高效液相操作步骤及注意事项

高效液相操作步骤及注意事项
1、着穿：穿好实验服，戴好鞋套或换拖鞋
2、卫生检查：检查实验台面，仪器是否干净，擦去灰尘，注意电源处不要太潮湿；
3、仪器检查：检查仪器各附件是否完好无损，发现异常向管理员汇报
4、Sealwash：准备10%的异丙醇润洗，流速控制在3秒每滴为好
5、样品前处理：进液质的样品先用0.22μm，过滤
6、流动相制备：流动相先用0.22μm过滤，再超声处理约15min
7、仪器操作：①将准备好的流动相放置好于载物台上，10%的异丙醇也准备好（注意：将管路换瓶时，勿让滤头上的甲醇溅到按钮上，防止粘结）
②先做好使用记录，打开ups电源，待输出稳定后，即指示灯变绿后，打开电脑，依上而下打开脱气机、泵柱温箱、检测器（注意：如果停电或ups电源插头没插好，输入指示灯是不亮的，且会发出警报；按钮是一次按到底后放开）。

开sealwash，打开联机（注意：甲要先开boot软件，出现七行字后再开联机）
③脱气，拧松purge阀，流速调为5ml/min，对所需要用到的管路purge5min，再拧紧purge阀，压力一般小于10bar
④冲柱子：接好二通，用纯甲醇或乙腈冲洗，待稳定后记录好系统压力，换柱子冲也用纯甲醇或乙腈冲洗，记录好系统压力，压力一般要小于20bar，流速为1ml/min。

（注意：在二通和换柱子后注意是否漏液，用干净滤纸垫于接口处，防漏。

万一漏了可向管理员汇报。

）
⑤清洗进样针和进样器（六通阀），可用甲醇洗针，至少3遍
⑥进样：进样前15min开紫外灯，走流动相，待基线稳定后进样（注意：进针时手动阀操作要快，不要把针头弄弯）
⑦进样结束后，关闭紫外灯，用甲醇或乙腈冲柱子，若流动相中有盐，应先用水冲洗，代替管路中的盐，再用95%的水梯度冲洗，最后确保每个管路中充满甲醇，作好记录，换二通，也用甲醇或乙腈冲洗，也作好记录，关闭各模块，关闭联机、电脑、至下到上关闭仪器，再关电源，作好使用记录。

⑧原来是保护柱的接保护柱，原来是二通的接二通，将进样针用甲醇洗好放回原处，进样器也要清洗，将废液回收倒掉，并将借用的拖鞋归还。

注意事项：
1、中饭或晚饭期间，液相室必须有人看管，确保仪器旁有人看守；
2、晚上如实验需要通宵的，应提前向管理人员提出申请，经同意后才行；
3、若在实验室内使用仪器时只有自己一个人，应保证整个实验室的安全问题；
4、遇到雷雨天气，为确保仪器使用安全，应断开电源，使用ups供电；
5、实验室最后走的，走之前应确保水、电、门、窗都处于关闭状态才可离开；
6、若是小组长，应抓好卫生、安全等工作，尤其是在吃饭时间，小组长必须保证整个液相室内有实验人员在，不能整个房间没一个人，同时确保仪器的安全使用，若有异常作好记录并及时上报；
7、未经允许的电器不可带入液相室，以防功率超载；
8、抽滤装置要注意轻拿轻放；
9、每周一和周四上午9点预定液相，原则上每人可预定两天，如有特殊要求的应提前说明，写好申请；
10、预定必须本人前来，不允许代订，有特殊情况的应提前说明；
11、为延长紫外检测器寿命，开启检测器应遵循“迟到早退”的原则；
12、预定液相人员不做可以取消，但不能私自转让，且取消的话必须提前说明。