三七的药理作用研究进展概述
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N,Kambe
M,Chang HW,et a1.An improved proved ofhuman mast cells from dispersed
procedure
for the developmem
Oncology,2000,27(2):221-233,
clinical application
or
【3】Y
Sun,J Chen,P Cal,et a1.Therapy of relapsed
refractory
non-
【15】邹征云,刘宝瑞,钱晓萍,等.从50mL外周血中高效扩增ClK方法 的探讨【J】.肿瘤防治杂志,2005,12(7):515・518. [16】郭智,陈丰,谭晓华,等.细胞因子诱导的杀伤细胞体外培养技术 的评价[J].神经损伤与功能重建,2009,4(2):110・113. 【17]Shi
anti-tumor activity segregate within two distinct subsets of
cytokine-induced
killer(ClK)cells:implications
for their infusion
acrossmajor HLA barriers[J].Int Immunol,2008,20(7):841-848. 【I 3】Kambe
朴春花
(吉林省通化市二道江鸭园镇中心卫生院,吉林通化134005)
【关键词】三七;药理作用;血液系统作用 中图分类号:R282.705 文献标识码:A
Ⅳ
文章编号:1671-8194(2011)13-0209--02
三七是五加科三七Panax notoginseng(Burk.)F.H.Chen的根。又 名田七、金不换。昧甘微苦,性温。化学成分主要是皂苷类和黄酮 类,皂苷类含量约12%。生用能止血化瘀、消肿止痛。是云南白药的
Adoptive immunotherapy with auto-cytokine induced killer in the patients with malignant solid tumor[J].The Pratical
cells
Journal
ofCancer,2006,21(1):1l-14.
I盈眶蛋叵IaEI圈呈Q!!圭曼旦篁皇堂篁!曼塑
的GM-C¥F。培养2周发现,B法可使CIK增殖倍数明显提高,最高可 达840倍。。结论是在cⅨ培养的第2天,增加细胞因子IL-.4和GM-CSF可 使cIK得率更高,细胞总数>5 x 109,从丽使得一次性采血50mL制备 的CIK足以满足临床回输治疗需要。 北京军区总医院郭智等【l”治疗复发或难治性淋巴瘤患者采用的CIK 细胞制备方法加入细胞因子的顺序有所不同:培养第l天加入抗人CD, 单抗100ng/mL、人重组IL-l旺100U/mL、人重组IFN-y 1000U/mL,第2 天加入人重组IL-2 300U/mL,每3天更换培养液并添加人重组IL.2和人 重组IFN-Y以维持其浓度,培养12 ̄14d收获CⅨ细胞。 4培养袋法 常规CIK细胞培养是采用大量的培养瓶,工作量大,且容易污 染。北京大学第一医院石永进等””采用1000mL大容量培养袋进行自 体CIK细胞大容量培养方法。培养容器采用1000mL大容量培养袋, 用一次性注射器进行细胞的定量加样、取样,换液时将培养袋在大容 量离心机中离。C,1000rpm lOmin,再用分浆夹挤出上清,新配好的培 养液经输液管插入培养袋进液管后输入培养袋,密封后放入37"C恒温 培养。结果表明大容量培养法使自体CIK细胞扩增总量达1.6 X 10”以 上,回输CIK细胞使患者PBMNC的杀伤活性明显增加,未出现不良反 应。此方法仅使用3—5个1000mL培养袋即可完成常规方法同样的工作 量。操作更简便,全封闭的培养操作方式使污染概率大大降低,回输 更安全。 CIK细胞过继免疫疗法作为一种新的治疗手段,实验室与临床统 一的操作规程和标准尚未制定,需要探讨的问题还有很多。以上方法 值得我们借鉴和完善,今后我们将致力于如何用最经济的方法获得足 量高效的免疫活性细胞,以便在临床上更推广应用。 参考文献 【1】Hoffm姐DM。Gitlitz therapy[J].Seminars
evaluate effect
of cytokine—induced autologous killer cell
infusion for ederly patients with hematological malignancies.【J】.
