金线莲组织培养几种培养基的筛选
金线莲组培快繁条件的优化
金线莲组培快繁条件的优化肖小君;王曼丁;曾桢迦;唐正义【摘要】为优化金线莲快繁技术体系以批量生产金线莲,以其无菌苗为外植体,MS 为基本培养基,附加不同浓度的植物激素(6-BA,NAA,IBA)、蔗糖及活性炭等研究金线莲不定芽增殖、生根的影响,并进行移栽试验.结果表明:金线莲不定芽增殖培养以MS+ 6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+蔗糖40 g/L的效果较佳,生根培养以1/2MS+IBA 0.5 mg/L+NAA 0.3 mg/L+活性炭0.2 g/L的效果较好,较适移栽基质为珍珠岩∶泥炭土∶松树皮=1∶1∶1,成活率达98％.【期刊名称】《贵州农业科学》【年(卷),期】2016(044)002【总页数】4页(P12-14,19)【关键词】金线莲;组织培养;快速繁殖【作者】肖小君;王曼丁;曾桢迦;唐正义【作者单位】内江师范学院生命科学学院,四川内江641100;成都市树德中学(光华校区),四川成都610031;内江师范学院生命科学学院,四川内江641100;内江师范学院生命科学学院,四川内江641100【正文语种】中文【中图分类】S688.2金线莲（Anoectochilus roxburghii）为兰科开唇兰属多年生草本植物，多生长在海拔500～1 600m的阴湿森林或竹林内［1］。
其株型小，叶形优美，叶脉金黄色呈网状，除具有很高的观赏价值外，还有药王、金草、神药、乌人参等美称，可全草入药，是名贵珍稀的中草药［2］，具有广阔的开发利用前景。
金线莲的种子发育不全，由于其对生态环境要求严格，在野生自然条件下萌发率和繁殖率都极低［3］，加之近年来，野生资源不断遭到破坏性采挖，以致处于濒临灭绝之地［4］。
随着药效学和临床应用对金线莲研究的深入，对金线莲药用价值的认识进一步提高，导致金线莲的市场需求压力增大。
目前，虽然金线莲的组培快繁技术在各个环节的研究已有报道［5－8］，但不同基因型植物其繁殖体系还不稳定，工厂化、规模化的生产技术还有待进一步研究。
不同培养基组分对金线莲组培苗生长及生根的影响
金线莲(Anoectochilus roxburghii )为兰科(Orchidaceae )开唇兰属多年生草本植物,别名金蚕、金线兰、金线虎头蕉等,在福建、广东、广西、云南等多地均有分布[1]。
金线莲具有重要的药用价值,有“药用植物之王”的盛誉,在民间素有“金草”“神药”“乌人参”等美称[2-3]。
目前,关于金线莲组织培养方面的文献研究报道较多,如王雅英等[4]开展了金线莲不同外植体诱导愈伤组织的研究,结果表明以不定芽作为外植体诱导愈伤组织效果最佳;在金线莲的种苗工厂化生产中,则以顶芽或茎段为最适合的外植体,利于诱导丛生芽和遗传性状稳定[5-6]。
在金线莲的增殖生根阶段,郝丽丽等[7]比较了6-BA 、ZT 对金线莲增殖的影响,结果表明以ZT 效果要好一些;孟志霞等[8]比较了不同分裂素金线莲增殖的影响,结果表明6-BA 的增殖作用较KT 和ZT 作用要强;冉彩虹等[9]对台湾金线莲的生根试验中发现,采用IAB 与NAA 进行组合,诱导金线莲生根,其生根率可达92.53%。
在移栽驯化阶段,对于金线莲组培苗移栽前的瓶内炼苗,则室外要明显优于室内[10];而在移栽时,尽量选择苗高、粗壮且根系多的组培苗[11]等;移栽的基质可以菜园土与粗砂、木屑的混合基质[12],或苔藓、泥炭、腐殖土等基质[13]。
本试验在前期建立的金线莲快繁体系基础上,对培养基组分进行了调整试验,为优化金线莲快繁体系,提高金线莲组培苗的质量提供参考。
1材料与方法1.1试验材料以福建金线莲的茎段为外植体材料,建立金线莲组培快繁体系。
1.2试验方法1.2.1不同培养基成分对金线莲增殖苗生长的影响。
以MS 培养基为基础,依次分别对大量元素、微量元素、铁盐、有机成分进行加倍,共4个处理,分别为A 1、A 2、A 3、A 4。
在金线莲组培苗的增殖阶段,选择相同继代数且长势相近的增殖苗,将继代苗接种到相应的培养基上,每个处理接15瓶,每瓶接种6丛,重复3次,培养温度为(25±2)℃,光照时间为12h/d ,光照强度为2000~3000lx ,60d 后对金线莲的生长情况进行调查和统计。
花叶金线莲试管花卉培养基配方筛选
花叶金线莲试管花卉培养基配方筛选林兵;陈艺荃;樊荣辉;吴建设;叶秀仙【摘要】以花叶金线莲单芽为试验材料,研究不同基本培养基(MS、B5、改良MS)、蔗糖含量及杀菌剂益培隆浓度等关键因素对其株型控制和污染控制的影响,探讨适合于试管花卉的培养基配方,以期建立花叶金线莲试管花卉培养技术.结果表明:以改良MS为基本培养基,添加蔗糖20 g· L-1的培养基有利于花叶金线莲试管花卉的株型控制;培养基中添加1.5 mg· L-1益培隆有利于培养基污染控制;筛选出适宜花叶金线莲试管花卉培养的培养基配方为改良MS+蔗糖20 g·L-1+益培隆1.5 mg·L-1+琼脂粉6.0 g·L-1+食用色素0.02g·L-1,培养6个月,株型控制良好,观赏效果较佳.研究结果为花叶金线莲试管花卉开发应用提供了技术基础.【期刊名称】《福建农业学报》【年(卷),期】2018(033)012【总页数】5页(P1275-1279)【关键词】花叶金线莲;试管花卉;组织培养【作者】林兵;陈艺荃;樊荣辉;吴建设;叶秀仙【作者单位】福建省农业科学院作物研究所/福建省农业科学院花卉研究中心,福建福州350013;福建省农业科学院农业工程技术研究所,福建福州 350003;福建省农业科学院作物研究所/福建省农业科学院花卉研究中心,福建福州350013;福建省农业科学院作物研究所/福建省农业科学院花卉研究中心,福建福州350013;福建省农业科学院作物研究所/福建省农业科学院花卉研究中心,福建福州350013【正文语种】中文【中图分类】S68试管花卉是通过植物组织培养技术，在人工控制的无菌环境下，在玻璃或透明塑料容器等相对密封空间内培养迷你微型植物。
试管花卉植株小，长在精致的小试管或玻璃瓶内，便于管理与携带；与传统种植方式相比，是一种新颖、独特的花卉观赏、培植方式，满足了现代人的猎奇心理，具有广阔的发展前景[1-2]。
金线莲组织培养方法
金线莲组织培养方法金线莲组织培养方法一种药用金线莲组织培养快速繁殖方法，其特征在于包括如下步骤：１）培养基准备该步骤包括配制，分装，灭菌三步，其中配制：以１／２ＭＳ为基本培养基，每升添加６－苄氨基嘌呤２ｍｇ、α－萘乙酸１．０～１．５ｍｇ、芸苔素内酯０．０５ｍｇ、香蕉１００ｇ、琼脂６．５ｇ和蔗糖２５ｇ，混合后的培养基的ｐＨ值调节至５．６；分装：将配制后的培养基加热至琼脂完全溶解，趁热均匀地分装于干净的培养瓶中，稍凉后加盖；灭菌：将加入培养基的培养瓶及时放入高压灭菌锅内灭菌，灭菌条件为：１２１℃、１０５ｋＰａ下灭菌１５分钟，灭菌后及时取出培养瓶，冷却备用；２）外植体处理和接种该步骤分为两种情形，当采用自然生长的植株作为外植体时包括清洗，消毒，接种三步，其中清洗：选择自然生长、无病虫害的健壮植株，用加入少许肥皂粉的水清洗植株，后用流水冲洗２小时；消毒：在无菌条件下，去除叶片，将植株茎段在７５％的酒精中浸润１０秒后，放入１０％的次氯酸钠消毒１５分钟，用无菌水清洗６遍，沥干水分，放入无菌的培养皿中备用；接种：将消毒后备用的茎在无菌条件下切成长约１ｃｍ、含一个茎节的若干茎段，接种于准备好的培养基上，每瓶接１个茎段；当采用组培无菌苗时直接进行无菌接种，即在无菌条件下将组培无菌苗去叶，将茎切成长约１ｃｍ、含一个茎节的若干茎段，接种于准备好的培养基上，每瓶接１个茎段；３）培养该步骤将接好种的培养瓶移入培养室进行幼苗的诱导与培养，培养条件为：温度２５±２℃，光照时间每天１２小时，光照强度１５００～２０００ｌｘ，培养时间四个月左右，培养期间要勤检查，发现污染的要及时去除；４）移栽选苗高约６～８ｃｍ、具叶３张以上、茎基直径约２ｍｍ、发根２～３条的试管苗，炼苗４天后，洗净附着在植株上的培养基，并晾干洗涤水后移栽至１份菜园土＋２份粗砂＋１份木屑，或１份菜园土＋１份粗砂＋２份木屑的基质中。
