酶工程制药
酶工程技术在制药中的应用研究
酶工程技术在制药中的应用研究随着医学的不断发展,药物的研制也日益提高了人类的健康水平,其中酶工程技术在制药中起到了重要的作用。
本文将围绕酶工程技术在制药中的应用展开论述。
一、酶工程技术简介酶是一种生物催化剂,能够在体内促进反应的进行。
而酶工程技术则是指利用现代分子生物学和遗传工程的方法,对酶进行设计、改造、合成和利用的技术。
酶工程技术的出现,为制药行业带来了新的机遇和挑战。
二、酶工程技术在制药中的应用1. 酶制药酶制药是利用酶在体外合成药物或对药物进行标记的一种方法。
由于酶具有高效、选择性强、对环境友好等特点,因此在制药中被广泛应用。
举例来说,酶可以在体外合成抗癌药物、维生素、抗生素等有效成分,也可以对药物进行放射性标记,在体内追踪药物的分布和代谢过程。
2. 酶工程技术在酶药物研制中的应用酶药物是指利用特定酶来治疗疾病的药物,在制药中具有广泛的应用前景。
随着酶工程技术不断发展,越来越多的酶药物被开发出来。
例如,利用酶切割蛋白质能够治疗关节炎和癌症等疾病,在新药研究中扮演了重要的角色。
3. 酶反应过程中的控制与优化在酶反应过程中,酶的性质和反应条件等都会对反应过程产生影响,因此需要对反应过程进行控制和优化。
酶工程技术可以通过改变酶的性质或设计特殊的反应条件,来优化酶反应过程,提高反应效率和质量。
例如,利用反应工程学方法,可以对pH、温度、底物浓度等因素进行优化,从而提高酶反应的产率和效率。
4. 酶工程技术在纯化和分离过程中的应用在药物的制备过程中,纯化和分离是非常关键的步骤,影响着药物的质量和产率。
酶工程技术可以将药物在分离过程中与特定酶结合,通过酶的特异性去除其他无关成分,从而达到提高药物纯度和分离效率的目的。
三、酶工程技术在制药中的应用前景随着现代医学的不断进步,药物的精细化和个性化成为制药行业的重要趋势。
酶作为一种天然催化剂,具有高效、安全、环保等优势,可以满足药物制备的高效性和精细化的要求,在药物研究和制备中的应用前景广阔。
酶工程技术的研究及其在医药领域的应用
酶工程技术的研究及其在医药领域的应用一、本文概述随着生物技术的飞速发展,酶工程技术作为其中的重要组成部分,已经在医药领域展现出广阔的应用前景。
酶,作为生物体内的一类特殊蛋白质,具有高效、专一和温和的催化特性,因此被广泛用于医药、化工、食品等多个领域。
本文旨在探讨酶工程技术的最新研究进展,并重点分析其在医药领域的应用现状和发展趋势。
本文将对酶工程技术的基本原理和方法进行简要介绍,包括酶的来源、分离纯化、固定化以及酶反应器的设计等。
在此基础上,文章将重点论述酶工程技术在医药领域的多个应用方面,如药物合成、药物转化、药物分析和疾病诊断等。
通过具体案例和数据分析,展示酶工程技术在提高药物生产效率、降低药物成本、改善药物质量和提高疾病诊疗准确性等方面的积极作用。
本文还将对酶工程技术在医药领域面临的挑战和未来发展方向进行深入探讨。
随着生物技术的不断进步,酶工程技术的研究和应用将更加深入和广泛。
例如,新型酶的发现与改造、酶固定化技术的创新、酶反应器的优化以及酶工程技术在基因治疗和细胞治疗等新兴领域的应用等,都将成为未来研究的热点和方向。
酶工程技术在医药领域的应用已经取得了显著成果,并展现出广阔的发展前景。
本文将从多个角度全面分析酶工程技术在医药领域的应用现状和发展趋势,以期为相关领域的研究和实践提供有益的参考和借鉴。
二、酶工程技术的基础理论酶工程技术,作为一门应用生物技术的分支,其基础理论主要涵盖酶学基本原理、酶反应动力学、酶分子设计和改造以及酶固定化技术等方面。
酶学基本原理是酶工程技术的基石。
酶是生物体内具有催化功能的蛋白质,具有高度专一性和高效性。
酶通过降低反应的活化能来加速生物化学反应,使得原本难以进行的反应在温和条件下也能迅速进行。
了解酶的结构、催化机制以及影响因素,对于酶工程技术的应用至关重要。
酶反应动力学是研究酶催化反应速率与反应物浓度关系的科学。
通过对酶反应动力学的研究,可以了解酶催化反应的速度控制步骤、反应速率常数以及反应机制等,为酶工程技术的优化提供理论依据。
第六章酶工程制药
B、微囊型:将酶或细胞包埋在高分子半透膜中。通常为直径几微米到几百微米 的球状体。颗粒比网格型要小得多,比较有利于底物与产物的扩散,但反应条件要 求高,制备成本也高。 (4)选择性热变性法:将细胞在适当温度下处理使细胞膜蛋白变性但不使酶变 性而使酶固定于细胞内的方法。此法专用于细胞固定化。
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(四)、固定化酶的形状与性质
1、固定化酶的形状 (1)颗粒状:包括酶铢、酶块、酶片、酶粉。每种固定化方法均可制 备颗粒状,方法简单,比表面积大,转化效率高,适用各种反应器。如酵母酶 铢。 (2)纤维状:三醋酸纤维素用适当的溶剂溶解后与酶混合,再用喷丝 的方法就可制成酶纤维。比表面积大,转化效率高,但只适用于填充床反应器。 此外,纤维酶可以织成酶布用于填充床反应器。 (3)膜状固定化酶:可通过共价结合的方法将酶偶联在滤膜上。也可 用其他方法制膜酶。酶膜比表面积大,渗透阻力小,可用于酶电极,破碎后也 可用于填充床。目前已有木瓜酶、葡萄糖氧化酶、过氧化物酶、脲酶等酶膜。