ZhongguoShiYahXueYeXuezaZhi,2010,18(5):1250—1255. [9】李鹏鑫,李贵新.细胞因子诱导的杀伤细胞制备的研究进展【J】. 医学综述,2009,15(20):3071—3073. [10】王家祥,郑树,刘秋亮.不同来源CIK细胞的体外扩增和杀伤活性 的比较【J】.第四军医大学学报,2005,26(7):616-618. 【11】黄文荣,张伯龙,靳海杰,等.细胞因子联合激活人骨髓和外周血 免疫细胞的比较研究田.中国实验血液学杂志,2002,10(3)..222-225. 【12】Sangiolo D,Martinuzzi E,TodorovicM,et a1.Alloreactivity and
fetal liver ceils in
serum-flee
cuture
medium[J]J Immunol Methods,
[2】Sa YL,Hua YlCYan XM,et a1.111e preliminary
of
2000.240(1-2):101-110. 【14】蒋永新,李高峰,王熙才,等.无血清培养基与完全培养基体外诱 导扩增ClK细胞分泌细胞因子水平的比较[J】.肿瘤防治研究, 2006,33(1 1):784-787.
Y.Yu J,Cen X,et a1.Large-capacity
Hodgkin's
lymphoma by antigen specific dendric celts-activated
Xue Ye Xue Za
lymphocytes[J].Zhon鼹uo Shi Yan
219-23.
Zhi,2010,18(1):
主药。三七促进造血、抗血栓、抗心肌缺血、免疫调节等功效。笔者 结合相关文献及l临床用药情况。现对三七的药理作用做一浅述。 1血液系统作用
万方数据
2lo・文献综述・
1.】抗血栓作用
坚型兰Q!!:型:!:盟旦:!曼圆圆田团墨衄
提高机体对缺氧的耐受力。PNS被证明是三七治疗缺血性心脏病的基 础【4】。文献报道,PNS对几种实验性心律失常模型均有明显的对抗作 用,其主要机制可能是减慢心率、降低心肌收缩力、降低外周阻力、 同时拮抗钙通道的作用。三七皂苷的抗心律失常作用是与心肌的直接 抑制作用有关。PNS对心肌缺血.再灌注损伤有很强的保护作用,心肌 缺血-再灌注损伤可引起心肌细胞凋亡。顾国嵘等弘1通过一系列的生化 试验及形态学等观察PNS缺血预处理对缺血-再灌流心肌的延迟保护作 用的情况,实验结果提示,三七总皂苷缺血预处理l天后能显著减少 缺血-再灌流导致的心肌细胞坏死和凋亡,对缺血一再灌流心肌起到延 迟保护作用。 3消化系统作用+ 三七及其制剂对治疗肝脏疾病有很好的疗效。三七中的活性成分 三七总皂昔可提高肝组织及血清超氧化物歧化酶的含量,肝糖元得消耗 也能显著的减少.对于肝脏微循环的改善也是非常的明显,另外,也能 减轻线粒体、内质网等细胞器的损伤及肝纤维化。三七对于肝脏的益处 不止这些。三七还具有降低血中胆固醇和血脂类的作用,调节肝脏代 谢。在血脂代谢中,总脂质水平降低,特别是会使三酸甘油酯含量明显 的降低。对抗肝纤维化也是三七的主要作用,主要是通过抑制TGF.D
『4】Schmidt-WolfIG,Negrin RS,Kiem HP,et a1.Use ofa SCID mous“ human lymphoma model
potent antitumor cell
to
expanded cytoline-induccd
evaluate cytokine Exp
severe
tivity in mice with J
combined
immunodeficiency[J].
Immunol,1994,153(4):1687-1696.
l trial ofautologous
【7】Leemhuis T,Welis S,Schefold C,et a1.A phase cytokine-indueed锄1豇cells
ofHaematology,1995,90(3):512-517.
