α-苯乙醇的酶法拆分工艺优化
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一
步 的实 验脂 肪酶拆 分苯 乙醇 以及 工业化 生产 手性 苯 乙醇 提供 了翔 实 的实 验数 据．
１ 实验 部 分
１ １ 仪 器 和 试 剂 ．
脂 肪 酶 由该 实 验 室 已 有 的一 工 程 菌 发 酵 得 到 ［ ， １ ２ １中 方 法 检 测 出 比 酶 活 为 ５ ９ ６ Ｕ／ ； 温 ８ 按 ．． ］ １ ． ｍｇ 恒
转 化 率 为 指标 ， 定 了底物 浓 度 、 量 、 冲液 的浓 度 和 ｐ 反 应 温 度 、 床 转 速 以及 反 应 时 间 等 因 素 对 拆 分 效 果 测 酶 缓 Ｈ、 摇
的影 响 ． 果显 示 ， 最 佳 条件 下 ， 物 Ｒ ａ苯 乙醇 ｅ 达 到 ９ ． ， 化 率 ４ ． 应 液 进 行 过 硅 胶 柱 分 离 后 ， － 一 结 在 产 ＿一 ｅ ７２ 转 ８ 反 Ｒ ａ 苯 乙醇 的产 率 为 ３ ，ｅ 为 ９ ； 乙酸 苯 乙 酯在 碱 性 条件 下 水 解 得 到 Ｓ 一 乙醇 产率 为 ４ ， 值 为 ８ ． Ｏ ｅ值 ８ －苯 ａ Ｏ ｅ ｅ ５
摇床 ， 上海精 弘 实验设 备有 限公 司 ； 效液 相色谱 仪 ， ｒ ｎＰ ｏ ｔｒ４ ０ 乙酸苯 乙酯 、 乙醇 为西 格玛 奥 高 Ｖａｉ ｒ Ｓａ １ ． ａ 苯
收 稿 日期 ： ０ ００ — ８ ２ １ — ３０ 基 金 项 目 ： 江 省 科 技 厅 项 目（ ｏ ７ ２ １ ０ ． 浙 ２ ｏ ｃ １５ ）
些 重要 的手性 中 间体 ， 能够 在一些 复杂 天然 产物 的不对 称合 成 中被用作 最初 的手性 中心． 也 习惯 上称 为苯 乙醇 的有两 种 ， ａ苯 乙醇和 苯 乙醇 ， 中 ａ苯 乙醇存 在 和 ｓ 两 种光学 异构 体． 即 一 其 一 一 手
性 ａ苯 乙醇 的不对称 合 成方法 很 多 ， 中酶催 化不 对称合 成手 性 ａ苯 乙醇 具有 反应 条件 温和 、 一 其 一 区域选 择性 和立 体选 择性 较高 等优 点． 随着 制药 工业 对手性 化合 物需 求 的 日益增 长 和人类 环保 意识 的增加 ， 酶催 化工
作 者 简 介 ： 小 春 （ ７ 一 ） 女 ， 卢 １ １ ， 浙江 杭 州 人 ， 程 师 ， ９ 工 主要 从 事药 物 分 析 研 究 ． — ｉ： ｕ ｉ ｃ ｕ ２）４ ｈ ｔ ｉ ｃ ｒ Ｅ ｍａ １ ｘａ ｈ ｎ （ ＠ ｏ ｍａ ． ｏ ｌ ０ ０ ｌ ｎ
通信作者 ： 振明（９１ ）男， 陈 １７ ， 浙江 东 阳人 ， 教 授 ， 要从 事生 物 催 化 和 绿 色 化 学 研究 ． — ｉ ｍｃ ｅ０ ＠ ｇ ｉ ｃｒ 副 主 Ｅ ｍａｌ ：ｚ ｈ ｎ ５ ｍａｌ ｏ ． ｎ
关 键 词 ：脂肪 酶 ；一 乙醇 ； 性 拆 分 ； 艺 优 化 ａ苯 手 工 中 图分 类 号 ：Ｑ８ ４ ９ １ ． 文 献标 志码 ：Ａ
