愈伤组织形成中，必须从培养基中取得
和小分子有机
物等营养物质。
• （2）要增进花粉细胞分裂生长，培养基中应有
菊花组织培养
课题1 菊花的组织培养一、教材分析：植物组织培养技术应用广泛。
利用植物的一块组织，甚至一个细胞，就能培育出完整的植株，靠的就是植物的组织培养技术。
运用这种技术，可以实现优良品种的快速繁殖，培养出大量不含病毒的幼苗，保持遗传性状的一致性，实现花卉的连续生产，缩短育种周期等。
这项技术从设想到成熟，经历了半个世纪。
植物组织培养的这项挑战性工作不仅使我们学到新的技术，还会带来丰富的经验，宝贵的启迪。
本专题主要从基础知识入手，进行实验操作及结果分析与评价。
其操作流程包括：配制母液、培养基配制与灭菌、外植体选择和消毒、接种、形成愈伤组织、诱导丛芽和生根、组培苗移栽等几个环节对学生进行教学。
二、学情分析：本专题在必修的有关知识的基础上，在教师的引导下学生自己进行实验设计，并引导学生尝试植物的组织培养，使学生初步掌握植物组织培养的技术。
三、与高考衔接组织培养是学习话要培养的基础，单倍体育种是高考热点，应着重掌握。
四、教学目标：1.、知识与技能1）、熟悉植物组织培养的基本过程。
2)、理解细胞分化的概念及离体植物细胞的脱分化和再分化。
3)、通过联系农业生产实际，培养学生活学活用，理论联系实际的能力。
2、过程与方法归纳MS培养基的配制方法，并设计表格比较微生物培养基与MS培养基的配方的异同。
3、情感、态度与价值观1）通过阅读植物组织培养技术的发展史，课下查阅植物组织培养技术在生产实践中应用的资料。
2）关注学生科学态度的教育，拓展学生视野，感受科学技术在生产实践中的重要价值。
五、课题重点：植物组织培养过程中使用的无菌技术。
六、课题难点：植物组织培养过程中使用的无菌技术。
七、教学方法：观察法、比较法、阅读法，讨论法、分析法、引导法、讲授法等相结合。
八、教学准备：多媒体课件、直观的图片、实验资料等。
九、课时安排2课时（第一课时新课讲解，第二课时习题讲解。
）十、教学过程十一、板书设计课题1 菊花的组织培养组织培养原理：（已分化细胞、全能性、完整植株）基础知识影响因素：菊花组织培养（营养、环境条件、激素）实验操作：制备培养基→外植体消毒→接种→培养→移栽→栽培（无菌下）十二、教学反思：。
课题1菊花组织培养
生长素/细胞分裂素比值 结果
比值高时
比值低时
促根分化,抑芽形成
促芽分化， 抑根形成 促进愈伤组织生长
比值适中
4、消毒
在培养的整个过程中，都需要是一个无菌环境原因： 5、pH、温度、光照 菊花： pH=5.8 温度控制在18—22℃ 每日光照12h
五、实验操作
3.接种（酒精灯火 焰旁）
1.制备MS固 体培养基
3、你认为组织培养过程中，成功的关键有哪些？这 些步骤的适宜条件是什么？ • 组织的脱分化及愈伤组织的再分化。 • 植物组织培养过程中，影响植物细胞脱分化、再 分化的最重要因素是植物激素。
4、在整个操作过程中，是如何来实现无菌环境的？ 1、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌）
2、外植体的消毒（酒精、氯化汞）
特点
练 习：
1、植物学家将胡萝卜的韧皮部细胞分离出来，将单个细 胞放在特定的培养基中培养，获得了许多完整的植株，这 些植株的特点是( ) A Ａ.彼此性状极为相似 Ｂ.都是单倍体植株 Ｃ.植株的变异频率较高 Ｄ.都是纯合体植株 2、根据分裂潜能，干细胞可分为全能干细胞（可发育成 完整的个体）、多能干细胞（可发育成多种组织和器官）和 专能干细胞（发育成专门的组织和器官），则这些细胞在个 体发育中的分化顺序是( B) Ａ.全能——专能——多能 Ｂ.全能——多能——专能 Ｃ.多能——全能——专能 Ｄ.专能——全能——多能