2一种菌根真菌在金线莲栽培中的应用技术，采用小菇属4种真菌：石斛小菇(Mycena dendrobii)、紫萁小菇(Mycenaosmundicola)、兰小菇(Mycena orchidicola)、开唇兰小菇(Mycena anoectochila)中的任选一种或由其中任意两种或两种以上组成，其主要步骤及条件如下(所述比例均为重量百分比)：(1)菌根真菌的培养将上述的菌根真菌自低温保藏的斜面试管菌种活化后，分别转接于PDA平皿中，于25℃恒温培养12-20d，分别在菌落边缘打孔成菌片，并以小碎块接入液体培养基进行培养和发酵或接入固体培养基进行培养；(2)金线莲苗的培养芽增殖培养基：MS(Murashige and Skoog 1968)培养基，附加6-BA(6-苄基嘌呤1.2mg/L、NAA(萘乙酸)0.6mg/L；丛芽增殖培养基：MS为基本培养基，附加6-苄基嘌呤(BA)1.5mg/L，吲哚丁酸(IBA)0.6mg/L，玉米素(ZT)0.15mg/L；苗继代培养基：1/2MS，200g/L马铃薯提取液，25g/L蔗糖，琼脂9g/L，pH5.8；(3)菌根真菌与金线莲苗共生栽培(a)金线莲栽培基质蛭石∶砂子＝4∶1或森林腐殖土∶砂子＝6∶1或泥炭土∶砂子＝5∶1或泥炭土∶砂子∶蛭石＝4∶1∶2；(b)金线莲菌根共生栽培在硬质材料的托盘或盆中立体栽培，其容器的基部平铺一层金线莲栽培基质，其上按株行距栽培一株或一丛的金线莲苗，在苗根的基部放置少量粉碎的湿栎树(山毛榉科Fagaceae)树叶，其上再放以上备好的液体菌根真菌2ml或固体菌根真菌1-2g，使金线莲的根与菌接触，用栽培基质将苗覆盖2-3厘米厚，浇放置至室温的水；(c)栽培条件采用塑料薄膜温室、玻璃温室、露天栽培遮阳网遮阴，环境温度为18-25℃，光照量为正常日光量的1/3，照度2000Lx；(d)金线莲的收获收获时可剪取地上部分，也可一次性连根取出洗净栽培基质；阴干或60℃以下烘干；其中所述的菌根真菌的液体培养为：培养基的配制：葡萄糖2.5％；KH2PO4 0.15％；K2HPO4 0.1％；MgSO4 0.15％；天然物：麦麸3％(煮汁)，高压灭菌后分别接入上述真菌；培养条件：培养基pH5.6；三角瓶摇床培养瓶装量50％；转速120转/分钟；23℃培养30天；发酵罐培养接种量10％，其余参数同上；发酵培养结束时将发酵物用匀浆机打碎菌体及发酵物备用；其中所述的菌根真菌的固体培养为：培养基的配制：阔叶树锯末∶麦麸∶玉米粒＝1∶1∶0.5，加水量为原料的150-250％，高压灭菌后分别接入上述真菌，待菌丝从培养基顶部长入底部时取出备用。
多倍体金线莲一次性成苗及移栽
多倍体金线莲一次性成苗及移栽何碧珠;吴沙沙;邹双全;兰思仁【摘要】筛选多倍体金线莲一次性成苗的最佳培养基配方并探讨不同基质对移栽苗生长的影响.结果表明:MS+1.0 mg·L-16-BA+1.5 mg·L-1 NAA+150 g·L-1土豆+3%蔗糖+0.65%琼脂+0.15%活性炭为最佳一次性成苗培养基配方;经120 d培养即可获得生长、生根同步完成的组培瓶苗,具有长势一致(株高5~7 cm),茎节多且粗(茎粗1.19 cm),根系发达(每株2~3条根)等优势;最佳移栽基质为:泥炭土:碎松树皮=1:1(体积比),移栽苗成活率(92%)最高,长势最好,植株增高(1.53 cm)、增重(0.43 g)均达到最大,折干率(13.31%)相对较高.%Polyploid Anoectochilus roxburghii has bigger vegetative organs than its diploid plant, such as roots, stems, leaves, be-sides which it also has higher growth rate and organics synthesis rate, stronger resistance, and higher medicinal ingredients. In this study, one-step seedling formation culture medium and transplanting of polyploid A.roxburghii were studied. The results showed:MS+1.0 mg·L-16-B A+1.5 mg·L-1 NAA+150 g·L-1 potato. mud+3% sucrose+0.65% agar+0.15% activated carbon is the optimum culture medium for one-step seedling formation. Fully growing plants formed from one stem, 5-7 cm in height, 1.19 cm in stem di-ameter, and 2-3 healthy roots can be gained after 120 d′s cultivation. The optimum transplanting medium is matrix peat : bark=1 :1 (v : v) with 92% transplanting survival rate, 1.53 cm increase in height, 0.43 g increase in weight, and 13.31% dry discount rate. To solve transplanting problem of polyploid Anoectochilus roxburghii because of its larger vegetative organsand high growth rate, one-step seedling formation culture medium and transplanting of polyploid A. roxburghii were studied. The results showed that MS with 1.0 mg·L-16-BA, 1.5 mg·L-1 NAA,150 g·L-1 potato mud, 3% sucrose, 0.65% agar and 0.15% activated carbon was the optimal culture medium for one-step seedling formation. After 120 d cultivation, plants fully developed to 5~7 cm in height, 1.19 cm in stem diameter, and 2~3 healthy roots. The optimum transplanting medium was matrix peat:bark = 1 : 1 ( v : v) with 92%transplanting survival rate. Moreover, it resulted in 1.53 cm increase in height, 0.43 g increase in weight, and high dry discount rate at 13.31%.【期刊名称】《福建农林大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2016(045)005【总页数】7页(P522-528)【关键词】金线莲;多倍体;一次性成苗;移栽【作者】何碧珠;吴沙沙;邹双全;兰思仁【作者单位】福建农林大学园艺学院;福建农林大学海峡兰花保育中心;福建农林大学海峡兰花保育中心;福建农林大学园林学院,福建福州350002;福建农林大学海峡兰花保育中心;福建农林大学海峡兰花保育中心;福建农林大学园林学院,福建福州350002【正文语种】中文【中图分类】S567.23+9金线莲(Anoectochilus roxburghii)为兰科(Orchidaceae)开唇兰属(Anoectochilus)地生兰[1-2]，在民间素有“药王”、“神药”和“金草”等美称，主要用于治疗高血压、糖尿病、心脏病、肺炎、急慢性肝炎和肾炎等症，具有广泛的药用价值和保健作用[3]，市场需求量大，但在自然条件下结实率低、自身繁殖能力差、生长缓慢、抗性弱[4].