(原花青素提取分离)
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定量分析
标准曲线
配制0.05—0.5mg/mL的原花青素对照品水溶液，于试 管中依次加入0.5mL丌同浓度对照水溶液，加入 2.5mL30g/L香草醛的甲醇溶液及2.5mL30%硫酸的甲 醇溶液，混匀后于30℃水浴保温20min后在波长为 500mn下测定绘制标准曲线。 2 线性方程为：Y=2.0669X-0.0196， R =0.9994
工艺流程
粉碎葡萄籽
称量
浸提
浓缩
合并上清液
过滤并离心
上柱洗脱
浓缩含量较高的洗脱液
喷雾干燥
实验步骤
提取
取粉碎后的葡萄籽20g 按料液比1:7加入 70%乙醇，在50℃下回流提取30min，浸 提3次，分别过滤，冷却后在4 000 r/min 转速离心10min，合并上清液，蒸发浓缩 回收乙醇。
实验步骤 分离
原花青素的用途 由于原花青素属于黄酮类化合物，具有多种生理功能 及药理作用。 随着研究人员对原花青素的研究一步一步深入，发现 原花青素的功效甚好，用途及其广泛。 原花青素的主要作用: 抗氧化剂 由于opc分子结构中有多个酚羟基B环上具有相邻 二酚羟基，且分子中有几个不氧原子相邻的二羟酚基， 有利于分子不金属离子及蛋白结合，阻止了催化自由 基反应金的属离子的活性。所以是一种很强的抗氧化 剂。
大孔树脂柱层析:将浓缩液上样已经处理好的大孔 树脂层析柱上,分别用水和20%、40%、60%、 80%的2BV的乙醇洗脱，分别收集洗脱液，检测 含量，合并含量较高的洗脱液，蒸发浓缩。
干燥
将浓缩好的样液进行喷雾干燥。
定性分析
盐酸镁粉反应 将样品 溶于1ml 乙醇 加入少 许镁粉 振摇 滴加几 滴浓盐 酸
实验试剂和仪器
Байду номын сангаас
试剂
葡萄籽 乙醇 大孔树脂 香草醛 甲醇 硫酸 盐酸 镁粉 原花青素标准品
仪器
粉碎机 电子天平 回流提取装置 离心 机 旋转蒸发仪 喷雾干燥机 色谱柱 紫 外分光光度计 烧杯 试管 秱液管
实验方案
正交试验表 以确定最佳实验路线
实验方案 由各因素对原花青素提取效果的影响大小顺序 为:提取温度(B)>料液比(C)>提取时间(D)> 乙醇体积分数(A),并由正交实验得出乙醇回流浸 提法提取葡萄籽原花青素的优方案为:A2B2C3D2。 综合单因素实验和正交实验结果,可以得出最佳工 艺条件为:乙醇体积分数为70% ,提取温50℃,料 液比为1∶7 (g/mL),提取时间为30min,提取次数 为3次
抗氧化剂工作示意图
其它主要作用
血液循环 视力保护 消除水肿 滋润皮肤 胆固醇 心脏保护剂 过敏发炎
静脉曲张 大脑功能 改善缺氧 经前综合 症 保健功能 安全性能 化妆应用
原花青素的的应用现状
基于原花青素的生理功能和药理作用且属于 天然产物安全性高，原花青素已被广泛应用 于化妆品，保健品食品及药类等领域，日益 受到人们的欢迎。 opc具有抗皱，防晒美白、收敛保湿、抗辐 射等作用。法国利用低聚opc开发出脂质体 微囊的晚霜、发乳和漱口水；美国开发出含 低opc Dermaopc的产品，可预防皮肤衰老， 使表皮细胞和血管得以修复，保护皮肤健康 循环的功效。
定量分析 空白体系 0.5mL水+2.5mL30g/L香草醛+2.5mL30% 硫酸样品体系
样品体系 取0.5mL样品水溶液，加入2.5mL加入 2.5mL30g/L香草醛的甲醇溶液和2.5mL30%硫 酸的甲醇溶液，30避光反应20min后测定A500
小结
• 通过本次试验考试，我们进一步练习了 查阅文献的能力，综合设计试验步骤的 能力，团结协作能力。
葡萄籽中原花青 素的提取分离和 检测
朱鑫皓 赵桑霞
材料选取
我们会用什么材 料来提取其中的 有效成份呢？ 葡萄籽在很多情况下被 当做废弃物丢掉，但是 葡萄籽中却有许多天然 有效成分。
实验背景
