癌症治疗的新希望-DC-CIK细胞的制备及在肿瘤治疗中的应用41页PPT
CIK细胞治疗主课件
采血用静脉的选择及保护 由于PBMC采集穿 刺针较粗(16G),为能顺利采集PBMC,血管的选 择尤为重要,一般选择弹性及充盈度较好的肘部静 脉,因此决定PBMC采集当天,应将肘部静脉预留 不作他用,以防穿刺过程中血液从刚穿刺过的针眼 中外渗。
采集当日患者准备 采血前对患者饮食无特殊禁忌,可根据 个人喜爱适量进食,然后沐浴更换干净及袖口宽松的衬衣,保证
[CIK细胞疗法是过程性免疫疗法之一，是目前抗肿瘤，抗乙肝、 丙肝治疗最新、最好的免疫治疗方法。.
.
我院CIK细胞治疗的发展
开始进行 CIK细胞治 疗肝癌和肝 炎的研究
取得了总后 卫生部的批 准文号，并 正式应用于 临床治疗
获得了治疗 病毒性肝炎 的批准文号
CIK细胞治 疗在临产上 广泛应用， 得到良好的 治疗效果
CIK细胞治疗的步骤
第一步
治疗前检查肝功 能、血常规、凝 血功能等常规项
目.
第二步
采集病人外周单 个核细胞（PBMC
）
第三步
对细胞进行培养 、诱导、激活、
配制
第四步
回输（分三次， 每次间隔1－2天
）
严格无菌条件
护理
PBMC采集前准备
常规检验 血常规、血生化、凝血酶原时间、 活动度、T细胞亚群等检测项目的送检。
长生存时间。 .
CIK细胞治疗的适应症
肝癌治疗的适应症： 1.早中晚期肝癌（包括肿瘤已经发生转移
的病例） 2.肝癌手术切除；放、化疗等治疗前后 3.肝移植前 4.由于病情已不适合其他治疗的患者
慢性乙肝和丙肝治疗的适应症：
1.确诊慢性乙型、丙型肝炎患者，胆红素（TBIL ）＜85微摩尔每升 2.转氨酶（ALT）40U/L但400U/L； HBVDNA或HCVRNA阳性 3.抗病毒治疗成果不佳或反弹，但包括由于病毒 变异，对抗病毒药物产生耐药者 4.病毒性肝炎诱发的肝硬化患者 5.可与其他抗病毒治疗联合应用。
DC-CIK细胞的制备及在肿瘤治疗中的应用 PPT课件
FS C-Hei ght
maj i nl an0 7090 7d9 .0 03
89.5%
R2
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102
103
CD3 P erCP
104
maj i nl an0 7090 7d9 .0 03
52.3%
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CD4 FIT C
104
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CD4 FIT C
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DC负载肿瘤抗原
肿瘤杀伤作用
DC在DC-CIK杀伤肿瘤细胞中的作用
诱导抗原特异性CTL反应 增加CIK细胞的扩增倍数 增强CIK肿瘤杀伤效力
MHC：抗原提呈 自分泌细胞因子：INF,IL-12等 抑制CD4+CD25+调节T细胞生长
CIK细胞的制备
PBMNC (CS3000 Plus)
当包被在培养皿和培养瓶中时，RetroNectin能显 著提高逆转录病毒转染入哺乳动物细胞内的效率。
RetroNectin还可参与细胞的附着、伸展、分化和 增殖，可增加体外CIK细胞扩增倍数，及肿瘤杀伤 活性。
RetroNectin activated killer cell（RAK）
zoledronate acid/唑来膦酸
DC-CIK细胞的制备及在肿瘤 治疗中的应用
恶性肿瘤的治疗现状
恶性肿瘤
治愈45％
难于治愈55％
未缓解
缓解后复发
恶性肿瘤的多学科综合治疗
恶性肿瘤各种治疗手段各具优势与不足
肿瘤外科学 肿瘤放射治疗学 肿瘤化学治疗学 肿瘤生物学治疗
