胚胎干细胞及其培养建系优秀课件
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最新3.3胚胎干细胞ppt课件
.优点
干细胞应用前景非常广阔，比如可用于细胞治疗、基 因治疗、药物筛检和毒性的检测、生物体发育机制研究 等。其中最吸引人的应用，是将干细胞分化成某一特定 的细胞、组织，甚至器官，通过移植，使之再建起受损 的组织，甚至器官。比如，将干细胞在体外分化为胰岛 素细胞，注入病人胰脏中，通过增殖，构成病人新的胰 岛组织，它就可以替代病人受损的胰岛组织，使依赖注 射胰岛素维持生命的病人得到根治。人们预言，干细胞 有可能用于治疗人类几乎所有的组织坏死性或退化性疾 病，它将是人类医疗史上的一次革命。
的发生. (二)临床表现 1,有1—6个月的服药史 2,部位全口牙龈,以上下前牙区较重 3,增生呈实质性,分叶状,可覆盖大部分或全部牙冠
(三)别诊断 1,遗传性牙龈纤维瘤病: 2,增生性龈炎 (四)治疗 1,停止服用引起牙龈增生的药物是对药物性
牙龈增生的最根本的治疗. 2,去除局部刺激因素 3,局部药物治疗 4,手术治疗 5,口腔卫生宣教
随着组织工程技术的发 展，通过ES细胞体外诱导分化，还 可以培育出人造组织器官，解决目 前临床上存在的供体器官不足和器 官移植后免疫排斥的问题。
（3）ES细胞也是研究体外细胞分化 的理想材料。
ES细胞在饲养层细胞上， 或在添加抑制因子的培养液中，能 够维持不分化的状态。
在培养液中加入分化诱导因 子,就可以诱导ES细胞向不同类型的 组织细胞分化.
分 – 能发育成完整个体 类 • 多能干细胞(成体干细胞)
– 能分化出动物体内的多种组织（造血干细胞）
• 专能干细胞
– 如成肌细胞、皮肤生发层细胞等 – 能分化出特定的（一种或两种）组织
.分别指什么, 分化程度, 潜能；核全能性；目前初始化
.应用
.
.分类
干细胞可以通过以下四个途径获得： (1)从体外培养的胚胎获得； (2)从早期流产的胎儿中获得； (3)从克隆的胚胎中获得； (4)从成体中获得。
干细胞应用前景非常广阔，比如可用于细胞治疗、基 因治疗、药物筛检和毒性的检测、生物体发育机制研究 等。其中最吸引人的应用，是将干细胞分化成某一特定 的细胞、组织，甚至器官，通过移植，使之再建起受损 的组织，甚至器官。比如，将干细胞在体外分化为胰岛 素细胞，注入病人胰脏中，通过增殖，构成病人新的胰 岛组织，它就可以替代病人受损的胰岛组织，使依赖注 射胰岛素维持生命的病人得到根治。人们预言，干细胞 有可能用于治疗人类几乎所有的组织坏死性或退化性疾 病，它将是人类医疗史上的一次革命。
的发生. (二)临床表现 1,有1—6个月的服药史 2,部位全口牙龈,以上下前牙区较重 3,增生呈实质性,分叶状,可覆盖大部分或全部牙冠
(三)别诊断 1,遗传性牙龈纤维瘤病: 2,增生性龈炎 (四)治疗 1,停止服用引起牙龈增生的药物是对药物性
牙龈增生的最根本的治疗. 2,去除局部刺激因素 3,局部药物治疗 4,手术治疗 5,口腔卫生宣教
随着组织工程技术的发 展，通过ES细胞体外诱导分化，还 可以培育出人造组织器官，解决目 前临床上存在的供体器官不足和器 官移植后免疫排斥的问题。
（3）ES细胞也是研究体外细胞分化 的理想材料。
ES细胞在饲养层细胞上， 或在添加抑制因子的培养液中，能 够维持不分化的状态。
在培养液中加入分化诱导因 子,就可以诱导ES细胞向不同类型的 组织细胞分化.
分 – 能发育成完整个体 类 • 多能干细胞(成体干细胞)
– 能分化出动物体内的多种组织（造血干细胞）
• 专能干细胞
– 如成肌细胞、皮肤生发层细胞等 – 能分化出特定的（一种或两种）组织
.分别指什么, 分化程度, 潜能；核全能性；目前初始化
.应用
.