葡萄籽是葡萄酒厂的下脚料，经晒干后分离葡萄皮、葡 萄梗后所得产物。葡萄籽因其含有丰富各种氨基酸、维 生素及矿物质等。 原花青素，是一种有着特殊分子结构的生物类黄酮，是 目前国际上公认的清除人体内自由基最有效的天然抗氧 化剂。一般为红棕色粉末，气微、味涩，溶于水和大多 有机溶剂。 原花青素（葡萄籽提取物）是一种新型高效 抗氧化剂，是目前为止所发现的最强效的自由基清除剂， 具有非常强的体内活性。实验证明，OPC的抗自由基氧化 能力是维生素E的50倍，维生素C的20倍，并吸收迅速完 全，口服20分钟即可达到最高血液浓度，代谢半衰期达7 小时之久。
实验目的和要求
了解 原花青素的结构和主要理化性质
掌握葡萄籽中原花青素的提取分离检测过程
进一步学习工艺设计
实验原理
原花青素又称缩合单宁，是自然界中广泛存在 的聚多酚类化合物。葡萄籽原花青素一般采用 有机溶剂提取，其产品含有少量溶剂残留，对 人体有一定毒副作用，因此一般常选择乙醇为 提取剂。 乙醇提取的葡萄籽原花青素含有蛋白质、多 糖、黄酮类化合物等杂质，可用大孔树脂进行 纯化，提高葡萄籽原花青素的含量和纯度。
原花青素的应用现状 opc亦可制作保健食品及添加剂，例如以其 为主要成分制成的胶囊已成为美国畅销保健 食品之一。国内对opc在食品上的应用也非 常重视，如某酒业有限公司，发明了添加 opc的保健酒等。
原花青素的经济价值
原花青素的经济价值体现在其具有如此之多生 理功效和药理作用上。 根据部分保健食品的价格看 1瓶保健胶囊有60粒 250mg/粒 含有原花青素 50mg/粒 价格是130元左右 即130/（50*60）=43元/g 左右 所以原花青素带来的经济价值是很高的。 原花青素作为食品添加剂，医疗药物等也有很 大的经济价值。 例如用于抗癌药物中，其经济价值就番了好几 倍
黄酮类化合物的介绍
本项目中的原花青素就属于黄酮类化合物 中的一种。 黄酮类化合物具有抗氧化、抗癌、抗心血 管疾病、抗病毒、免疫调节等多种生理功 能及药理作用，其提取物已用于食品、药 品、化妆品等产品中。
原花青素的介绍 原花青素，简称OPC， 是一种有着特殊分子结 构的生物类黄酮，是目 前国际上公认的清除人 体内自由基最有效的天 然抗氧化剂。一般为红 棕色粉末，气微、味涩， 溶于水和大多有机溶剂。
定量分析
标准曲线
配制0.05—0.5mg/mL的原花青素对照品水溶液，于试 管中依次加入0.5mL丌同浓度对照水溶液，加入 2.5mL30g/L香草醛的甲醇溶液及2.5mL30%硫酸的甲 醇溶液，混匀后于30℃水浴保温20min后在波长为 500mn下测定绘制标准曲线。 2 线性方程为：Y=2.0669X-0.0196， R =0.9994
工艺流程
粉碎葡萄籽
称量
浸提
浓缩
合并上清液
过滤并离心
上柱洗脱
浓缩含量较高的洗脱液
喷雾干燥
实验步骤
提取
取粉碎后的葡萄籽20g 按料液比1:7加入 70%乙醇，在50℃下回流提取30min，浸 提3次，分别过滤，冷却后在4 000 r/min 转速离心10min，合并上清液，蒸发浓缩 回收乙醇。
实验步骤 分离
原花青素的用途 由于原花青素属于黄酮类化合物，具有多种生理功能 及药理作用。 随着研究人员对原花青素的研究一步一步深入，发现 原花青素的功效甚好，用途及其广泛。 原花青素的主要作用: 抗氧化剂 由于opc分子结构中有多个酚羟基B环上具有相邻 二酚羟基，且分子中有几个不氧原子相邻的二羟酚基， 有利于分子不金属离子及蛋白结合，阻止了催化自由 基反应金的属离子的活性。所以是一种很强的抗氧化 剂。
大孔树脂柱层析:将浓缩液上样已经处理好的大孔 树脂层析柱上,分别用水和20%、40%、60%、 80%的2BV的乙醇洗脱，分别收集洗脱液，检测 含量，合并含量较高的洗脱液，蒸发浓缩。
干燥
将浓缩好的样液进行喷雾干燥。
定性分析
盐酸镁粉反应 将样品 溶于1ml 乙醇 加入少 许镁粉 振摇 滴加几 滴浓盐 酸
实验试剂和仪器
Байду номын сангаас
试剂
葡萄籽 乙醇 大孔树脂 香草醛 甲醇 硫酸 盐酸 镁粉 原花青素标准品
仪器
粉碎机 电子天平 回流提取装置 离心 机 旋转蒸发仪 喷雾干燥机 色谱柱 紫 外分光光度计 烧杯 试管 秱液管
实验方案
正交试验表 以确定最佳实验路线
