植物组织培养技术 ppt课件
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室内应配有超净工作台,紫外灯、解剖镜、各种 接种器械等。
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1.5 培养室
为了控制培养室的温度和光照时间及其强度,培养
室的房间不要窗户,但应当留一个通气窗,并安上排气 扇。室内温度由空调控制,光照由日光灯控制。天花板 和内墙最好用塑料钢板装修,地面用水磨石或瓷砖铺设, 一般要分两间,一为光照培养室,一为暗培养室。培养 室外应有一预备间或走廊。
如果没有条件的话,可以将上述工作间合并 成一个准备间,要求是设备的安装和排列要合理、 房间要宽敞、明亮、透风,地面要便于清洁、防滑。
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1.4 无菌操作室
无菌操作室主要用于实验材料的接种操作,所以又叫 接种室。通常由里外两间组成,外间是缓冲间,用于 准备工作,还有防止污染的作用。缓冲间的门应该与 接种室的门错开,两个门也不要同时开启,以保证无 菌室不因开门和人的进出带进杂菌。缓冲间内应该设 有水槽、实验台、鞋帽架、和柜子、紫外灯。无菌操 作室的内壁应当用塑钢板或瓷砖装修,工作人员进入 操作间前要穿上消过毒的工作服和拖鞋。
细胞学鉴定室 其功能是对培养材料进行细胞学鉴定 和研究。要求清洁、明亮、干燥,使各种光学仪器 不受潮湿和灰尘污染。应配置各种显微镜、照相系 统等。
生化分析室 在以培养细胞产物为主要目的的实验室 中,应建立相应的分析化验实验室,以便于对培养 物的有效成分随时进行取样检查。 离心机、酶联免 疫检测仪、天平、PCR仪等。
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1.2培养基配制间
面积60平方米左右,配备的主要仪器设备有 :冰 箱、天平、微波炉、pH计、培养基分装器、药品 柜、器械柜、抽气泵、电炉、各种规格的培养瓶、 培养皿、移液管、烧杯、量筒、容量瓶、储藏瓶 等。冰箱以体积180-200L为宜,用于储存培养基 母液、激素维生素等贵重药品、彩色胶卷、及保 存植物材料。天平应有不同感量。
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1.基本实验室
1.1 洗涤间 根据工作量的大小决定其大小,一般面积控制
在30-50m2。在实验室的一侧设置专用的洗涤水 槽,用来清洗玻璃器皿。中央实验台还应配置2 个水槽,用于清洗小型玻璃器皿。如果工作量大, 可以购置一台洗瓶机。准备1-2个洗液缸,专门 用于洗涤对洁净度要求很高的玻璃器皿。此外还 应配置落水架、干燥箱、柜子、超声波清洗器等。 地面应耐湿并排水良好。
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C、 塑料器皿的清洗
聚乙烯、聚丙烯等制成的塑料器皿,在生物化学
实验中已用的越来越多。第一次使用塑料器皿时, 可先用8mol/L尿素(用浓盐酸调pH = 1)清洗,接 着依次用无离子水、1 mol/L KOH和无离子水清洗, 然后用10—3 mol/L EDTA 除去金属离子的污染,最 后用无离子水彻底清洗,以后每次使用时,可只用 0.5%的去污剂清洗,然后用自来水和无离子水洗净 即可。
精品资料
• 你怎么称呼老师? • 如果老师最后没有总结一节课的重点的难点,你
是否会认为老师的教学方法需要改进? • 你所经历的课堂,是讲座式还是讨论式? • 教师的教鞭 • “不怕太阳晒,也不怕那风雨狂,只怕先生骂我
笨,没有学问无颜见爹娘 ……” • “太阳当空照,花儿对我笑,小鸟说早早早……”
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2.2、温室
为试管苗提供满足生长的适宜环境条件。
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§2 ຫໍສະໝຸດ Baidu验基本操作
一.洗涤技术
(1)洗涤液的 配制
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(2)洗涤方法
A、新购买的玻璃仪器表面常附着有游离的碱性 物质,可先用0.5%的去污剂洗刷,再用自来水洗 净,然后浸泡在1%~2%盐酸溶液中过夜(不可 少于四小时),再用自来水冲洗,最后用无离子 水冲洗两次,在100℃~120℃烘箱内烘干备用。
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D、金属用品洗涤
金属用品一般不宜用各种洗涤液洗涤(新的 可以用热洗衣粉水洗净),需要清洗时,一 般用酒精擦洗,然后火焰干燥。 E、除菌过滤器用清水冲洗后,用洗液冲洗, 再用清水冲洗,最后用蒸馏水冲洗,晾干备 用。
