天然产物活性成分的提取与分离
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服液、冲剂等； 3、提高中药及制剂的质量：有效成分含量测定，如连翘
以HPLC法用连翘苷做限量指标； 4、提供中药炮制现代科学依据：如黄芩（含黄芩苷）；
冷提（酶水解黄芩苷），宜热提（灭活酶）； 5、开辟药源、开发新药：如小檗碱（黄连，资源有限），
三颗针、黄柏含量也很高；中药新药：有效成分（一 类），有效部位（二类），复方（三类）；
3、提取方法：
①冷提法： 浸渍法：药材+溶剂 浸泡 提取物 渗漉法：药材粉碎后，加入渗漉桶中（见图） ②热提法 煎煮法 回流提取法 连续提取法
（二）水蒸气蒸馏法 挥发油多用此法，要求能挥发、与 水不混溶、遇水稳定。
（三）升华法：气态 → 固态 如樟木中樟脑的提取。
四、超声波辅助提取法
原理：超声波强化萃取的最主要原因是 由于超声波产生的空化效应。超声空化 是指液体中的微小泡核在声波作用下被 激活，表现为泡核的振荡、生长、收缩 乃至崩溃等一系列动力学过程
b、溶剂的影响 洗脱能力：
水<甲醇<丙酮<氢氧化钠水溶液<甲酰胺< 二甲基酰胺<尿素水溶液
③大孔吸附树脂：
原理：吸附性（范德华力及氢键）与分子筛性（多 孔结构）结合。
影响因素：树脂型号、溶剂种类及化合物性质。
百度文库
应用：除杂与富集。一般水煎法收率30%，水醇法 15%，大孔树脂法收率5%。
如：
人参提取液 通过树脂柱 水洗树脂
天然产物化学活性成分的提取与分离
天然药物
植物：87%，如人参、甘草等 动物：12.3%，牛黄、鹿茸等 矿物：0.6%，石膏、朱砂等
天然产物化学：运用现代科 学理论和方法研究天然药物 中化学成分的一门学科。
一、学习天然药化的目的和意义： 1、探索中药防病治病的机理：研究体内吸收、分布、排
泄，进一步研究结构与活性的关系； 2、改进剂型、提高疗效：丸散膏丹→注射剂、滴丸、口
五、ＣＯ２超临界萃取提取
原理：超临界CO2流体萃取（SFE）分离过程的原理是利 用超临界流体的溶解能力与其密度的关系，即利用压 力和温度对超临界流体溶解能力的影响而进行的。在 超临界状态下，将超临界流体与待分离的物质接触， 使其有选择性地把极性大小、沸点高低和分子量大小 的成分依次萃取出来。当然，对应各压力范围所得到 的萃取物不可能是单一的，但可以控制条件得到最佳 比例的混合成分，然后借助减压、升温的方法使超临 界流体变成普通气体，被萃取物质则完全或基本析出， 从而达到分离提纯的目的，所以超临界CO2流体萃取过 程是由萃取和分离过程组合而成的。
pb2+、 Ca2+ 等金属离子可与酸、碱性化合物 生成不溶于水的沉淀。
（二）根据化合物在两相溶剂间分配比差别：
⑴液-液萃取法：
1、分配系数：K=C上/C下 2、分离因子：β= KA/KB（ KA> KB），表示分离 难易一般β>100，简单萃取；β<50，难分离；β=1 ，无法分离
⑵CCD法（Countercurrent distribution， 逆流分溶法）：
二、分离方法
（一）根据物质溶解度差别
1、结晶与重结晶：利用溶剂对有效成分 与杂质在冷热情况下溶解度显著差异以获 得结晶的方法。
2、改变混合溶剂极性 水/醇法：水提液+醇（数倍） 多糖、蛋 白质除去。
醇/水法：醇提液+水（数倍） 素、油脂除去。 3、改变pH值 碱提酸沉 酸提碱沉
叶绿
4、金属盐络合法：
是一种多次连续的液-液萃取分离过程。
⑶DCCC (液滴逆流色谱)和HSCCC (高速逆流色谱法)
是在逆流分溶法基础上创建的色谱装置，可使流动相 呈液滴形式在固定相间交换，分离效果好。多用于分离皂 苷、蛋白质、糖类等。
⑷液-液分配柱色谱：
将两相溶剂中的一相涂覆在硅胶等多孔载 体上，作为固定相，填充于色谱柱中，用流动 相洗柱。 (5)ＴＬＣ色谱
（五）根据物质解离程度不同进行分离：
离子交换树脂法：由母核（二乙烯苯）与离子交换 基团组成。有阳离子交换树脂及阴离子交换树脂。
（六）半制备色谱进行分离
