乳鼠心肌微血管内皮细胞体外原代培养与鉴定的实验研究

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ｓｅｒｖｅｄｗｉｔｈｉｎｖｅ￣ｅｄｐｈａｓｅｃｏｎｔｒａｓｔｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ．Ｃｅｌｌｐｕｒｉｔｙｗａｓｅｖａｌｕａｔｅｄｂｙｉｍｍｕｎｏｃｙｔ０ｃｈｅｍｉｃａｌｓｔａｉｎｗｉｔｈ
ＺＨＡＮＧＹｉｎｇ－ｑｉａｎ，ＨＵＳｈｕｎｙｉｎｇ，ＣＨＥＮＹｕｎ — ｄａｉ（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＶａｓｃｕｌ０ｃａｒｄｉｏｌｏｇｙ，ＧｅｎｅｒａｌＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＰＬＡ，５３，Ｃｈｉｎａ）
・
６・
医药杂志２０１３年９月第２５卷第９期Ｍｅｄ＆ＰｈａｒｍＪＣｈｉｎＰＬＡ．Ｖｏ１．２５．Ｎｏ．９．Ｓｅｐ．２０１３
・
论著・
乳鼠心肌微血管内皮细胞体外原代培养与鉴定的实验研究
（ＣＭＥＣｓ）ｏｆｎｅｏｎａｔａｌｒａｔｓｗｉｔｈｈｉｇｈｉｄｅｎｔｉｉｆｃａｔｉｏｎｐｕｒｉｔｙａｎｄｓｕｒｖｉｖａｌｒａｔｅ．ＭｅｔｈｏｄｓＣＭＥＣｓｗｅｒｅｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍＳＤ
ｎｅｏｎａｔａｌｒａｔｓｂｙｄｉｇｅｓｔｉｏｎｗｉｔｈｃｏｌｌａｇｅｎａｓｅａｎｄｔｒｙｐｓｉｎａｎｄｄｅｐｕｒａｔｅｄｂｙｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌａｄｈｅｓｉｏｎ．Ｔｈｅｃｅｌｌｇｒｏｗｔｈｗａｓｏｂ—
张颖倩，胡舜英，陈韵岱
［摘要］目的探讨体外原代培养与鉴定纯度、成活率均较高的乳鼠心肌微血管内皮细胞（ＣＭＥＣｓ）的方法。方
法双酶消化法分离原代ｓＤ乳鼠ＣＭＥＣｓ并以差速贴壁法进行纯化，倒置显微镜观察细胞生长状态。Ⅷ 因子及ＣＤ３１抗体免疫细胞化学染色进行细胞鉴定。台盼蓝染色测定细胞存活率，并以ＡｎｎｅｘｉｎＶ＆ＰＩ双标记流式细胞术检测细胞凋亡率。结果倒置相差显微镜观察细胞呈管腔样、铺路石样生长， Ⅷ因子及ＣＤ３１抗体免疫细胞化学染色双阳性细此方法成功培养与鉴定出胞＞９５％，台盼蓝染色及ＡｎｎｅｘｉｎＶ＆ＰＩ双标记流式细胞术检测细胞存活率＞９５％。结论纯度及存活度较高的ＣＭＥＣｓ。［关键词】心肌；内皮，血管；细胞培养技术；大鼠，Ｓｐｒａｇｕｅ．Ｄａｗｌｅｙ［中国图书资料分类号］Ｒ－３３２［文献标志码］Ａ［文章编号］２０９５－１４０Ｘ（２０１３）０９￣００６．０４
［ＤＯＩ］１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．２０９５．１４０Ｘ．２０１３．０９．００２
ＰｒｉｍａｒｙＣｕｌｔｕｒｅａｎｄＩｄｅｎｔｉｉｃｆａｔｉｏｎｏｆＣａｒｄｉａｃＭｉｃｒｏｖａｓｃｕｌａｒＥｎｄｏｔｈｅｌｉａＩＣｅｌｌｓｏｆＮｅｏｎａｔａＩＲａｔｓ
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］０ｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｍｅｔｈｏｄｏｆｐｒｉｍａｒｙｃｕｌｔｕｒｅｏｆｃａｒｄｉａｃｍｉｃｒｏｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓ
ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓａｇａｉｎｓｔｆａｃｔｏｒⅧ ａｎｄＣＤ３１．Ｃｅｌｌｓｕｒｖｉｖａｌｒａｔｅｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙｃｏｕｎｔｉｎｇｔｙｐｒａｎｂｌｕｅｓｔａｉｎｉｎｇ．ａｎｄａｐｏｐｔｏｓｉｓｒａｔｅｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙｄｏｕｂｌｅｌａｂｅｌｌｉｎｇｏｆＡｎｎｅｘｉｎＶ＆ＰＩｓｔａｉｎｉｎｇｌｆｏｗｃｙｔｏｍｅｔｙ．ＲｅｒｓｕｌｔｓＣｅｌｌｇｒｏｗｔｈｓｈｏｗｅｄＬｕｍｉｎａｌ —