实验方案 由各因素对原花青素提取效果的影响大小顺序 为:提取温度(B)>料液比(C)>提取时间(D)> 乙醇体积分数(A),并由正交实验得出乙醇回流浸 提法提取葡萄籽原花青素的优方案为:A2B2C3D2。 综合单因素实验和正交实验结果,可以得出最佳工 艺条件为:乙醇体积分数为70% ,提取温50℃,料 液比为1∶7 (g/mL),提取时间为30min,提取次数 为3次
抗氧化剂工作示意图
其它主要作用
血液循环 视力保护 消除水肿 滋润皮肤 胆固醇 心脏保护剂 过敏发炎
静脉曲张 大脑功能 改善缺氧 经前综合 症 保健功能 安全性能 化妆应用
原花青素的的应用现状
基于原花青素的生理功能和药理作用且属于 天然产物安全性高，原花青素已被广泛应用 于化妆品，保健品食品及药类等领域，日益 受到人们的欢迎。 opc具有抗皱，防晒美白、收敛保湿、抗辐 射等作用。法国利用低聚opc开发出脂质体 微囊的晚霜、发乳和漱口水；美国开发出含 低opc Dermaopc的产品，可预防皮肤衰老， 使表皮细胞和血管得以修复，保护皮肤健康 循环的功效。
定量分析 空白体系 0.5mL水+2.5mL30g/L香草醛+2.5mL30% 硫酸样品体系
样品体系 取0.5mL样品水溶液，加入2.5mL加入 2.5mL30g/L香草醛的甲醇溶液和2.5mL30%硫 酸的甲醇溶液，30避光反应20min后测定A500
小结
• 通过本次试验考试，我们进一步练习了 查阅文献的能力，综合设计试验步骤的 能力，团结协作能力。
葡萄籽中原花青 素的提取分离和 检测
朱鑫皓 赵桑霞
材料选取
我们会用什么材 料来提取其中的 有效成份呢？ 葡萄籽在很多情况下被 当做废弃物丢掉，但是 葡萄籽中却有许多天然 有效成分。
实验背景
葡萄籽是葡萄酒厂的下脚料，经晒干后分离葡萄皮、葡 萄梗后所得产物。葡萄籽因其含有丰富各种氨基酸、维 生素及矿物质等。 原花青素，是一种有着特殊分子结构的生物类黄酮，是 目前国际上公认的清除人体内自由基最有效的天然抗氧 化剂。一般为红棕色粉末，气微、味涩，溶于水和大多 有机溶剂。 原花青素（葡萄籽提取物）是一种新型高效 抗氧化剂，是目前为止所发现的最强效的自由基清除剂， 具有非常强的体内活性。实验证明，OPC的抗自由基氧化 能力是维生素E的50倍，维生素C的20倍，并吸收迅速完 全，口服20分钟即可达到最高血液浓度，代谢半衰期达7 小时之久。
实验目的和要求
了解 原花青素的结构和主要理化性质
掌握葡萄籽中原花青素的提取分离检测过程
进一步学习工艺设计
实验原理
原花青素又称缩合单宁，是自然界中广泛存在 的聚多酚类化合物。葡萄籽原花青素一般采用 有机溶剂提取，其产品含有少量溶剂残留，对 人体有一定毒副作用，因此一般常选择乙醇为 提取剂。 乙醇提取的葡萄籽原花青素含有蛋白质、多 糖、黄酮类化合物等杂质，可用大孔树脂进行 纯化，提高葡萄籽原花青素的含量和纯度。
原花青素的应用现状 opc亦可制作保健食品及添加剂，例如以其 为主要成分制成的胶囊已成为美国畅销保健 食品之一。国内对opc在食品上的应用也非 常重视，如某酒业有限公司，发明了添加 opc的保健酒等。
原花青素的经济价值
原花青素的经济价值体现在其具有如此之多生 理功效和药理作用上。 根据部分保健食品的价格看 1瓶保健胶囊有60粒 250mg/粒 含有原花青素 50mg/粒 价格是130元左右 即130/（50*60）=43元/g 左右 所以原花青素带来的经济价值是很高的。 原花青素作为食品添加剂，医疗药物等也有很 大的经济价值。 例如用于抗癌药物中，其经济价值就番了好几 倍
黄酮类化合物的介绍
本项目中的原花青素就属于黄酮类化合物 中的一种。 黄酮类化合物具有抗氧化、抗癌、抗心血 管疾病、抗病毒、免疫调节等多种生理功 能及药理作用，其提取物已用于食品、药 品、化妆品等产品中。
原花青素的介绍 原花青素，简称OPC， 是一种有着特殊分子结 构的生物类黄酮，是目 前国际上公认的清除人 体内自由基最有效的天 然抗氧化剂。一般为红 棕色粉末，气微、味涩， 溶于水和大多有机溶剂。