多倍体植株具有根、茎、叶等营养器官较二倍体大,植株生长速率和有机物合成速率快，抗逆性增强及有效药用成分增加的优势[5].多倍体金线莲产业化生产对于满足市场需求具有重要意义.目前生产上所用的金线莲种苗均来源于组培繁育苗，需经增殖、壮苗和生根等多个阶段[6-7]，生长周期长，且瓶苗存在生长弱小、茎节徒长、炼苗时间长、栽培适应性差、缓苗速度慢和成活率低等问题，成为金线莲产量、有效成分积累以及产品品质提升的限制因子，增加了企业生产成本和种植难度，影响产业发展.一次性成苗方法在朱顶兰(Amryllis vittata)[8]和枣树(Ziziphus jujuba)[9]等植物组织培养中有报道过，具有成苗时间短和成本低等优点，但有关多倍体金线莲一次性成苗快速繁殖技术及在产业化生产中的应用尚未见报道.本试验以经鉴定的多倍体金线莲继代植株茎段作为外植体，进行一次性成苗培养基和移栽基质的筛选，研究结果对于缩短培养时间、降低培育成本、减少工作量、提高产品品质、增加有效活性成分和产量具有重要的实践意义.1.1 材料以福建永泰藤山自然保护区的野生金线莲(图1A)为试材建立无菌体系，在培养基中添加一定量的秋水仙素诱变多倍体植株.对变异植株的株高，茎节粗细程度、数量，叶片数量、大小、厚度等形态学特征进行初步筛选，经细胞学鉴定确定后，将四倍体无菌植株(图1B)用于一次性成苗繁育和移栽研究.1.2 多倍体植株一次性成苗的诱导在超净工作台上将高6～8 cm，具3～4个节间、3～4片叶的粗壮植株从丛生芽中选出，切成带一个茎节，长1～2 cm的茎段接种到经高压灭菌的一次性成苗培养基上，接种茎段有序平放在培养基上，以增加培养材料与培养基的接触面积及有效苗的形成.以MS为基本培养基，加入0.65%琼脂和0.15%活性炭，设计6-BA(0、1.0、2.0 mg·L-1)、NAA(0.5、1.0、1.5 mg·L-1)和有机添加物(3 mg·L-1花宝1号、150 g·L-1土豆泥、3 mg·L-1蛋白胨)三因素三水平的正交设计，共设1～9号处理，每处理接种7瓶，每瓶4个芽，重复4次.培养室温度(23±2) ℃，接种后第1周置于黑暗培养10 d，后光照培养11 h·d-1，光照度1 500～2 000 lx.培养120 d后对各组苗的生长情况进行记录，测定其增殖芽数、株高(用游标卡尺测定茎基部至最高芽顶端的长度)、茎粗(用游标卡尺测定茎中部直径)和生根数(每个处理所有植株根系总条数/植株总数).株高5～7 cm、根数>1.5条的植株为有效苗，有效苗/%=有效苗数/接种数×100.1.3 炼苗与移栽将一次性成苗培养基培养4个月的瓶苗(苗高6～8 cm，单株苗重1.05 g，具有2～3条根系，根长1.0～2.0 cm)移到自然光条件下炼苗(夏季用黑色遮荫网搭建炼苗棚)5～7 d后从瓶内取出，用自来水清洗根部附着的残留培养基，将清洗干净的小苗放入竹框中置阴凉处阴干至不滴水为止，根部用1%多菌灵浸泡消毒5～10 min后用于移栽.移栽基质选用泥炭、碎松树皮、蛭石、珍珠岩、椰糠、稻壳、细沙和水苔，按不同体积比混合(表1).移栽基质经过消毒后装入50孔穴盘(规格：5 cm×10 cm)中，挑选生长一致的瓶苗进行移栽，每种基质种植50株，移栽后浇足定根水.将移栽好的穴盘置于塑料大棚中，大棚光照度控制在3 000 lx左右，温度控制在25～28 ℃，日常管理中根据土壤干湿程度进行浇水.种植3个月后统计移栽成活率，把苗挖出、洗净、擦干，测量每株株高和鲜重，然后在80 ℃的恒温干燥箱中烘干至恒重，测量其干重，计算净增高、净增重和折干率.折干率%=(鲜种-干重)/鲜种×100.1.4 数据处理试验数据采用Excel和SPSS 19.0软件进行分析.2.1 不同培养基对金线莲一次性成苗培养的影响将带一个茎节，长1～2 cm的茎段接种到一次性成苗培养基中，接种40 d后茎节处萌发出1～3个芽，随后芽体生长，新叶伴随长出；培养3个月，植株长成具有3～4个节的小苗，在基部第1和2节处分布许多白色绒毛并长出根系；随着茎节不断生长，根系也逐渐变长，根颜色由白色转为深绿色，部分根系扎入培养基中；培养120 d可获得生长与生根同时完成且植株生长一致可直接进行移栽的健壮瓶苗.不同培养基一次性成苗的培养情况如图2所示.从表2可知：不定芽增殖倍数最大的是9号处理，培养120 d不定芽增殖2.91个(图2I)，其他依次为6、5、7、8、4、1、2和3号处理，长出有效芽较少，生长不一致(图2A～H)；株高和茎粗最大的是6号处理，其株高和茎粗分别为7.08、1.19 cm，其他依次为2、7、3、8、4、9、5和1号处理，有效芽较少，生长不一致导致株高和茎粗存在较大差异；生根数最多的是3号处理，培养4个月后生根2.21条，其他依次为6、2、5、4、1、8、9和7号处理.对表2中不定芽增殖数进行极差分析，从极差R的大小(表3)可以看出，3个因素对不定芽增殖数影响程度大小为：6-BA>有机添加物>NAA.由K的大小和不定芽增殖数可知，培养基的最优组合为2.0 mg·L-1 6-BA+1.5 mg·L-1 NAA+2.0 mg·L-1花宝1号.类似地，3个因素对株高影响程度大小为：有机添加物>NAA>6-BA.比较K的大小和株高可知，培养基较佳组合为1.0 mg·L-1 6-BA+1.5 mg·L-1 NAA+150 g·L-1土豆.3个因素对茎粗影响程度大小为：有机添加物>6-BA>NAA.比较K的大小和茎粗可知，培养基较佳组合也是1.0 mg·L-1 6-BA+1.5 mg·L-1 NAA+150 g·L-1土豆.3个因素对生根数影响程度大小为：6-BA>NAA>有机添加物.比较K的大小和株高可知，培养基较佳组合为0.0 mg·L-1 6-BA+1.5 mg·L-1 NAA+2.0 mg·L-1蛋白胨.2.2 3个因素对金线莲4个测量指标的效应检验和多重比较为进一步了解不同处理因素对一次性成苗不同考查指标的影响，以便找出更佳的一次性成苗培养基，对表2、3作进一步分析，进行各因素主体间的效应检验和多重比较，结果如表4、5所示.从表4可知：因素A对不定芽增殖数的影响达到极显著水平，因素B、C对不定芽增殖数的影响达到显著水平.从F的大小看出，3个因素对不定芽增殖数影响程度大小为：6-BA>有机添加物>NAA，其结果与极差R的比较结果一致.对影响不定芽增殖数的3个因素3个水平进行SSR检验，结果(表5)显示：在0.05水平上，因素6-BA的第1水平与第2、3水平存在显著差异，第2水平与第3水平的差异不显著；因素NAA和因素有机添加物的第3水平与第1、2水平存在显著差异，第1水平与第2水平的差异不显著.从表4可知：因素B、C对株高的影响达到极显著水平，因素A对株高的影响达到显著水平.从F的大小看出，3个因素对株高影响程度大小为：有机添加物>NAA>6-BA，其结果与极差R的比较结果一致.对影响株高的3个因素3个水平进行SSR检验，结果(表5)显示：在0.05水平上，因素6-BA的第2水平与第1、3水平存在显著差异，第1水平与第3水平的差异不显著；因素NAA和因素有机添加物3个水平间的差异极显著.从表4可知：因素C对茎粗的影响达到极显著水平，因素A、B对茎粗的影响达到显著水平.从F的大小看出，3个因素对茎粗影响程度大小为：有机添加物>6-BA>NAA，其结果与极差R的比较结果一致.对影响茎粗的3个因素3个水平进行SSR检验，结果(表5)显示：在0.05水平上，因素6-BA的第2水平与第1、3水平存在显著差异，第1水平与第3水平的差异不显著；因素NAA的第1水平与第2、3水平存在显著差异，第2水平与第3水平的差异不显著；因素有机添加物3个水平间的差异极显著.