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• (二)固定化细胞的制备 • 1、固定化细胞的定义 • 将细胞限制或定位于特空间位置的 方法,是第二代固定化酶。
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2、固定化细胞的特点 (1)无需进行酶的分离纯化; (2)细胞保持酶的原始状态,固定化过程中酶的回收率高; (3)细胞内酶比固定化酶的稳定性高; (4)细胞内酶的辅因子可以自动再生; (5)细胞本身含多酶体系,可催化一系列反应 (6)抗污染能力强。 3、固定化细胞的制备技术 (1)载体结合法制备技术:将细胞悬浮液直接与水不溶性载体相结合。载 体主要为阴离子交换树脂、阴离子交换纤维素、聚氯乙烯。 优点:操作简单,符合细胞的生理条件,不影响细胞的生长及酶 活性。 缺点:吸附容量小结合强度低。 (2)包埋法制备技术:与包埋酶法相同。 (3)交联法制备技术:由于所用交联剂戊二醛等对细胞有毒性,一般很少 用。 (4)无载体法制备技术:靠细胞自身的絮凝作用制备固定化细胞的技术。 23 通过助凝剂或选择性热变性的方法实现细胞的固定化。缺点是机械强度差。
酶工程制药
五、产酶菌株的制备和优化
1、产酶菌株的培养条件
2、菌种的分离筛选 3、菌种的变异诱导技术 4、原生质体诱导实际生产例子
1、产酶菌株的培养条件
(1)产酶促进剂 (2)影响酶产量的各种因素 (3)诱导剂和抑制剂
(1)产酶促进剂
在酶制剂的生产过程中,如果添加少量的某种物 质就能增加酶的产量,则这类物质就称为产酶 促进剂。 产酶促进剂多数是酶的诱导物、或者是表面活性 剂,常用的产酶促进剂有: (A)吐温-80 (B)脂肪酰胺磺酸钠 (C)聚乙烯醇 (D)糖脂 (E)乙二胺四乙酸(EDTA)
4、裂合酶 天冬氨酸-β -脱羧酶 β -酪氨酸酶 延胡索酸酶 谷氨酸脱羧酶 5、异构酶 氨基酸消旋酶 葡萄糖异构酶
(来源于细菌) (来源于细菌) (来源于细菌) (来源于细菌)
(来源于细菌、霉菌、酵母) (来源于细菌、放线菌
四、酶的生产菌种
1、对生产菌种的要求 (1)产酶量高、酶的性质应符合使用要求,最好是产 生胞外酶的微生物菌种 (2)不能含有致病菌,系统发育应该与病原体无关, 也不会产生毒素 (3)菌种稳定,不易产生变异退化,不易感染噬菌体 (4)能利用廉价的原料,发酵周期短,易于培养
第四章
酶工程制药
第一节 酶工程制药概论 第二节 药用酶的来源和生产
第三节 固定化酶工程
第四节 酶工程研究进展 第五节 酶工程应用实例
第一节 酶工程制药概论
一、酶的定义和分类 二、酶的特性 三、酶的来源 四、酶的生产菌种
五、产酶菌株的制备和优化
酶工程制药是将细胞或活细胞固定化后用于药 品生产的技术。 现代酶工程制药的基本技术主要包括酶和细胞 固定化、酶的非水相催化、酶法的手性药物合 成、酶的化学修饰技术
酶工程技术在生物制药中的应用
酶工程技术在生物制药中的应用酶工程技术在生物制药领域中起着非常重要的作用。
通过利用生物学和化学的知识,对酶进行研究和改造,可以提高酶的稳定性、活性和选择性,从而实现对生物药物的高效生产。
本文将探讨酶工程技术在生物制药中的应用,包括酶的筛选、优化、产物合成以及生产过程监控等方面。
首先,酶工程技术在生物制药中的第一个应用是酶的筛选。
酶的筛选是指从大量的天然资源中寻找具有所需活性和特性的酶。
传统的方法涉及到对大量的样本进行筛选和检测,但这种方法非常耗时、费力且效果不稳定。
而酶工程技术则通过构建酶库,将大量的酶候选体转化到不同的表达宿主中进行高通量的筛选。
通过高通量的筛选技术,可以筛选出拥有所需活性和稳定性的酶。
其次,酶工程技术在生物制药中的另一个应用是酶的优化。
酶的优化是指对酶进行改造,以提高其特定功能。
通过酶的定点突变、DNA重组技术和蛋白质工程等手段,可以改变酶的结构和性质。
例如,可以通过改变酶的底物结合位点、催化活性位点等来优化酶的催化效率和选择性。
此外,酶的改造还可以增加酶的稳定性,使其能够在高温、高压、酸碱等恶劣条件下工作。
通过酶的优化,可以提高生物制药中的产率和纯度。
另外,酶工程技术还在生物制药中发挥着关键的作用,例如酶的产物合成。
酶可以被利用来合成各种高价值的生物活性分子,如药物、抗生素、酶制剂等。
酶可以选择性地催化特定化学反应,从而在合成过程中减少无用副产物的生成,提高产物纯度和产率。
此外,酶还可以在困难的反应条件下催化反应,如不对称合成、催化剂的选择性还原等。
因此,酶工程技术在药物合成中具有广阔的应用前景。
最后,酶工程技术还可用于生产过程监控。
生物制药过程的监控是确保产品质量和一致性的重要手段。
酶工程技术可以通过构建报告基因来实现对酶的表达量、活性和稳定性进行监测。
通过监测这些参数,可以实时了解酶的工作状态和产物的合成过程,从而及时调整工艺参数,确保产品质量的稳定和一致性。
此外,酶工程技术还可以应用于注射剂的制备过程监控,如温度、pH值、搅拌速度等参数的监测和调节。
酶工程技术在制药中的应用
酶工程技术在制药中的应用酶工程技术是一种将生物反应器、生化工程等技术手段与酶学、生物工程等学科知识相结合的交叉学科。