为提供的条件下（一定的营养、激素、适宜的外在条件比如温 度、空气、PH、适时的光照等）生长发育的所有技术的总称
1、植物组织培养过程属于无性生殖，子代可基本保留母 本的性状，不发生性状分离。
快速繁殖，
2.概念 内涵
获得完整植株——应用：
培育无病毒植株， 转基因植物的培育
课题1 菊花的组织培养
课题1 菊花的组织培养(5.25)学习目标1、熟悉植物组织培养的基本过程2、理解细胞分化的概念及离体植物细胞的脱分化和再分化3、通过联系农业生产实际，培养学生活学活用，理论联系实际的能力过程与方法归纳MS 培养基的配制方法，并设计表格比较微生物培养基与MS 培养基的配方的异同。
课题重点植物组织培养过程中使用的无菌技术 教学过程 （一）引入新课上节课我们探讨学习了如何从土壤中分离出尿素分解菌和纤维素分解微生物及其计数方法。
这节课我们来学习研究植物的组织培养技术。
（二）进行新课 1．基础知识知识回顾：联系“植物细胞工程”，回答下列问题：1．1具有某种生物 的任何一个活细胞，都具有发育成 的能力，即每个生物细胞都具有 。
但在生物体的生长发育过程中并不表现出来，这是因为在 条件下，通过基因的 ，构成不同组织和器官。
1．2植物组织培养技术的应用有：实现优良品种的 ；培育 作物；制作 种子；培育作物 以及细胞产物的工厂化生产等。
活动1：阅读“植物组织培养的基本过程”，讨论并完成以下问题：1．3细胞分化：个体发育中细胞在 上出现稳定性差异的过程。
〖思考1〗细胞分化是一种持久性的变化，它有什么生理意义？1．4愈伤组织是通过 形成的，其细胞排列 ，高度 呈无定形状态的薄壁细胞。
〖思考2〗填表比较根尖分生组织和愈伤组织的异同：活动2：阅读“影响植物组织培养的因素”，讨论并完成以下问题：1．6材料：植物的种类、材料的年龄和保存时间的长短等都会影响实验结果。
菊花组织培养一般选择未开化植物的茎上部新萌生的侧枝作材料。
〖思考3〗一般来说，容易进行无性繁殖的植物容易进行组织培养。
〖思考4〗选取生长旺盛嫩枝进行组培的原因是1．7营养：常用的培养基是MS 培养基，其中含有的大量元素是 ，微量元素是 ，有机物有 等。
1．8激素：在培养基中需要添加和 等植物激素，其 、 、用量的比例等都影响结果。
1.9环境条件：PH 、温度、光等环境条件。
课题1菊花的组织培养
课题1菊花的组织培养专题3植物的组织培养技术利⽤植物的⼀块组织，甚⾄⼀个细胞，就能培养出完整的植株，靠的就是植物组织培养技术。
运⽤这种技术，可以实现优良品种的快速繁殖，保持遗传性状的⼀致；可以培育出⼤量不含病毒的幼苗，提⾼作物的产量；可以实现花卉的连续⽣产，不受开花季节的限制……然⽽这⼀技术从设想到成熟，却经历了半个世纪。
这项富有挑战性的⼯作，不仅会使你学到新的技术，还会带给你丰富的体验，宝贵的启迪。
课题1 菊花的组织培养课题背景科学研究表明，当植物细胞脱离了原来所在植物体的器官或组织⽽处于离体状态时，在⼀定的营养物质、激素和其他外界条件的作⽤下，就可能表现出全能性，发育成完整的植株。
科学家⽤植物组织培养的⽅法，已经把许多种植物的离体的组织或细胞，培养成了完整的植物体。
在本课题中，我们将通过菊花组织培养的实验来学习这⼀技术。
基础知识（⼀）植物组织培养的基本过程在植物的个体发育过程中，细胞在形态、结构和⽣理功能上都会出现稳定性的差异，形成这些差异的过程叫做细胞分化。
已经分化了的细胞在结构和功能上都⽐较专⼀，要在离体条件下发育成完整的植株，并不容易。