[6】Lu PH,Negrin RS.A novel population of expanded human CD3
CD56
cells derived from T cells with potent in vivo antitumorac-
l
三七能抗血栓及抗弥散性血管内凝血(DIC),其抗血栓机制主 要是三七总皂苷抑制血小板聚集,使血小板cAMP含量明显增加,同 时抑制5・HT的释放。抗凝血酶、促进纤维蛋白溶解。临床用三七粉 (3—69/d)用于抗血栓,较阿司匹林的抗血栓机制更全面。三七粉的 主要是通过改善血管内皮功能、降低血液黏稠度、抑制血小板活化和 聚集产生抗血栓作用,因此,三七粉的抗血栓机制是通过多组分多环 节实现。除此之外,三七的另一主要成分-三醇苷类,有明显抑制花 生四烯酸、胶原、二磷酸腺苷诱导的血小板聚集,研究发现,血小板 Ca2+浓度随着三七三醇皂苷剂量的增加显著减少,抑制血小板血栓素 A2释放等作用。临床上常用的以三七总皂苷为原料的抗血栓药物主要 是血塞通的各种剂型。 1.2止血作用 三七在短时间内增加血小板的数量、增强血小板的功能、收缩局 部血管、增加凝血酶含量,因此起到止血的功效。学者研究显示, 三七能使血小板因子Ⅲ、血小板释放ADP、钙离子和槲皮苷等止血活 性物质表现出来,从而表现促凝血作用Ⅲ。由于三七素不稳定,加热 后分解破坏,所以生用三七止血。三七常添加在牙膏中,常用于治疗 牙龈出血。 1.3补血作用 三七除具有止血的功效外,也能补血。这主要是因为三七中的 有效成分三七总皂苷可促进造血细胞增殖、使GATA・I和GATA-2转录 调控蛋白合成增加,同时能够增高其与上游调控区的启动子和增强 子结合的活性,调控与造血细胞增殖和分化相关的基因表达上调, 具有良好的补血作用肚】。陈小红等p1研究观察三七皂苷对人骨髓造血 细胞凋亡相关蛋白表达影响的作用机制表明,PNS在某种程度上能 够抑制Daxx、Fas蛋白表达,而相应减少造血细胞的凋亡,同时也能 通过上调NFkB、c2Rel转录因子,促进细胞增殖。并阻止半胱天冬酶 (caspase)连锁链的活化而抑制造血细胞凋亡。三七止血和补血的药 理作用的研究,为临床为临床推广和新药开发提供依据。 2心血管系统的作用 三七中的活性成分三七总皂苷(PNS)能对抗垂体后叶索引起的 心肌缺血,提高心肌细胞耐缺氧能力及对抗再供氧造成的危害,扩张 冠脉,增加冠脉血流量,改善心肌微循环,降低心肌耗氧量,因此能
in BJ,BeUdegrun A,et a1.Adoptive cellular
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
・文献综述・209
[5】Schmidt-Wolf IG,Grimm B,Brandt
numbeors of ceils of
British Jounlal
a
K,et a1.Propagation
of large
human mixed-lineage T-lymphoid/mydoid[J].
induced ldllercells with
killer cells and its c”omxic activity[J].Sheng Wu Yi Xue Za Zhi, 2001,18(1):94—96.
activityp].J
Meal,1991,174(1):139・149.
三七的药理作用研究进展概述
disease and non-Hodgkin for the treatment
ofreapsed Hodglan
lymphoma[J].Biol
Blood Marrow Transp
lant,2005,ll(3):181-187.
[8】Cai
to
LL,Yang B,Lu XC,et a1.Application of inlnlune function test
M,Chang HW,et a1.An improved proved ofhuman mast cells from dispersed
procedure
for the developmem
Oncology,2000,27(2):221-233,
clinical application
or
【3】Y
Sun,J Chen,P Cal,et a1.Therapy of relapsed
refractory
non-
【15】邹征云,刘宝瑞,钱晓萍,等.从50mL外周血中高效扩增ClK方法 的探讨【J】.肿瘤防治杂志,2005,12(7):515・518. [16】郭智,陈丰,谭晓华,等.细胞因子诱导的杀伤细胞体外培养技术 的评价[J].神经损伤与功能重建,2009,4(2):110・113. 【17]Shi
anti-tumor activity segregate within two distinct subsets of
cytokine-induced
killer(ClK)cells:implications
for their infusion
acrossmajor HLA barriers[J].Int Immunol,2008,20(7):841-848. 【I 3】Kambe
朴春花
(吉林省通化市二道江鸭园镇中心卫生院,吉林通化134005)
【关键词】三七;药理作用;血液系统作用 中图分类号:R282.705 文献标识码:A
Ⅳ
文章编号:1671-8194(2011)13-0209--02
三七是五加科三七Panax notoginseng(Burk.)F.H.Chen的根。又 名田七、金不换。昧甘微苦,性温。化学成分主要是皂苷类和黄酮 类,皂苷类含量约12%。生用能止血化瘀、消肿止痛。是云南白药的
Adoptive immunotherapy with auto-cytokine induced killer in the patients with malignant solid tumor[J].The Pratical
cells
Journal
ofCancer,2006,21(1):1l-14.
