12个白色金针菇菌株的亲缘关系分析
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置 室 温 ２ ℃ 、 气 相 对 湿 度 ７ ％的 培养 室发 菌 。将 发 好 的 菌 ２ 空 ０
金 针 菇 是 我 国 食 用 菌 主栽 品种 之 一 。 其 口感好 、 养 丰 以 营
袋 在 温 度 为 １ － ８ 、空 气 相 对 湿 度 ９ ％左 右 的 出 菇 室 内进 ５ １℃ ０ 行 出 菇 管 理 。 收获 第 一 潮 菇 子 实 体 。
驯 ｅ １根 据 酯 酶 同工 酶 电泳 结 果 将 金 针 菇 菌株 分 为 ａ． ｔ
鹱
１ ．． Ｄ Ａ 的提 取 ． ３１ Ｎ ２ 见 文 Ｂ法 ， 体 步 骤 具
上 清 液 即 为粗 酶液 。
熊鹰等曾对 ２ ６个 金 针 菇 品 种 进 行 了 菌 丝 培 养特 性 比较 ，
使用 Ｔ ｅｌ ｃ ｎｉｃＮ ｎ Ｄ ｏ ０ ０检 测 上 清 液 的 蛋 白 ｈ ｒ ｏ ｉ ｔ ｉ ａ ｏ ｒｐｉ ０ ｎ Ｓ ｅ ｆ 浓 度 ， 据 蛋 白浓 度 保 证 上 样 量 一 致 。采 用 不 连 续 垂 直 板 聚 根
２１（） ００ ６
龟 同苗
１ 个 白 色 金 针 菇 菌 株 的 亲 缘 关 系 分 析 ２
崔 鹏 张树 斌 李 冬梅 王朝 江 。 王 立安
（ 河 北 师 范 大 学 生命 科 学 学 院 ， 家 庄 ０ ０ １ ； １ 石 ５０ ６ ２河 北 农 业 厅 环 境 保护 监 测 站 ， 家 庄 ０ ０ １ ； 石 ５０ １３河北 农 林 科 学 院遗 传 生 理 所 ， 家庄 ０ ０ ５ ） 石 ５ ０ １
状 图 ， 析 各 菌 株 间 的 亲缘 关 系 。 分
１２３ ＲＡＰ 分 析 ．． Ｄ
与 出发 菌 株 在 酯 酶 同 工 酶谱 带 上 完 全 相 同ｌｌ 兰 宝 等 研 究 ４。朱
种
发 现 ，不 同 类 型 的 金针 菇 菌株 具 有 独 特 的酯 酶 同工 酶 标 记 区 带 ， 映 出 金 针 菇 种 群 发 生 了较 广 泛 的 基 因变 异 【】 ｅ ｉ ｉ 反 ５ 。Ｋ ｎｃ ｈ ３种 类 型 ，
丙烯酰胺凝胶 电泳（Ａ Ｅ ， 泳 、 色 、 Ｐ Ｇ ）电 染 固定 、 色方 法 见文 脱
献 ［１ ７。
进 行 了酯 酶 同 工 酶 分 析 ， 现 有 ２ 个 菌 株 在 酯 酶 同工 酶 谱 带 发 １
上 完 全 相 同 ， 明其 亲 缘 关 系 非 常 相 近 。此 外 ， 织 分 离 菌 株 表 组
根据 金 针 菇 的酯 酶 同工 酶 谱 ， 酶 带 “ ” “ ” 计 各 菌 按 有 、无 统 株 的 酯 酶 同工 酶 信 息 ， 用 Ｎ Ｓ Ｓ ｐ ｅｓ ｎ ． 聚类 分 析 软 使 Ｔ Ｙ — ｃＶ ｒ ｏ ２ １ ｉ 件 ， 用 Ｕ Ｇ Ａ 法 计 算 菌 株 间 的遗 传 相 似 系 数 ， 成 聚 类 树 采 Ｐ Ｍ 生