离体的植物组织或细胞，在培养了⼀段时间以后，会通过细胞分裂，形成愈伤组织（图3-1）。
愈伤组织的细胞排列疏松⽽⽆规则，是⼀种⾼度液泡化的呈⽆定形状态的薄壁细胞。
由⾼度分化的植物组织或细胞产⽣愈伤组织的过程，称为植物细胞的脱分化，或者叫做去分化。
脱分化产⽣的愈伤组织继续进⾏培养，⼜可以重新分化成根或芽等器官，这个过程叫做再分化。
再分化形成的试管苗，移栽到地⾥，可以发育成完整的植物体。
图3-1简要地归纳了植物组织培养的过程。
在这个过程中，往往需要使⽤植物激素，⼈为地控制细胞的脱分化与再分化。
（⼆）影响植物组织培养的因素不同的植物组织，培养的难易程度差别很⼤。
例如，烟草和胡萝⼘的组织培养较为容易，⽽枸杞愈伤组织的芽诱导就⽐较难。
因此，植物材料的选择直接关系到实验的成败。
生物13课题1菊花的组织培养(教案)含解析
选修1专题3课题1菊花的组织培养教学设计一、课题目标
1。
知识目标
说明植物组织培养的基本原理。
2.能力目标
a。
学习植物组织培养的基本技术。
b。
进行菊花或其他植物的组织培养.
3。
情感目标
感受科学技术在生产实践中的重要价值.二、课题重点
植物组织培养过程中使用的无菌技术。
三、课题难点
植物组织培养过程中使用的无菌技术.
四教学流程
段时间。
三、结果分析与评价
提出几个问题让学生进行分析和评价。
1。
接种3 ～4d后，观察外植体的生长情况，统计多少外植体被污染,多少能正常生长，分析被污染原因。
2.是否完成脱分化和再分化。
3.是否进行统计、对照与记录。
4.生根苗移栽是否合格。
四、课题延伸
讲解：一般来说,容易进行无性繁殖的植物，也容易进行组织培养，如芦荟、豆瓣绿、秋海棠、月季.
环节三：课堂小结共同回顾本节要点:呼
应、
回
答.
突
出本
节重
点。
环（2013·重庆，5)某兴趣小组拟用组织演突。
3-1 菊花的组织培养
总结植物组织培养过程:
离 体 组 织 或 细 胞
脱分化 细胞分 裂素≈ 生长素
愈 再分化 伤 组 织
细胞分裂 素>生长素
芽
根 细胞分裂 素<生长素
植 物 体
植物组织培养过程示意图
上面的示意图中还有什么地方不够完善的？
没有进行灭菌处理，试管也没有做密封等。
植物组织培养的污染
①细菌污染：菌斑呈粘液状，界限比较明显， 一般接种后1－2天即能发现。主要是大肠杆 菌和链球菌。
讨论：你能说出各种营养物质的作用吗？同专题2中微 生物培养基的配方相比，MS培养基的配方有哪些明显 的不同？ 微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐； 蔗糖提供碳源，同时能够维持细胞的渗透压；
甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞对 特殊营养的需求。
微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同， MS培养基则需提供大量无机营养。
菊花： pH=5.8、温度控制在18—22℃、每日 光照12h
1、组织培养 是指在人工培养基上，离体培养植物的器官、 组织、细胞，并使其生长、增殖、分化以及再生 植株的技术。
2、植物组织培养的原理 植物细胞具有全能性。（即生物体的细胞， 具有使后代细胞形成完整个体的能力）
一、基础知识 (一)植物的组织培养的基本过程
3、细胞分化 个体发育中，细胞在形态、结构和生理功能上 出现稳定性差异的过程。
(一)植物的组织培养的基本过程
离体组 织或细 胞 愈 脱分化 再分化 伤 组 营养物质、 织 营养物质、 芽 根 植 物 体
激素、pH、 温度
激素、pH、 温度、光照
（二）影响植物组织培养的因素