原理：是基于混合物中的组分在固定相和 移动相之间的不均匀分配。不均匀分配的 先决条件是各个单一组分对两相不同的“ 亲和力”和向两相不均匀扩散的可能性。
②极性强弱比较
a 官 能 团 极 性 ： RCOOH>Ar-OH>H2O>ROH>R-NH2 >RCONH2>RCHO>RCOOR’>ROR’>R-X>R-H b 官能团相同，极性官能团数目多，极性大。 c ε介电常数越大，极性越强。 2、半化学吸附：聚酰胺（氢键缔合）
影响因素：a、溶质的影响
（三）根据物质吸附力差别 物理吸附：无选择性，吸附与解 吸可逆，如硅胶、氧化铝、活性炭
吸附 化学吸附： 有选择性，吸附牢固 半化学吸附：介于上述二者之间， 如聚酰胺
①物理吸附：相似者易于吸附
吸附力三要素
溶质极性 溶剂极性 吸附剂活性
硅胶、氧化铝为极性吸附剂，溶质极性 大，吸附力强；溶剂极性大，洗脱力强。活 性炭为非极性吸附剂，与此相反。
结构研究方法
一、纯度鉴定 1）物理常数：mp， [α]D 2）TLC（PC）： 三 种 展 开系统均为单一斑点。 3）GC，HPLC
二、化合物类型： 1、文献调研：同种、同属及相近属植物的成分 2、鉴别反应： 3、色谱行为：酸碱性、溶解性等 三、化合物结构： 1、光谱方法：UV、IR、1H-NMR、13C-NMR、MS 2、化学沟通：化学降解、衍生物制备、人工合成 3、立体结构：CD、ORD、2D-NMR、X-射线衍射
提取分离方法
一、提取 （一）溶剂提取法
1、理想溶剂：有效成分溶解性大，无效成分溶 解性小，与植物成分不起化学反应；安全、成本 低
原则 从单一到复合、从极性小到大
乙醚＜石油醚＜氯仿＜乙酸乙酯＜正丁醇＜乙醇 ＜甲醇＜水
2、溶剂分类： ①水，
②亲水性有机溶剂：如甲醇、乙 醇、丙酮
③亲脂性有机溶剂：石油醚、饱和 烷烃
70%乙醇洗脱 乙醇洗脱液
回收
人参总皂苷粗品
（四）、根据分子量大小差别： 凝胶色谱：分子筛，按分子由大到小顺序出柱。
葡聚糖凝胶（Sephadex）：只适用于水 中应用。
羟 丙 基 葡 聚 糖 凝 胶 （ Sephadex LH20）： 可在水及有机溶剂中使用。在 由极性及非极性溶剂组成的混合溶剂中 常起到反相色谱的作用。
以HPLC法用连翘苷做限量指标； 4、提供中药炮制现代科学依据：如黄芩（含黄芩苷）；
冷提（酶水解黄芩苷），宜热提（灭活酶）； 5、开辟药源、开发新药：如小檗碱（黄连，资源有限），
三颗针、黄柏含量也很高；中药新药：有效成分（一 类），有效部位（二类），复方（三类）；
3、提取方法：
①冷提法： 浸渍法：药材+溶剂 浸泡 提取物 渗漉法：药材粉碎后，加入渗漉桶中（见图） ②热提法 煎煮法 回流提取法 连续提取法
（二）水蒸气蒸馏法 挥发油多用此法，要求能挥发、与 水不混溶、遇水稳定。
（三）升华法：气态 → 固态 如樟木中樟脑的提取。
四、超声波辅助提取法
原理：超声波强化萃取的最主要原因是 由于超声波产生的空化效应。超声空化 是指液体中的微小泡核在声波作用下被 激活，表现为泡核的振荡、生长、收缩 乃至崩溃等一系列动力学过程
b、溶剂的影响 洗脱能力：
水<甲醇<丙酮<氢氧化钠水溶液<甲酰胺< 二甲基酰胺<尿素水溶液
③大孔吸附树脂：
原理：吸附性（范德华力及氢键）与分子筛性（多 孔结构）结合。
影响因素：树脂型号、溶剂种类及化合物性质。
百度文库
应用：除杂与富集。一般水煎法收率30%，水醇法 15%，大孔树脂法收率5%。
如：
人参提取液 通过树脂柱 水洗树脂
天然产物化学活性成分的提取与分离
天然药物
植物：87%，如人参、甘草等 动物：12.3%，牛黄、鹿茸等 矿物：0.6%，石膏、朱砂等
天然产物化学：运用现代科 学理论和方法研究天然药物 中化学成分的一门学科。
一、学习天然药化的目的和意义： 1、探索中药防病治病的机理：研究体内吸收、分布、排
泄，进一步研究结构与活性的关系； 2、改进剂型、提高疗效：丸散膏丹→注射剂、滴丸、口
五、ＣＯ２超临界萃取提取