在制药领域中,酶工程技术发挥了越来越重要的作用。
以下将从酶的选择、酶在制药中的应用等方面展开阐述。
首先,选择适合的酶非常重要。
酶工程技术不仅能够提高药物合成的效率,还能提高产物的纯度、降低废物的生成量,节约成本。
但是,要实现这些目标,选择适合的酶是非常关键的。
例如,如果制备生物类似物药物,有时需要选择一种特定的酶,以便保证在产生类似物化合物时的正确度和纯度。
而在选择酶的时候,需要考虑到酶反应的特异性、活性和稳定性等因素,以保证酶对反应物的选择性和效率。
因此,在酶的选择方面需要进行详细的研究和评估。
其次,酶在制药领域中的应用十分广泛。
酶可以被使用在药物的各个阶段,如合成中间体的制备、合成药物、纯化、以及对不需要的杂质去除等方面。
例如,在合成中间体的制备中,可采用酶催化合成的技术,以降低反应物的副反应和纯度的提高。
在药物的合成中,酶催化可大大提高反应的效率和选择性。
纯化步骤则可以将杂质去除,增加产物的纯度。
而对于某些复杂的药物,酶也可以在药物的研发中发挥积极的作用。
例如通过酶技术来研究药物代谢和药效,从而增加药物的安全性和疗效。
酶在制药领域中的应用还体现在高效和绿色生产中。
生物反应器中的酶系统可以使用和使废物产生量降低等方面减轻对环境的影响。
例如,在制备含水药物粉剂时,可使用酶技术将常规制剂的发散性和吸散性得到提高,从而提高药物在身体中的吸收率和效率。
最后,要注意酶的稳定性。
在使用酶的过程中,酶的稳定性和长期持久性对制药工业至关重要。
酶必须经常保持清洁,并且需要良好的维护和贮存的方法。
在酶反应进行时,酶所处的环境条件也要得到充分考虑。
因此,在酶使用的过程中,需要进行酶的稳定性测试,并就最优条件进行调整和修改。
综上所述,酶工程技术对于制药领域的作用越来越重要,随着科技的不断进步,酶工程技术的应用前景必将更加广阔。
酶工程技术在制药中的应用
酶工程技术在制药中的应用酶工程技术是将生物催化反应应用于工业领域的一种技术,具有高效、环保、低成本等优点。
在制药领域,酶工程技术的应用也越来越广泛。
一、酶工程技术在药物合成中的应用
酶在药物合成中的应用已经成为一种趋势。
它可以降低药物生产成本,提高药物纯度和效力,并避免传统合成方法中的化学毒性和环境污染。
例如,利用酶催化的方法可以合成具有治疗性质的药物,比如说去氧胆酸的合成和抗癌药物阿霉素的合成等。
二、酶工程技术在药物分离中的应用
在药物分离中,酶可以被用来制备极纯的药物。
同时,酶的高效性可以帮助加速药物分离过程。
例如,酶可以被用来去除药物中的杂质,提高药品的纯度。
三、酶工程技术在药物传递中的应用
酶工程技术在药物传递中的应用已经成为公认的一种有效方式。
酶可以被用来制作可以促进吸收的药物。
这些药物可以以不同的
方式输送到受体器官,从而提高药物的效力和生物利用度。
例如,通过合成可以被口服的酶,可以提高药物在肠道中的分解率。
四、酶工程技术在药物配方中的应用
酶工程技术在药物配方中的应用可以帮助保证药物品质,提高
药物的效力,并改善药物传递的过程。
在制药公司中,通过酶工
程技术,药品的配方可以被改进,进而制造出更加安全和高效的
药品。
总之,酶工程技术的应用对于现代制药业的发展有着非常大的
促进作用。
未来,伴随着技术的不断进步,酶工程技术在制药领
域中的应用也将不断拓展。
六酶工程制药
⒊固定化细胞的制备技术 ⑴载体结合法 是将细胞悬液直接与水不溶性的 载体 相结合的固定化方法。 ⑵包埋法 将细胞定位于凝胶网格内的技术。
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⑶交联法 用多功能试剂对细胞进行交联的固 定化方法。 ⑷无载体法 靠细胞自身的絮凝作用制备固定 化细胞的技术。
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⒌循环反应器(PCR) 部分反应液流出和新加入底物流入液混合,在进入反应床进行循环。⒍连续流动搅拌罐-超滤膜反应器(CSTR/UFR) 由连续流动搅拌罐反应器和超滤装置组合而成的反应器。它在连续流动搅拌罐的出口处装有半透膜。⒎其它反应器
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酶工程的研究内容
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提取分离法:动物、植物组织、器官、细胞生物合成法:动物、植物、微生物细胞化学合成法:实验室阶段,尚不成熟
二、酶的来源
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1、微生物种类多,酶的品种齐全;2、微生物繁殖快,生长周期短,产量高;3、微生物培养方法简单,原料来源丰富,价格低廉,产量高,经济效益高;4、微生物具有较强的适应性和应变能力,菌种易诱变,易于控制代谢方向;
1、对菌种的要求
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2、生产菌的来源
3、目前常用的产酶微生物
大肠杆菌生产谷氨酸脱羧酶用于测定谷氨酸含量生产天冬氨酸酶催化延胡索酸生成L-天冬氨酸生产苄青霉素酰化酶生成新的半合成青霉素或头孢菌素类生产β-半乳糖苷酶用于分解乳糖
