马铃薯黑痣病菌菌丝融合群的鉴定

２ 结果 与分析
２１ 供试 菌株 分离鉴 定 结果 ．
从各地 区采集 的马铃 薯黑痣病标样 中分离 出 ４ 个分离物 ，经鉴定和致病性测定 ，均为 马铃薯 ４ 黑痣病菌 （ １。 表 ）
表 １ 马铃薯 黑痣病菌菌株编号及其采集地点
Ｔａ ｌ １ 尼 ｓ ｌ ｎ ｔ ａ ｎ ｏ ａ ｅ ｒ ｍ ｏ ａ ｏ ｓ ｂｅ ｏａ ｉｓｒ ｉ ｓｉ ｌ ｔ ｄ ｆｏ ｐ ｔ ｔ ｅ ｓ ｉ ｉ ｅ ｅ ｔ ｒ ａ ｎ ｄｆ ｒ ｎ ｅ ｓ ａ
ｐ ｔｔ ． Ｔ ｅｆｅ ｕ ｎ ｙｏ ｏａ ｏ ｈ ｑ ｅ ｃ ｆ ｒ ＡＧ一 － ｓ２２ ％ ， ｎ ｅｎ ｎ ｆ ｓｏ ｔ ｉｓｗｅ ｅａ ｃ ｕ ｔ ｇｆ ｒ ．６ ｉ １ ＩＢｗａ ．７ ａ ｄｔ ｏ —ｕ ｉｎｓｒ ｎ ｒ ｃ ｏ ｎｉ ｏ １３ ％ ｎ￣ｅ ｕ ｎ ｙ ｈ ａ ｎ １ ｑ ｅ ｃ ．Ｓｉｔ ｅ ｘｅ ｎ
ｇ ｏ ｐ ｒ ｕ ｈｈ ｐ ａ ｍａ ｉｇｗｉ ｔｎ ａｄ ｓｒ ｉｓ ＡＧ一 －ＩＡ， ｒ ｕ ｓｔ ｏ ｇ ｙ ｈ ｔ ｔ ｓａ ｄ ｒ ｔａｎ ， ｈ ｎ ｈ １ ＡＧ一一ＩＢ， １ ＡＧ一 － ， ２ １ ＡＧ－－ＩＢ ａ ｄ ＡＧ－ ． Ｔｈ ｒ ｑ ｅ ｃ ２ ＩＩ ｎ ３ ｅ ｆ ｕ ｎ ｙｏ ｅ ｆ
Ａ ３ｗａ ６ ６ ｏ ｌ ｈ ｓｅ ｔ ｉ ． ｉ ｄｃ ｔｄｔａ Ｇ． ｓｔｅｍａｏ ｎ ｓｏ ｓｓｇ ｕ ｆ ．ｓ ｌ ｆ ｎｔｅ Ｇ一 ｓ８ ． ％ ｆ ｌ ｅｔ ｔｄｓｒ ｎ ｗｈ ｈｉ ｉａｅ ｔ ３ ａ ｅ ｔ ａ ｓ ｃ ｎ ｈ Ａ ３ｗａ ｊｒ ａ ｔｍｏ ｉ ｒ ｐｏ 尺 ｏ ｎ ｈ ａ ｏ ａ ｏ ｈ
除含有大量淀粉 、蛋白质 ，还含有丰富的维生素 Ａ
和 ｃ以及矿物质圈 。近年来 ，随着马铃薯产业的迅 猛发展 ，马铃薯种植面积逐渐扩大 ，种薯调用频繁 ，
收稿 日期 ：２ １ － ３ ２ ０ Ｉ０ — ９
铃薯黑痣病发病率高达９ ％，该病严重影 响着马铃 ０
薯的产量与品质 ，阻碍了马铃薯产业的发展 。
菌株为标准菌株。
１３ 核相 测 定 ．
参照张天晓１ ５ 】 的方法 ，采用番红染色。将活化 后的菌株接入培养皿 内， 在菌饼周围培养基上斜插
菌株编号
Ｓｒｉ ． ｔａｎ Ｎｏ
采集 地
Ｃ ｌ ｃｉｎ ａｅ ｏｌ ｔｏ ｒａ ｅ
入４ 个盖玻片。２ ℃恒温培养 ，待菌丝生长至盖玻 ５
将 同一融合群的所有菌株 ，按 ３ 个一组 ，成正
三角形排列接种于 Ｐ Ａ培养基上 。２ ￣下对峙培 Ｓ ５Ｃ 养 ２ ４ｄ ～ ，观察其生长情况 ，每组重复 ３ 。根据 次 两菌株间菌丝交会处分离带的有无判断两菌株是否 亲和，无分离带的视为同一亲和群 ，有分离带的视 为不 同亲和群 。通过合理组合 ， 使同一菌株与其他 各菌株间均得到对峙比较 ，以此对所有菌株进行亲 和群 判别 。
