蛋白质沉淀反应

四、实验步骤：
❖ （一）蛋白质的可逆沉淀 ❖ 蛋白质的盐析
2ml蛋白质 浓溶液
等体积饱和 浓硫酸溶液
过滤 沉淀
清夜
Байду номын сангаас硫酸铵粉末
加水
沉淀
观察现象
（二）蛋白质的不可逆沉淀
❖ 1.重金属离子沉淀蛋白质 重金属离子与蛋 白质结合成不溶于水的复合物。
❖ 取3支试管，加入蛋白质溶液1mL，加入 0.01%NaOH，再加2%硝酸银溶液1滴、 0.5%乙酸铅1滴和1%硫酸铜1滴，振荡试管， 观察生成沉淀的颜色和量。放置片刻，倾去 上清液，向沉淀中加入少量的水，沉淀是否 溶解？为什么？
❖ 蛋白质变性后，有时由于维持溶液稳定的 条件仍然存在（如电荷），并不析出。因 此变性蛋白质并不一定都表现为沉淀，而 沉淀的蛋白质也未必都已变性
三、实验材料与设备：
❖ （一）材料 ❖ 5ml鲜鸡蛋清，用蒸馏水稀释至100ml，搅拌
后用4-8层纱布过滤，新鲜配制。
（二）试剂
蛋白质溶液 取10ml蛋清，用蒸馏水稀释至 100ml，搅拌均匀后，用纱布过滤
❖ 3 生物碱试剂沉淀蛋白质
❖ 取2支试管，各加2ml蛋白质溶液，加1%的醋酸4~5 滴，分别滴加鞣酸和苦味酸溶液数滴，观察结果。
❖ 4.加热沉淀蛋白质
❖
❖ 注意事项
❖ 实验要求各种试剂的浓度和加入量必须相当 准确。
❖ 作业 ❖ 列表说明各实验的颜色变化，说明原因。
❖ 思考题:
❖ 1.为什么蛋清可作为重金属中毒的解毒剂
❖ （1）可逆的沉淀反应 蛋白质虽然沉淀析 出，但蛋白质分子的结构尚未发生显著变化， 除去引起沉淀的因素后，蛋白质的沉淀仍能 溶解于原来溶剂中，并保持其天然性质而不 变性。属于这类反应的有；蛋白质的盐析作 用或在低温下用乙醇（或丙酮）短时间作用 于蛋白质。提纯蛋白质时，常利用此类反应。
❖ （2）不可逆沉淀反应 此时蛋白质分子内 部结构发生重大改变，蛋白质常变性而沉 淀，不再溶于原来溶剂中。加热、重金属 盐、过酸、过碱、震荡、超声波或某些有 机酸都能使蛋白质发生不可逆沉淀反应。
浓蛋白溶液 鸡蛋清稀释2倍（1:1）方法同上 饱和硫酸铵，2%硝酸银，0.5%醋酸铅溶液 浓盐酸，浓硫酸，浓硝酸， 1%硫酸铜，0.1%醋酸，10%醋酸， 饱和氯化钠溶液，10%NaOH溶液，1%醋酸 10%鞣酸，饱和苦味酸溶液，0.01%NaOH
（三）设备
❖ 水浴锅 ❖ 滤纸，漏斗 ❖ 吸管 ❖ 试管及试管架 ❖ 玻棒
蛋白质的沉淀反 应
一、目的要求：
❖ 了解沉淀蛋白质的几种方法及其实用意义
二、实验原理：
❖ 在水溶液中的蛋白质分子由于表面生成水化 层和双电层而成为稳定的亲水胶体颗粒，在 一定的理化因素影响下，蛋白质颗粒可因失 去电荷和脱水，甚至变性，则以固体形式从 溶液中析出，这个过程称为蛋白质的沉淀反 应。
❖ 蛋白质的沉淀反应可分为两类。
❖ 2.强酸沉淀蛋白质
❖ 取3支试管，各加入10滴蛋白质溶液，分别沿管壁 加入等量浓盐酸，浓硫酸和浓硝酸10滴。观察两溶 液界面处白色环状蛋白质沉淀的生成。然后摇动试 管，蛋白质沉淀应在过量的盐酸和硫酸中溶解，在 含硝酸的试管中蛋白质沉淀不会溶解。（磷酸不能 使蛋白质沉淀，无机酸沉淀蛋白质的原因可能是蛋 白质颗粒脱水的结果，过量的无机酸可使沉淀在溶 解）
❖ 2、在等电点时，蛋白质溶液为什么容易发生 沉淀？
❖ 3.在蛋白质的可逆沉淀反应中，为何要用蛋 白质氯化钠溶液？
❖谢 谢