磁珠分选原理及应用

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MD0044.02
去除后再阳性分选CD4+CD25+双阳性细胞
1. 去除非CD4+ T 细胞。 用生物素化抗体混合物和抗生物素微珠间接磁性标记非CD4+ T 细胞
磁性分选去除标记细胞 先行流出为 CD4+ T 细胞 2. CD25微珠直接磁性标记CD25+细胞 阳性分选靶细胞
CD4+ CD25+ 调节性T滞留在分选柱上,离开磁场后洗脱下来
MD0197.02
MACS技术原理
MACS(Magnetic Activated Cell Sorting): =免疫学+细胞生物学+磁力学
• 基于抗体对抗原的特异性识别 • 磁性微珠直接或者间接偶联在抗体上,从而与细胞相连 • 在高强度、梯度磁场中达到细胞磁性分离的目的
MD0347.01
MACS® 磁性分选
选各种细胞、亚细胞物质)
MD0043.02
MACS® 细胞分选策略
• 阳性分选 • 去除分选 • 去除分选后再阳性分选 • 多重分选
MD0044.02
MACS细胞分选策略
1、阳性分选:
• 根据特异性标志分选细胞: 阳性分选是指目的细胞磁性标记
后,作为阳性的标记组分直接分选出来。
• 优点:
》高纯度,尤其是富集稀有的细胞 》高回收率 》操作简便、迅速
MD0044.02
去除分选
磁性标记
分选未磁性标记细胞
MD0160.02
MACS细胞分选策略
3、去除分选后再阳性分选:
• 即先去除非目的细胞,再进行阳性分选。 • 适用范围:
》非目的细胞也表达用来阳性选择目的细胞的抗原。 》要分选非常稀有细胞,先去除非目的细胞再行阳性分选,
可获得高纯度的目的细胞。
autoMACS分选仪
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MACS 微珠是与高度特异性单克隆抗体相偶联的超顺 磁化微粒,可用于目的细胞的磁性标记。
• 特性:
50nm大小 对细胞没有毒性 可生物降解 不影响细胞特性
MACS技术分选的CD8+ T 细胞
微珠
MD0057.03
MACS微珠
直标微珠 多选微珠
间标微珠
MACS技术
设备与试剂
• MACS分选柱:
》填充有不同规格的铁珠。 》铁珠表面有亲水包被,不损伤细胞。 》无菌包装。 》可用于分选多种细胞及亚细胞物质、
MACS微珠进行磁性标记
洗脱阳性分选的 细胞
未标记的细胞 先行流出
MD0651.01
分选前标本制备:过滤
MACS预选滤器:30m
MD0197.02
MACS 技术
设备与试剂
» MACS微珠 » MACS分选柱
» MACS 分选器 » 详细分选方案*
MD0197.02
MACS技术
设备与试剂
• MACS微珠:
• Mini&MidiMACS starting kit:1个分选架、1个MiniMACS分选器、 1个MidiMACS分选器、1盒MS分选 柱、 1盒LS/LD分选柱、1支价值7500元试剂(27838元):可做阳性分选和去除分选
• MS分选柱:1盒25个,2763元 • LS分选柱:1盒25个,4356元 • LD分选柱:1盒25个,5100元 • uMACS与u或者M分选柱:分子生物学分选 • VarioMACS分选仪 • autoMACS自动分选仪、CliniMACS分选仪
Байду номын сангаас
MACS技术主要优势
• 小磁珠: 50 nm(快速、不活化细胞、不沉淀)
• 保留细胞功能(直接进行后续实验;无毒性;氧化 铁和多聚糖组成,可生物降解)
• 与流式细胞仪兼容(不影响细胞光学特性、不影响荧 光抗体标记、与流式细胞仪分选联合使用可以缩短流 式分选时间)
• 快速、简便、无菌 • 适用范围广(磁珠种类多、从少量到大量、适用于分
MD0044.02
阳性分选策略
MACS® 微珠磁性标记
将分选柱移出磁 场,洗脱阳性分
选细胞
未标记细胞先行流出
MD016102
MACS细胞分选策略
2、去除分选:
• 去除分选是磁性标记非目的细胞,并将其从细胞混合物中去
除,即未磁性标记的细胞为目的细胞。
• 去除分选策略适用范围:
》去除不需要的细胞 》缺乏针对目的细胞的特异性抗体(如肿瘤细胞) 》不需要抗体和目的细胞结合 》需进一步通过阳性选择分选细胞亚群
MACS细胞分选策略
4、多选微珠:
多选微珠标记
MACS 分选
磁性颗粒的酶解离
终止解离反应
根据第二标志进行磁 珠标记
MACS 分选
MD0652.01
MACS畅销机器与分选柱
• MiniMACS starting kit:1个分选架、1个MiniMACS分选器、1盒MS分选柱、1支价值7500元试剂(15088元 ):可做阳性分选、小量标本、间标去除分选、分子生物学分选
细菌、病毒、mRNA和蛋白质。
• 专利产品 • 将磁场扩大1000-10000倍—
—高纯度,高回收率
在MS柱中产生的强大磁场
MD0061.02
MACS技术
设备与试剂
• MACS分选柱:
MACS技术
设备与试剂
• MACS分选器:从手动到自动,从实验室到临床
MACS技术
设备与试剂
• MACS分选器
Miltenyi Biotec: 免疫磁珠分选技术及应用
1/1 MD0xxx.01
内容
• MACS技术原理 • MACS技术设备及分选策略 • 几种特殊的MACS分选
分选和分析DC细胞 分选各种T细胞
分选和分析细胞因子分泌细胞 分选造血干细胞
分选人类肿瘤细胞 分选和分析凋亡和死亡细胞 分选转染细胞 分子生物学和蛋白生化的分选
MD0044.02
MACS几种畅销磁珠与抗体
• 专利产品:CD133、CD303、CD304
• 特殊产品:人类DC系列:BDCA-1(CD1c)、BDCA-2(CD303)、 BDCA-3(CD141)、BDCA-4(CD304)
小鼠DC系列:mPDCA微珠与抗体 干细胞产品: CD133、CD271微珠与抗体 细胞因子分泌细胞:CSA分选与分析 TH2细胞: CD294(CRTH)微珠与抗体 分选人类肿瘤细胞:上皮肿瘤:CK、HEA
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