侧重点不同 局部与全身 早、中、晚期
负载的DC细胞、DC-CIK细胞及在肿瘤细胞治疗方面的应用的制作技术
图片简介:本技术介绍了一种负载的DC细胞、DC CIK细胞及在肿瘤细胞治疗方面的应用。
本技术研究结果表明，2'FL负载可以提高DC细胞的活性，2'FL负载的DC细胞不仅可以促进CIK细胞体外增殖，还可以提高CIK细胞对肿瘤细胞的杀伤力。
以2'FL负载的DC细胞替代常规未经负载的DC细胞制得的DC CIK细胞可以用于制备抗肿瘤药物，在体外共培养后输入肿瘤患者体内进行细胞治疗；也可以直接将2'FL负载的DC细胞用于制备抗肿瘤药物，输入肿瘤患者体内后激活患者体内的CIK细胞进行细胞治疗。
技术要求1.一种DC-CIK细胞，其特征在于：该DC-CIK细胞由DC细胞和CIK细胞共培养制的；所述DC细胞为2'-岩藻糖基乳糖负载的DC细胞。
2.权利要求1所述的DC-CIK细胞用于制备抗肿瘤药物的用途。
3.一种DC细胞，其特征在于：该DC细胞为2'-岩藻糖基乳糖负载的DC细胞。
4.权利要求3所述的DC细胞用于CIK细胞体外培养促进其增殖的用途。
5.权利要求3所述的DC细胞用于CIK细胞体外培养提高其杀伤力的用途。
6.权利要求3所述的DC细胞用于制备抗肿瘤药物的用途。
7.2'-岩藻糖基乳糖用于DC细胞体外培养提高其活性的用途，所述活性指与CIK细胞共培养提高其对肿瘤细胞的杀伤力。
技术说明书一种负载的DC细胞、DC-CIK细胞及在肿瘤细胞治疗方面的应用技术领域本技术属于生物领域，涉及肿瘤的细胞治疗，具体涉及一种负载的DC细胞、DC-CIK细胞及在肿瘤细胞治疗方面的应用。
背景技术DC-CIK即为CIK细胞与DC细胞在体外共同培养，在促进DC细胞成熟的同时，更加强了ClK细胞的抗肿瘤活性。
DC细胞能激活人体的免疫系统，可以长期的监视、杀伤肿瘤细胞，表现出了强大的抗原提呈功能；CIK细胞能够直接并精准的“点杀”肿瘤细胞，清除微小病灶，且不会殃及正常组织，所以将DC与CIK细胞联合培养(即DC-CIK细胞)，既能凸显出特异性的免疫杀伤，又能展现其强大的非特异性的抗瘤效应，如同战场中的“侦察兵”与“炮兵”之间的相互配合的战略部署。
DCCIK细胞的制备及在肿瘤治疗中的应用教学课件ppt
05
临床应用和案例分析
dccik细胞治疗的临床试验研究
临床试验研究概述
dccik细胞治疗的临床试验旨在 评估其安全性和有效性，为正式 应用于临床提供依据。
试验设计
临床试验设计需严谨，包括患者 筛选、治疗分组、疗效评估等环 节。
试验结果
根据试验结果分析，dccik细胞 治疗对某些肿瘤具有一定的疗效 ，如肝癌、肺癌等。
04
dccik细胞制备及应用的实验技术
实验动物的选取和预处理
实验动物种类的选择
应选择易感染肿瘤且肿瘤生长周期较短的动物，如小鼠。
实验动物预处理
包括饲养环境、饮食、健康状况等方面的管理。
dccik细胞的实验室制备和扩增
dccik细胞制备
将肿瘤细胞与淋巴细胞在特定条件下进行混合培养，诱导产生dccik细胞。
DCCIK细胞在肿瘤治疗中的意 义
DCCIK细胞治疗是一种新型的肿瘤治疗方法，具有独 特的优势和潜力。其可直接杀伤肿瘤细胞、调节机体免 疫功能，改善肿瘤微环境等，为肿瘤治疗提供了新的途 径。
dccik细胞治疗面临的挑战和未来发展方向
要点一
DCCIK细胞治疗的挑战
要点二
未来发展方向
目前，DCCIK细胞治疗仍面临着许多挑战，如制备效 率低下、治疗过程中可能出现的副作用、个体化差异等 问题，需要进一步研究和改进。
dccik细胞培养基的制备和优化
基本成分
DCCIK细胞培养基的基本成分为DMEM高糖培养基、 胎牛血清、青霉素、链霉素、非必需氨基酸、谷氨酰 胺等。
优化方法
