7 叶绿体荧光观察

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沿斜面切下一薄层完整组织,置于载玻片上
滴加0.9%NaCl溶液
加盖片后轻压
置显微镜下观察,观察记录细胞中叶绿体的形态、 数目和分布状况
2、叶绿体自发荧光观察 叶片徒手切片,表皮条,提取的叶绿体 置荧光显微镜下 用紫外激发光照射标本
观察记录细胞中叶绿体的形态、数目和分布状况。
3、叶绿体、细胞核次生荧光观察
叶片徒手切片,表皮条,提取的叶绿体 滴加0.01%吖啶橙,加盖玻片 染色1分钟
置荧光显微镜下观察,用紫外激发光照射标本,记录细胞中 叶绿体和细胞核的形态、数目和分布状况。
五、注意事项:
1.吖啶橙为有毒物质,使用时注意不要涂到皮肤、 实验台等其它器皿上。用过的载玻片放到指定地 点统一处理。
2.使用荧光显微镜时要正确操作。 3.吖啶橙易分解,染色时要致黑暗处,观察时动作
荧光显微镜成像 光源 滤光片
三、实验材料与用品
实验材料: 烟草、蚕豆、大葱叶片 试剂: • 0.01%吖啶橙 • 0.9%氯化钠溶液
• 仪器与器材: 普通显微镜,荧光显微镜
刀片,眼科镊子(直头),载玻片,盖玻 片,滴管, 移液管。
四、实验方法:
1、普通显微镜观察叶绿体形态和数量 ຫໍສະໝຸດ Baidu手切片或撕取表皮条
自发荧光: 生物体内的物质受激发光照射后直接发出荧光, 如叶绿素的火红色荧光和木质素的黄色荧光等。 次生荧光: 有的生物材料本身不发荧光,但它吸收荧光染料 后同样也能发出荧光, 如叶绿体和细胞核吸附吖啶 橙后分别发桔红色和绿色荧光。
• 吖啶橙:
• 可对细胞中的DNA和RNA同时染色而显示 不同颜色的荧光,DNA呈绿色荧光,RNA 呈橙红色荧光。
实验七 叶绿体和细胞核的的荧光观察
一、实验目的
1.观察叶绿体的自发荧光 2.观察叶绿体和细胞核的次生荧光 3.熟悉荧光显微镜的使用方法
二、实验原理
荧光: 某些物质在—定短波长的光(如紫外光)的照射下 吸收光能进入激发态,从激发态回到基态时,就能 在极短的时间内放射出比照射光波长更长的光(如 可见光),这种光就称为荧光 荧光显微术: 利用荧光显微镜对可发荧光的物质进行观察的一种 技术。
要快。
五、实验报告及作业 加入吖啶橙染色后,叶绿体和细胞核各发出 什么颜色的荧光?为什么?
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