冷冻保存对人类卵母细胞线粒体DNA缺失和能量代谢的影响

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ＣｒｙｏｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎＣＡＩＸｕｅ－ｙｏｎｇ，ＰＥＮＧＮａｎ— ｎｉ，ＤｆＡ０Ｒｕｉ — ｙｔｎＬＩＬｉｎｇ— ｗｅｉ，ＣＨＥＮＹｎ．ＲｅａｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅＣｅｎｔｒｅ，ＳｈｅｎｚｈｅｎＳｅｃｏｎｄａｒｙＰｅｏｐｌｅＨｏｓｐｉｔａｌ，Ｓｈｅｎｚｈｅｎ５１８０３５，ＣｈｉｎａＣＡＩＸｕｅ－ｙｏｎｇ，ＤｌＡ０Ｒｕｉ－ｙｉｎｇ，ＣＨＥＮ
ｄｅｌｅｔｉｏｎｓａｎｄｅｎｅｒｇｙｍｅｔａｂｏｌｉｓｍｏｆｈｕｍａｎｏｏｃｙｔｅ，ＳＯａｓｔｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｃｒ￣ｏｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎｏｎｏｏｃｙｔｅｓ
【关键词】低温保存；卵母细胞；ＤＮＡ，线粒体；应激，氧化性
ＳｔｕｄｙｏｎＨｕｍａｎＯｏｃｙｔｅＭｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌＤＮＡＤｅｌｅｔｉｏｎｓａｎｄＥｎｅｒｇｙＭｅｔａｂｏｌｉｓｍｂｅｆｏｒｅａｎｄａｆｔｅｒ
ｗｅｉ）
Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒ：ＣＡＩＸｕｅ－ｙｏｎｇ，Ｅ－ｍａｉｌ：１８４６７９０３４０＠ｑｑ．ｔｏｍ
【Ａｂｓｔｒａｃｔ】０ｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｃｒｙｏｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎｏｎｔｈｅｍｉｔｏｃｈｏｎｄｉｆＭＤＮＡ（ｍｔＤＮＡ）
拷贝数和三磷酸腺苷（ＡＴＰ）含量变化。结果：卵母细胞ｍｔＤＮＡ缺失率和ｍｔＤＮＡ拷贝数在冷冻处理前后差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）；冷冻后卵母细胞内ＡＴＰ含量低于冷冻前新鲜卵母细胞。结论：冷冻保存对卯母细胞
ｍｔＤＮＡ缺失及拷贝数影响较小，可较好地实现保存卵母细胞的目的。
ｃｒｙｏｐｒｅｓｅｖａｒｔｉｏｎｓｔｕｄｙ．Ｔｈｏｓｅｏｏｃｙｔｅｓｗｅｒｅｒａｎｄｏｍｌｙｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏｔｗｏｇｒｏｕｐｓ，ｏｎｅｆｏｒｖｉｔｉｒｉｆｃａｔｉｏｎｃｒｙｏｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎ
・３５７・
・
论著・
冷冻保存对人类卵母细胞线粒体ＤＮＡ缺失和能量代谢的影响
蔡学泳，彭南妮，刁瑞英，李凌伟，陈燕
【摘要】目的：通过检测玻璃化冷冻前后卵母细胞线粒体ＤＮＡ（ｍｔＤＮＡ）缺失和能量代谢变化，以探讨冷冻保存对卵母细胞质量的影响。方法：收集体外受精（ＩＶＦ）废弃的人卵母细胞和受精卵，包括未受精
国际生殖健康／计划生育杂志２０１５年９月第３４卷第５期ＪＩｎｔＲｅｐｒｏｄＨｅａｈｈ／ＦａｍＰｌａｎ，Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ２０１５，Ｖｏ１．３４，Ｎｏ．５
（０ＰＮ）、两原核（２ＰＮ）和三原核（３ＰＮ）；随机分为２组，Ａ组为经玻璃化冷冻保存，Ｂ组为新鲜对照组。采用巢式
聚合酶链反应（ｎｅｓｔＰＣＲ）检测冷冻前后卵母细胞ｍｔＤＮＡ缺失差异；并进一步比较冷冻前后卵母细胞ｍｔＤＮＡ
Ｙａｎ）；ＲｅｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅＣｅｒｔｔｒｅ，Ｓｈｅｎｚｈｅｎ￡ ∞
ＰｅｏｐｌｅＨｏｓｐｉｔａｌ，Ｓｈｅｎｚｎ５１８０３０，Ｃｈｉｎａ（ＰＥＮＧＮａｎ一，
（ＧｒｏｕｐＡ）ａｎｄｔｈｅｏｔｈｅｒａｓｃｏｎｔｒｏｌ（ＧｒｏｕｐＢ，ｗｉｔｈｏｕｔｃｒｙｏｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎ）．Ｔｈｅｎｅｓｔｅｄｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ（ＰＣＲ）ｗａｓｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｃｔｔｈｅｍｔＤＮＡｄｅｌｅｔｉｏｎｓｏｆｏｏｃｙｔｅｍｔＤＮＡｂｅｆｏｒｅａｎｄａｔｆｅｒｃｒｙｏｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎ．Ｒｅａｌ — ｔｉｍｅ
ｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｔｈｅｄｕｍｐｅｄｏｏｃｙｔｅｓｗｉｔｈ０ＰＮ．２ＰＮａ ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ ｄ３ＰＮｄｕｉｎｒｇｒｏｕｔｉｎｅＩＶＦｗｅｒｅｃｏｌｌｅｃｔｅｄｆｏｒｔｈｉｓ