摘 要 目的 ： 了解 ｌ ２个 白色 金 针 菇 菌株 的遗 传 特 性 及 亲 缘 关
系 。方法 ： 用 酯 酶 同工 酶 和 Ｒ Ｄ技 术 。结 论 ： 种分 析 方 法均 采 ＡＰ 两 显示 ， ２号 （ ０ ８ 和 ３号 （ ８ ）６号 （ ２ ） １ ２９ ） ８ １， Ｆ １ 和 ２号 （ ９ ） ８号 新 ３， （３ １和 １ １ ０ ） Ｏ号 （ １ ３金 １ ） 似 系数 为 １ 其 为 同种 异 名 的 菌 株 。 号 相 ， 关键 词 金 针 菇 聚类 分 析
菌产业发展具重要意义。
１ ． 子 实体 酯酶 同 工 酶 图谱 ．２ ２
将子实体液 氮冻干后研磨 ，
每 克 干 粉 加 入 ３ｍ Ｌ稀 释 ４倍 的 浓 缩 胶 缓 冲 液 （ ． ｒ ｓ ６ｏ ｇ ｉ ， ６ ｆ Ｊ ８ ｄ ２ 溶 解 ， 盐 酸 调 ｐ 至 ６ ８， 后 定 容 到 Ｊ ｏ ｍＬ ｄ Ｈ ０ Ｈ 用 Ｈ ． 最 １ ０ｍ ） 混 匀 后 装 到 Ｅ ０ Ｅ ， Ｐ管 中 ，Ｏ ｏ ｍｉ ，￣ ， 心 １ ｉ 。 ｌ ０ ０ ／ ｎ ４Ｃ 离 ｒ ５ｍ ｎ
文章 编 号 １ ０ － ３ ７ ２ １ ０ — ０１ — ２ ０ ０ ８ ５ （ ０ ０）６ ０ ７ ０
９ ． ， 萄糖 １ ， 膏 １ ％ ， 水 量 ６ ％。 ７５ 葡 ％ ％ 石 ． 含 ５ ５ 出菇 培 养 基 ： 子 壳 ７ ％ ， 皮 ２ ％ ， 糖 １ ， 膏 ２ ， 棉 ７ 麸 ０ 蔗 ％ 石 ％
发 现 菌 丝 长 速 、 度 、 泽 、 蕾 难 易 等 与菇 体 色 泽 、 系 有 很 密 色 现 品
好 的相 关 性 。 汪 波 等 对 １ ９个 白色 金 针 菇 菌 株 和 １ ４个 黄 色
金 针 菇 菌 株 以及 黄 色 金 针 菇 Ｆ １ ４ １菌 株 的 ６个 组 织 分 离 菌 株
含 水 量 ６ ％。 ０
１２ 试 验 方 法 ．
酯酶同工酶
随 机 扩 增 多 态 性 Ｄ Ａ（ ＡＰ Ｎ Ｒ Ｄ）
１ ． 子 实体 获得 ．１ ２
采用熟料袋栽模式。 常规方法拌料 、 按 装
袋 、 压 灭 菌 （ ２ ｏ ２ ） 接 种 。每 一 菌 株 接种 后 的栽 培 袋 放 高 １１ Ｃ， 、 ｈ
富 ， 良好 的 保 健 作 用 而 深 受 国 内外 市 场 欢 迎 【 但 目前 ， 具 ｌ ｊ 。 我 国食 用 菌 菌 种 市 场 十分 混乱 ， 现 为 名 目繁 多 ， 表 同种 异 名 现 象
严 重 ； 之 多 年 无 性 扩 繁 ， 种退 化 、 化 现 象严 重 ， 响 了食 加 菌 老 影 用 菌 产 量 ， 害 了菇 农 的 利 益 田 通 过 同 工 酶 技 术 、 子 生 物 损 。 分 学 技 术 研 究 各 菌 株 的遗 传特 性 及 亲缘 关 系 对 进 一 步 促 进 食 用
