BV单卡 临床试验方案

临床试验方案
（体外诊断试剂）
产品名称：细菌性阴道病检测卡(唾液酸酶法)
型号规格：25人份／盒，50人份／盒
实施者：北京泰格科信生物科技有限公司
承担临床试验的医疗机构：首都医科大学右安门临床检验中心
临床试验类别：临床验证
临床试验负责人：（签字）
统计学负责人：（签字）
年月日
说明
1、产品在临床试验前，必须制定临床试验方案。

2、临床试验方案由医疗机构和实施者共同设计、制定。

实施者与医疗机构签署双方同意的临床试验方案，并签订临床试验合同。

3、市场上尚未出现的第三类植入体内或借用中医理论制成的，临床试验方案应当向技术审评机构备案。

4、医疗机构和实施者应当共同制定每病种的临床试验例数及持续时间，以确保达到试验预期目的。

5、临床试验类别分临床试用和临床验证。

目录
1 产品原理 (1)
2 产品的指定用途 (1)
3 临床试验背景 (1)
4 临床试验目的和内容 (1)
5 承担临床试验机构的要求 (2)
6 临床试验方法的选择 (2)
7 临床试验的设计 (2)
7.1 样本量及样本量确定的依据 (2)
7.2 样本选择依据、入选标准、排除标准和剔除标准 (3)
7.2.1 选择依据 (3)
7.2.2 入选标准 (3)
7.2.3 排除标准 (3)
7.2.4 剔除标准 (3)
7.3 临床试验产品基本信息 (3)
7.3.1 试验试剂信息 (3)
7.3.2 对比试剂信息 (3)
7.3.3 第三方试剂信息 (3)
7.4 研究中发生的问题及其处理措施 (3)
7.5 临术研究统计分析方法 (4)
7.6 临床试验数据统计分析的判断标准 (4)
7.7 临床试验持续时间 (5)
8 临床试验试验具体操作方案 (5)
8.1 样本采集 (5)
8.2 样本制备 (5)
8.3 试验流程 (5)
9 成功和失败的可能性分析 (5)
9.1 成功可能性分析 (5)
9.2 失败可能性分析 (6)
10 有关安生性方面的说明 (6)
10.1 样本 (6)
10.2 试验产生的废弃物 (6)
11 风险的预测及事先应采取的措施 (6)
12 病人知情同意书及有关伦理事宜的说明 (6)
13 临床试验人员 (6)
14 各方承担职责 (7)
14.1 实施者职责 (7)
14.2 承担临床试验的医疗机构职责 (7)
15 参考文献 (7)
16 临床试验各方意见 (7)
附表1 (9)
1 产品原理
本试剂盒主要采用酶化学反应法定性检测人阴道分泌物中唾液酸酶的活性。

唾液酸酶又称神经氨酸酶，在阴道环境中，唾液酸酶是BV致病菌所产生的特异性酶之一，已证实其在阴道分泌物中的活性与细菌性阴道病密切相关。

唾液酸酶活性检测：反应卡上含有生色底物乙酰神经氨酸盐，经样本中唾液酸酶水解后，产生唾液酸和5-溴-4-氯-3-吲哚，5-溴-4-氯-3-吲哚在空气中被氧化后显示蓝色（浓稠样本显示绿色），当样本中缺乏唾液酸酶时，不发生以上化学反应，而显示无色。

2 产品的指定用途
本试剂盒适用于体外定性检测妇女阴道分泌物中唾液酸酶，辅助判断细菌性阴道病感染的可能性。

3 临床试验背景
细菌性阴道病（Bacterial Vaginosis，简称BV）是已婚妇女最常见的下生殖道感染之一，是指一类在细菌学上表现为生殖道正常菌群（产H2O2的乳酸杆菌）减少，代之以一组厌氧菌群（类杆菌属族、加德纳菌、莫比伦氏菌属、人型支原体菌属和消化链球菌属等）数量增加所致的临床症候群。

BV是妇科常见疾病之一，感染率在10～30 % ，且容易复发。

患BV的妇女有50％的人易早产或者分娩低体重儿，她们所生的孩子也很可能
带有各种后遗症。

越来越多的证据表明，BV是导致组织性绒毛膜炎、羊水感染、剖腹产后子宫内膜炎及其它妊娠不良和妊娠并发症的危险因素。

另外在妇科，BV主要与输卵管炎、盆腔炎、宫外孕、不孕症、泌尿系感染、术后感染及妇科肿瘤有关。

鉴于BV对妇女及其妊娠的危害性，在妇科、产科以及施行外科流产术前进行BV检查具有十分重要的意义。

唾液酸酐酶是BV致病菌所产生的特异性酶之一，众多学者通过大量临床研究，已证实其在阴道分泌物中的活性与BV发病的严重程度成正比，检测阴道分泌物中的唾液酸酐酶的活性而诊断BV是近几年诊断BV的新方法，具快速，简便及特异性强等特点。