从表4可知：因素A、B对生根数的影响达到极显著水平，因素C对生根数的影响不显著.从F的大小看出，3个因素对生根数影响程度大小为：6-BA>NAA>有机添加物，其结果与极差R的比较结果一致.对影响生根数的3个因素3个水平进行SSR检验，结果(表5)显示：在0.05水平上，因素6-BA的第3水平与1、2水平存在显著差异，第1水平与第2水平的差异不显著；因素NAA的第3水平与第1、2水平存在显著差异，第1水平与第2水平的差异不显著；因素有机添加物的第1水平与第2、3水平存在显著差异，第2水平与第3水平的差异不显著.综合评价6-BA、NAA、有机添加物对不定芽增殖数、株高、茎粗和生根数的影响，对茎段培养4个月后诱导出的不定芽增殖数、株高、茎粗和生根数进行极差分析、4个测量指标的效应检验和SSR检验.结果表明：对不定芽增殖数影响程度大小为:6-BA>有机添加物>NAA，最优组合为2.0 mg·L-1 6-BA+1.5 mg·L-1NAA+2.0 mg·L-1花宝1号；对株高影响程度大小为:有机添加物>NAA>6-BA，最优组合为1.0 mg·L-1 6-BA+1.5 mg·L-1 NAA+150 g·L-1土豆；对茎粗影响程度大小为:有机添加物>6-BA>NAA，最优组合为1.0 mg·L-1 6-BA+1.5 mg·L-1 NAA+150 g·L-1土豆；对生根数影响程度大小为:6-BA>NAA>有机添加物，最优组合为0 mg·L-1 6-BA+1.5 mg·L-1 NAA+2.0 mg·L-1蛋白胨.一次性成苗的培养目标是有效芽数量多，茎节纤维多且粗壮，长势一致，根系粗壮且多，综合考虑这些指标，一次性成苗培养的最优培养基为MS+1.0 mg·L-1 6-BA+1.5 mg·L-1 NAA+150 g·L-1土豆+ 3%蔗糖+0.65%琼脂+0.15%活性炭.2.3 不同基质对金线莲移栽苗生长的影响从表6和图3可以看出，6(泥炭+碎松树皮)、1(水苔)和5号(泥炭+珍珠岩+蛭石)基质移栽苗的成活率均高于90%，且长势相对较好.6号基质移栽苗长势最好，叶片大、饱满，顶芽长出新叶，茎粗壮、较硬(图3F)，植株增高(1.53 cm)和增重(0.43 g)均达到最大，折干率(13.31%)相对较高；1号基质移栽苗虽长势较好，叶片大，有新叶长出，但基部叶片枯萎(图3A)，折干率(9.53%)低；5号基质移栽苗长势优良，叶片饱满，部分叶片发黄脱落，顶芽长出新叶，茎杆挺直.7号基质(泥炭+珍珠岩+稻壳)移栽苗与5号基质移栽苗的长势相当，7号基质加入稻壳对茎的生长有利，茎段纤维含量高，折干率最高，同时成活率高于85%.4(泥炭+珍珠岩+细沙)、3(泥炭+椰糠+蛭石)和2号基质(泥炭+椰糠+细沙)移栽苗的成活率均低于80%.其中，4和3号基质移栽苗的长势较差，基部叶片发黄掉落，茎杆细弱；2号基质移栽苗的长势最弱，生长现象不明显，大部分叶片脱落，叶片柔软，茎细小，净增高、净增重和折干率均最低.3.1 金线莲一次性成苗与分段成苗的差异金线莲分段成苗一般需经增殖培养和生根培养两个诱导过程才能完成，增殖培养需要120 d左右，生根培养需要30 d，为了增加增殖系数，激素用量比较大，从而使有效苗所占比例减少[10-15].分段成苗的植株生长弱小(单株重0.875 g)、茎节徒长、炼苗时间长(需30 d)、环境适应力差、缓苗速度慢、成活率低(60%～70%)、抵御病虫害能力差、连续生长时间短(大量存活仅60～90 d)，直接影响产量、品质和内含物的变化，增加生长成本和种植难度.一次性成苗从茎段开始培养到成苗、生根再到可移栽的时间只需120 d，一次性完成生长过程，在培养期间无需更换培养基，获得培养时间短(培养4个月后直接移栽)、扩繁系数高、植株生长一致、炼苗时间短(7～10 d)、适应性强、缓苗速度快(7～10 d)、病虫害少、茎粗(直径4 mm)、根系发达(3根以上)、叶片颜色深且绒毛状明显、叶脉金线明晰、连续生长时间长(2 a以上)的植株,培育时间缩短1/5，节约能耗30%，节约劳动力50%.金线莲分段成苗的繁殖系数一般为2.5～5.2[16-18]，而一次性成苗的增殖率虽然仅为2.55，但一次性成苗的有效成苗率、移栽成活率比前者高.从育苗成本上看，由于分段培养添加了大量激素，植株表现为茎细小、水分含量高、自身营养积累欠缺、苗体弱、根系发育不良，因此在规模化生产上要想提高成活率的有效方法是延长炼苗时间，分段成苗的炼苗时间需30～40 d[19]，而一次性成苗的炼苗时间仅为7～10 d.在生产实践中增加炼苗时间并不是提高移栽苗成活率的主要因素，更直接的因素是不定芽诱导培养基的合理构成及有机添加物的合理配比，才能使苗生长得更加健壮.3.2 金线莲一次性成苗培养基的选择兰科植物组织培养中常用的有机添加物都是一些成分较复杂的天然复合物，如土豆含有脂肪、蛋白质及少量的Ca、Mg、K等多种营养成分；蛋白胨含有机氮化合物、维生素和糖类物质；花宝一号含有N、P、K等丰富的矿质元素.这些有机添加物的使用有利于生根和壮苗.鉴于有机添加物在兰科植物生长发育中的作用，本试验在金线莲一次性成苗的培养基中分别添加了土豆泥、蛋白胨和花宝一号，随着有机添加物比例的增加促进了株高、茎粗、生根数和有效成苗率的提高.有机添加物在瓶苗培养过程中的效果依次为土豆泥、花宝一号、蛋白胨.金线莲一次性成苗培养综合考虑的是在同一空间同一时间内生长有效芽数多、生长健壮、长势一致、根系发达等指标，选择出最优的培养基为MS+1.0 mg·L-1 6-B+1.5 mg·L-1 NAA+150 g·L-1土豆泥+3%蔗糖+0.65%琼脂+0.15%活性炭，一次性成苗每个茎段成苗数2.55株，每株根数2.14条.此结果与江建铭[10]的“金线莲一步成苗中每个外植体增殖4.8株、每株根数2.5条”结果差异较大，可能由培养基成分构成及外植体接种方式不同引起.金线莲一次性成苗培养采用平放接种茎段的方式诱导有效芽.3.3 金线莲移栽苗和移栽基质的选择瓶苗的质量对移栽成活率的影响很大，移栽时要选择株高适中(6～7 cm)、茎粗壮、具2条以上根系的瓶苗进行移栽.若苗过小，根系发育不好，移栽后缓苗时间长，适应力差，抵抗病虫害能力差，容易死亡；苗过大，移栽后地上部分蒸腾作用大，遇高温天气时容易萎蔫.此结果与黄慧莲等[12]的研究结果相近.移栽时应选择株高5 cm以上、茎径0.18 cm以上、具2～4条根系、生长状况良好的苗，才能保证有高的成活率.金线莲属浅根性植物，根系不发达，生长在土壤表层，要求土质疏松、透气、有机质含量高等，且金线莲瓶苗生长在无菌、营养丰富的环境下，适宜外界环境的能力较差，移栽时基质的选择很关键.胥学峰[13]认为，单一基质(蛭石或木屑)较适宜金线莲移栽苗的生长，移栽成活率高达95%；吴坤林[14]认为，细沙、珍珠岩和泥炭按一定比例混合用于金线莲种植，成活率可达90%.不同移栽基质对金线莲成活率及生长的影响不同，这与基质构成、种植品种的不同有关.本试验结果表明，泥炭与碎松树皮按1∶1的体积比混合最适宜金线莲生长，成活率达92%，生长良好.泥炭保水能力好，但透气性差，易板结；而碎松树皮呈细块状，吸水性差，孔隙度大，二者结合互相取长补短，防止基质板结，保水透气性好.【相关文献】[1] 陈裕,林坤瑞.金线莲生长发育与光照强度关系[J].福建热作科技,1996,2(4):22-23.[2] 蔡文燕,肖华山,范秀珍.金线莲研究进展[J].亚热带植物科学,2003,32(3):68-72.[3] 江苏新医学院.中药大辞典[M].上海:上海科学技术出版社,1985:2008.[4] 马志杰, 胡宏友. 民间药材金线莲研究动态(综述)[J]. 亚热带植物科学, 2002, 31(S): 27-31.[5] 陶抵辉.植物多倍体的研究与应用[J].生物技术通报,2010(7):22-27.[6] 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不同培养基组分对金线莲组培苗壮苗生根的影响