原理：超临界CO2流体萃取（SFE）分离过程的原理是利 用超临界流体的溶解能力与其密度的关系，即利用压 力和温度对超临界流体溶解能力的影响而进行的。在 超临界状态下，将超临界流体与待分离的物质接触， 使其有选择性地把极性大小、沸点高低和分子量大小 的成分依次萃取出来。当然，对应各压力范围所得到 的萃取物不可能是单一的，但可以控制条件得到最佳 比例的混合成分，然后借助减压、升温的方法使超临 界流体变成普通气体，被萃取物质则完全或基本析出， 从而达到分离提纯的目的，所以超临界CO2流体萃取过 程是由萃取和分离过程组合而成的。
pb2+、 Ca2+ 等金属离子可与酸、碱性化合物 生成不溶于水的沉淀。
（二）根据化合物在两相溶剂间分配比差别：
⑴液-液萃取法：
1、分配系数：K=C上/C下 2、分离因子：β= KA/KB（ KA> KB），表示分离 难易一般β>100，简单萃取；β<50，难分离；β=1 ，无法分离
⑵CCD法（Countercurrent distribution， 逆流分溶法）：
二、分离方法
（一）根据物质溶解度差别
1、结晶与重结晶：利用溶剂对有效成分 与杂质在冷热情况下溶解度显著差异以获 得结晶的方法。
2、改变混合溶剂极性 水/醇法：水提液+醇（数倍） 多糖、蛋 白质除去。
醇/水法：醇提液+水（数倍） 素、油脂除去。 3、改变pH值 碱提酸沉 酸提碱沉
叶绿
4、金属盐络合法：
是一种多次连续的液-液萃取分离过程。
⑶DCCC (液滴逆流色谱)和HSCCC (高速逆流色谱法)
是在逆流分溶法基础上创建的色谱装置，可使流动相 呈液滴形式在固定相间交换，分离效果好。多用于分离皂 苷、蛋白质、糖类等。
⑷液-液分配柱色谱：
将两相溶剂中的一相涂覆在硅胶等多孔载 体上，作为固定相，填充于色谱柱中，用流动 相洗柱。 (5)ＴＬＣ色谱
（五）根据物质解离程度不同进行分离：
离子交换树脂法：由母核（二乙烯苯）与离子交换 基团组成。有阳离子交换树脂及阴离子交换树脂。
（六）半制备色谱进行分离
原理：是基于混合物中的组分在固定相和 移动相之间的不均匀分配。不均匀分配的 先决条件是各个单一组分对两相不同的“ 亲和力”和向两相不均匀扩散的可能性。
②极性强弱比较
a 官 能 团 极 性 ： RCOOH>Ar-OH>H2O>ROH>R-NH2 >RCONH2>RCHO>RCOOR’>ROR’>R-X>R-H b 官能团相同，极性官能团数目多，极性大。 c ε介电常数越大，极性越强。 2、半化学吸附：聚酰胺（氢键缔合）
影响因素：a、溶质的影响
（三）根据物质吸附力差别 物理吸附：无选择性，吸附与解 吸可逆，如硅胶、氧化铝、活性炭
吸附 化学吸附： 有选择性，吸附牢固 半化学吸附：介于上述二者之间， 如聚酰胺
①物理吸附：相似者易于吸附
吸附力三要素
溶质极性 溶剂极性 吸附剂活性
硅胶、氧化铝为极性吸附剂，溶质极性 大，吸附力强；溶剂极性大，洗脱力强。活 性炭为非极性吸附剂，与此相反。
结构研究方法
一、纯度鉴定 1）物理常数：mp， [α]D 2）TLC（PC）： 三 种 展 开系统均为单一斑点。 3）GC，HPLC
二、化合物类型： 1、文献调研：同种、同属及相近属植物的成分 2、鉴别反应： 3、色谱行为：酸碱性、溶解性等 三、化合物结构： 1、光谱方法：UV、IR、1H-NMR、13C-NMR、MS 2、化学沟通：化学降解、衍生物制备、人工合成 3、立体结构：CD、ORD、2D-NMR、X-射线衍射
提取分离方法
一、提取 （一）溶剂提取法
1、理想溶剂：有效成分溶解性大，无效成分溶 解性小，与植物成分不起化学反应；安全、成本 低
原则 从单一到复合、从极性小到大
乙醚＜石油醚＜氯仿＜乙酸乙酯＜正丁醇＜乙醇 ＜甲醇＜水
2、溶剂分类： ①水，
②亲水性有机溶剂：如甲醇、乙 醇、丙酮
③亲脂性有机溶剂：石油醚、饱和 烷烃
70%乙醇洗脱 乙醇洗脱液
回收
人参总皂苷粗品
（四）、根据分子量大小差别： 凝胶色谱：分子筛，按分子由大到小顺序出柱。
葡聚糖凝胶（Sephadex）：只适用于水 中应用。
羟 丙 基 葡 聚 糖 凝 胶 （ Sephadex LH20）： 可在水及有机溶剂中使用。在 由极性及非极性溶剂组成的混合溶剂中 常起到反相色谱的作用。