北京泰格科信生物科技有限公司利用干化学技术研发生产了细菌性阴道病检测卡（唾液酸酶法），按照国家食品药品监督管理局有关《临床试验规定》要求进行临床验证。

承担临床试验的医疗机构之一为首都医科大学右安门临床检验中心。

4 临床试验目的和内容
验证北京泰格科信生物科技有限公司研制生产的细菌性阴道病检测卡（唾液酸酶法）的临床性能及其与测定结果的临床符合率。

本次临床试验至少选择200例住院或门诊阴道分泌物样本为研究对象，总共由两家省级医疗卫生单位完成。

临床试验的主要内容是：北京泰格科信生物科技有限公司生产的细菌性阴道病
检测卡（唾液酸酶法）与国内已上市同原理产品：珠海迪尔生物工程有限公司生产的细菌性阴道病快速检测试剂盒（唾液酸酶法）(粤食药监械（准）字2012第2400595号）平行检测一系列样本，计算两种试剂的相关性、一致性、阳性符合率、阴性符合率和总符合率，评价两种试剂是否等效。

5 承担临床试验机构的要求
根据《体外诊断试剂临床试验技术指导原则（试行）》要求，承担临床试验的机构应该具备以下条件：
[1]从事人类健康或疾病预防、诊断、治疗以及流行病学调查等活动的法人单位，所研究产品在其所从事的专业范围内。

[2]具有相应专业的技术人员，必须具有与研究试剂相适应的仪器设备，并能确保研究的实施。

[3]省级医疗卫生单位。

6 临床试验方法的选择
此次临床试验为已有同品种批准上市产品的临床试验，根据《体外诊断试剂临床试验技术指导原则》的规定，采用已有同品种产品与新产品进行对比试验的方法，证明新产品达到已有同品种产品的质量水平。

因珠海迪尔生物工程有限公司生产的细菌性阴道病快速检测试剂盒的性能稳定，检测的结果灵敏性和特异性较好，为目前临床普遍认为质量较好的产品，因此本次临床试验采用此试剂盒作为对比试剂进行临床试验。

将对照组和病例组的样本分别编号后用待考核试剂和对比试剂检测，将待考核试剂测定结果与对比试剂测定结果进行比较，计算两者的阳性符合率、阴性符合率及总符合率，对于检测结果不一致的样本用第三方试剂进行确认，整个试验过程实行盲法试验，从而验证北京泰格科信生物科技有限公司生产的细菌性阴道病检测卡（唾液酸酶法）是否达到同等质量水平。

7 临床试验的设计
7.1 样本量及样本量确定的依据
本临床试验所涉及到的诊断试剂为二类产品，按《体外诊断试剂临床试验技术指导原则》规定，临床试验的总样本数至少为200例。

拟选择2家省级卫生医疗机构，临床研究的阴道分泌物样本通过对比试剂检测和临床诊断综合分析，确诊为非细菌性阴道病感染患者（正常对照）和已确诊为细菌性阴道病感染的患者阴道分泌物样本。

其中阳性例数不少于40%。

每家医疗机构样本不少于110例，其中阳性例数不少于44例。

7.2 样本选择依据、入选标准、排除标准和剔除标准
7.2.1 选择依据
以《体外诊断试剂临床试验技术指导原则》及《医疗器械临床试验规定》作为选择依据。

7.2.2 入选标准
－确诊为非细菌性阴道病感染患者（正常对照）和已确诊为细菌性阴道病感染的患者阴道分泌物样本；
－阳性样本率不低于40%；
7.2.3 排除标准
－反复冻融的样本。

