液体闪烁计数器检测血浆肾素活性及醛固酮

原发性醛固酮增多症［1 － 2］（ primary aldosteronism，PA） 是引 起继发性高血压的一种内分泌性疾病。临床诊断 PA 多通过测 定血浆醛固酮（ Aldosterone，ALD） 和血浆肾素活性（ Plasma renin activity，PRA） ，高血浆醛固酮、低血浆肾素活性是诊断 PA 的强 有力证据［3］。近年来的研究提示，有些 PA 患者因严重低血钾 而抑制了醛固酮的分泌，而且约 20% ～ 30% 的原发性高血压患 者呈现低血浆肾素活性，尤其是在高钠饮食情况下［4］，故近年 来许多研究者推荐使用血浆醛固酮浓度 / 血浆肾素活性（ the aldosterone / plasma renin ratio，ARR） 的比值来筛查 PA［5 － 7］。本文 建立了使用液体闪烁计数器检测血浆肾素活性（ PRA） 及醛固 酮（ ALD） 、计算 ARR 比值，用于临床继发性高血压的诊断。经 实验证明此方法操作简便、准确度高、重复性好，方便临床和科 研推广使用。
【摘 要】 目的 建立使用液体闪烁计数器检测血浆肾素活性（ PRA） 及醛固酮（ ALD） 的方法及临床应用。方法 应 用竞争机制原理，血浆（ 或标准品溶液） 中的醛固酮（ ALD） 或血管紧张素 I（ AI） 以及加入的放射性免疫试剂125 I-ALD 或125 I-AI，竞争性地与一定量的特异性抗体产生免疫反应。血浆（ 或标准品溶液） 中 ALD 或 AI 则优先与特异性抗体结 合，剩余的抗体再与 放 射 性 免 疫 试 剂125 I-ALD 或 125 I-AI 结 合。用 驴 抗 兔 免 疫 分 离 试 剂 沉 淀 被 抗 体 结 合 的125 I-ALD 或 125 I-AI。离心，取上清液，使用 β-液体闪烁计数器，检测未被抗体结合的游离的125 I-ALD 或125 I-AI 的放射性强度。建立相 应的标准曲线方程，求得血浆中 ALD 或 AI 的含量，计算肾素活性（ PRA） 及 ALD / PRA 比值。结果 变异系数 RSD（ % ） 为6． 18% ～ 10． 79% ，AI、ALD 的回收率分别为 87． 61% ～ 116． 89% 、82． 98% ～ 119． 22% 。结论 本方法操作简便、准确 度高、重复性好，可用于科研及临床。 【关键词】 液体闪烁计数器； 血管紧张素Ⅰ； 肾素活性； 醛固酮 【中图分类号】 R446． 6 R544． 14 【文献标识码】 A 【文章编号】 1674-4152（2012）12-1937-03
中华全科医学 2012 年 12 月 第 10 卷 第 12 期 Chinese Journal of General Practice，December 2012，Vol. 10，No
液体闪烁计数器检测血浆肾素活性及醛固酮
邵姣梅，汪道双，赵春霞，徐西振，严江涛，汪道文
Establishment of Fluid Scintillation Counter Method for Measurement of Plasma Renin Activity and Aldosterone SHAO Jiao-mei，WANG Dao-shuang，ZHAO Chun-xia，et al． Division of Internal Medicine，Tongji Hospital，Tongji Medical College，Huazhong University of Science and Technology，Wuhan 430030，Hubei，China 【Abstract】 Objective To establish a special fluid scintillation counter method for measuring plasma renin activity and aldosterone． Methods According to the principle of competition，aldosterone（ ALD） or angiotensin I（ AI） in plasma（ or the standard solution） bound with a certain amount of specific antibodies to compete with the Radioactive Immune Reagent 125 I-ALD or 125 I-AI to produce an immune reaction． The specific antibodies was given priority to combine with ALD or AI in plasma （ or the standard solution） ，the rest bound with the 125 I-ALD or 125 I-AI． The compound combined with the specific antibodies was precipitated by Donkey Anti-Rabbit antibody． After centrifuged，a certain amount of the supernatant was taken，the unbinding 125 I-ALD or 125 I-AI was detected by β-fluid scintillation counter． To establish corresponding standard curves，the contents of ALD or AI in samples， the plasma renin activity and the ALD / PRA ratio were acquired according to the standard curves． Results Variation coefficient RSD （ % ） was 6． 18% － 10． 79% ，the recovery rates of AI and ALD were 87． 61% － 116． 89% and 82． 98% － 119． 22% ，respectively． Conclusion The method had more simplicities，high accuracy and reproducibility，and can be applied in the research and clinic． 【Key words】 Fluid scintillation counter； Angiotensin I； Activity of renin； Aldosterone