Ｉ ｅ ｔ ｉａ ｉ ｎ ｏ ａ ｔ ｍ ｏ ｉ Ｇｒ ｕ ｓ ｏ ｉｏ ｔ ｎ ａ ｓ ｌ ｉ ｔ ｔ ａ ｔ ｄ ｎ ｉｃ ｔ ｆ ｆ ｏ Ａｎ ｓ ｏ ｓｓ ｏ ｐ ｆ Ｒｈ ｚ ｃｏ ｉ ｏａｎ Ｐｏ ａ ｏ Ｐｌ ｎ ｏｎ
ＴＩ ａ ｙ ｎ ＭＥＮＧ ｉａ ， ＡＮ Ｘｉｏ ａ ， Ｍｅｌ ｎ ＺＨＡＮＧ ａ ｙ ， ｉ Ｘｉｏ ｕ ＤＯＮＧ ｉ， Ｒｕｌ ＨＵ ｕ ｉ Ｊｎ
又分别予以生理 、生化 、病理遗传等方面的研究 。
为了研究马铃薯黑痣病菌菌丝融合群组成 、分布和 亲和群的组成情况 ，本试验对采 自 同地 区的马铃 不
ｃ完全不融合 ：细胞壁不溶解 ，两菌互不干扰
对方 ，交 叉 而过 。 １５ 营养 亲和 群 的鉴 定 ．
薯黑痣病菌进行了菌丝融合群鉴定。
・
２８ ９・
中国马铃薯 ，第 ２ 卷 ， ５ ，２ １ ５ 第 期 ０１
中图分类号 ：￥ ３ ５２
文献标识码 ：Ａ
文章编 号：１７ — ６ ５ ２ １） ５ ０ ９ — ４ ６ ２ ３ ３ （０ １０ — ２８ ０
马铃 薯黑痣病菌菌丝融合群 的鉴定
田晓燕 ，蒙美莲 ，张笑宇 ，董瑞利 ，胡 俊
Ａｂ ｔ ｃ ： ｏｔ－ｏ ｒ ｔａｎ ｆ ｉｏ ｔｎａｓ ｌｎ ｒ ｏａｅ Ｏ ｔ ｅｐ ｔｔ ｌｎ ｉｇａ ｅ ｆｈ ｉ ｏ ａｏｐｏ ｕ ｔ ｎ ｓｒ ｔ Ｆ ｒ ｆ ｕ ｒ ｉｓｏ ｚ ｃｏ ｉ ｏａ ｉ ａ ｙ ｓ Ｒｈ ｗｅ ｅｉ ｌｔ ｄｆ ｍ ｏａ ｏｐａ ｔ ｒａｏ ｅｍａｎｐ ｔｔ ｒｄ ｃｉ ｓ ｒ ｈ ｎ ｔ ｏ ｃ ｕ ｔ ｓ ａ ｄ ｃｔ ｓ ｏ ｉｅ ｅ ｔｐ ｏ ｉｃ ｓ Ｔ ｅ ｒ ｌｔｅ ｐ ｌｎ ｃｅ ｒｓｒ ｉｓ Ｔ ｅ ｒ ｉｉｅ ｎｏ ｔｒ ｅ ａ ａ ｔｍ ｏ ｉ ｏ ｎ ｉ ｎ ｉｅ ｄｆ ｒ ｎ ｒｖｎ ｅ ． ｈ ｙｗｅ ｅ ａｌｈ ｏｙ ｕ ｌａ ｔａｎ ． ｈ ｙｗｅ ｅ ｄｖｄ ｄ ｉｔ ｈ ｅ ｎ ｓｏ ｅ ｉ ｆ ｓｓ
马铃薯是世界第四大粮食作物 ，仅次于水稻 、 小 麦和玉米口 １ 。中国是一个 马铃薯 生产大 Fra Baidu bibliotek ，其 总产
量 和面积均 占世界第一位 。马铃薯 的营养价 值很 高 ，
重迎茬问题 比较普遍 ，在马铃薯种植区黑痣病 日 趋 加重 ，且发病较 为普 遍 ，一般可造成马铃薯减产 Ｉ％左右 ，个别年份可达全田毁灭网 ２ ０ 年调查 ５ 。 ０９ 了内蒙古乌兰察布市马铃薯种植区 ， 严重的地块马
ｌ 材 料与方法
１１ 供试 菌株 的分 离 ． 从 内蒙古 自治 区呼和浩 特 市和乌 兰察 布 市 、山 西省大同市 、陕西省榆林市 、黑龙江省等地的马铃
