常用缓冲溶液的配制方法

常用缓冲溶液的配制方法

1．甘氨酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L）

X毫升0.2 mol/L甘氨酸+Y毫升0.2 mol/L HCI，再加水稀释至200毫升

甘氨酸分子量 = 75.07，0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升。

2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（0.05 mol/L）

X毫升0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾 + 0.2 mol/L HCl，再加水稀释到20毫升

邻苯二甲酸氢钾分子量 = 204.23，0.2 mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升

3．磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液

Na2HPO4分子量 = 14.98，0.2 mol/L溶液为28.40克/升。

Na2HPO4-2H2O分子量 = 178.05，0.2 mol/L溶液含35.01克/升。

C4H2O7·H2O分子量 = 210.14，0.1 mol/L溶液为21.01克/升。4．柠檬酸–氢氧化钠-盐酸缓冲液

①使用时可以每升中加入1克克酚，若最后pH值有变化，再用少量50% 氢

氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。

5．柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液（0.1 mol/L）

柠檬酸C6H8O7·H2O：分子量210.14，0.1 mol/L溶液为21.01克/升。

柠檬酸钠Na3 C6H5O7·2H2O：分子量294.12，0.1 mol/L溶液为29.41克/毫升。

6．乙酸–乙酸钠缓冲液（0.2 mol/L）

Na2Ac·3H2O分子量 = 136.09，0.2 mol/L溶液为27.22克/升。7．磷酸盐缓冲液

（1）磷酸氢二钠–磷酸二氢钠缓冲液（0.2）

Na 2HPO 4·2H 2O 分子量 = 178.05，0.2 mol/L 溶液为85.61克/升。 Na 2HPO 4·2H 2O 分子量 = 358.22，0.2 mol/L 溶液为71.64克/升。 Na 2HPO 4·2H 2O 分子量 = 156.03，0.2 mol/L 溶液为31.21克/升。 （2）磷酸氢二钠–磷酸二氢钾缓冲液（1/15 mol/L ）

Na 2HPO 4·2H 2O 分子量 = 178.05，1/15M

溶液为11.876克/升。 KH 2PO 4分子量 = 136.09，1/15M 溶液为9.078克/升。 8．磷酸二氢钾–氢氧化钠缓冲液（0.05M ）

X 毫升0.2M K 2PO 4 + Y 毫升0.2N NaOH 加水稀释至29毫升

9．巴比妥钠-盐酸缓冲液（18℃）

巴比妥钠盐分子量=206.18;0.04M溶液为8.25克/升

10．Tris–盐酸缓冲液（0.05M，25℃）

50毫升0.1M三羟甲基氨基甲烷（Tris）溶液与X毫升0.1N盐酸混匀后，加水稀释至100毫升。

三羟甲基氨基甲烷（Tris）HOCH2 CH2OH HOCH2 NH2 C

分子量=121.14;

0.1M溶液为12.114克/升。Tris溶液可从空气中吸收二氧化碳，使用时注意

将瓶盖严。

11．硼酸–硼砂缓冲液（0.2M硼酸根）

硼砂Na2B4O7·H2O,分子量=381.43;0.05M溶液（=0.2M硼酸根）含19.07克/升。硼酸H2BO3,分子量=61.84,0.2M溶液为12.37克/升。

硼砂易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存。

11．硼酸-硼砂缓冲液（0.2M硼酸根）

硼砂Na2B4O7·10H2O,分子量=381.43;0.05M溶液（=0.2M硼酸根）含19.07克/升。

硼酸H 2BO 3，分子量=61.84, 0.2M 溶液为12.37克/升。 硼砂 易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存。 12．甘氨酸–氢氧化钠缓冲液（0.05M ）

X 毫升0.2M 甘氨酸+Y 毫升0.2NnaOH 加水稀释至200毫升

甘氨酸分子量=75.07;0.2M 溶液含15.01克/升。 13．硼砂-氢氧化钠缓冲液（0.05M 硼酸根）

X 毫升0.05M 硼砂+Y 毫升0.2NNaOH 加水稀释至200毫升 硼砂Na 2B 4O 7·10H 2O,分子量=381.43;0.05M 溶液为19.07克/升。 14．碳酸钠-

碳酸氢钠缓冲液（0.1M ） Ca 2+、Mg 2+存在时不得使用

Na2CO2·10H2O分子量=286.2;0.1M溶液为28.62克/升。

N2HCO3分子量=84.0;0.1M溶液为8.40克/升。

15．“PBS”缓冲液

缓冲盐溶液

缓冲溶液是一类能够抵制外界加入少量酸和碱的影响，仍能维持pH值基本不变的溶液。该溶液的这种抗pH变化的作用称为缓冲作用。缓冲溶液通常是由一或两种化合物溶于溶剂（即纯水）所得的溶液，溶液内所溶解的溶质（化合物）称之为缓冲剂，调节缓冲剂的配比即可制得不同pH的缓冲液。

缓冲溶液的正确配制和pH值的准确测定，在生物化学的研究工作中有着极为重要的意义，因为在生物体内进行的各种生物化学过程都是在精确的pH值下进行的，而且受到氢离子浓度的严格调控，能够做到这一点是因为生物体内有完善的天然缓冲系统。生物体内细胞的生长和活动需要一定的pH值，体内pH环境的任何改变都将引起与代谢有关的酸碱电离平衡移动，从而影响生物体内细胞的活性。为了在实验室条件下准确地模拟生物体内的天然环境，就必须保持体外生物化学反应过程有体内过程完全相同的pH值，此外，各种生化样品的分离纯化和分析鉴定，也必须选用合适的pH值，因此，在生物化学的各种研究工作中和

生物技术的各种开发工作中，深刻地了解各种缓冲试剂的性质，准确恰当地选择和配制各种缓冲溶液，精确地测定溶液的pH值，就是非常重要的基础实验工作。

下表列出某些人体体液的pH值：

7.1 基本概念

⑴ Br?nsted-Lowry酸碱理论（又称酸碱质子理论）。1923年由丹麦化学家J.N.Br?nsted和英国化学家T.M.Lowry同时提出了酸碱质子学说，发展了酸碱理论，被后人称为酸碱质子理论或Br?nsted-Lowry酸碱理论。他们认为凡能释放质子的分子或离子（如：H2O，HCl，NH4+，HSO4—等）称为酸，凡能接受质子的分子或离子（如：H2O，NH3，Cl—等）称为碱。因此，一种酸释放质子后即成为碱，称为该酸的共轭碱，同样一种碱与质子结合后，形成对应的酸，称为该碱的共轭酸。

A—H ＋ B— A ＋ B—H

酸1碱 2 碱1酸2

酸1是碱1的共轭酸，碱 2 是酸2的共轭碱。

如盐酸在水中的解离：

HCl Cl—＋ H+

HCl是酸，Cl—是它的共轭碱。

⑵ 缓冲体系的设计：

强电解质溶于水几乎全部解离为正负离子，弱电解质溶于水时，则不完全解离，只有部分的分子解离出正负离子，其馀以分子形式存在于溶液中。例如弱酸（HA）及其盐溶于水时，只有部分HA解离为 H+和 A—离子，其平衡方程式如下： K1

HA A—＋ H+ (1-1)

K2

∴(1-

2)

(1-2)式两边取负对数： (1-3)