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枯草芽孢杆菌生产α -淀粉酶、蛋白酶、葡萄糖氧化酶、碱性磷酸酯酶青霉菌生产葡萄糖氧化酶、青霉素酰化酶等
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分子印迹技术的基本原理
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(1)分子印迹酶①分子印迹酶的设计②催化活性基团的引入
酶工程在医药工业中实际实际应用
1.技术路线
固定化细胞法生产6-氨基青霉烷酸的技术 路线
2.工艺过程
• (1) 大肠杆菌培养
• (2) E.coli 固定化 • (3) 固定化E.coli反应堆制备
• (4) 转化反应 • (5) 6-APA的提取
青霉素酰化酶转化流程图
• 1. 酶反应器;2.pH凋节罐;3.热水罐;4.碱液罐; • 5. 热水循环泵;6.裂解液循环泵; 7.流量计; • 8. 自动pH计;9.自动记录温度计;10.反应器温
• 规模通气搅拌培养。培养结束后用高速管 式离心机离心收集菌体,备用。
E.coli 固定化
• 取E. coli 湿菌体100 kg,置于40℃反应 罐中,在搅拌下加入50 L 10%明胶溶液, 搅拌均匀后加入25%戊二醛5L,再转移 至搪瓷盘中,使之成为3~5cm厚的液层, 室温放置2 h,再转移至4℃冷库过夜;
• 酶促反应的专一性强,反应条件温和。酶 工程的优点是工艺简单、效率高、生产成 本低、环境污染小,而且产品收率、纯度 高,还可制造出化学法无法生产的产品。 以下重点介绍固定化酶技术在制药工业中 生产抗生素、核苷酸和氨基酸的应用。
• 1. 固定化细胞法生产6-氨基青霉烷酸 • 2. 固定化酶法生产5’-复合单核苷酸 • 3. 固定化酶法生产L-氨基酸
• 取下层水相,加1% g/mL活性炭于70℃搅 拌脱色 30 min,滤除活性炭;滤液用 6 mol/L盐酸调pH至左右,5℃放置结晶过 夜;次日滤取结晶,用少量冷水洗涤,抽 干,115℃烘2~3h,得成品6-APA。按青 霉素G计,收率一般为70%~80%。
2. 固定化酶法生产5’-复合单核苷 酸
• 4种5’-复合单核苷酸注射液可用于治疗白 血球下降、血小板减少及肝功能失调等疾 病。核糖核酸(RNA)经5’-磷酸二酯酶作用 可分解为腺苷、胞苷、尿苷及鸟苷的一磷 酸 化 合 物 , 即 AMP、 CMP 、 UMP , 及 GMP。
08酶工程制药
S1 酶工程制药概述
酶法制药 药用酶的生产
S1 酶工程制药概述
酶法制药 药用酶的生产
S1 酶工程制药概述
酶法制药 药用酶的生产
至2004年2月美国FDA批准的生物技术药物
产品 Reteplase,t-PA突变体 Rasburicase,尿酸降解酶
alteplase, tPA
urokinase,尿激酶
固定化酶的性质 固定化细胞
固定化酶的优点
3、反应条件易于控制:
可实现转化反应的连续化和自动控制
4、利用效率高:
单位酶催化的底物量增加,用酶量减少
5、比水溶性酶更适合于多酶反应
连续的多酶反应
从游离酶到固定化酶 固定化的方法 固定化酶的性质 固定化细胞
主要缺点: 固定化时,酶活力有损失
固定化的方法
从游离酶到固定化酶 固定化的方法 固定化酶的性质 固定化细胞
Genzyme Genzyme Genzyme Genentech Genentech
2003.4 粘多糖贮积病 1994.5 Gaucher's病 2003.4 Fabry's病 1993.12 囊性纤维化 2000.6 急性心梗
S2 固定化酶与固定化细胞
从游离酶到固定化酶 固定化的方法 固定化酶的性质 固定化细胞
Interferon -2b 干扰素-2b
商品名
Protropin SOMAVERT(PEG化)
Neupogen Neulasta (PEG化)
Roferon-A Pegasys (PEG化)
Intron A PEG-Intron (PEG化)
公司
Genentech Nektar/ Pfizer Amgen Amgen Roche Roche/Nektar
酶工程技术在生物制药中的应用
酶工程技术在生物制药中的应用生物制药是以生物技术为基础,利用生物系统合成药品的过程。
与传统化学合成的药品相比,生物制药更具有针对性,效果更加显著。
虽然生物制药市场前景广阔,但是生产过程复杂,生产成本高昂,制约了生物制药产业的发展。
酶工程技术在生物制药中的应用,可以解决这一难题,有效提高了生物制药的生产效率,降低了生产成本,促进了生物制药的发展壮大。
1. 酶工程技术的基本原理酶是一种生物催化剂,具有高效、高选择性和环境友好等特点。
酶工程技术是指通过改造酶基因序列,结构和功能的方式,使得酶的催化效率、反应条件适应性、稳定性、选择性等性能指标大幅度提高。
具体的酶工程技术包括基因工程、蛋白质工程、化学修饰等。
酶工程技术是基于对酶本质的研究,通过改造酶的结构和功能,提高其催化效率和生产效率,进而实现低成本、高效高产的生产过程,从而推动生物制药产业的发展。
