国外常用的皮肤药代试验方法

国内常用的皮肤药代试验方法

离体皮肤透皮吸收试验

全身药代动力学试验

局限性:

离体皮肤的透皮吸收试验,由于离体皮肤缺乏主动转运过程,而与在体皮肤有很大区别,故不能充分反应药物在体内的真实过程;另一方面,随着时间的延长,离体皮肤的状态越来越差,与在体皮肤的生理状态相差甚远,导致无法长时间观察药物在皮肤的吸收、分布、消除等过程。全身药代动力学试验,通过检测局部用药全身吸收后的血药浓度,分析药物可能对人体带来的毒性作用;但却无法提供药物能否到达治疗靶部位,以及在该部位能否达到足以发挥治疗作用的药物浓度以及药物在该部位代谢情况等信息,从而难以评价其是否具有作用于皮肤靶部位的特点。

皮肤药代动力学试验应揭示出,在规定剂型、浓度和剂量下,试验药物渗透入皮肤或浅表皮肤组织的情况;或其他有效的标记物显示,在足够时间内,有足够数量的药物到达并保持在皮肤和浅表皮肤组织中。

国外常用的皮肤药代试验方法

皮肤贴片法：该方法可以相对无侵袭性地评价药物在体内摄入至人体角质层的数量,在涂搽药物后不同时间间隔,涂药的人体角质层胶条贴片也可用于定量测定药物从皮肤上的消除过程。

该方法用于评价局部皮肤药代动力学特征尚不全面,因为不同皮肤疾病的病变累及部位不同,需要药物到达的皮肤部位不同,且不仅仅在角质层。

因此,对于不同的适应症,应针对其病变累及部位的不同,采用不同的取材方法进行药代试验,以观察药物能否到达病变部位,并测定在该部位的药物浓度是否足以发挥疗效。

有创性技术、方法

打孔(钻取)活组织检查：用一次性使用的直径2～10 mm的圆形刀子完成,活组织检查包括表皮、真皮和部分皮下组织。

刮取活组织检查：通常用保险刀片(剃毛刀片)进行,获取的皮肤比较表浅,包括表皮和部分真皮。

皮肤刮除术：通常用皮肤刮匙获取表面的角质层;但是, 表皮深层部分则用更有力的刮除术来取样。

皮肤表面活检：用快速干燥氰基丙烯酸酯胶获取少数样品中的角质层。将胶涂于载玻片后,按在皮肤表面,在胶的聚合作用后,移去载玻片。

表皮微量渗析：是一种最低程度的侵入性方法,其能够实时评价表皮给药。将一个包括半透膜管和模拟血管的探针,插入真皮并用生理溶液灌流,以与周围组织的细胞外液保持平衡。由此,局部应用的化合物能在细胞外液中被测定。

负压吸引水泡技术：通常用于评价全身给药后、药物在皮肤中的浓度。在皮肤上安置一个带有几个小孔的腔室,并用真空装置负压吸引,以产生一个表皮内水疱。负压吸引产生的水疱液与组织间液成分相似。

以上这些技术可获取不同皮肤部位的组织,故可针对不同适应症病变部位,选择应用于观察药物的皮肤局部代谢动力学。这些技术多数用直接获取皮肤组织的方法,均为有创性方法。因此,由于疼痛等副作用,使健康受试者入选困难,并因此给该项试验的开展带来一定难度。但其中相当一部分技术,如刮取活组织检查、皮肤刮除术、皮肤表面活检等已在临床皮肤疾病的

诊断、治疗过程中均有较多使用。因此,对于采用这些技术进行患者人群的药代动力学研究,应具备条件。

无创性新技术、新方法

激光扫描共聚焦显微镜技术

Roman共聚焦显微分光镜检查技术

这些新技术用绝对非侵入性方法,使光束集中到皮肤内的既定深度,并能测定局部应用化合物在这个水平的浓度。目前,这些新技术、新方法已在国内一些大学、科研院所有不同程度的开展,相信能对目前及今后皮肤药代动力学无创性研究,提供很好的技术支持。