一14一熟带农址科技2014，37(1)T】I opi c4l A j t i c“f tⅨ14￡$ci t．ce&T t ch．ot o，y@不同培养基组分对金线莲组培苗壮苗生根的影响邵果园1，邬玉芬2(1．浙江农林大学农业与食品科学学院，浙江临安311300；2．宁海县林特技术推广总站，浙江宁海315600)摘要：以金线莲组培苗为试验材料，筛选壮苗生根最适培养基，试验结果表明：合适的壮苗培养基为1／2M S+N A A l．0m g／L+B A0．2m g／L+G A。
0．5r ag／L；合适的生根培养基为1／2M S+1g／L+N A A l．0m g／L+ B A0．2m g／L+G A30．5r ag／L+活性碳1．0g／L。
关键词：金线莲；组织培养；壮苗生根中图分类号：S682．31文献标识码：A文章编号：1672—450X(2014)01—0014-02111e Eff ect of D i f f er ent C om ponent s0n St r engt heni ng and R oot i ng of A noect ocl n'l us r oxbt w s l n'i i n V i t ro SH A0G uo．yua nl．W U Y u．f e n921．School of A gr i cuhur e a nd Fo od Sci ence．Zhej i ang A gr i cul t ur e＆For es t r y U ni ver s i t y,Li n’an311300,C hi n a；2．N i nghai For est r y a nd Speci al t y T e chnol ogy-S pr ea d H ead off i ce，N i nghai315600，C hi naA bs t r act：Exper i m ent of A no ect o chi l us r oxbur ghi i i n vi t ro i ndi cat ed t ha t t he opt i m um m edi um f or s eed l i ng s t r engt heni ng i s I／2M S+N A A l．O m g／L+B A0．2m g／L+G A30．5m g／L w hi l e m edi um of1／2M S+l g／L+N A A l．0m g／L+B A O．2m g／L+ G A30．5m g／L+1．09／L of act i vat ed car b on f or r oo t i ng．K e y w or ds：A noect ochi l us r o xburghf f；t i s s u e cul t ur e；s eedl i ng s t r engt heni ng金线莲(A noect ochi l us r oxburghf i)，别名金线兰、金丝草等，兰科开唇兰属多年生草本植物n1。
不同培养基组分对金线莲组培苗生长及生根的影响
通讯，２０１４（５）：１２４—１２５．
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响研究。结果表明：增殖阶段，采用大量元素加倍，最有利于金线莲增殖苗的生长，增殖苗生长快，芽粗，而且比较整齐，叶片舒展、叶色深 绿；在生根时，最佳的香蕉粉用量为１００９，Ｌ，高生长快，根较粗，叶色深。 关键词金线莲；组织培养；生长；生根 中图分类号￥５６７．２３＇９ 文献标识码Ａ 文章编号１００７—５７３９（２０１５）２４—００８９—０２
２００９（２）：１７—１９．
得出安定区辣椒最佳施氮量为（Ｎ）３８９．１３ ｋｇ／ｌｌｍｚ，施磷 量（Ｐ２０５）７０２．３３ ｋｇ／ｈｍ２，施钾量（Ｋ２０）１４７．２５ ｋｇ／ｈｍ２，此时辣 椒产量预报值为５５ 比例为１：１．８：０．３８。 ４参考文献
４７９．５７
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现代农业科技２０１５年第２４期 壮苗时，可以通过培养基成分调整与外源添加物使用，较好 地实现组培苗的增壮。 ４参考文献
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金线莲组培
金线莲组培摘要目的建立金线莲快繁体系。
方法以茎段为外植体，开展了茎段不同部位、培养基、激素、有机物和活性炭对不定芽增殖、幼苗生长的影响研究，并进行了移栽试验。
结果外植体以不含顶芽和长根的中间段茎节为好；不定芽增殖最佳培养基配方为MS（或B5）+BA3.0 mg/L +NAA0.5～1.0 mg/L，两个月增殖倍数达5.0以上；壮苗最适培养基为1/2MS＋NAA3.0 mg/L＋6-BA 0.5 mg/L＋香蕉提取物20%（或椰子汁20%）；试管苗移栽适宜的基质为菜园土1份＋2～3 mm粗砂2份（或1份）＋木屑1份（或2份），3个月成活率均达100%，且生长良好。
结论采用上述方法，能实现金线莲幼苗的快速繁殖。
【关键词】金线莲；快速繁殖；增殖；生长；移栽金线莲Anoectochilus roxburghii（wall.）lindl为兰科开唇兰属多年生草本，别名金蚕、金线兰、金线虎头蕉等，是我国传统珍贵药材，素有“金草”“神药”“乌人参”等美称，在民间应用范围较广，广泛应用于风湿性关节炎、高血压病、糖尿病、肾病等疑难杂症的治疗和强身健体、病后体虚恢复等方面，在浙江、福建、台湾等省和东南亚地区被视为珍稀名贵药材，特别在台湾省更是备受青睐，被称为“药中之王”［1，2］。
金线莲种子微小，由未成熟的胚及数层种皮细胞构成，自然萌发率和繁殖率低，目前市场上货源主要来自于野生采挖，产品一直处于供不应求的状况。
近年来，随着对其药效学和临床应用研究的深入，对金线莲药用价值的认识进一步提高，其市场货源紧缺的状况更为严峻，野生资源也不断遭到破坏性采挖，以致于处于濒临灭绝之地。
本研究旨在采用组织培养技术，解决金线莲种苗来源，加快人工栽培，以保护金线莲野生资源、稳定市场供应。
现将有关实验结果如下。
1 材料与方法1.1 材料无菌繁殖体系的建立为浙江金线莲野生种源，其它实验为继代培养的不定芽及无根幼苗茎段。
1.2 无菌繁殖体系的建立取生长健壮、无病虫害的植株，去叶后放入低浓度的洗衣粉水中漂洗3～5 min，然后用流水冲洗30 min。
金线莲组织培养试验简报_孙瑶
C4
11.1 Ac 51.76 ABab 6.12 Aa 5.18 ABab
C5 11.5 Aabc 54.34 ABab 6.15 Aa 5.43 Bab
3 讨论
本试验中以金线莲的茎段为外植体进行诱导培 养时，用 NAA+ZT 组合在新芽数、茎节数、鲜重等指 标上均优于 NAA+6-BA 组合，表明 ZT 更适宜于金 线莲组织培养。增殖培养过程中，当 NAA 浓度为 0.5mg/L、6-BA 的浓度为 1.5mg/L 时增殖效果最佳， 浓度过低（＜1.5mg/L）或过高（＞1.5mg/L）都不利于 金线莲增殖。因此，在金线莲组织培养中，应根据取 材部位的不同而选择不同的激素组合及浓度，才能 达到最佳的培养效果。诱导培养中的 F1 处理和增 殖培养中 C3 处理的培养基配方一样，但结果不尽 相同，可能是诱导培养的外植体为商品无菌苗，而 增殖培养的外植体为经过诱导培养后的无菌苗，材 料的不同导致接种后茎节数和鲜重表现出差异。
1 材料与方法
1.1 试验材料
试验地点：供试茶园为杭州市农科院茶叶研究 所大清谷科研基地，30°19′N，120°08′E，海拔 60，黄壤土。供试茶树品种为 2 年生龙井 43，单行、3 株 / 丛种植，行距 1.5m，丛距 33cm。土壤基础理化性 质为 pH6.0，有机质含量 1.48%，全氮、有效磷、有效 钾含量分别为 1.4g/kg，15.63g/kg 和 290.9mg/kg。
表 4 增殖培养基对金线莲生长的影响
处理 新芽数 / 个 茎节数 / 节 鲜重 /g 繁殖系数
C1
12.9 Aa
60.48 Aa
5.38 Ab 6.05 Aa
C2
12.8 Aab
62.97 Aa
金线莲组培技术现状及发展趋势