薯上采集具有黑痣病典型症状的新鲜病害标本 ，采 用组织分离法 ，将病组织在 Ｐ Ａ平板上于 ２℃下 Ｄ ５ 恒温培养 ４ 后 ，挑取病 组织 周围长 出的尖端菌 ｇｈ
马铃薯黑痣病菌菌丝融合群的鉴定—— 田晓燕 ，蒙美莲 ，张笑宇 ，等
马铃薯黑痣病又称 “ 黑色粗皮病 、茎溃疡病” ， 是一种重要的土传真菌性病害 ，其病原菌为立枯丝
核 菌 （ ｈｚｃｏｉ ｓｌｎ Ｋｉｎ ｔ 国际 上 运 用 菌 丝 Ｒ ｉ ｔ ａ ｏａｉ ｔ ）￣ ｏ ｎ ｈ ４ 。
ｖ ｇ ｔｔ ｅｃ ｍｐ ｔ ｌ ｒ ｕ ｓｏ ｅ ｅａ ｉ ｏ ａｉ ｅｇ ｖ ｂ ｏ ｐ ＡＧ－ ｔ ｉｓｗｅｒ ｅ ｅ ｍｉｅ ｙｔ ｅｒ ｅ ａ ｉｍ ｎＰＳ ｍ ｅ ｉｍ ． ｈ ｓ ， ｆ ３ｓｒ ｎ ｅｄ ｔ ｒ ｎ ｄ ｂ ｉｂ ｈ ｖｏ ｏ Ａ ｄｕ Ｏｆ ｅ ｅ ＡＧ－— ｓｔ ｅ ａ ｈ ｔ ３５ｗａ ｈ
片的 １ ２处 时取 出 ，经 番 红 ０ Ｋ Ｈ染 色 １２ｍｉ ／ 一Ｏ ～ ｎ
１ ２ １ ， ７、 １ ８， ２１ ２ ２、 ２ ３ ２ ９、 ３ ８、 ４ ０、４６ ３、４、 ５、 ３ ０
ｍａｏ ｅ ｅａｉ ｏ ａｉｌ ｇ ｕ （ ５７ ％ ｏ ｔｌ Ｇ－ ｎ ｓｏ ｓ ｒｕ ） ｆｌｗ ｄ ｂ Ｇ－—， Ｇ－－ ｎ Ｇ－－ ｊｒ ｇ ｔｔ ｅ ｃ ｍｐ ｔ ｅ ｒ ｐ １ ．９ ｆ ｏａ Ａ ３ ａ ａ ｔｍｏ ｉ ｇｏ ｐ，ｏｌ ｅ ｙＡ ３ １ Ａ ３２ ａ ｄ Ａ ３８ ｖ ｖ ｂ ｏ ｔ ｓ ｏ （３１ ％）ＡＧ ３３ Ａ ３４ Ａ ３６ Ａ 一－ ｎ －－ ５ ６ ， ｎ ｈ ｎＡ ３１ ， －－１ ＡＧ ３１ ， Ｇ一— Ａ ３１ ， １． ， 一—， Ｇ一＿ ， Ｇ－－， Ｇ ３７ａ ｄＡＧ ３９（． ％）ａ ｄｔｅ Ｇ－－０ ＡＧ ３１ ， －—２ Ａ ３１ ， Ｇ一－４ ６ ２ ３
丝 ，移人 Ｐ Ａ平板纯化培养。将认为是立枯丝核 Ｄ 菌的菌株通过镜检 、形态学鉴定和致病性测定 ，确
认为病原菌后保存备用。
１２ 标准 菌株 来源 ． 由华南农业 大学周而勋教授 惠赠 的 Ａ ＿—Ｉ Ｇｌ Ａ、
Ａ 一 一ＩＢ、Ａ ２ １ Ｇ一 一ⅢＢ、Ａ 一 Ｇ １ Ｇ一 — 、Ａ ２ Ｇ ３共 ５个
菌丝融合群的鉴定标准如下 ：
Ａ完全融合 ：接触细胞间细胞壁溶解 ，原生质 融合 ，互有引诱现象 ；
Ｂ不完全融合 ：菌丝接触 ，细胞壁溶解后细胞
死亡 ；
融合 技术将 立枯 丝核 菌 分成不 同的群 系／ 融合群 （ ｎｓ ｍ ｓ ｒ ｐ简称 Ａ ） Ａ ａ ｏ ｏｓ ｏ ｔ ｉｇ ｕ Ｇ ，许多植物病 理学家
的 ８ ． ％和 ２ ７ ６６ ３ ． ％，非融合 类占测定茵株 的 １． ％。说 明马铃 薯黑痣病菌的优 势茵群是 Ａ 一 ２ １６ ３ Ｇ ３融合群 。通过对峙培