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二.灭菌
(一)、灭菌工作是极其重要的。
首先应建立有菌和无菌的概念有菌的范畴:
有菌:凡是暴露在空气中的物体,至少其表面都是有菌的。 如植物的表面、超净工作台的台面,未处理的工具和手等。 无菌:高压高温处理(工具、器皿、培养基等)
物理或化学处理; 火烤后的物体; 健康的动植物不与内外部表面接触的组织 内部可能是无菌的(有时也有内生菌,但 不会影响培养,也不会污染)
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B、使用过的玻璃仪器的清洗
先用自来水洗刷至无污物,再用合适的 毛刷沾去污剂(粉)洗刷,或浸泡在0.5% 的清洗剂中超声清洗(比色皿决不可超声), 然后用自来水彻底洗净去污剂,用无离子水 洗两次,烘干备用(计量仪器不可烘干)。 清洗后器皿内外不可挂有水珠,否则重洗, 若重洗后仍挂有水珠,则需用洗液浸泡数小 时后(或用去污粉擦洗),重新清洗。
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1.3 消毒间
配备实验台、高压灭菌锅、排风灭火设备、细
菌过滤设备、干热消毒柜、电炉等。灭菌锅的选择 应根据不同的要求选择不同型号的灭菌锅。一般实 验室可选用小型的医用手提式高压灭菌锅,较大的 实验室可选用立式自动控制压力和温度的灭菌锅。 生产性的实验室可选用大型的卧式灭菌锅。
植物细胞工程实验室及基本操作
§1 实验室设置及仪器设备 §2 实验基本操作 §3 培养基的成分及其配制 §4 培养条件的选择
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§1 实验室设置及仪器设备
实验室是进行组培研究的主要场所,应能 满足清洗、培养基制备、储藏、无菌操 作、培养、鉴定等多方面的工作。
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培养室应配有培养架、转床、摇床、光照培养箱、 生化培养箱、自动控时器等。日光灯一般用40W,固定 在培养架的侧面或搁板的下面,每层有两支日光灯,距 离在20cm,光照强度为2000-3000lx。
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2.辅助实验室
2.1鉴定室
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1.5 培养室
为了控制培养室的温度和光照时间及其强度,培养
室的房间不要窗户,但应当留一个通气窗,并安上排气 扇。室内温度由空调控制,光照由日光灯控制。天花板 和内墙最好用塑料钢板装修,地面用水磨石或瓷砖铺设, 一般要分两间,一为光照培养室,一为暗培养室。培养 室外应有一预备间或走廊。
如果没有条件的话,可以将上述工作间合并 成一个准备间,要求是设备的安装和排列要合理、 房间要宽敞、明亮、透风,地面要便于清洁、防滑。
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1.4 无菌操作室
无菌操作室主要用于实验材料的接种操作,所以又叫 接种室。通常由里外两间组成,外间是缓冲间,用于 准备工作,还有防止污染的作用。缓冲间的门应该与 接种室的门错开,两个门也不要同时开启,以保证无 菌室不因开门和人的进出带进杂菌。缓冲间内应该设 有水槽、实验台、鞋帽架、和柜子、紫外灯。无菌操 作室的内壁应当用塑钢板或瓷砖装修,工作人员进入 操作间前要穿上消过毒的工作服和拖鞋。
细胞学鉴定室 其功能是对培养材料进行细胞学鉴定 和研究。要求清洁、明亮、干燥,使各种光学仪器 不受潮湿和灰尘污染。应配置各种显微镜、照相系 统等。
生化分析室 在以培养细胞产物为主要目的的实验室 中,应建立相应的分析化验实验室,以便于对培养 物的有效成分随时进行取样检查。 离心机、酶联免 疫检测仪、天平、PCR仪等。
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1.2培养基配制间
面积60平方米左右,配备的主要仪器设备有 :冰 箱、天平、微波炉、pH计、培养基分装器、药品 柜、器械柜、抽气泵、电炉、各种规格的培养瓶、 培养皿、移液管、烧杯、量筒、容量瓶、储藏瓶 等。冰箱以体积180-200L为宜,用于储存培养基 母液、激素维生素等贵重药品、彩色胶卷、及保 存植物材料。天平应有不同感量。
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1.基本实验室
1.1 洗涤间 根据工作量的大小决定其大小,一般面积控制