金线莲组培技术现状及发展趋势金线莲是一种极具观赏价值的地被覆盖植物，其主要生长于华南等地区。
然而，由于野外生长条件的不稳定性和过度捕捞等因素，金线莲的数量越来越稀少。
因此，采用组培技术进行大规模繁育，以达到人工繁殖保护物种和满足市场需求的目的，成为保护金线莲和利用的重要手段之一。
本文将介绍当前金线莲组培技术的现状和发展趋势。
金线莲组培是指利用金线莲的组织片段，通过悬浮培养、愈伤组织诱导和再生，获得大量的快速繁殖植株。
该技术具有快速繁殖、优良品质、遗传稳定性等优点，已在金莲产业中得到广泛应用。
下面将从营养基质、激素配方、愈伤组织诱导、悬浮培养、再生和质量控制等方面介绍金线莲组培技术的现状。
1. 营养基质：金线莲在组织培养时需要适宜的营养基质。
目前使用最广泛的是MS，B5和WPM等培养基。
其中，MS培养基中含有13个离体元素，适用于多种植物的组织培养，但对金线莲的愈伤组织诱导和再生效果不是很好。
近年来，一些学者还尝试将MS培养基与其他基质进行混合使用，以提高金线莲组织培养的效果。
2. 激素配方：愈伤组织的诱导和再生需要添加适量的激素，其中最常用的是IAA, NAA, IBA, 6-BA等生长素。
其中，NAA和6-BA的配方组合最佳，能够有效促进愈伤组织的诱导和再生。
3. 愈伤组织诱导：金线莲的组织培养过程中，愈伤组织的诱导是关键步骤，会影响到后续培养过程的成效。
愈伤组织的诱导需要将金线莲的幼嫩叶片或茎秆，进行无菌化处理，然后在含有适量激素的培养基中进行诱导，通常需要在黑暗中进行培养。
在诱导过程中，应注意营养基质的浓度、激素的浓度、培养时间等因素。
4. 悬浮培养：悬浮培养是指将愈伤组织切碎后放入含有营养物质的液体培养基中，在搅拌的过程中进行培养。
悬浮培养可以增加愈伤组织的表面积，提高培养效率。
但是悬浮培养也容易引起细胞的凋亡和愈伤组织的变异。
5. 再生：再生是指通过组培将愈伤组织重新分化为根、茎、叶等组织，并最终形成植株的过程。
台湾金线莲组培生根苗栽培基质筛选试验
新复极差 多重 比较 ， 明腐 殖 土与 泥 炭土 间差 异 不显 著 ， 表 但 这 ２种基 质极显 著地优 于其他 ４种 基本 栽培 基质 ； 心 黄 土和火烧 土间差 异不显著 ， 极显 著优 于农 田土 和粗河沙 。
表 ２ 基本 栽 培 基 质 对 移栽 成 活 率 的 影 响
栽 培技 术 的进 一 步 研 究提 供 基 础 资料 。结 果表 明 ， 台湾 金 线 莲 的 最优 基 质 与 辅 助 材 料 分 别 为 泥炭 土与 树 皮 。
关键 词 ： 台湾金 线莲 ； 栽培 基 质 ； 辅助 材 料
中 图分 类 号
Ｑ ４ ． １ ．３ ９ ９７ ８ ７
文 献标 识 码
组织培 养 的方 式 生 产 种 苗 ， 关 生 产 技 术 已趋 向 成 熟 相
。。
。
２ 结果 与分析
２ １ 基本栽培 基质 与辅助材 料的初选 ． 从 各种 基本栽 培 基质对 台湾金线 莲生 根 苗移 栽 成活 率 的影 响 （ 表 ２ 可 见 ）
看出， 在农 田土 、 黄心 土 、 泥炭 土 、 殖 土 、 腐 火烧 土 、 河 沙 粗 ６种基 本 栽 培 基 质 中 ， 栽 成 活 率 最 高 的 为 腐 殖 土 ， 移 达 ８ ． ％ ； 次 为 泥 炭 土 ， ８ ． ％ ； 差 的 为 农 田土 ， ８８ 其 达 ７８ 最 仅
安 徽 农 学 通报 ， ｈ ｉ ｇｉＳｉＢ ｌ ２ １ ，６ ２ ） Ａｎｕ Ａ ｒ ｃ． ｕ１ ０ ０ １ （ ３ ． ．
台 湾 金 线 莲 组 培 生 根 苗 栽 培 基 质 筛 选 试 验
陈 宗 杰
（ 和 县 三 墩 经 营所 ， 建 漳 州 平 福 ３ ３０ ） ６７ ０
金线莲外植体的筛选及不定芽诱导的研究
金线莲外植体的筛选及不定芽诱导的研究冯亦平;张利平;王岩花;张学红【摘要】以金线莲(Anoectochilus roxburghii)试管苗的叶、茎段和茎片(厚约2mm)为外植体,对金线莲组织培养快繁技术进行研究.结果表明,茎片是其快繁的最佳外植体,诱导其产生愈伤组织的适宜培养基是:MS(大量元素减半,微量元素加倍)+6-BA4.0mg/L+ZT0.2mg/L+NAA0.5mg/L+0.7%琼脂+3%蔗糖;适合不定芽分化的培养基是:MS+6-BA4.0mg/L+NAA0.3 mg/L+0.7%Agar+3%蔗糖.%With leaves, stems and segments of Anoectochilus roxburghii as explants to study rapid propagation by tissue culture. The results showed that segments were the best explants, and the optimal culture medium for callus induction of segments was MS (half of mass elements, double in microelements) + 6-BA4.0 mg/L + ZT 0.2 mg/L + NAA 0.5 mg/L +0.7% Agar +3% sucrose; the culture medium for buds differentiation was MS + 6-BA 4.0mg/L + NAA 0.3mg/L+0.7% Agar+3% sucrose.【期刊名称】《种子》【年(卷),期】2009(028)010【总页数】4页(P19-22)【关键词】金线莲;外植体;茎片;快速繁殖【作者】冯亦平;张利平;王岩花;张学红【作者单位】山西农业大学,山西,太谷,030801;山西省太谷县林业局,山西,太谷,030800;山西省壶关县林业局,山西,壶关,047300;山西生物应用职业技术学院,太原,030031【正文语种】中文【中图分类】S567金线莲(Anoectochilus roxburghii)是兰科开唇兰属植物，又名金线兰、金不换、乌人参等。
金线莲组织培养几种培养基的筛选
生长，各项分化、生长指标都明显高于对照，其中 以添加 １０％ 马铃薯和 １０％ 香蕉的分化、生长最好； 其次为添加 １０％ 香蕉和 １０％ 马铃薯的，然而污染 率也随加入添加物而增加，幼苗分化、生长愈好的， 污染愈重。
１．４ 不同添加物壮苗培养基筛选
将幼苗转接到壮苗培养基上，培养基Ａｒ加入或 不加入 １０％ 马铃薯、１０％ 香蕉等添加物 ＋ 糖 ３％＋ＡＣ ０．２％；培养基均加入琼脂粉 ０．７％，ｐＨ５．８。培养条 件同上。试验设培养基中添加 １０％ 马铃薯，添加 １０％ 香蕉，添加 １０％ 马铃薯 ＋１０％ 香蕉，不添加马 铃薯和香蕉（对照）等 ４ 种处理，以筛选最佳添加 物壮苗培养基配方。
细弱 细 较粗壮 中等 细 粗壮 粗壮 中等
Selection on Culture Medium of Tissue Culture
for Anoectochus roxburghih
GAO yan, BAI Yan-bin, ZHAO Yun-xiang (Dehong Tropical Agriculture Research Institute of Yunnan, Ruili 678600, China) Abstract: The culture medium selection is carried out by asepsis stem segment with axilla bud of Anoectochus roxburghih.The culture mediums are made of Ar+6-BA 2.0mg*L-1+IBA 0.2mg*L-1+NAA 0.4mg*L-1+KT 0.5 mg*L-1+3%sugar+0.2% AC for multiplication, Ar+10%potato+10%banana+3% sugar+0.2% AC to get strong seedling, Ar+IBA 0.5mg*L-1+NAA 0.5mg*L-1+2%sugar+0.2% AC for rootage.The surviving percentage of seedling is over 90% on the medium of 7 shares humus soil, 2 shares sand and 1 share perlite. Key words: Anoectochus roxburghih; tissue culture; culture medium