.分类
干细胞可以通过以下四个途径获得： (1)从体外培养的胚胎获得； (2)从早期流产的胎儿中获得； (3)从克隆的胚胎中获得； (4)从成体中获得。
新ES胚胎干细胞课件
一些人认为，人类胚胎拥有某种 程度的权利，而胚胎干细胞研究 可能对胚胎造成了伤害或破坏，
这是伦理争议的焦点之一。
动物实验
胚胎干细胞研究通常需要进行动 物实验，这引发了关于动物权利
和福利的伦理问题。
如何解决伦理问题
制定严格的伦理准则
为确保胚胎干细胞研究的道德合理性，需要制定严格的伦理准则， 包括对胚胎来源、研究目的、动物实验等方面的限制和监管。
我们期待看到胚胎干细胞在更多疾病的治疗、药物筛选和研究等方面发 挥重要作用，为人类健康做出更大的贡献。
我们也期待看到胚胎干细胞在组织工程和器官移植方面的应用得到更广 泛和深入的研究和应用，为解决供体短缺和提高移植效果提供更加可靠 的途径。
THANKS
感谢观看
生产生物肥料和农药
胚胎干细胞可以用于生产生物肥料和农药，减少化学肥料和化学农 药的使用，提高农业生产效率。
其他领域的应用
环境保护
胚胎干细胞可以用于环境保护， 如修复生态环境、治理污染等。
能源领域
胚胎干细胞可以用于生产生物燃料 ，如生物柴油、生物氢等，减少对 化石燃料的依赖。
材料领域
胚胎干细胞可以用于生产生物材料 ，如生物塑料、生物纤维等，减少 对传统材料的依赖。
01
02
03
高度增殖能力
胚胎干细胞具有非常强的 增殖能力，可以在培养基 中不断分裂繁殖。
多向分化潜力
胚胎干细胞可以分化成为 各种类型的细胞，包括生 殖细胞、神经细胞、心肌 细胞等。
自我更新能力
胚胎干细胞还可以在特定 条件下自我更新，保持其 多向分化的潜力。
胚胎干细胞的分化能力
神经分化
胚胎干细胞可以分化成为 神经元和神经胶质细胞， 为神经系统Байду номын сангаас病的治疗提 供种子细胞。
这是伦理争议的焦点之一。
动物实验
胚胎干细胞研究通常需要进行动 物实验，这引发了关于动物权利
和福利的伦理问题。
如何解决伦理问题
制定严格的伦理准则
为确保胚胎干细胞研究的道德合理性，需要制定严格的伦理准则， 包括对胚胎来源、研究目的、动物实验等方面的限制和监管。
我们期待看到胚胎干细胞在更多疾病的治疗、药物筛选和研究等方面发 挥重要作用，为人类健康做出更大的贡献。
我们也期待看到胚胎干细胞在组织工程和器官移植方面的应用得到更广 泛和深入的研究和应用，为解决供体短缺和提高移植效果提供更加可靠 的途径。
THANKS
感谢观看
生产生物肥料和农药
胚胎干细胞可以用于生产生物肥料和农药，减少化学肥料和化学农 药的使用，提高农业生产效率。
其他领域的应用
环境保护
胚胎干细胞可以用于环境保护， 如修复生态环境、治理污染等。
能源领域
胚胎干细胞可以用于生产生物燃料 ，如生物柴油、生物氢等，减少对 化石燃料的依赖。
材料领域
胚胎干细胞可以用于生产生物材料 ，如生物塑料、生物纤维等，减少 对传统材料的依赖。
01
02
03
高度增殖能力
胚胎干细胞具有非常强的 增殖能力，可以在培养基 中不断分裂繁殖。
多向分化潜力
胚胎干细胞可以分化成为 各种类型的细胞，包括生 殖细胞、神经细胞、心肌 细胞等。
自我更新能力
胚胎干细胞还可以在特定 条件下自我更新，保持其 多向分化的潜力。
胚胎干细胞的分化能力
神经分化
胚胎干细胞可以分化成为 神经元和神经胶质细胞， 为神经系统Байду номын сангаас病的治疗提 供种子细胞。
胚胎分割和胚胎干细胞培养sun.pptx
形态特征:体积小.细胞核大,核仁明显。
功能特点:具有发育的全能性.可分化为成年动 物体内任何一种组织细胞.