1、外植体的选取 2、培养基的配制(MS培养基)
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
课题1 菊花的组织培养抚顺二中王忠妍【自主学习】1.实验室内常见的灭菌方法有：、和。
2.细胞分化是指在过程中，相同细胞的后代在、和上发生的过程。
3.愈伤组织的细胞而，是一种高度的、呈状态的细胞。
4.在植物组织培养过程中，往往需要使用和等植物激素，人为地控制细胞的和_______过程。
5.在诱导细胞分裂分化过程中，先使用生长素，后使用细胞分裂素，有利于细胞，但细胞；先使用细胞分裂素，后使用生长素，细胞；同时使用生长素和细胞分裂素，频率提高。
【互动课堂】知识点一基础知识资料分析一阅读教材P32及下列资料，完成下列问题及右侧知识点填空植物组织培养是指在无菌和人工控制的营养及环境条件下，将外植体（离体的植物器官、组织片段或细胞）培育成完整植物的技术。
◆动动脑1◆⑴生物体内的细胞不表现全能性的原因是。
⑵植物细胞全能性表达的条件：①植物细胞处于状态；②环境；③种类齐全、比例适宜的物质；④适宜的、、等环境条件；⑤适宜物质的诱导和调节（如和）。
⑶完成植物组织培养流程图①在上述过程中，细胞增殖的方式是。
②图中d过程应先诱导，再诱导，若顺序颠倒，则无法生芽。
③若想制作人工种子，应选用；若想获取细胞代谢产物，则培养进行到。
④e到f过程指的是植物的生长和生长阶段。
⑤同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因型______（相同/不同）。
知识点一基础知识1.植物组织培养的基本过程⑴细胞分化：在过程中，相同细胞的后代在、和上发生____________的过程。
⑵植物组织培养的理论基础：①概念：的植物细胞仍具有形成的潜能。
②根本原因：每个细胞都含有_______。
⑶植物组织培养的基本过程①脱分化：由的植物组织或细胞产生的过程，也叫。
②愈伤组织：的植物组织或细胞通过_____形成的________而_______、高度________的、呈______状态的____细胞。
③再分化：经培养，重新分化成或等器官的过程。
资料分析二阅读教材P33及下列资料，完成下列问题及右侧知识点填空 Ⅰ.不同植物各种组织和器官分裂能力不同，选择恰当外植体既有利于在较短时间内形成组培苗，又有利于消毒，避免污染，提高成功率。
Ⅱ. 培养基中添加蔗糖而不是葡萄糖的原因是：①蔗糖较葡萄糖能更好地维持培养基内的低渗环境，配制相同质量分数的培养基，蔗糖形成的渗透压要明显低于葡萄糖，不易使植物细胞脱水而生长不良②组培过程中，要特别注意防止微生物的污染。
微生物生长所需的碳源最适合的是葡萄糖，而较少利用蔗糖。
③从能源供应来说，相同物质的量浓度下，蔗糖比葡萄糖提供的能量多。
Ⅲ.外植体接种后，置于已灭菌且可人工控制光照和温度等条件的培养室中培养。
一般将温度控制在18～22℃，有的需要保持昼夜温差。
对光照的要求，因组织的不同而异，茎尖和叶片培养需要光照，根组织培养常在暗中进行。
◆动动脑2◆ ⑴全能性大小的比较﹥ 细胞﹥ 细胞体细胞中： 组织细胞（如芽尖）﹥ 组织细胞⑵MS 培养基中包含有大量元素 和微量元素，N 一般用铵态氮和硝态氮，P 多用磷酸盐，S 用硫酸盐。
⑶与微生物培养基以 为主不同，MS 培养基需为离体植物组织提供大量 。
⑷常用的植物激素有 、 及 等。
⑸激素使用顺序对实验结果的影响⑹激素用量比例对发育方向的影响2.影响植物组织培养的因素⑴外植体的选取 ①植物的（容易进行 的植物，也容易进行组织培养）②对于同一种植物，材料的 、 ________等也会影响实验结果⑵营养因素①植物组织培养所用的培养基为 培养基，其主要成分为 、 、________。