不同产地金线莲组培快繁试验
不同产地金线莲组培快繁试验黄淑燕;荣俊冬;郑郁善【期刊名称】《西南林业大学学报》【年(卷),期】2014(000)005【摘要】以不同产地金线莲幼嫩茎段为外植体诱导丛生芽，通过不同培养基配方的筛选，建立不同产地金线莲组培快繁体系。
结果表明，不同产地金线莲最佳初代培养基分别是，福建永安产地为MS＋2.0 mg/L 6-BA＋0.2 mg/L NAA＋1.0 mg/L KT，台湾南投产地为MS ＋3.0 mg/L 6-BA＋0.2 mg/L NAA＋1.0 mg/L KT，广西玉林产地为MS＋4.0 mg/L 6-BA＋0.2 mg/L NAA＋1.0 mg/L KT；最佳继代培养基分别是，福建永安产地为MS＋2.0 mg/L 6-BA ＋0.2 mg/L NAA，台湾南投产地为MS＋3.0 mg/L 6-BA ＋0.3 mg/L NAA，广西玉林产地为MS ＋2.0 mg/L 6-BA＋0.2 mg/L NAA；在壮苗培养阶段，使用外源添加物蛋白胨后，不同产地金线莲外植体苗的生长状况在不同程度上得到了改善，最佳生根培养基分别是，福建永安产地为1/2MS ＋1.5 mg/L NAA ＋0.5 mg/L IBA＋2.0 mg/L ABT1，台湾南投产地为1/2MS ＋0.5 mg/L NAA＋0.5 mg/L IBA，广西玉林产地为1/2MS ＋0.5 mg/L NAA＋1.0 mg/L IBA＋1.0 mg/L ABT1，同时添加1.5 g/L Ac；炼苗移栽基质V （蛭石）∶V（泥炭土）＝1∶1，移栽生根率均达90％以上。
【总页数】5页(P64-68)【作者】黄淑燕;荣俊冬;郑郁善【作者单位】福建林业职业技术学院，福建南平353000;福建农林大学工业原料林研究所，福建福州350002;福建林业职业技术学院，福建南平353000【正文语种】中文【中图分类】S723.1【相关文献】1.金线莲组培快繁与移栽试验研究 [J], 陈芝华;胡启灿2.不同产地金线莲根茎和叶中多糖含量对比 [J], 陈晓兰;黄丽英;黄丽萍;吴萍萍;王美华3.单糖标准品的选择和不同试验产地金线莲中多糖含量分析 [J], 林守二;黄丽英;吴兴明;陈瑜;黄庆佐;黄冰兰4.福建金线莲和台湾金线莲的组培快繁技术 [J], 陈永快;林一心;邹晖;林江波5.不同产地和不同环境生长的金线莲的ISSR遗传特性分析 [J], 赵会贤;黄宛祯;黄丽英因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
不同因素对金线莲组织培养的影响
不同因素对金线莲组织培养的影响植物组织培养是一种通过营养基和激素控制植物组织增殖和分化的技术，已经广泛应用于植物繁殖、育种和生产等领域。
金线莲是一种草本植物，在组织培养方面也受到了广泛的研究。
不同的因素对金线莲组织培养的影响有很多，如下所述。
1. 植物激素植物激素是影响金线莲组织培养的主要因素之一。
不同的植物激素对金线莲的组织生长和分化有着不同的作用。
研究表明，金线莲的愈伤组织和生长点可以被不同的植物激素诱导分化产生根、茎、叶等组织。
例如，NAA（萘乙酸）和IBA（3-吲哚丁酸甲酯）可以促进根的生长和发育，而6-BA（6-苯基腺嘌呤）可以增加叶片和茎的分化。
2. 营养基质成分金线莲组织培养的营养基质成分也会影响组织营养生长和分化。
一般来说，金线莲需要碳源、氮源、磷源和微量元素等营养物质来促进组织生长和分化。
不同的营养基质成分对金线莲组织营养生长和分化的影响差异很大，例如MS培养基和B5培养基能够促进金线莲愈伤组织的生长和分化，但是不同的质量浓度以及物质组成都会对其产生影响。
3. 温度、光照和湿度温度、光照和湿度也是影响金线莲组织培养的重要因素。
温度对植物代谢、生育和生长发育等方面都有着巨大的影响。
光照对植物的光合作用、重要物质的生成等方面都有着影响。
湿度对植物的蒸腾作用、养分的吸收都有影响。
因此，金线莲的组织培养需要在合适的温度、光照和湿度条件下进行。
例如，金线莲在25摄氏度下生长和分化的效果最佳。
4. 培养时间和培养方法金线莲的组织培养时间和培养方法也是影响其生长和分化的重要因素之一。
不同的培养方法可以促进金线莲愈伤组织的生长、分化和再生能力。
常用的培养方法包括愈伤组织法、种子培养法、叶片培养法等。
而不同的培养时间则会影响组织的生长发育和产量。
综上所述，不同的因素对金线莲组织培养的影响十分重要。
这些因素相互作用，最终的组织培养结果也会受到这些因素的共同影响。
因此，在进行金线莲组织培养时，需要综合考虑这些因素，进行合理的组合和调整，才能获得更好的增殖和分化效果。
植物组培过程中培养基的筛选方法
植物组培过程中培养基的筛选方法在建立一个新的实验体系时，为了能研制出一种适合的培养基，最好先由一种已被广泛使用的基本培养基(如Ms培养基或B5培养基)开始。
当通过一系列的实验，对这种培养基做了某些定性和定量的小变动之后，即有可能得到一种能满足实验需要的新培养基，选择最佳培养基。
常用试验方法主要有单因子试验、多因子试验及广谱实验等。
一、单因子试验在单因子试验中．由于培养基中其他成分都维持在一般水平上，所以只变动一个因子，就可以找出这一因子对试验的影响和影响的程度。
例如Ms基本培养基的其他成分和用量都不变，只变动NAA用量对某一培养物生根的影响，这种只研究一个因素的试验就是单因子试验。
生物学试验不同于物理学或化学试验，最显著的差别是在生物学试验中必需设置对照组与试验组，试验组可以有一组或几组，随试验的复杂性而设置，对照组也可能有一组以上。
试验中要求对照组与试验组中的试验个体，即植物组织块或其他培养物，必须在遗传性、生理状态、前培养条件等方面，尽可能完全一致。
以保证试验结果是来源于试验因子，而不是由于试验材料的不一致导致的。
试验中各处理一般都要设有一定的重复，以取得可靠的试验结果。
随试验规模和要求不同，大多每个项目要有4—10瓶，每瓶至少3块培养物或3丛小幼苗。
二、多因子试验对培养基中两个或两个以上因素进行研究的试验称为多因子实验，试验可采用完全试验方案，也可选用正交设计方案，完全试验方案具有均衡完全的特点，各个因子的每个水平都相互搭配，构成了所有可能的处理组合，如研究NAA和6—BA的最佳浓度组合，每个因子各设5个浓度水平(0，0.5，2.5，5，10mg／L)，这两种因子各种浓度的所有组合，就构成了一个具有25项处理的试验见表3—3。
完全试验方案试验因子越多，处理数越多，试验越复杂，消耗的精力、物力越多。
为了减少试验处理，但又能准确全面地获得试验信息，通常采用正交试验。
例如，采用正交设计，在使用此表时就可以安排4个因子，3种水平的试验，一共做9种不同搭配的试验，其结果相当于做了27次种种搭配的试验。
金线莲组织培养几种培养基的筛选
金线莲组织培养几种培养基的筛选
高燕;白燕冰;赵云翔
【期刊名称】《热带农业科技》
【年(卷),期】2004(27)3
【摘要】用金线莲无菌幼苗带腋芽的茎段进行继代增殖培养,经试验筛选出适宜的培养基分别是:继代增殖培养基Ar+6-BA 2.0mg·L-1+IBA 0.2mg·L-1+NAA 0.4mg·L-1+KT 0.5 mg·L-1+糖3%+AC 0.2%;壮苗培养基Ar+10%马铃薯+10%香蕉+糖3%+AC 0.2%;生根培养基Ar+IBA 0.5mg·L-1+NAA 0.5mg·L-1+糖2%+AC0.2%.生根炼苗时,移栽到腐殖土、河沙、珍珠岩比例为7:2:1的基质上,成活率达98%以上.