.特点
胚胎干细胞的培养过程
内细胞团 （胚胎干细胞）
培养的关键问题：促
进胚胎干细胞的生长，
同时抑制胚胎干细胞 的分化
加饲养层 【或成纤维细胞】 进行培养
诱导因子：牛磺 酸、丁酰环腺苷 酸
.特点
胚胎分割的基本操作
选择良好的桑椹胚 或囊胚移入培养皿 中，用分割针或分 割刀片将其切开， 吸出其中的半个胚
注意: 胎注入透明带中或
将内细胞团均等分裂 直接移植给受体。
旁栏思考题：
内细胞团一般到囊胚阶段才出现，它是发育 为胚胎本身的基础细胞，其他细胞为滋养细胞， 只为胚胎和胎儿发育提供营养。若分割时不能 将内细胞团均等分割，会出现含内细胞团多的 部分正常发育的能力强，少的部分发育受阻或 发育不良，甚至不能发育等问题。
胚胎干细胞的应用前景
1）移植ES细胞修复坏死或
退化部位，治愈糖尿病、肝 (心)衰竭、_成__骨__不__良_等病症 2）ES细胞体外诱导分化， 可培育__人__造__组__织器官 3)ES细胞在牛黄酸、丁酰环 腺苷酸等诱导因子作用下可 向不同类型组织细胞 ____分__化__
胚胎干细胞核移植
把胚胎干细 胞核移植到去核 的卵细胞中，经 过胚激活、胚胎 培养、胚胎移植 后直接由受体完 成克隆动物的技 术；
取滋养层做DNA分析鉴定性别
SRY—PCR鉴定法：
用特异性引物扩增
SRY基因，能够产生出
扩增DNA片段的胚胎即
胚
为雄性，反之为雌性。
胎
再把确定性别的胚胎
性
移植到子宫。
别
鉴
功能特点:具有发育的全能性.可分化为成年动 物体内任何一种组织细胞.
.特点
胚胎干细胞的培养过程
内细胞团 （胚胎干细胞）
培养的关键问题：促
进胚胎干细胞的生长，
同时抑制胚胎干细胞 的分化
加饲养层 【或成纤维细胞】 进行培养
诱导因子：牛磺 酸、丁酰环腺苷 酸
.特点
胚胎分割的基本操作
选择良好的桑椹胚 或囊胚移入培养皿 中，用分割针或分 割刀片将其切开， 吸出其中的半个胚
注意: 胎注入透明带中或
将内细胞团均等分裂 直接移植给受体。
旁栏思考题：
内细胞团一般到囊胚阶段才出现，它是发育 为胚胎本身的基础细胞，其他细胞为滋养细胞， 只为胚胎和胎儿发育提供营养。若分割时不能 将内细胞团均等分割，会出现含内细胞团多的 部分正常发育的能力强，少的部分发育受阻或 发育不良，甚至不能发育等问题。
胚胎干细胞的应用前景
1）移植ES细胞修复坏死或
退化部位，治愈糖尿病、肝 (心)衰竭、_成__骨__不__良_等病症 2）ES细胞体外诱导分化， 可培育__人__造__组__织器官 3)ES细胞在牛黄酸、丁酰环 腺苷酸等诱导因子作用下可 向不同类型组织细胞 ____分__化__
胚胎干细胞核移植
把胚胎干细 胞核移植到去核 的卵细胞中，经 过胚激活、胚胎 培养、胚胎移植 后直接由受体完 成克隆动物的技 术；
取滋养层做DNA分析鉴定性别
SRY—PCR鉴定法：
用特异性引物扩增
SRY基因，能够产生出
扩增DNA片段的胚胎即
胚
为雄性，反之为雌性。
胎
再把确定性别的胚胎
性
移植到子宫。
别
鉴
胚胎干细胞(自己做的ppt)
（3）治疗人类胚胎干细胞群
细胞治疗是指用遗传工程改造过的人体细胞直接移 植或输入病人体内，达到治愈和控制疾病的目的。 ES细胞经遗传操作后仍能稳定地在体外增殖传代。 以ES细胞为载体，经体外定向改造，使基因的整合 数目、位点、表达程度和插入基因的稳定性及筛选 工作等都在细胞水平上进行，容易获得稳定、满意 的转基因ES细胞系，为克服基因治疗中导入基因的 整合和表达难以控制，以及用作基因操作的细胞在 体外不易稳定地被转染和增殖传代开辟了新的途径。
（2）无限扩增
理论上，ES细胞具无限扩增的特性。体外无