在30-50m2。在实验室的一侧设置专用的洗涤水 槽,用来清洗玻璃器皿。中央实验台还应配置2 个水槽,用于清洗小型玻璃器皿。如果工作量大, 可以购置一台洗瓶机。准备1-2个洗液缸,专门 用于洗涤对洁净度要求很高的玻璃器皿。此外还 应配置落水架、干燥箱、柜子、超声波清洗器等。 地面应耐湿并排水良好。
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C、 塑料器皿的清洗
聚乙烯、聚丙烯等制成的塑料器皿,在生物化学
实验中已用的越来越多。第一次使用塑料器皿时, 可先用8mol/L尿素(用浓盐酸调pH = 1)清洗,接 着依次用无离子水、1 mol/L KOH和无离子水清洗, 然后用10—3 mol/L EDTA 除去金属离子的污染,最 后用无离子水彻底清洗,以后每次使用时,可只用 0.5%的去污剂清洗,然后用自来水和无离子水洗净 即可。
精品资料
• 你怎么称呼老师? • 如果老师最后没有总结一节课的重点的难点,你
是否会认为老师的教学方法需要改进? • 你所经历的课堂,是讲座式还是讨论式? • 教师的教鞭 • “不怕太阳晒,也不怕那风雨狂,只怕先生骂我
笨,没有学问无颜见爹娘 ……” • “太阳当空照,花儿对我笑,小鸟说早早早……”
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为试管苗提供满足生长的适宜环境条件。
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§2 ຫໍສະໝຸດ Baidu验基本操作
一.洗涤技术
(1)洗涤液的 配制
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(2)洗涤方法
A、新购买的玻璃仪器表面常附着有游离的碱性 物质,可先用0.5%的去污剂洗刷,再用自来水洗 净,然后浸泡在1%~2%盐酸溶液中过夜(不可 少于四小时),再用自来水冲洗,最后用无离子 水冲洗两次,在100℃~120℃烘箱内烘干备用。
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D、金属用品洗涤
金属用品一般不宜用各种洗涤液洗涤(新的 可以用热洗衣粉水洗净),需要清洗时,一 般用酒精擦洗,然后火焰干燥。 E、除菌过滤器用清水冲洗后,用洗液冲洗, 再用清水冲洗,最后用蒸馏水冲洗,晾干备 用。
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二.灭菌
(一)、灭菌工作是极其重要的。
首先应建立有菌和无菌的概念有菌的范畴:
有菌:凡是暴露在空气中的物体,至少其表面都是有菌的。 如植物的表面、超净工作台的台面,未处理的工具和手等。 无菌:高压高温处理(工具、器皿、培养基等)
物理或化学处理; 火烤后的物体; 健康的动植物不与内外部表面接触的组织 内部可能是无菌的(有时也有内生菌,但 不会影响培养,也不会污染)
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B、使用过的玻璃仪器的清洗
先用自来水洗刷至无污物,再用合适的 毛刷沾去污剂(粉)洗刷,或浸泡在0.5% 的清洗剂中超声清洗(比色皿决不可超声), 然后用自来水彻底洗净去污剂,用无离子水 洗两次,烘干备用(计量仪器不可烘干)。 清洗后器皿内外不可挂有水珠,否则重洗, 若重洗后仍挂有水珠,则需用洗液浸泡数小 时后(或用去污粉擦洗),重新清洗。
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1.3 消毒间
配备实验台、高压灭菌锅、排风灭火设备、细
菌过滤设备、干热消毒柜、电炉等。灭菌锅的选择 应根据不同的要求选择不同型号的灭菌锅。一般实 验室可选用小型的医用手提式高压灭菌锅,较大的 实验室可选用立式自动控制压力和温度的灭菌锅。 生产性的实验室可选用大型的卧式灭菌锅。
植物细胞工程实验室及基本操作
§1 实验室设置及仪器设备 §2 实验基本操作 §3 培养基的成分及其配制 §4 培养条件的选择
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§1 实验室设置及仪器设备
实验室是进行组培研究的主要场所,应能 满足清洗、培养基制备、储藏、无菌操 作、培养、鉴定等多方面的工作。
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培养室应配有培养架、转床、摇床、光照培养箱、 生化培养箱、自动控时器等。日光灯一般用40W,固定 在培养架的侧面或搁板的下面,每层有两支日光灯,距 离在20cm,光照强度为2000-3000lx。
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2.1鉴定室