为了提高DCCIK细胞的生长速度和活性，可以加入适 量的生长因子、激素、抗体等，例如IL-2、IFN-γ、 TGF-β等，以促进细胞的生长和分化。此外，也可以 添加适量的营养物质，如葡萄糖、氨基酸、维生素等 ，以满足细胞的代谢需求。制备好的DCCIK细胞培养 基应在无菌条件下保存，并定期检查其质量和活性。
DC和CIK细胞与肿瘤免疫治疗
DC和CIK细胞在肿瘤免疫治疗上应用易平勇湖南省肿瘤医院内五科一、肿瘤免疫治疗的必要性肿瘤治疗面临复发与转移的重大难题，免疫治疗与化疗、手术、放疗有机结合，通过调动机体自身的抗肿瘤免疫能力，达到清除体内不同部位的微小残留病灶、防治肿瘤复发与转移的作用。
1．肿瘤免疫编辑·2002年Schreiber和Dunn等首次提出该学说。
免疫系统和肿瘤相互作用中，免疫系统发挥了免疫监视和免疫逃逸的双重作用，肿瘤细胞经历清除、平衡和逃逸三个过程。
·免疫逃逸：部分肿瘤在发展过程中经历了免疫系统的重塑，其免疫表型发生改变，使弱免疫原性肿瘤细胞得以逃逸免疫系统知别和攻击。
肿瘤发生过程中的免疫编辑过程2. 肿瘤细胞逃逸免疫攻击的机制·低表达MHC·肿瘤抗原改变，低或弱的免疫原性，·肿瘤细胞分泌抑制因子诱发宿主免疫抑制·阻止免疫效应细胞接触肿瘤细胞的生理屏障·专职APC功能缺陷，与抗原提呈相关基因表达下调，缺乏共刺激因子或黏附分子·T细胞对肿瘤特异抗原耐受3. 免疫治疗的策略1调动和增强机体抗肿瘤免疫活性2增强肿瘤细胞免疫原性3打破免疫系统对肿瘤的免疫耐受状态4. 免疫治疗的类型主动免疫治疗·概念：利用抗原性疫苗对要机体进行免疫接种，诱导产生特异性免疫应答或免疫耐受，达到治疗目的。
·特点：见效慢，维持时间长如肿瘤疫苗等。
被动免疫治疗·概念：人为提供现成免疫效应物质（抗毒素、丙种球蛋白）或免疫效应细胞，直接发挥免疫效应。
·——这种免疫力是通过被动输入方式获得。
·——被动免疫后效应分子虽可立即发挥免疫效应，但不能产生记忆反应，其保护作用是短暂的。
治疗性疫苗是近年建立和发展起来的免疫治疗新概念·治疗对象难治性的疾病：如：肿瘤、自身免疫病、慢性感染、移植排斥、超敏反应等。
·作为一种特殊的治疗药物，相对预防性疫苗，利润率要高得多，而市场竞争也相对较少。
DCCIK课件
肿瘤免疫细胞治疗目前临床情况
K：早期的一种疗法，因为疗效小、毒性大，目前临床上已经基本 不再使用。 2. TIL：必须取得瘤体，从中获得淋巴细胞进行培养，在临床实施方面 的可行性较差。 3.TAK ：不能解决抗原强度和呈递表达的效率，共刺激信号的提供等， 因此疗效不稳定。 4.CIK和NK： — 依靠非特异性杀伤，不是针对患者本身的肿瘤细胞进行专门 杀伤，效力较低，需要输入大量的体外刺激的细胞，培养成本较高， 培养时间长，病人经常会出现高热等副反应。 — 依赖一种叫做NK的淋巴细胞进行杀伤，如果肿瘤细胞表面表 达了MHC分子，NKT细胞就无法对这种肿瘤细胞进行杀伤，且这种情况 经常发生，即使原发肿瘤没有表达这种结构，转移的肿瘤也经常发生 变化，从而逃避NKT细胞的杀伤。 5.DC瘤苗：在肾癌和黑色素瘤方面取得了一定的疗效，但当在肿瘤抗原 比较复杂的情况下，该方法实施效果不佳。 6.具有负向免疫调节作用的调节性T细胞：还处于早期的研究阶段。
产生干扰素的杀伤
DC , IKDC
链式激活的免疫细胞 DC-CIK
链式激活的免疫细胞（Cascade Primed Immune cells, 简称DC-CIK细胞，又名： 链式CIK）。
德国慕尼黑大学医学院免疫研究所教授 Rudolf Wank发明的一种用于肿瘤自体免 疫细胞治疗新技术。
树突状细胞的来源
DC的生物学功能
1.抗原提呈
–高水平表达MHC-II（组织相容性复合物）类分子；
–表达参与抗原摄取和转运的特殊膜受体；
–有效摄取和处理抗原，然后迁移至T细胞区； –活化未致敏（naive）T细胞； –抗原提呈效率高，少数DC可以激活T细胞。
2.