限扩增的特性是ES细胞研究和应用的一个前 提和关键。早期胚胎细胞具全能性，但其数 量很少，相对说其实际应用意义没有ES细胞 大ES细胞在体外适宜条件下，能在未分化态 下无限增殖，为ES细胞研究和应用提供了无 限的细胞来源。
（3）可操作性
在体外，可以对ES细胞进行遗传操作选择，
（2）生产转基因动物
用ES细胞生产转基因动物，可打破物种的界
限，突破亲缘关系的限制，加快动物群体遗 传变异程度，可以进行定向变异和育种。利 用同源重组技术对ES细胞进行遗传操作，通 过细胞核移植生产遗传修饰性动物，有可能 创造新的物种；利用ES细胞技术，可在细胞 水平上对胚胎进行早期选择，这样可以提高 选样的准确性，缩短育种时间。
胚胎干细胞
概念
发展史
ES的形态学及
生物学特征 应用前景
（一）定义
胎干细胞（embryonic stem cell， ESCs，简称ES或EK细胞。）胚 胎干细胞是早期胚胎（原肠胚期 之前）或原始性腺种分离出来的 一类细胞，它具有体外培养无限 增殖、自我更新和多向分化的特 性。无论在体外还是体内环境， ES细胞都能被诱导分化为机体几 乎所有的细胞类型。胚胎干细胞 研究在美国一直是一个颇具争议 的领域，支持者认为这项研究有 助于根治很多疑难杂症，是一种 挽救生命的慈善行为，是科学进 步的表现。而反对者则认为，进 行胚胎干细胞研究就必须破坏胚 胎，而胚胎是人尚未成形时在子 宫的生命形式。
胚胎干细胞(自己做的ppt)
养，以模拟体内环境。
培养器皿
02
选择适合胚胎干细胞贴壁生长的培养器皿，如培养瓶、培养板
等，并进行预处理以提高细胞贴壁率。
优化策略
03
根据细胞生长情况，调整培养基成分、培养密度、换液时间等，
以优化培养条件，提高细胞质量和数量。
细胞传代与冻存方法
传代时机
当胚胎干细胞生长至一定密度时，需要进行传代以避免细胞过度生长和分化。
02 胚胎干细胞的研究历程
早期研究阶段
起源与发现
胚胎干细胞的研究起源于20世纪 80年代，最初是从早期胚胎中提
取并培养出来的。
初步应用
早期胚胎干细胞研究主要集中在细 胞分化、胚胎发育等基础研究领域， 同时也探索了其在再生医学中的潜 在应用。
伦理争议
由于胚胎干细胞研究涉及人类胚胎 的使用和破坏，因此在其早期阶段 就引发了广泛的伦理争议。
再生医学
胚胎干细胞在再生医学领域具有广阔的应用 前景，可以用于构建人工组织或器官，替代 受损的组织或器官，实现人体损伤的修复和 再生。
药物筛选
利用胚胎干细胞分化得到的特定细胞 类型，可以进行药物筛选和毒性测试， 提高药物研发效率和安全性。
科学研究
胚胎干细胞是研究胚胎发育和细胞分 化的重要模型，有助于揭示生命起源 和细胞分化的奥秘。
特点
具有发育的全能性，能分化出成体动物的所有组织和器官， 包括生殖细胞；具有在体外培养无限增殖、自我更新和多向 分化的特性；无论在体外还是体内环境，ESCs都能被诱导分 化为机体几乎所有的细胞类型。
胚胎干细胞的来源
早期胚胎
核移植技术
通过体外受精或其他辅助生殖技术得 到的早期胚胎是获取胚胎干细胞的主 要来源。
法律法规限制
胚胎干细胞的研究及其应用课件
能的细胞。
干细胞的主要特征：
• 1.形态特征 • • 形态特征—圆形或椭圆形，核质比大； 增殖的缓慢性 • 2.增殖特征
•
增殖的自稳性（区别与肿瘤细胞的本质特征）
干细胞的分类
• 全能干细胞
按分化潜能
按发育状态
•胚胎干细胞 •成体干细胞
• 多能干细胞
• 专能干细胞
• 专能干细胞—只能分化成一种类型或功能密切相关的两 种类型的细胞。如上皮组织基底层的干细胞，肌肉中的 成肌细胞。
胚胎干细胞的形态和生化特征
形态特征
• 体积小、核大，有一个或多个核仁； • 胚胎干细胞克隆紧密堆积，无明显的界 限，形似鸟巢