②各种成分的作用a.大量元素和微量元素提供植物细胞生活所必需的 ；b.蔗糖为植物提供 ，同时维持植物细胞的 ；c.甘氨酸、维生素等物质满足 植物细胞的 需求。
⑶植物激素的影响①生长素与细胞分裂素是启动 、 和 的关键性激素。
在_______存在的情况下， 的作用呈现 的趋势。
②植物激素的 、使用的 以及__________等，都会影响实验结果。
⑷环境因素（以菊花组培为例）： ①pH ： ②温度： ℃③光照：日光灯照射 h/天⑸植物组织培养成功的关键—知识点二实验操作阅读教材P34-35，完成下列问题及右侧知识点填空◆动动脑3◆⑴制备MS固体培养基时，配制各种母液，可以_ ，同时减少极微量药品称量时带来的。
⑵菊花的组织培养（需要/不需要）添加植物激素。
⑶植物组织培养不同于扦插等常规无性繁殖，需要进行一系列的、____等无菌操作，因为植物组织培养所用材料、，对培养条件和无菌操作要求很高。
且用于组织培养的培养基成分也适于生长，如果被污染，将可能造成培养工作的前功尽弃。
⑷在接种菊花茎段时注意不能茎段，原因是在植物体内由形态学端运输到形态学端，如果倒插，形态学上端生长素少，影响生根，最终导致形态学上端和下端生根都不多，不易成活。
⑸外植体接种时，要分布，不能随机放入，以保证必要的营养面积和光照条件。
⑹生产上常用试管苗保留植物优良性状，原因是组织培养属于生殖，后代不发生。
⑺移栽前要经过一定的炼苗处理，使之逐步由环境过渡到环境，由环境过渡到环境。
⑻本实验操作可以按照不同的或制作重复，每种至少做组以上的重复。
对照实验可以取用一个经过的装有培养基的锥形瓶，不经，与的锥形瓶一同培养，用以说明培养基制作合格，没有被污染。
◆随讲随练1◆下列关于影响植物组织培养因素，说法正确的是（）A.不同植物组织培养的难易程度不同，同一种植物材料培养的难易程度相同B.在植物组织培养中，培养基中必须添加植物激素C.植物激素中生长素和细胞分裂素的作用是互相独立的D. pH、温度、光照条件等对植物组织培养也特别重要知识点二实验操作知识点三结果分析与评价资料分析三阅读下列资料，完成右侧知识点填空在接种的3～4天后，可能会发现培养物被污染的现象，即使对于有经验的操作人员，操作后出现培养物被污染的情况也常有。
一般情况下，可能人为造成细菌污染，如未戴口罩，接种时说话，或手及器械消毒不严等。
真菌污染可能是植物材料灭菌不当。
需要特别注意的是，一旦发现培养材料被污染，特别是真菌性污染，一定不要打开培养瓶。
应先将所有被污染的培养瓶统一放在高压蒸汽锅内进行高压蒸汽灭菌，然后再打开培养瓶，进行清洗。
知识点四课题延伸——植物组织培养的应用资料分析四阅读教材P36及下列资料，完成右侧知识点填空早在20世纪50年代，科学家们就发现植物分生区附近（如茎尖）的病毒极少，甚至无病毒。
因此，切取一定大小的茎尖进行组织培养，再生的植株就可能不带病毒，从而获得脱毒苗。
用脱毒苗进行繁殖，种植的作物就不会或极少感染病毒。
◆随讲随练2◆某兴趣小组在完成菊花组织培养实验后，欲进一步探究生长素与细胞分裂素的使用比例对植物组织培养的影响。
在实验中设置了多组对照实验，请将各对照组与可能出现的实验结果连线。
对照组实验结果A组：不添加任何植物激素只生芽不生根B组：生长素与细胞分裂素用量的比值为1 外植体生根发芽正常C.组：生长素与细胞分裂素用量的比值大于1 愈伤组织不断生长D组：生长素与细胞分裂素用量的比值小于1 只生根不生芽知识点三结果分析与评价1.外植体被污染的原因⑴选材不当：老的材料比幼嫩的材料带菌，田间的材料比温室的材料带菌____ 。