金 针 菇 是 我 国 食 用 菌 主栽 品种 之 一 。 其 口感好 、 养 丰 以 营
袋 在 温 度 为 １ － ８ 、空 气 相 对 湿 度 ９ ％左 右 的 出 菇 室 内进 ５ １℃ ０ 行 出 菇 管 理 。 收获 第 一 潮 菇 子 实 体 。
驯 ｅ １根 据 酯 酶 同工 酶 电泳 结 果 将 金 针 菇 菌株 分 为 ａ． ｔ
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１ ．． Ｄ Ａ 的提 取 ． ３１ Ｎ ２ 见 文 Ｂ法 ， 体 步 骤 具
上 清 液 即 为粗 酶液 。
熊鹰等曾对 ２ ６个 金 针 菇 品 种 进 行 了 菌 丝 培 养特 性 比较 ，
使用 Ｔ ｅｌ ｃ ｎｉｃＮ ｎ Ｄ ｏ ０ ０检 测 上 清 液 的 蛋 白 ｈ ｒ ｏ ｉ ｔ ｉ ａ ｏ ｒｐｉ ０ ｎ Ｓ ｅ ｆ 浓 度 ， 据 蛋 白浓 度 保 证 上 样 量 一 致 。采 用 不 连 续 垂 直 板 聚 根
２１（） ００ ６
龟 同苗
１ 个 白 色 金 针 菇 菌 株 的 亲 缘 关 系 分 析 ２
崔 鹏 张树 斌 李 冬梅 王朝 江 。 王 立安
（ 河 北 师 范 大 学 生命 科 学 学 院 ， 家 庄 ０ ０ １ ； １ 石 ５０ ６ ２河 北 农 业 厅 环 境 保护 监 测 站 ， 家 庄 ０ ０ １ ； 石 ５０ １３河北 农 林 科 学 院遗 传 生 理 所 ， 家庄 ０ ０ ５ ） 石 ５ ０ １
状 图 ， 析 各 菌 株 间 的 亲缘 关 系 。 分
１２３ ＲＡＰ 分 析 ．． Ｄ
与 出发 菌 株 在 酯 酶 同 工 酶谱 带 上 完 全 相 同ｌｌ 兰 宝 等 研 究 ４。朱
种
发 现 ，不 同 类 型 的 金针 菇 菌株 具 有 独 特 的酯 酶 同工 酶 标 记 区 带 ， 映 出 金 针 菇 种 群 发 生 了较 广 泛 的 基 因变 异 【】 ｅ ｉ ｉ 反 ５ 。Ｋ ｎｃ ｈ ３种 类 型 ，
丙烯酰胺凝胶 电泳（Ａ Ｅ ， 泳 、 色 、 Ｐ Ｇ ）电 染 固定 、 色方 法 见文 脱
献 ［１ ７。
进 行 了酯 酶 同 工 酶 分 析 ， 现 有 ２ 个 菌 株 在 酯 酶 同工 酶 谱 带 发 １
上 完 全 相 同 ， 明其 亲 缘 关 系 非 常 相 近 。此 外 ， 织 分 离 菌 株 表 组
根据 金 针 菇 的酯 酶 同工 酶 谱 ， 酶 带 “ ” “ ” 计 各 菌 按 有 、无 统 株 的 酯 酶 同工 酶 信 息 ， 用 Ｎ Ｓ Ｓ ｐ ｅｓ ｎ ． 聚类 分 析 软 使 Ｔ Ｙ — ｃＶ ｒ ｏ ２ １ ｉ 件 ， 用 Ｕ Ｇ Ａ 法 计 算 菌 株 间 的遗 传 相 似 系 数 ， 成 聚 类 树 采 Ｐ Ｍ 生