胚胎干细胞的分离
酶消化后培养 免疫方法去除滋养层细胞
流式细胞仪分离法
胚胎干细胞系的建立过程
分离囊胚的内细胞群 与成纤维细胞共培养，ES 细胞非分化增殖 分离胚胎生殖腺脊细胞
基因转染
胚胎干细胞－－－－－－－－－－－－－－－胰岛素分泌细胞
研究意义
人胚胎发育机制及影响因素的研究。 用于药物机理及毒性实验的研究，减少人体 和动物的实验及临床研究。 将胚胎干细胞定向分化的细胞用于制造人体 细胞、组织和器官——治疗性克隆技术。
来源于干细胞的组织可能用于治疗的疾病
细胞类型 治疗的疾病
• 6、胚胎干细胞是从哺乳动物或人的早期胚胎中分离出 来的一类细胞，具有发育的全能性，它可进一步分化 发育成各种不同的组织细胞，。下图所示为干细胞的 培养过程，请问图中哪一段的细胞是全能干细胞： （ ） 人体 体细胞 细胞核 去核卵细胞
各种血细胞 血液组织干细胞 内细胞群 神经细胞等 神经组织干细胞等 A、囊胚 B、内细胞群 C、血液组织干细胞 D、各种血细胞
胚胎分割和胚胎干细胞的培养.ppt
5、使用的主要仪器：
实体显微镜和显微操作仪。
6、具体操作
用分割针或分割刀片将胚胎切开，吸出其中 的半个胚胎，注入预先准备好的空透明带中， 或直接将裸半胚移植给受体。
显 微 操 作 仪
实 体 显 微 镜
仪器
做DNA分 析性别 鉴定
胚胎 移植
透明带 滋养层
操作
内细 胞团
7、操作注意事项：
①对囊胚阶段的胚胎进行分割时，为什么 要将内细胞团均等分割? ②胚胎分割的份数越多，操作的难度会越 大，移植的成功率也越低的原因。
总结：
一、胚胎分割
（1）胚胎分割的概念、特点 （2）胚胎分割的理论基础 （3）胚胎分割操作过程 （ 4）胚胎分割的注意事项
二、胚胎干细胞
（1）什么是胚胎干细胞？ （2）胚胎干细胞的来源。 （3）胚胎干细胞的特性。 （4）胚胎干细胞的应用。
1、以下哪一种胚胎分割的移植效率最高 A
A.二分胚 C.八分胚 B. 四分胚 D. 十六分胚
2、进行胚胎胚胎移植时最迟选择哪一时期的胚胎 C A、卵裂期 B、桑椹胚 C、囊胚 D、原肠胚
3．下图是牛胚胎分割示意图。请据图回答下列问题： 桑椹胚 囊胚 (1)进行胚胎分割时，应选择发育到___________ 和___________ 时 期的胚进行操作。 内细胞团 囊胚腔 (2)①指的是___________ ，②指的是___________ 。 (3)通过胚胎分割产生的两个或多个个体具有的特点是 具有相同的遗传物质 ______________________ 。 (4)在对囊胚阶段的胚胎进行分割时， 胚胎分割要将内细胞团均等分割 应注意_______________________________ ， 以免影响胚胎的恢复和进一步发育 原因是_________________________________ 。
胚胎分割和胚胎干细胞培养PPT课件
复习检测
1、胚胎移植的优势是？ 2、胚胎移植的生理学基础是？ 3、胚胎移植的基本程序是？
精品ppt
1
精品ppt
2
一、胚胎分割
1、概念：采用机械方法将 早期胚胎切割成2、4或8等 份等，经移植获得同卵双胎 或多胎的技术。
2、特点：后代具有相同的遗 传物质，可看成无性繁殖或 克隆方法之一。
3、意义：提高胚胎的利用率
3）在体外培养的条件下，可增殖但不可分化。 对它可以进行冷冻保存，也可以进行遗传改造。
精品ppt
10
3.主要用途
• (1)治疗人类的某些顽症 • (2)培育出人造组织器官，用于器官移植 • (3)是研究体外细胞分化的理想材料
精品ppt
11
例题3
胚胎干细胞的特点是（ B ）