⑵外植体不彻底⑶操作过程中污染2.脱分化和再分化情况分析⑴脱分化成功：培养出了_________⑵再分化成功：培养出了____和_____3.操作成功判断标准统计_______，分析是否符合____要求知识点四课题延伸——植物组织培养的应用1.______繁殖优良品种2.培养_________植株3.花卉，不受开花季节的限制等【知识清单】一、基础知识1. 植物组织培养的基本过程的植物组织或细胞产生的过程经培养，重新分化成或等器官的过程的植物组织或细胞通过形成的而、高度的、2.植物组织培养的原理概念： 的细胞仍具有形成 的潜能①植物细胞处于 状态； 环境；表达的条件 ②种类齐全、比例适宜的 物质；③适宜的 、 、 等环境条件；④适宜物质的诱导和调节（如 和 ）。
二、实验操作三、植物激素在植物组织培养中的作用1.生长素与细胞分裂素是启动 、 和 的关键性激素。
在 存在的情况下， 的作用呈现 的趋势。
2.植物激素的 、使用的 以及 等，都会影响实验结果。
植物细胞的3.激素使用顺序对实验结果的影响 激素用量比例对发育方向的影响【习题巩固】1.下列关于植物组织培养的叙述中，错误的是 ( ) A.培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压 B.培养基中的生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化 C.离体器官或组织的细胞都必须通过脱分化才能形成愈伤组织D.同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因型相同 2.下列那组符合菊花组织培养的基本步骤（ ）A.制备MS培养基 外植体消毒 接种 培养 移栽 栽培 B.制备MS 培养基 外植体消毒 接种 培养 栽培 移栽 C.制备MS 培养基 外植体消毒 接种 栽培 培养 移栽 D.制备MS 培养基 外植体消毒 接种 移栽 培养 栽培 3.下列关于影响植物组织培养因素，说法正确的是( )A.不同植物组织培养的难易程度不同，同一种植物材料培养的难易程度相同B.在植物组织培养中，培养基中必须添加植物激素C.植物激素中生长素和细胞分裂素的作用是互相独立的D. pH 、温度、光照条件等对植物组织培养也特别重要4. 用高度分化的植物细胞、组织和器官进行组织培养，可以形成愈伤组织，下列叙述错误的是( ) A.该愈伤组织是细胞经过脱分化和分裂形成的 B.该愈伤组织是由排列疏松的薄壁细胞组成C.该愈伤组织的细胞没有全能性D. 该愈伤组织可以形成具有生根发芽能力的胚状结构 5. 菊花的组织培养需要进行严格的无菌操作，下列说法中不正确的是 （ ） A.培养基连同其他器械一起进行高压蒸汽灭菌B.幼苗要先移植到消过毒的蛭石或者珍珠岩等环境下生活一段时间C.用于植物组织培养的培养基同样适合于某些微生物的生长，一旦感染杂菌则前功尽弃D.接种时用镊子夹取菊花茎段随机插入培养基中 二、非选择题6.某班同学在学完菊花的组织培养内容之后，决定利用课余时间去实践这项技术，培养出美丽的菊花来美化教室的环境。
(1)在制备MS 固体培养基时先根据 进行计算。
MS 培养基含 营养成分。
其中 6种元素属大量元素， 8种元素属微量元素，能源物质是 。
由于菊花的茎段组织培养比较容易，所以不必加 。
(2)将分装好的培养基连同培养器械一起进行 灭菌。
(3)选取菊花的 部分进行外植体消毒，在消毒时既要考虑 ，又要考虑 ，所以分别用 酒精和 氯化汞溶液消毒，消毒时间不宜过长。
(4)接种时要特别注意 ，每瓶接种 块外植体。