2. (1)表达系统的优化针对不同的生物材料,如大肠杆菌、酿酒酵母、哺乳动物细胞等,建立不同的表达系统可以有效提高目标蛋白的表达效率。
例如,在大肠杆菌表达系统中表达重组蛋白,采用适当的宏观生理策略、优化培养条件以及合适的发酵设备,可以实现高密度、连续生产,从而大幅度降低生产成本。
(2)酶的改造与增效酶的改造与增效是酶工程技术的核心内容。
通过基因工程、蛋白质工程等手段改造酶的结构和性质,使其更好地适应生产环境,从而实现催化效率的提高,进而实现生产成本的降低。
例如,利用基因工程在酿酒酵母中表达次黄嘌呤酶,可以使得次黄嘌呤的产生率增加十倍,从而产量大幅度提高,效率大大增加。
(3)酶的固定化技术酶的固定化技术是将酶固定在载体上,形成稳定的酶液,进而实现酶的长时间耐高温、耐酸碱等特性。
这种技术可以大大提高酶的使用寿命,从而提高生产效率,并且可以节约原材料和降低生产成本。
例如,在生产青霉素时,将青霉素酰化酶固定在斜坡填充床上,可以增加设备的流量和生产效率,实现了生产青霉素的连续化和大规模化。
酶工程在制药领域的应用
酶工程在制药领域的应用
酶工程是一种利用生物酶的特异性和高效性进行化学反应的技术。
在制药领域,酶工程已经成为一种重要的技术手段。
以下是酶工程在制药领域的应用的几个方面:
一、酶制剂
酶制剂是指将酶固定在载体上,形成一种稳定的酶催化系统。
酶制剂可以在制药过程中用于催化反应,提高反应速率和选择性。
例如,葡萄糖氧化酶制剂可以用于制备葡萄糖酸钙,而α-淀粉酶制剂可以用于制备麦芽糖。
二、酶催化合成
酶催化合成是指利用酶催化反应,合成药物分子。
酶催化合成可以提高反应速率和选择性,减少副反应和废弃物的产生。
例如,通过酶催化合成可以合成头孢菌素类抗生素和阿司匹林等药物。
三、酶催化反应的控制
酶催化反应的控制是指通过调节反应条件,控制酶催化反应的速率和选择性。
例如,通过调节温度、pH值、底物浓度等反应条件,可以控制酶催化反应的速率
和选择性,从而得到高纯度的药物。
四、酶在药物代谢中的作用
酶在药物代谢中起着重要的作用。
药物在体内被代谢成代谢产物,其中大部分是通过酶催化反应完成的。
例如,肝脏中的细胞色素P450酶可以代谢许多药物,包括抗癌药物、抗生素和镇痛药等。
总之,酶工程在制药领域的应用非常广泛,可以提高药物的生产效率和质量,减少废弃物的产生,同时也可以为新药的研发提供技术支持。
(生物技术制药)酶工程制药-概述
乳酸脱氢酶 肝癌、急性肝炎、心肌梗塞,活力显著升高;肝硬化,活力 正常
端粒酶
癌细胞中含有端粒酶,正常体细胞内没有端粒酶活性
乳酸脱氢酶同工 心肌梗塞、恶性贫血,LDH1增高;白血病、肌肉萎缩,LDH2
酶 LDH
增高;白血病、淋巴肉瘤、肺癌,LDH3增高;转移性肝癌、
结肠癌,LDH4增高;肝炎、原发性肝癌、脂肪肝、心肌梗塞、
纤维蛋白,从而促使血液凝固,防止微血管出血。 纤维蛋白溶解酶的作用是溶解血块,为目前临床
上最新的一种酶制品,治疗血栓静脉炎、冠状动脉 栓塞等。 抑肽酶作为肽酶抑制剂,广泛应用于体外循环手 术,大剂量抑肽酶可明显减少心脏外科手术后的 渗血,消除因心脏外科手术后渗血而导致的死亡
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凝血酶
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栓溶酶类与心血管疾病
五、酶类药物的发展
1987年,第一种重组酶类药物Activase (Genentech公司,栓类药tPA)诞生,治疗由冠状 动脉阻塞引起的心脏病。
AdAgen(腺苷脱氨酶,阿达根):腺苷脱氨酶缺乏症 患者,T淋巴细胞因代谢产物的累积而死亡,从而引 起免疫功能缺陷。PEG-ADA酵素,可以减少多余腺 苷, 1990年被批准用于治疗缺乏腺苷脱氨酶而造成 的重症联合免疫缺陷病(SCID)。
Activase和AdAgen的批准,标志着酶类药物新时 代的到来,可以补充其他药物的不足。
生物化学反应依赖于催化,酶类药物在血液病、
遗传病、灼伤清除,传染性疾病、癌症等治疗方面
有广泛的前景。
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1 酶类药物治疗遗传性疾病
AdAgen用于治疗SCID,成为第一种成功治疗遗传性 疾病的酶类药物。
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目前至少治疗3种黏多糖储积病(MPS)的酶替代治 疗正在研究中及上市。黏多糖储积病是黏多糖代 谢的先天性缺陷,均由于缺乏特异性降解性溶菌 体酶所致,患者多以黏多糖尿、身材矮小及脂肪 软骨营养不良为特征。
酶工程技术在生物制药中的应用前景
酶工程技术在生物制药中的应用前景酶是一类高效、特异性的生物催化剂,广泛应用于生物制药领域。
酶工程技术的发展为生物制药提供了新的机遇和方法。
自20世纪70年代以来,酶工程技术在生物制药中的应用已经取得了显著的进展。
本文将探讨酶工程技术在生物制药中的应用前景,并介绍其在药物生产、疫苗制备和基因治疗中的重要作用。
一、药物生产领域1. 酶催化合成药物酶工程技术可以通过改造酶的结构和功能,使其具有更高的催化活性和稳定性。