参与T细胞发育、分化和激活 3. 参与B细胞发育、分化及激活
护理路径在恶性肿瘤患者行CIK—DC细胞治疗中的应用
护理路径在恶性肿瘤患者行CIK—DC细胞治疗中的应用目的探讨临床护理路径在恶性肿瘤患者行CIK-DC细胞治疗中的应用价值。
方法对148例接受CIK-DC细胞治疗的恶性肿瘤患者随机分成两组，实验组和对照组。
实验组采用临床护理路径，对照组采用常规护理。
比较两组患者的知识掌握情况.满意度，住院时间及住院总费用。
结果实验组的各项指标均明显好于对照姐（P＜0.05）。
结论实施临床护理路径使患者对知识的掌握及满意度提高，可以缩短住院时间，并减少住院总费用。
标签：护理路径；恶性肿瘤；CIK-DC细胞临床护理路径（clinical pathway of nursing，CPN）CPN是临床路径在护理实践中的应用，是医疗卫生机构的一组成员共同制订的一种照顾模式，是一种以患者为中心，确定了由谁、在什么时间、什么地点、采取什么措施、达到什么结果的护理服务步骤路线图或表，对某种疾病的大多数患者最有效照顾流程的护理规范[1，2]。
CIK-DC作为一种新型的过继免疫治疗方法，与肿瘤的常规治疗方法手术、化疗、放疗等联合应用可实现肿瘤的多学科综合治疗，取得良好的疗效，在临床上得到广泛应用生物治疗已成为继手术、放疗、化疗后对肿瘤患者进行治疗的重要手段[3]。
因此，精心护理是治疗顺利进行、取得满意疗效的保证。
我科自2012年开展生物治疗以来，成立了CPN小组，制订护理路径表，进行临床实践，现将其效果报告如下。
1 资料与方法1.1 一般资料为2013年1月～2014年2月我科收治入院行CIK-DC细胞治疗的恶性肿瘤患者80例。
采用随机数字表法将患者分为两组：实验组40例，男性26例，女性14例；年龄41～86岁，平均62.3岁；小学文化18例，中学文化13例，大专以上文化9例。
对照组40例，男21例，女19例；年龄40～79岁，平均61.3岁；小学文化19例，中学文化15例，大专以上文化6例。
两组患者在性别、年龄、文化程度、病情方面的差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。
DC-CIK生物免疫疗法
DC-CIK生物免疫疗法一、DC细胞治疗 (1)什么是DC细胞治疗 (1)DC细胞治疗肿瘤的原理 (2)DC细胞治疗的肿瘤有哪些 (2)DC细胞治疗方案的优势 (2)DC细胞治疗的适用人群 (2)二、CIK细胞治疗 (3)什么是CIK细胞治疗 (3)CIK细胞的治疗流程及原理 (3)CIK细胞治疗的适宜人群 (3)CIK细胞治疗的优势 (4)CIK细胞治疗的效果 (4)三、DC-CIK细胞治疗 (4)什么是DC-CIK细胞治疗 (4)DC-CIK细胞治疗的肿瘤有哪些 (5)DC-CIK细胞治疗的效果 (5)DC-CIK细胞治疗的适宜人群 (5)DC-CIK细胞治疗方案的优势 (5)附：................................................................................................... 错误！未定义书签。
（一）、外周血单个核细胞采集工作流程： ................................ 错误！未定义书签。
（二）、树突状细胞免疫接种工作流程：.................................... 错误！未定义书签。
（三）治疗方案图示：................................................................ 错误！未定义书签。
（四）、”DC-CIK免疫细胞疗法”研究发现.................................. 错误！未定义书签。
（五）、治疗案例....................................................................... 错误！未定义书签。
案例一 ................................................................................. 错误！未定义书签。
DC-CIK在肿瘤治疗中的应用
一DC-CIK治疗恶性肿瘤疾病方案总论一、适用人群1. 入选标准适用于各类恶性肿瘤疾病患者。
2. 排除标准严重心脏病，包括近期内患心肌梗塞、失代偿性心力衰竭、严重心律失常、顽固性不稳定型心绞痛等；近期内患急性脑出血者；严重哮喘或其它严重呼吸功能不全；急性肾功能衰竭；有严重出血倾向或凝血异常者；如进行介入治疗，对造影剂过敏者。
二、树突状细胞（DC）联合细胞因子活化的杀伤细胞（CIK）抗肿瘤治疗原理1. 肿瘤免疫治疗包括抗体治疗细胞治疗细胞因子治疗治疗型疫苗2. 机理三、DC与CIK联合治疗的优点(1) 由于肿瘤细胞的多态性，表达和不表达MHC-I类分子的肿瘤细胞同时存在，这就决定了单一的免疫治疗方法不能彻底解决肿瘤复发。