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的GM-C¥F。培养2周发现,B法可使CIK增殖倍数明显提高,最高可 达840倍。。结论是在cⅨ培养的第2天,增加细胞因子IL-.4和GM-CSF可 使cIK得率更高,细胞总数>5 x 109,从丽使得一次性采血50mL制备 的CIK足以满足临床回输治疗需要。 北京军区总医院郭智等【l”治疗复发或难治性淋巴瘤患者采用的CIK 细胞制备方法加入细胞因子的顺序有所不同:培养第l天加入抗人CD, 单抗100ng/mL、人重组IL-l旺100U/mL、人重组IFN-y 1000U/mL,第2 天加入人重组IL-2 300U/mL,每3天更换培养液并添加人重组IL.2和人 重组IFN-Y以维持其浓度,培养12 ̄14d收获CⅨ细胞。 4培养袋法 常规CIK细胞培养是采用大量的培养瓶,工作量大,且容易污 染。北京大学第一医院石永进等””采用1000mL大容量培养袋进行自 体CIK细胞大容量培养方法。培养容器采用1000mL大容量培养袋, 用一次性注射器进行细胞的定量加样、取样,换液时将培养袋在大容 量离心机中离。C,1000rpm lOmin,再用分浆夹挤出上清,新配好的培 养液经输液管插入培养袋进液管后输入培养袋,密封后放入37"C恒温 培养。结果表明大容量培养法使自体CIK细胞扩增总量达1.6 X 10”以 上,回输CIK细胞使患者PBMNC的杀伤活性明显增加,未出现不良反 应。此方法仅使用3—5个1000mL培养袋即可完成常规方法同样的工作 量。操作更简便,全封闭的培养操作方式使污染概率大大降低,回输 更安全。 CIK细胞过继免疫疗法作为一种新的治疗手段,实验室与临床统 一的操作规程和标准尚未制定,需要探讨的问题还有很多。以上方法 值得我们借鉴和完善,今后我们将致力于如何用最经济的方法获得足 量高效的免疫活性细胞,以便在临床上更推广应用。 参考文献 【1】Hoffm姐DM。Gitlitz therapy[J].Seminars
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of cytokine—induced autologous killer cell
infusion for ederly patients with hematological malignancies.【J】.
ZhongguoShiYahXueYeXuezaZhi,2010,18(5):1250—1255. [9】李鹏鑫,李贵新.细胞因子诱导的杀伤细胞制备的研究进展【J】. 医学综述,2009,15(20):3071—3073. [10】王家祥,郑树,刘秋亮.不同来源CIK细胞的体外扩增和杀伤活性 的比较【J】.第四军医大学学报,2005,26(7):616-618. 【11】黄文荣,张伯龙,靳海杰,等.细胞因子联合激活人骨髓和外周血 免疫细胞的比较研究田.中国实验血液学杂志,2002,10(3)..222-225. 【12】Sangiolo D,Martinuzzi E,TodorovicM,et a1.Alloreactivity and
fetal liver ceils in
serum-flee
cuture
medium[J]J Immunol Methods,
[2】Sa YL,Hua YlCYan XM,et a1.111e preliminary
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2000.240(1-2):101-110. 【14】蒋永新,李高峰,王熙才,等.无血清培养基与完全培养基体外诱 导扩增ClK细胞分泌细胞因子水平的比较[J】.肿瘤防治研究, 2006,33(1 1):784-787.
Y.Yu J,Cen X,et a1.Large-capacity
Hodgkin's
lymphoma by antigen specific dendric celts-activated
Xue Ye Xue Za
lymphocytes[J].Zhon鼹uo Shi Yan
219-23.
Zhi,2010,18(1):
主药。三七促进造血、抗血栓、抗心肌缺血、免疫调节等功效。笔者 结合相关文献及l临床用药情况。现对三七的药理作用做一浅述。 1血液系统作用
万方数据
2lo・文献综述・
1.】抗血栓作用
坚型兰Q!!:型:!:盟旦:!曼圆圆田团墨衄
提高机体对缺氧的耐受力。PNS被证明是三七治疗缺血性心脏病的基 础【4】。文献报道,PNS对几种实验性心律失常模型均有明显的对抗作 用,其主要机制可能是减慢心率、降低心肌收缩力、降低外周阻力、 同时拮抗钙通道的作用。三七皂苷的抗心律失常作用是与心肌的直接 抑制作用有关。PNS对心肌缺血.再灌注损伤有很强的保护作用,心肌 缺血-再灌注损伤可引起心肌细胞凋亡。顾国嵘等弘1通过一系列的生化 试验及形态学等观察PNS缺血预处理对缺血-再灌流心肌的延迟保护作 用的情况,实验结果提示,三七总皂苷缺血预处理l天后能显著减少 缺血-再灌流导致的心肌细胞坏死和凋亡,对缺血一再灌流心肌起到延 迟保护作用。 3消化系统作用+ 三七及其制剂对治疗肝脏疾病有很好的疗效。三七中的活性成分 三七总皂昔可提高肝组织及血清超氧化物歧化酶的含量,肝糖元得消耗 也能显著的减少.对于肝脏微循环的改善也是非常的明显,另外,也能 减轻线粒体、内质网等细胞器的损伤及肝纤维化。三七对于肝脏的益处 不止这些。三七还具有降低血中胆固醇和血脂类的作用,调节肝脏代 谢。在血脂代谢中,总脂质水平降低,特别是会使三酸甘油酯含量明显 的降低。对抗肝纤维化也是三七的主要作用,主要是通过抑制TGF.D
『4】Schmidt-WolfIG,Negrin RS,Kiem HP,et a1.Use ofa SCID mous“ human lymphoma model
potent antitumor cell
to
expanded cytoline-induccd
evaluate cytokine Exp
severe
tivity in mice with J
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immunodeficiency[J].