这为酶催化的药物合成提供了可能。
通过酶工程技术,可以构建高效催化的酶反应途径,实现对复杂化合物的合成,提高生产效率和产品质量,降低成本。
2. 酶催化代谢途径优化酶工程技术可以通过改变细胞代谢途径来增加药物产量。
例如,通过改变酶的催化活性或选择性,可以调控代谢途径中的关键酶活性,从而增加目标产物的合成速率。
这种方法可以应用于产生抗生素、激素和维生素等药物的生产中,提高产量和纯度。
3. 酶工程在药物合成中的应用酶工程技术在药物合成中的应用已经取得了重要的突破。
通过对酶的特异性和催化机制的研究,可以设计和构建高效的酶催化合成途径,从而实现对药物的合成。
这种方法可以降低药物合成的成本,并提高药物的质量和稳定性。
酶工程技术还可以用于合成新药物,开发新的药物原料和中间体,从而推动新药物的研制和开发。
二、疫苗制备领域1. 酶催化疫苗制备酶工程技术可以应用于疫苗制备中。
通过改变酶的催化活性和特异性,可以提高疫苗的产量和纯度,增强其免疫效果。
酶催化的疫苗制备具有简单、高效、低成本等优点,可以应用于大规模生产和流行病防控。
通过酶工程技术的应用,可以开发出更加安全、有效的疫苗,提高免疫保护水平,预防疾病的发生和传播。
2. 酶工程在疫苗研发中的应用酶工程技术在疫苗研发中的应用也取得了重要的进展。
通过对病毒、细菌和寄生虫等病原体的酶特征和免疫机制的研究,可以设计和构建高效的疫苗研发策略。
通过改变酶的催化活性和特异性,可以增强疫苗的免疫原性和抗原特异性,提高其免疫效果。
酶工程技术在生物制药中的应用研究
酶工程技术在生物制药中的应用研究生物制药是指利用细胞、细菌等生物体来生产药品的一种新兴的制药领域,与传统的化学合成药物不同,生物制药具有高效、高选择性、低副作用等优点。
而酶工程技术作为生物制药领域中的一项重要技术,已经广泛应用于药品的研制、生产和质量控制中,成为推动生物制药发展的重要力量。
一、酶工程技术在生物制药中的应用酶工程技术是通过对酶的生理学、生化学性质的研究,利用基因工程和生物工程技术改造和优化酶的结构和功能,以达到设计和生产具有高效、高选择性和高稳定性的工业酶的目的。
在生物制药的研发过程中,酶工程技术具有重要的作用:1.提高药品的纯度和活性在生物制药中,药物的纯度和活性是关系到药品有效性和安全性的两个最基本的因素。
酶工程技术可以通过改变酶的结构和功能,使其更符合实际需求,从而提高药品的纯度和活性。
例如,目前生产小肠肽酶的工业用途是海藻酸盐作为活性载体,但是海藻酸盐不但昂贵,而且对环境有一定危害。
借助酶工程技术,研究人员可以改变小肠肽酶的载体属性,将其变为廉价、易生产、可再生的载体,从而提高药品的纯度和活性。
2.优化生产工艺在生产药品时,酶反应的条件是非常关键的,合理的反应条件可以提高产量和成本效益,同时减少环境污染。
然而,天然的酶反应条件常常不够理想,需要使用配套的反应条件来协助生产。
酶工程技术可以通过改变酶的结构和功能,使之更适合目标反应条件,从而优化生产工艺。
例如,目前生产青霉素的工艺需要使用真菌菌丝体来产酶,这个过程需要长时间的培养和处理,非常耗时耗力。
通过酶工程技术改变酶的受体结构,可以成功地将酶固定在沙漠土壤中,进而优化生产工艺。
3.提高药品的稳定性和耐受性在药品的使用过程中,稳定性和耐受性是另外两个非常关键的因素。
药物在使用中容易受到高温、高压、辐射等外部因素的破坏,从而影响其作用效果和使用寿命。
酶工程技术可以通过改变酶的结构和功能,改善其稳定性和耐受性,从而延长药品的使用寿命和效果。
酶工程制药实用技术
酶工程制药实用技术随着生物技术的迅速发展,酶工程制药技术已经成为制药行业的重要支柱。
酶是一种生物催化剂,可以加速各种生物化学反应,因此酶工程制药技术利用酶的特性,在制药工业中发挥重要作用。
本文将详细介绍酶工程制药技术的原理、实用技术及其在实践中的应用效果和未来发展前景。
一、酶工程制药技术简介酶工程制药技术是指利用酶或微生物细胞作为生物催化剂,在体外合成或改造药物分子的一种技术。
该技术运用酶的特性和催化效率,在制药工业中生产、修饰和优化药物,为药物研发和生产提供了新的途径。
二、酶工程制药技术原理酶工程制药技术的基本流程包括:1、酶的筛选和鉴定:从自然界中筛选出具有特定催化功能的酶,鉴定其性质和作用机理。
2、酶的克隆和表达:将筛选出的酶基因克隆到表达载体中,实现大量生产。
3、药物合成:利用酶的催化作用,在体外合成药物分子。
4、药物修饰和优化:通过酶的修饰作用,改善药物分子的药效和稳定性等性质。
5、产品分离和纯化:将合成的药物分子分离、纯化,以备临床应用。
三、酶工程制药实用技术1、固定化酶技术:将游离酶固定在特定介质上,以提高酶的稳定性和可回收性,降低生产成本。
2、酶的修饰和改造:通过基因工程技术对酶进行修饰和改造,提高酶的催化效率和药物分子的产量。
3、全细胞生物转化:利用完整微生物细胞进行催化反应,实现多步生物化学反应的连续进行。
四、酶工程制药技术应用案例分析以β-干扰素的生产为例,传统生产方法主要采用化学合成法,但该方法步骤繁琐、产率较低。
采用酶工程制药技术,可以在短时间内实现大量生产,且产物纯度高、安全性好。
具体应用如下:1、酶的筛选:从微生物中筛选出具有β-干扰素类似物生产能力的酶。