A.在形态上，表现为体积大，细胞核大，核仁 明显；在功能上具有发育的全能性
.讨论,
精品ppt
5
.时期
6、胚胎分割技术的缺陷
（1）刚出生动物的体重偏低，毛色和 斑纹还存在差异；
（2）采用胚胎分割技术产生同卵多胎 的可能性是有限的。
精品ppt
6
例题1
对于桑椹胚和囊胚的胚胎，用分割针或分割
刀将胚胎切开，吸出其中半个胚，移入预先
准备好的（ A ）中，或直接移植给受体。
A. 空透明带
B. 滋养层
C. 饲养层
D. 囊胚腔
精品ppt
7
例题2
以下对于胚胎分割的描述，正确的是（ D ）
A．只能对囊胚期细胞进行分割 B．囊胚阶段的胚胎分割份数越多，产生相同 基因型的后代个数越多 C．胚胎分割产生的后代个体表现型完全相同 D．内细胞团一般到囊胚才出现，胚胎分割时 最好将其均等分割，移植成功率才高
1、胚胎移植的优势是？ 2、胚胎移植的生理学基础是？ 3、胚胎移植的基本程序是？
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1
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2
一、胚胎分割
1、概念：采用机械方法将 早期胚胎切割成2、4或8等 份等，经移植获得同卵双胎 或多胎的技术。
2、特点：后代具有相同的遗 传物质，可看成无性繁殖或 克隆方法之一。
3、意义：提高胚胎的利用率
3）在体外培养的条件下，可增殖但不可分化。 对它可以进行冷冻保存，也可以进行遗传改造。
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10
3.主要用途
• (1)治疗人类的某些顽症 • (2)培育出人造组织器官，用于器官移植 • (3)是研究体外细胞分化的理想材料
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11
例题3
胚胎干细胞的特点是（ B ）
A.在形态上，表现为体积大，细胞核大，核仁 明显；在功能上具有发育的全能性
.讨论,
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5
.时期
6、胚胎分割技术的缺陷
（1）刚出生动物的体重偏低，毛色和 斑纹还存在差异；
（2）采用胚胎分割技术产生同卵多胎 的可能性是有限的。
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6
例题1
对于桑椹胚和囊胚的胚胎，用分割针或分割
刀将胚胎切开，吸出其中半个胚，移入预先
准备好的（ A ）中，或直接移植给受体。
A. 空透明带
B. 滋养层
C. 饲养层
D. 囊胚腔
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7
例题2
以下对于胚胎分割的描述，正确的是（ D ）
A．只能对囊胚期细胞进行分割 B．囊胚阶段的胚胎分割份数越多，产生相同 基因型的后代个数越多 C．胚胎分割产生的后代个体表现型完全相同 D．内细胞团一般到囊胚才出现，胚胎分割时 最好将其均等分割，移植成功率才高
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胚胎干细胞具有全能性，可以自我
更新并具有分化为体内所有组织的 能力。
Байду номын сангаас
胚胎干细胞的特点
全能性
无限扩增性 遗传稳定性
1.是生产转基因动物的高效载体
2.用于疾病治疗
胚胎干细胞用来克隆治疗技术路线
1.胚胎采集
分离具有发育全能性的ES 细胞, 要求选择合适阶段的胚胎。采卵时一 般取囊胚。