－样本量少及血性样本。

－长菌的样本。

7.2.4 剔除标准
－因仪器或人为因素导致无法完成整个试验过程的样本。

7.3 临床试验产品基本信息
7.3.1 试验试剂信息
试剂名称：细菌性阴道病检测卡（唾液酸酶法）
检测方法：唾液酸酶法
生产企业：北京泰格科信生物科技有限公司
7.3.2 对比试剂信息
试剂名称：细菌性阴道病快速检测试剂盒（唾液酸酶法）检测方法：唾液酸酶法
生产企业：珠海迪尔生物工程有限公司
注册证号：粤食药监械（准）字2012第2400595号7.3.3 第三方试剂信息
试剂名称：细菌性阴道病诊断试剂盒（唾液酸酶法）
检测方法：唾液酸酶法
生产企业：北京明悟德生物技术有限公司
注册证号：京药监械（准）字2010第2400423号
7.4 研究中发生的问题及其处理措施
如试验中出现差异较大的样本测定结果,应做如下分析:
A 操作是否有误。

B 样本状态是否正常。

C 试剂状态是否正常。

经过上述分析,若是以上错误原因,应修正后重新进行试验。

7.5 临床试验统计分析方法
用四格表方式对待考核试剂（细菌性阴道病检测卡（唾液酸酶法））与对比试剂进行比较，计算二者的卡方值、Kappa系数、阳性符合率、阴性符合率、总符合率，评价二者的诊断效果是否等效。

对样本的具体检测数据汇总入附表1中。

7.6 临床试验数据统计分析的判断标准
7.6.1测量结果的等效性评价标准
以对照试剂为参考，检验两种试剂对一系列样本的检验是否有显著性差异（计算卡方值、Kappa系数、阳性符合率、阴性符合率、总符合率）
试验试剂盒与对照试剂盒的检测结果比较
备注：“+ ”表示阳性，“-”表示阴性。

A为真阳性（对比试剂、试验试剂都是阳性）；B为假阳性（对比试剂检测结果为阴性，试验试剂检测结果为阳性）；C为假阴性（对比试剂检测结果为阳性，试验试剂为阴性)；D为真阴性(对比试剂、试验试剂检测结果均为阴性）。

7.6.2计算公式：
经统计分析，对试验试剂盒和对比试剂盒对待检样本进行检测后其计算结果如下：
1）v=1 进行统计学分析，得X2＝，P>0.05，检验两种试剂间检测结果之间有无显著性差异。

备注：v: 代表自由度，自由度=（行数-1）（列数-1）若X2＞3.84 说明P＜0.05，此时有显著性差异，
若X2＜3.84 说明P＞0.05，此时无显著性差异。

2) 计算两种试剂检测结果的一致性系数（Kappa系数）。

P0＝（A+D）/(A+B+C+D)；
Pe=((A+C)(A+B)/ (A+B+C+D)+(B+D)(C+D)/
(A+B+C+D))/ (A+B+C+D)；
Kappa系数＝(P0-Pe)/(1-Pe)=
备注：Kappa系数>0.8，为高度一致，认为两系统等效；
0.4<Kappa系数<0.8认为一致。

3) 两种试剂盒的临床符合率：
阳性符合率和阴性符合率满足临床要求，认为两个方法或产品等效；阳性符合率和阴性符合率相差过大，则需重新设计临床方案。

备注：符合率均大于95%，说明两种试剂盒的临床符合率可以达到要求。

4) 本次临床实验与对比试剂盒不符样本，必须采用第三方试剂盒确认，并根据第三方试剂盒检测结果对试验试剂盒进行评价。

第三方试剂盒进行确认之前，首先验证选择的第三方试剂盒是否合理，选取10例对比试剂盒与试验试剂盒测定结果一致的样本（5例阴性样本、5例阳性样本）用第三方试剂盒进行检测，检测结果与两试剂盒一致说明第三方试剂盒选择合理，然后再用第三方试剂盒对不一致样本进行确认。

7.7 临床试验持续时间
临床试验持续时间没有特殊的要求，一般分为几个部分：临床试验方案的设计和通过，试验的前期准备工作，试验的实施，试验数据的统计分析，临床试验报告。

只要各临床试验单位严格按照本方案筛选到足够样本数即可结束临床试验，总体时间为约3个月左右。

8 临床试验具体操作方案
8.1 样本采集
(a) 用无菌棉拭子在阴道后穹窿处旋转2~10周，停留
10~20秒，尽可能多的采集患者阴道分泌物，以清晰见到棉试子上有分泌物附着为准。