2、酶的克隆和表达:将筛选出的酶基因克隆到表达载体中,在大规模发酵罐中进行表达。
3、β-干扰素的合成和修饰:利用固定化酶技术和全细胞生物转化技术,实现β-干扰素的高效合成与修饰。
4、产品分离和纯化:通过高效液相色谱等分离纯化技术,将合成的β-干扰素进行分离、纯化,得到高纯度的产品。
《酶工程制药》PPT课件
本章重点: 产酶菌的要求; 酶和细胞的固定化;
本章难点:酶的人工模拟; 酶的化学修饰; 有机相的酶反应。
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“绿色健康,“酶”力无限
医药、洗涤剂、纺织、淀粉制糖、发酵、酒精、食品
(包括果蔬汁、啤酒酿造、谷物食品、蛋白水解、和功
能食品以及食用油脂)、饲料、皮革、造纸和化工等工
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使用戊二醛的酶固定化的交联方式:
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酶分子之间共价交联和与水不溶性载体共价结合酶分子;
(a)酶分子之间用双功能基团的化学交联试剂相互交联成水不溶性的固定化酶; (b)酶分子被结合到水不溶性载体上形成水不溶性的固定化酶
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(3)包埋法 将酶包埋在凝胶的微小空格内或埋于半透膜的微
固定化技术 水不溶性酶 (固定化酶)
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固定化酶:是被固定在某一有限空间内不再能自 由流动而仍有催化活性的酶。
优点: • 不溶于水,易于与产物分离; • 可反复使用,反应易于控制; • 可连续化生产; • 稳定性好。
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缺点: 固定化过程中往往会引起酶的失活。 增加了生产的成本 只能用于水溶性底物,而且较适用于小分子底物 胞内酶必须经过酶的分离纯化过程 不适宜用于多酶反应
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优点:此法制得的固定化酶,酶分子和载体间的 共价键较牢固,在介质组成发生改变和进行反应 时,都不会造成酶的脱落,因而可以反复使用。 缺点:制取固定酶较复杂,反应条件比较剧烈, 所以要制得酶活力很高的固定化酶较为困难。 制作方法:有重氮化法、烷基化和芳基化法、肽 法和戊二醛法等。
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第一个离子结合法固定化酶: DEAE — Cellulose 固定化过氧化氢酶
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第三节 酶的人工模拟
分子印迹酶模型
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第三节 酶的人工模拟
分子印迹酶的过程
1、选定印迹分子和功能单位,让它们之间发生互补 作用,形成印迹分子功能单位复合物。
2、用交联剂在印迹分子功能单位复合物周围发生聚 合反应,形成交联的聚合物。
3、从聚合物中除去印迹分子,得到对印迹分子具有 选择性的聚合物。
二、模拟酶的理论基础
稳定过渡态理论
酶先与底物结合,进而选择性地稳定某一特定 反应的过渡态(TS),降低反应活化能,从而加快 反应速度。模拟酶要和酶异养能够在结合底物的过 程中,通过底物的定向化、键的扭曲及变形来降低 反应的活化能。
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第三节 酶的人工模拟
二、模拟酶的理论基础
主客体化学和超分子化学
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⑶ 膜状固定化酶:可通过共价结合的方法将酶偶联 在滤膜上。也可用其他方法制膜酶。酶膜比表面积大, 渗透阻力小,可用于酶电极,破碎后也可用于填充床。 目前已有木瓜酶、葡萄糖氧化酶、过氧化酶、脲酶等 酶膜。
⑷管状固定化酶:又称酶管,利用管状载体如尼龙, 聚氯苯乙烯和聚丙烯酰胺,经活化后与酶偶联的酶管。 酶管的机械强度大,切短后可用于填充床反应器,也 可组装成列管反应器。目前已制备出糖化酶、转化酶、 脲酶等酶管。
五、固定化方法与载体的选择依据
2、载体的选择
为了工业化应用,最好选择工业化生产中已大量 应用的廉价材料为载体,如聚乙烯醇、卡拉胶、海藻 胶等。离子交换树脂、金属氧化物及不锈钢碎屑等都 是有应用前途的载体。此外,载体的选择要考虑底物 的性质,如当底物为大分子时,只能用可溶性固定化 酶,不能用包埋型;若底物不完全溶解或粘度大,宜 采用密度高的不锈钢屑或陶瓷材料制备固定化酶,以 便实现转化反应和回收固定化酶。
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第三节 酶的人工模拟
三、模拟酶的分类
根据Kirby分类法