摘 要 目的 ： 了解 ｌ ２个 白色 金 针 菇 菌株 的遗 传 特 性 及 亲 缘 关
系 。方法 ： 用 酯 酶 同工 酶 和 Ｒ Ｄ技 术 。结 论 ： 种分 析 方 法均 采 ＡＰ 两 显示 ， ２号 （ ０ ８ 和 ３号 （ ８ ）６号 （ ２ ） １ ２９ ） ８ １， Ｆ １ 和 ２号 （ ９ ） ８号 新 ３， （３ １和 １ １ ０ ） Ｏ号 （ １ ３金 １ ） 似 系数 为 １ 其 为 同种 异 名 的 菌 株 。 号 相 ， 关键 词 金 针 菇 聚类 分 析
菌产业发展具重要意义。
１ ． 子 实体 酯酶 同 工 酶 图谱 ．２ ２
将子实体液 氮冻干后研磨 ，
每 克 干 粉 加 入 ３ｍ Ｌ稀 释 ４倍 的 浓 缩 胶 缓 冲 液 （ ． ｒ ｓ ６ｏ ｇ ｉ ， ６ ｆ Ｊ ８ ｄ ２ 溶 解 ， 盐 酸 调 ｐ 至 ６ ８， 后 定 容 到 Ｊ ｏ ｍＬ ｄ Ｈ ０ Ｈ 用 Ｈ ． 最 １ ０ｍ ） 混 匀 后 装 到 Ｅ ０ Ｅ ， Ｐ管 中 ，Ｏ ｏ ｍｉ ，￣ ， 心 １ ｉ 。 ｌ ０ ０ ／ ｎ ４Ｃ 离 ｒ ５ｍ ｎ
文章 编 号 １ ０ － ３ ７ ２ １ ０ — ０１ — ２ ０ ０ ８ ５ （ ０ ０）６ ０ ７ ０
９ ． ， 萄糖 １ ， 膏 １ ％ ， 水 量 ６ ％。 ７５ 葡 ％ ％ 石 ． 含 ５ ５ 出菇 培 养 基 ： 子 壳 ７ ％ ， 皮 ２ ％ ， 糖 １ ， 膏 ２ ， 棉 ７ 麸 ０ 蔗 ％ 石 ％
发 现 菌 丝 长 速 、 度 、 泽 、 蕾 难 易 等 与菇 体 色 泽 、 系 有 很 密 色 现 品
好 的相 关 性 。 汪 波 等 对 １ ９个 白色 金 针 菇 菌 株 和 １ ４个 黄 色
金 针 菇 菌 株 以及 黄 色 金 针 菇 Ｆ １ ４ １菌 株 的 ６个 组 织 分 离 菌 株
含 水 量 ６ ％。 ０
１２ 试 验 方 法 ．
酯酶同工酶
随 机 扩 增 多 态 性 Ｄ Ａ（ ＡＰ Ｎ Ｒ Ｄ）
１ ． 子 实体 获得 ．１ ２
采用熟料袋栽模式。 常规方法拌料 、 按 装
袋 、 压 灭 菌 （ ２ ｏ ２ ） 接 种 。每 一 菌 株 接种 后 的栽 培 袋 放 高 １１ Ｃ， 、 ｈ
富 ， 良好 的 保 健 作 用 而 深 受 国 内外 市 场 欢 迎 【 但 目前 ， 具 ｌ ｊ 。 我 国食 用 菌 菌 种 市 场 十分 混乱 ， 现 为 名 目繁 多 ， 表 同种 异 名 现 象
严 重 ； 之 多 年 无 性 扩 繁 ， 种退 化 、 化 现 象严 重 ， 响 了食 加 菌 老 影 用 菌 产 量 ， 害 了菇 农 的 利 益 田 通 过 同 工 酶 技 术 、 子 生 物 损 。 分 学 技 术 研 究 各 菌 株 的遗 传特 性 及 亲缘 关 系 对 进 一 步 促 进 食 用