2.ICM的获取
从着床前的胚泡中分离内细胞团,是从 早期胚胎建立ES 细胞系的先决条件
直接分离法
免疫外科法
延迟着床法
3.内胚团的离散
分离ICM 时可用吸管将其 从滋养层细胞上转移到胰蛋白 酶微滴中,大约3～5 分钟ICM 细胞彼此解离。
4.胚胎干细胞的鉴定
常用的检测指标有碱性磷酸酶、 OCT24 、细胞特异性表面抗原 (SSEA2l) 等。
测定胚胎干细胞的体内分化能力 是通过制备嵌合体来完成的。
5.培养
有饲养层培养体系
胚胎干细胞是动物个体发生过程中具有全能性的原始细胞,维 持ES 细胞的不分化状态由细胞内一些结构蛋白和多肽因子进 行内源性调控。体外培养的ES 细胞,接种在饲养层细胞上培养 时可以长时间保持ES 细胞的原初特性。用作饲养层的细胞多
胚胎干细胞及其培养建系优秀 课件
干细胞 (stem cells, SC)
是一类具有多向分化潜能和
自我2复制能力的原始的未分化细
胞，是形成哺乳类动物的各组织 器官的原始细胞。
3
按分化潜能： 按发育状态：
→ 全能干细胞
胚胎干细胞
多能干细胞
成体干细胞。
单能干细胞
当受精卵分裂发育成囊胚时， 内层细胞团（Inner Cell Mass） 的细胞即为胚胎干细胞。
数是具有贴附能力的细胞(如成纤维细胞、子宫内皮细胞等)
无饲养层培养体系
饲养层细胞分泌的因子难以支持某些ES 细胞的增殖。ES 细胞
也可在无饲养层细胞的环境中建立和维持 ,培养液中添加L IF 因子或使用能分泌L IF 的细胞制备条件培养液均可
胚胎干细胞系不 仅是研究细胞分化 的模型,也是研究某 些前体细胞起源和 细胞谱系演变较理 想的实验体系。
更新并具有分化为体内所有组织的 能力。
Байду номын сангаас
胚胎干细胞的特点
全能性
无限扩增性 遗传稳定性
1.是生产转基因动物的高效载体
2.用于疾病治疗
胚胎干细胞用来克隆治疗技术路线
1.胚胎采集
分离具有发育全能性的ES 细胞, 要求选择合适阶段的胚胎。采卵时一 般取囊胚。
2.ICM的获取
从着床前的胚泡中分离内细胞团,是从 早期胚胎建立ES 细胞系的先决条件
直接分离法
免疫外科法
延迟着床法
3.内胚团的离散
分离ICM 时可用吸管将其 从滋养层细胞上转移到胰蛋白 酶微滴中,大约3～5 分钟ICM 细胞彼此解离。
4.胚胎干细胞的鉴定
常用的检测指标有碱性磷酸酶、 OCT24 、细胞特异性表面抗原 (SSEA2l) 等。
测定胚胎干细胞的体内分化能力 是通过制备嵌合体来完成的。
5.培养
有饲养层培养体系
胚胎干细胞是动物个体发生过程中具有全能性的原始细胞,维 持ES 细胞的不分化状态由细胞内一些结构蛋白和多肽因子进 行内源性调控。体外培养的ES 细胞,接种在饲养层细胞上培养 时可以长时间保持ES 细胞的原初特性。用作饲养层的细胞多
胚胎干细胞及其培养建系优秀 课件
干细胞 (stem cells, SC)
是一类具有多向分化潜能和
自我2复制能力的原始的未分化细
胞，是形成哺乳类动物的各组织 器官的原始细胞。
3
按分化潜能： 按发育状态：
→ 全能干细胞
胚胎干细胞
多能干细胞
成体干细胞。
单能干细胞
当受精卵分裂发育成囊胚时， 内层细胞团（Inner Cell Mass） 的细胞即为胚胎干细胞。
数是具有贴附能力的细胞(如成纤维细胞、子宫内皮细胞等)
无饲养层培养体系
饲养层细胞分泌的因子难以支持某些ES 细胞的增殖。ES 细胞
也可在无饲养层细胞的环境中建立和维持 ,培养液中添加L IF 因子或使用能分泌L IF 的细胞制备条件培养液均可
胚胎干细胞系不 仅是研究细胞分化 的模型,也是研究某 些前体细胞起源和 细胞谱系演变较理 想的实验体系。