单纯酶模型:以化学方法通过天然酶活性的模拟来 重建和改造酶活性。 机制酶模型:通过对酶作用机制诸如识别、结合和 过渡态稳定化的认识,来指导酶模型的设计和合成 单纯合成的酶样化合物:化学合成的具有酶样催化 活性的简单分子。
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第三节 酶的人工模拟
分子印迹酶
通过分子印迹技术可以产生类似于酶的活性中 心的空腔,对底物产生有效的结合作用,并可 以在结合部位的空腔内诱导产生催化基团,并 与底物定向排列。
性质:遵循米氏方程,催化活力依赖反应速度 常数。
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第四节 酶的化学修饰
线可能发生变化,其变化与酶蛋白和载体的带电性质 有关。 C、最适温度:一般升高,原因是固定化后空间结构更为 稳定。 D、米氏常数(Km):Km值均发生变化,有的增加很小 ,有的增加很大,但不会变小。 E、最大反应速度(Vm):变化很小或不定。
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第三节 酶的人工模拟
一、模拟酶的概念
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第三节 酶的人工模拟
三、模拟酶的分类
按照模拟酶的属性
主-客体酶模型 胶束酶模型4
第三节 酶的人工模拟
主-客体酶模型
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第三节 酶的人工模拟
胶束酶模型
模拟的胰凝乳蛋白酶侧链上接上羟基、咪唑基、羧基。
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C、热稳定性:热稳定性越高,工业化意义越大,热稳 定性高,可以提高反应温度和反应速度,提高效率。 D、对蛋白酶的稳定性:大多数天然酶经固定化后对蛋 白酶耐受力有所提高,可能的原因是由于空间位阻效 应是蛋白酶不能进入固定化酶内部。
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⑶ 酶学特性的变化:
A、底物专一性:对底物的专一性下降。 B、最适pH:最适pH可能变大,也可能变小;pH-酶活曲
Cram把主体与客体通过配位键或其他次级键形 成稳定复合物的化学领域称为主-客体化学。本质上 ,主-客体化学的基本意义来源于酶和底物的相互作 用,体现为主体和客体在结合部位的空间及电子排 列的互补。
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第三节 酶的人工模拟
二、模拟酶的理论基础
主客体化学和超分子化学
超分子的形成源于底物和受体的结合,这种结 合基于非共价键相互作用,如静电作用、氢键和范 德华力等,当接受体与络合离子或分子结合成稳定 的、具有稳定结构和性质的实体时,即形成了超分 子。它兼具分子识别、催化和选择输出的功能。
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2、固定化酶的性质
⑴ 酶活力的变化
酶经过固定化之后活力大都下降。其原因主要是酶活 性中心的重要氨基酸与载体发生结合,酶的空间结构 发生变化或酶与底物结合时存在空间位阻效应。包埋 法中还有底物与产物扩散阻力增大。
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⑵ 酶稳定性的变化
包括对温度、pH、蛋白酶变性和抑制剂的耐受程度。 固定化后,稳定性提高,有效寿命延长。其原因是限 制了酶分子之间的相互作用,阻止了其自溶,增加了 酶构型的牢固程度。 A、操作稳定性:是酶能否实际应用的关键因素。常 用半衰期表示,即酶的活力降为初活力一半时所经历 的连续操作时间。通常半衰期达到1个月以上时,即 具有工业应用价值。 B、贮藏稳定性:一般不能长期贮存,现做现用,否 则活力逐渐下降,若需长期保存,可在贮存液中添加 底物、产物、抑制剂和防腐剂,并与低温保存。
人工模拟酶就是指根据酶的作用原理,用各种方 法人为制造的具有酶性质的催化剂,简称人工酶或模 拟酶。它们一般具有高效和高适应性的特点,在结构 上比天然酶相对简单。
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第三节 酶的人工模拟
二、模拟酶的理论基础
稳定过渡态理论
主客体化学和超分子化学
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第三节 酶的人工模拟
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六、固定化酶的形状与性质
1、固定化酶的形状
⑴ 颗粒状:包括酶株、酶块、酶片、酶粉、每种固定 化方法均可制备颗粒状,方法简单,比表面积大,转化 效率高,使用各种反应器。
⑵ 纤维状:三醋酸纤维素用适当的溶剂溶解后与酶混 合,再用喷丝的方法就可制成酶纤维。比表面积大,转 化效率高,但只适合于填充床反应器。此外,纤维酶可 以织成酶布用于填充床反应器。