养 ，又将 Ａ 一 融合群 的所有 菌株划分为 ｌ 个不 同的营养亲和群 。 Ａ 一 － 所 占 定菌株的 比 最高 ，为 １． ％； Ｇ３ ６ Ｇ ３５ 测 例 ５９ ７
Ａ － — 、Ａ ３ ２ Ａ ３ ８ 占测定菌株的 ｌ． ％：Ａ ＿— 、Ａ －＿ 、Ａ ３ 、Ａ － ． Ｇ ３１ ＿ 和 — 各 ３１ ６ Ｇ ３ ３ Ｇ ３４ Ｇ ３７和 Ａ ＿ － Ｇ ３ ９占测定菌株的 ５６ ． ％； Ａ － —０ Ｇ ３ １ 、Ａ ＿ —２ Ｇ ３ １ 、Ａ － — ４ ＧＩ １ 和 Ａ －— ６仅 占测定菌株的 ２ ３ ２ Ｃ－ １、Ａ － — ｌ Ｇ ３ １、Ａ ＿ — ３ Ｇ ３ １ 、Ａ － — ５ ３ ３ Ｇ３ １ ． ％。 ６ 关键词 ：马铃薯 ；立枯 丝核 菌；菌丝融合群 ；营养亲和群
（内蒙古 农业大学农学院 ，内蒙古 呼和浩特 ００１ １０ ９）
摘 要 ：从马铃薯种植 区的部分县市分离纯化得到 ４ ４个马铃著黑痣病病原菌立枯丝核茵（ ｈ ｏｔ ｉ ｌｎ Ｕ ｎ Ｒ ｉ ｃ ｎａ ｏａｉ ｈ ） ｚ ｏ ｓ Ｋ
菌株 ，经核相测定均为 多核菌株。通过与标 准菌株 Ａ 一 一Ｉ Ｇ １ Ａ ＿ 一Ｉ 、Ａ ＿ — 、Ａ ＿ 一 Ａ、 Ｇ １ Ｂ Ｇ ２ １ Ｇ ２ ⅢＢ和 Ａ ． 的茵丝融合 Ｇ３ 试验，最终将 ４ 个 菌株分为 ３个菌丝融合群 ，即 Ａ 一 、Ａ — —Ｉ ４ Ｇ ３ Ｇ ｌ Ｂ和非融合类，ＡＧ ３ Ａ 一 一Ｉ ＿ 和 Ｇ １ Ｂ分别 占测定菌株
（ ｏ ｅ ｅｏ Ａ ｒｎ ｍｙ Ｉｎ ｒ ｎ ｏａＡ ｒ ｕ ｕａ Ｕ ｉ ｒ ｔ Ｈ ｈ ￣，ｎ ｅ ｏ ｇ ｌ １ ０ ９ Ｃ ｉ Ｃ ｌ ｇ ｆ ｇｏ ｏ ， ｅ ｇ ｌ ｇｉ ｌ ｒｌ ｎ ｅｓｙ ｕ ｈ Ｉ ｒ ｎ ｏ ａ ０ １ ， ｈ ａ） ｌ ｎ Ｍｏ ｉ ｃ ｔ ｖ ｉ， ｎ Ｍ ｉ０ ｎ
Ａ ３１ ｎ Ｇ一—６（．３ ． Ｇ－－５ａ ｄ Ａ ３１ ２６ ％）
Ｋｅ ｏ ｄ ： ｏ ａｏ Ｒｈｚ ｃｏ ｉ ｏａ ｉ ｈ ； ｎ ｓｏ ｓｓｇ ｕ ； ｅ ｅ ａｉｅｃ ｍｐ ｔ ｌ ｒ ｕ ｙＷ ｒ ｓ ｐ ｔｔ ； ｉｏ ｔｎａ ｓ ｌｎ ｎ ａ ａ ｔ ｍｏ ｉ ｒ ｐ ｖ ｇ ｔｔ ｏ ａｉ ｅｇ ｐ Ｋ０ ｏ ｖ ｂ ｏ
基金项 目：国家现代马铃薯产业技术体系建设岗位专家专Ｊ （ｙｙ 一５ｇｚ ２ ） ￣ ： ｎｃｔ １，ｗｊ ｏ 。 ， ｘ 一
作者简介： 田晓燕 （９ ４ ） 女 ，硕士 ，主要从事植物病害研究 。 １８ 一 ， 通信作者 （ ｏｒｓ ｏ ｄ ｇ ｕｈ ｒ ： 胡俊，教授 ，主要从事植物病害综合治理 ， － ａ ： ｕ ｎ ２２ １ ６ ｏ 。 Ｃ ｒ ｐ ｎ ｉ ｔｏ ） ｅ ｎ ａ Ｅ ｍ ｉ ｈ ｊ ６０ ＠ ２ ． ｍ ｌ ｕ ｔ