Immunol,1994,153(4):1687-1696.
l trial ofautologous
【7】Leemhuis T,Welis S,Schefold C,et a1.A phase cytokine-indueed锄1豇cells
ofHaematology,1995,90(3):512-517.
[6】Lu PH,Negrin RS.A novel population of expanded human CD3
CD56
cells derived from T cells with potent in vivo antitumorac-
l
三七能抗血栓及抗弥散性血管内凝血(DIC),其抗血栓机制主 要是三七总皂苷抑制血小板聚集,使血小板cAMP含量明显增加,同 时抑制5・HT的释放。抗凝血酶、促进纤维蛋白溶解。临床用三七粉 (3—69/d)用于抗血栓,较阿司匹林的抗血栓机制更全面。三七粉的 主要是通过改善血管内皮功能、降低血液黏稠度、抑制血小板活化和 聚集产生抗血栓作用,因此,三七粉的抗血栓机制是通过多组分多环 节实现。除此之外,三七的另一主要成分-三醇苷类,有明显抑制花 生四烯酸、胶原、二磷酸腺苷诱导的血小板聚集,研究发现,血小板 Ca2+浓度随着三七三醇皂苷剂量的增加显著减少,抑制血小板血栓素 A2释放等作用。临床上常用的以三七总皂苷为原料的抗血栓药物主要 是血塞通的各种剂型。 1.2止血作用 三七在短时间内增加血小板的数量、增强血小板的功能、收缩局 部血管、增加凝血酶含量,因此起到止血的功效。学者研究显示, 三七能使血小板因子Ⅲ、血小板释放ADP、钙离子和槲皮苷等止血活 性物质表现出来,从而表现促凝血作用Ⅲ。由于三七素不稳定,加热 后分解破坏,所以生用三七止血。三七常添加在牙膏中,常用于治疗 牙龈出血。 1.3补血作用 三七除具有止血的功效外,也能补血。这主要是因为三七中的 有效成分三七总皂苷可促进造血细胞增殖、使GATA・I和GATA-2转录 调控蛋白合成增加,同时能够增高其与上游调控区的启动子和增强 子结合的活性,调控与造血细胞增殖和分化相关的基因表达上调, 具有良好的补血作用肚】。陈小红等p1研究观察三七皂苷对人骨髓造血 细胞凋亡相关蛋白表达影响的作用机制表明,PNS在某种程度上能 够抑制Daxx、Fas蛋白表达,而相应减少造血细胞的凋亡,同时也能 通过上调NFkB、c2Rel转录因子,促进细胞增殖。并阻止半胱天冬酶 (caspase)连锁链的活化而抑制造血细胞凋亡。三七止血和补血的药 理作用的研究,为临床为临床推广和新药开发提供依据。 2心血管系统的作用 三七中的活性成分三七总皂苷(PNS)能对抗垂体后叶索引起的 心肌缺血,提高心肌细胞耐缺氧能力及对抗再供氧造成的危害,扩张 冠脉,增加冠脉血流量,改善心肌微循环,降低心肌耗氧量,因此能
in BJ,BeUdegrun A,et a1.Adoptive cellular
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
・文献综述・209
[5】Schmidt-Wolf IG,Grimm B,Brandt
numbeors of ceils of
British Jounlal
a
K,et a1.Propagation
of large
human mixed-lineage T-lymphoid/mydoid[J].
induced ldllercells with
killer cells and its c”omxic activity[J].Sheng Wu Yi Xue Za Zhi, 2001,18(1):94—96.
activityp].J
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三七的药理作用研究进展概述
disease and non-Hodgkin for the treatment
ofreapsed Hodglan
lymphoma[J].Biol
Blood Marrow Transp
lant,2005,ll(3):181-187.
[8】Cai
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LL,Yang B,Lu XC,et a1.Application of inlnlune function test