(2) 负载肿瘤抗原的DC细胞，在体内产生肿瘤特异性CTL，攻击表达MHC-I类分子的肿瘤细胞。
(3) CIK细胞攻击不表达MHC-I类分子的肿瘤细胞。
(4) 两种细胞联合治疗，有可能消除各种残存的癌细胞。
(5) 可以兼顾到短期效果和长期疗效的问题。
四、相关检查传染病四项；出凝血时间：采集当日的血象检查。
五、细胞采集质量标准病人外周血WBC大于4×109/L；病人外周血单核细胞计数大于0.4×109/L；病人外周血淋巴细胞计数大于1.0×109/L；采集6～9L病人外周血单个核细胞；采集的单个核细胞总数不小于4×109。
六、临床治疗方案DC细胞通过静脉和皮下两种途径注入体内，CIK细胞经静脉注射到体内。
七、不良反应的预防和处理可能出现发热、肌肉酸痛、不适等感觉，高热者可适当肌注安痛定。
出现不良反应，一般对症处理即可。
八、影响治疗效果的因素临床治疗方案合理，主要是细胞免疫治疗与其他治疗方法的有机配合。
输注的免疫细胞总量和细胞活性。
实验室与临床科室的有机配合与相互信任。
病人的配合和医患之间相互信任。
九、细胞免疫治疗中间化疗的作用化疗的目的并非杀伤肿瘤细胞，而是免疫调节作用。
矿产
矿产资源开发利用方案编写内容要求及审查大纲
矿产资源开发利用方案编写内容要求及《矿产资源开发利用方案》审查大纲一、概述
㈠矿区位置、隶属关系和企业性质。
如为改扩建矿山, 应说明矿山现状、
特点及存在的主要问题。
㈡编制依据
(1简述项目前期工作进展情况及与有关方面对项目的意向性协议情况。
(2 列出开发利用方案编制所依据的主要基础性资料的名称。
如经储量管理部门认定的矿区地质勘探报告、选矿试验报告、加工利用试验报告、工程地质初评资料、矿区水文资料和供水资料等。
对改、扩建矿山应有生产实际资料, 如矿山总平面现状图、矿床开拓系统图、采场现状图和主要采选设备清单等。
二、矿产品需求现状和预测
㈠该矿产在国内需求情况和市场供应情况
1、矿产品现状及加工利用趋向。
2、国内近、远期的需求量及主要销向预测。
㈡产品价格分析
1、国内矿产品价格现状。
2、矿产品价格稳定性及变化趋势。
三、矿产资源概况
㈠矿区总体概况
1、矿区总体规划情况。
2、矿区矿产资源概况。
3、该设计与矿区总体开发的关系。
㈡该设计项目的资源概况
1、矿床地质及构造特征。
2、矿床开采技术条件及水文地质条件。
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ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
26、要使整个人生都过得舒适、愉快，这是不可能的，因为人类必须具备一种能应付逆境的态度。——卢梭
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27、只有把抱怨环境的心情，化为上进的力量，才是成功的保证。——罗曼·罗兰
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28、知之者不如好之者，好之者不如乐之者。——孔子
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29、勇猛、大胆和坚定的决心能够抵得上武器的精良。——达·芬奇
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30、意志是一个强壮的盲人，倚靠在明眼的跛子肩上。——叔本华
谢谢！
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癌症治疗的新希望-DC-CIK细胞的制备 及在肿瘤治疗中的应用
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6、黄金时代是在我们的前面，而不在 我们的 后面。
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7、心急吃不了热汤圆。
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8、你可以很有个性，但某些时候请收 敛。
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9、只为成功找方法，不为失败找借口 (蹩脚 的工人 总是说 工具不 好)。
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10、只要下定决心克服恐惧，便几乎 能克服 任何恐 惧。因 为，请 记住， 除了在 脑海中 ，恐惧 无处藏 身。-- 戴尔． 卡耐基 。