【总页数】3页(P12-14)
【作者】高燕;白燕冰;赵云翔
【作者单位】云南省德宏热带农业科学研究所,云南,瑞丽,678600;云南省德宏热带农业科学研究所,云南,瑞丽,678600;云南省德宏热带农业科学研究所,云南,瑞丽,678600
【正文语种】中文
【中图分类】S567.239
【相关文献】
1.金线莲组织培养增殖培养基的筛选 [J], 刘伟;王牛柱
2.侧金盏花组织培养基本培养基筛选初报 [J], 贾鹏博
3.重瓣红玫瑰组织培养中培养基和培养条件的筛选 [J], 陈宇杰;朱俊兆;杨思学;丁
沃娜
4.花叶金线莲试管花卉培养基配方筛选 [J], 林兵;陈艺荃;樊荣辉;吴建设;叶秀仙
5.轮钟花组织培养的最佳外植体及培养基筛选 [J], 祝久洁; 吴汉竹; 孙庆文; 郭文凯; 徐文芬
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金线莲
基质浇水以“不干不浇”为原则。
1页 栽培介质不宜过湿，过湿易导致茎腐病 金线莲病虫害发生大多由高温多湿 金线莲在炎热季节易发生茎枯病 春春末末夏夏初初易易发发生生立立枯枯病病、、病均在６～８月的高温季节易发生病害防治1 春末夏初易发生立枯病、 茎枯病、尤以新植霉素、代森锰锌两种药剂的防治效果更为突出2 ６～８月的高温季节易发生软腐病3 雨前、雨后 软腐病病害防治进行了研究．试验结果表明，喷用硫酸链霉素6000倍、托布津800倍、新植霉素3000倍、代森锰锌200倍、瑞毒霉-锰锌500倍等杀菌剂稀释液，对减少金钱莲茎枯病、猝倒病、立枯病、软腐病的发病率，均有一定的防治作用．尤以新植霉素、代森锰锌两种药剂的防治效果更为突出，达73.59％和66．78％．软腐病发生时可喷新植要素；浓度200毫升/升或农抗751水剂100倍液。
金线莲病虫害发生大多由高温多湿、通风不良及受光照与栽培地不清洁寺,应设法克服这些不良因受光照与栽培地不清洁寺,应设法克服这些不良因素和防除杂草。
金线莲在炎热季节易发生茎枯病,春末夏初易发生立枯病、猝倒病,因此在病害高发季节可用农用硫酸链霉素1 000 万单位或代森锰锌200倍、多菌灵1 000 倍等轮换喷施,每15 天喷1 次化学防治防治猝倒病可用75%百菌清可湿性粉剂600倍液或64%杀毒矾可湿性粉剂500倍液或50%多菌灵可湿性粉剂600倍液喷洒。
见零星病苗就应喷药以提高防治效果，每7～10天喷一次，连喷2～3次雨前、雨后软腐病金线莲软腐病防治：雨前、雨后或浇水后及时喷洒14%络氨铜水剂300倍液或77%可杀得可湿性粉剂500倍液或50%琥胶硫酸铜可湿性粉剂500倍液金线莲主要病害有猝倒病主要为镰刀菌危害引起，病苗茎基部出现黄褐色水渍状病斑，很快发展至绕茎一周，病部组织腐烂干枯溢缩呈线状。
病势发展迅速，幼苗迅速倒伏死亡，出现猝倒现象。
软腐病属细菌性病害，主要为害中下部内茎和近地表叶片的叶柄。
金线莲外植体筛选及愈伤组织诱导研究
ｉ ｄｕ ｅ ｃ ｌｕ ｃ ｕ ｒ ｎ ｅａ ｏ ｌ ｗｉ ｕ ｔ ｒ ｄ ｕ ． Ｓ＋ ６ ＢＡ ． ／ ＋ＮＡＡ ． ／ Ｍ Ｓ＋ ｎ ｃ ａ ｌ ｓｏ ｃ ｒｅ ｃ ｔｆ ｌｏ ｎｇｃ ｌｕ ｅ ｍｅ ｉ ｍｓ Ｍ 一 ２ ０ ｍｇ Ｌ ０５ ｍｇ Ｌ． ＮＡＡ ０ ｍｇ Ｌ ＋ＫＴ ． ｇＬ ｄ Ｍ Ｓ＋ ６ ＢＡ ． ／ ＋ ＮＡＡ ５ ｍｇ Ｌ ＋ ＺＴ ． ／ Ｃｅ ｔ ｉ ｌ ， ２． ／ ０ １ｍ ／ ａ ｎ 一 ２０ ｍｇ Ｌ ０． ／ ０ ２ ｍｇ Ｌ． ｒａ ｎ ｙ ６ ＢＡ，ＮＡＡ，ＫＴ ｒ ｈ ｍｐ ｒａ ｔｆ ｃｏ ｓ ｏ ｒ ｄｕ ｔ ｎ ｏｆｃ ｌｕ ．Ａｍｏ ｇ ｔ ｅ ｔ ｒ ｅ ｅ ｐｌｎ ｓ ｈ 一 ｗｅ ｅ ｔ ｅ ｉ ｏ ｎ ａ ｔ ｒ ｎ ｐ ｏ ｃｉ ａ ｌ ｓ ｔ ｏ ｎ ｈ ｈ ｅ ｘ ａ ｔ，ｔ ｅ ｂ ｄｓｗｅ ｅｔ ｅ ｂ ｓ ｘ ｌ ｔ ｏ ｈ ａ ｌ ｎ ｃｉ ｎ Ａｎ ｅｒ ｓ ｌ ｒｈｏ ｏ ｌ ｅ ｉ ｎ ｓ ｏｗｅ ｈ ｔ ｕ ｒ ｈ ｅ ｔｅ ｐ ａ ｓｆ ｒｔ ｅｃ ｌ ｉ ｄｕ ｔｏ ． ｄ ｔ ｅ ｕ ｔ ｏｆｏ ｔ ｇ ｎａ ｄ ｓｇ ｈ ｎ ｕｓ ｈ ｓ ｄｔ ａ ｆ ｒｔ ｅｂ ｄ ｏ ０ ｕ ｆＡｎ ｅ ｔ ｃ ｉｕ ｏ ｂ ｇ ｉｔ ｒ ｅ ｃ ｌｕ ． ｅｂｅ ｔ ｄ ｕ ｗａ Ｓ＋ ６ ＢＡ ０ ｍｇ／ ｈ ｏ ｃｏ ｈ ｌ ｓｒ ｘ ｕｒ ｈｉ ｏｆ ｍ ｔ ａ ｌ ｓ ｔ ｓ ｏ ｈ ｈ ｍｅ ｉ ｍ ｓＭ 一 ２． Ｌ ＋ＮＡＡ ． ／ ＋ＫＴ ２ ｍｇ Ｌ． ０５ ｍｇ Ｌ ０． ／ Ｋ ｙ ｗｏ ｄｓ：Ａｎｏ ｃｏ ｈ ｌｓｒ ｘ ｕ ｇ ｉ；ｓｅ ；ｅ ｖ ｓ ｓ ｇｍｅ ｓ ｂ ｓ ｃ ｌ ｅ ｒ ｅ ｔ ｃ ｉｕ ｏ ｂ ｒ ｈ ｉ ｔ ｍ １ａ ｅ ； ｅ ｎｔ； ｕｄ ； ａ ｌ ｕｓ
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矿产资源开发利用方案编写内容要求及审查大纲
矿产资源开发利用方案编写内容要求及《矿产资源开发利用方案》审查大纲一、概述
㈠矿区位置、隶属关系和企业性质。
如为改扩建矿山, 应说明矿山现状、
特点及存在的主要问题。
㈡编制依据
(1简述项目前期工作进展情况及与有关方面对项目的意向性协议情况。
(2 列出开发利用方案编制所依据的主要基础性资料的名称。
如经储量管理部门认定的矿区地质勘探报告、选矿试验报告、加工利用试验报告、工程地质初评资料、矿区水文资料和供水资料等。
对改、扩建矿山应有生产实际资料, 如矿山总平面现状图、矿床开拓系统图、采场现状图和主要采选设备清单等。
二、矿产品需求现状和预测
㈠该矿产在国内需求情况和市场供应情况
1、矿产品现状及加工利用趋向。
2、国内近、远期的需求量及主要销向预测。
㈡产品价格分析
1、国内矿产品价格现状。
2、矿产品价格稳定性及变化趋势。
三、矿产资源概况
㈠矿区总体概况
1、矿区总体规划情况。
2、矿区矿产资源概况。
3、该设计与矿区总体开发的关系。
㈡该设计项目的资源概况
1、矿床地质及构造特征。
2、矿床开采技术条件及水文地质条件。