取样应在非经期，且取样前24小时应禁止性交、盆浴、阴道灌洗及局部上药等。

(b) 以上取得样本若立即实验则将拭子放入标本处理管中；若不立即实验，请将标本放置于干燥的试管中保存。

标本可在室温下放置4-6小时，或冷藏（2-8℃）保存24-72小时，-20℃可保存6个月。

所有标本测试前要恢复至室温。

标本不可冻融超过一次。

8.2 样本制备
棉拭子样本：取一加样试管，滴加“稀释液”12~15滴，将一已经取样的拭子置于该试管中，反复挤压拭子，使阴道分泌物充分释出。

8.3 试验流程
试验人员按上述样本制备的要求准备足够的样本后，由复核人编盲，由试验操作者按照本产品的说明书进行操作实验工作。

同一样本分别用待考核试剂和对照试剂在规定时间内完成。

实验结果记录在临床实验数据汇总表中。

9 成功和失败的可能性分析
9.1 成功可能性分析
本试验使用门诊和住院患者妇科常规检查残留拭子样本进行测定，试验的样本量充足，由经验丰富的主管技师进行操作，应用的仪器设备一直处于正常运行状态，检测流程简单、易重复、干扰试验的因素易受控制，因此试验的成功可能性极大。

9.2 失败可能性分析
1)实验中出现断电、断水等，导致仪器不能正常运行，出现试
验失败。

但检验机构备有电源、辅助供水设施，不致出现上述情况。

2)人员操作不当，导致试验失败。

但本试验选择操作人员为具
有多年临床操作经验的人员，将出现操作不当的现象的可能性极小。

3)如果试验中标本没有达到要求，则会导致试验结果的不可
信，导致试验的失败。

10 有关安生性方面的说明
10.1 样本
由于试验过程中所用样本，均来自临床病人，阴道分泌物样本的处理也应该按传染性物质处理，做好相应防护。

10.2 试验产生的废弃物
按潜在传染性物质的处理规定执行，避免对人员环境的污染。

11 风险的预测及事先应采取的措施
(1) 临床试验开始时，临床试验单位应做好充分的准备，掌握本试剂及对比试剂的使用方法和相关技术，确保有充分的人力、时间保障试验的进行，预测能采集到足够的样本。

申请者对本试剂的使用及相关技术对临床试验人员进行充分的培训，并提供足够的试验试剂。

在没有做好充分的准备前，不开展临床试验。

(2) 本试剂盒为体外诊断试剂、本身不会对受试者造成直接的伤害。

但临床试验的诊断结果不能作为医疗机构的诊断结果。

临床试验负责人应时刻进行监督。

(3) 本试剂在试验中若出现和预期严重不相符的情况，应立即暂停试验，找出原因，再重新开始或停止临床试验。

12 病人知情同意书及有关伦理事宜的说明
根据《体外诊断试剂注册临床试验技术指导原则》（国食药监械[2007]240号）的规定，客观上不可能获得受试者的知情同意或该临床试验对受试者几乎没有风险，可不提交伦理委员会的审评意见及受试者的知情同意书。

因本产品（细菌性阴道病检测卡（唾液酸酶法））为体外诊断试剂，我们进行本次临床试验采用患者检测白带常规时的阴道分泌物样本，对患者身体不接触，同时我们记录的汇总表对于阴道分泌物样本均使用样本编号，不透露病人的姓名等关键信息，所以本次试验不会对检测对象产生任何额外的风险，故此无需与本病的患者签署知情同意书。

13 临床试验人员
14 各方承担职责
14.1 实施者职责
（1）与医疗机构共同设计、制定医疗试验方案，签署双方同意的临床试验方案及合同；
（2）向医疗机构免费提供检测合格的受试产品及相关消耗品；
（3）试验前对临床试验人员进行相关培训；
（4）负担与试验相关的费用；
（5）实施者中止医疗器械临床试验前，应当通知医疗机构。

14.2 承担临床试验的医疗机构职责
（1）应当熟悉实施者提供的有关资料，并熟悉受试产品的使用；
（2）与实施者共同设计、制定临床试验方案，双方签署临床试验方案及合同；
（3）严格按操作要求进行试验，并如实记录结果；
（4）指定专业人员负责统计学工作；
（5）提供临床试验报告，并对报告的正确性及可靠性负责；
（6）对实施者提供的资料负有保密义务。

15 参考文献
[1]《体外诊断试剂临床技术指导原则》国食药监械[2007]240号
[2]《医疗器械临床试验规定》国家食品药品监督管理局第5号令
[3]《医学统计学》马斌荣人民卫生出版社2009年第5版
16 临床试验各方意见
附表1
临床试验数据汇总表
试验试剂：北京泰格科信生物科技有限公司细菌性阴道病检测卡（唾液酸酶法）
对比试剂：珠海迪尔生物工程有限公司细菌性阴道病快速检测试剂盒（唾液酸酶法） 阳性结果：填写“+” 阴性结果：填写“-”。