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
文 章 编 号 ：１ ７ — ３ Ｘ ２ １ ） ４０ ５ — ５ ６ ４２ ２ （ Ｏ ０ ０ — ２ ２０
苯 乙醇是 一种 芳香 醇 ， 香料 、 在 涂料 、 纺织 工业 、 药 、 光 材 料等 方 面 具有 广 泛 的用 途＿ ． 年来 ， 医 感 １近 ］ 随 着 相关 行业 的发展 ， 国内外对 手性 苯 乙醇 的需 求不 断增加 ． 手性 苯 乙醇是 许多 手性药 物合 成 的关 键 手性砌 块 和平 台化合 物＿ ］在 手性 合成 中占有 重要 的地 位 ， ２ ， 。 它可 以被 用 来从 一 些 非 常简 单 的起 始 原料 去 制备 一
艺 作 为 一 种 绿 色 的 手 性 技 术 ， 成 为 目前 化 学 制 药 领 域 中研 究 和 应 用 的热 点 之 一 ． 法 拆 分 主 要 是 通 过 酶 已 酶
有选 择地催 化 Ｒ ａ苯 乙醇 与酞基 供体 发生 醋化反 应或 转醋化 反应 得到 Ｒ 苯 乙酯 ， 一 一 留下未 反应 的 ａ苯 乙 一
Ｖｏ１９ ＮＯ． ． ４
Ｊ１ ００ ｕ ．２ １
ＤＯＩ ０ ３ ６ ／．ｓｎ １ ７ — ３ Ｘ． ０ ０ ０ ． ０ ：１ ． ９ ９ ｊ ｉｓ ． ６ ４ ２ ２ ２ １ ． ４ ０ ４
苯 乙醇 的酶 法 拆分 工 艺优 化
卢 小春 赖 敦 岳 裴 曾飞。 陈振 明 ， ， ，
（ ． 力健 （ 州 ） 药 有 限公 司 ， 江 杭 州 ３ ０ １ ； ． 州 师 范 大 学 生物 和 可 持 续 技 术 中心 ， １眼 杭 制 浙 １０８２杭 浙江 杭 州 ３ ０ １ ） １ ０ ２
摘 要 ：使 用 一种 重组 脂肪 酶对 乙 酸 苯 乙 酯进 行 选 择 性 水 解 拆 分 以 得 到 ａ 苯 乙醇 ． 究 首 先 以选 择 性 和 一 研
醇 ， 把 Ｒ 苯 乙酯 水 解 得 到 Ｒ一 乙 醇 ［ ］ 此 外 Ｊｃ ｕ ｓＤ ｏ ｉ＿采 用 Ｎｏ ｏ ｙ ３ 脂 肪 酶 ， 化 戊 酸 ａ苯 再 一 苯 ４． ａ ｑ ｅ ｒ ｕｎ７ ｖ ｚ ｍ４ ５ 催 一
乙酯 和正 丁醇 的转酯 化获 得 Ｒ ａ 苯 乙醇 ； Ｔ ｄ ｓ ｉ ｍａ６ 二 异丙 醚 作 溶剂 ， ＿一 而 ａａｈ Ｅ Ｌ在 ］ 乙酸 乙烯 酯 作 酰基 供 体 ， 以枯 草杆 菌蛋 白酶 （ｕ ｔ ｉ ｎ 作催 化剂 时 ， 优先 转酷化 Ｓ 对 映体 ． ｓ ｂｉｓ ） ｌｉ 则 一 该研 究 中 ， 使用 实验 室 已有 的一 种脂 肪酶＿ 对 ａ苯 乙醇 进行 手性 拆 分 ， 对其 产 物进 行 了分 离． 进 ８ 一 并 为
第 ９卷第 ４期
２１ ０ ０年 ７月
杭州师 范 大学学 报 （ 自然 科 学 版 ）
Ｊ ｕｎ ｌ ｆ ａ ｇ ｈ ｕＮ ｒ ｌ ｎ ｅ ｓ ｙ Ｎ ｔｒｌ ｃｅ ｃ ｄｔ ｎ ｏ ｒａ ｏ ｎ ｚ ｏ ｏｍａ Ｕ ｉ ｒ ｉ （ ａｕａ Ｓ ｉｎ ｅ Ｅ ｉｏ ） Ｈ ｖ ｔ ｉ
步 的实 验脂 肪酶拆 分苯 乙醇 以及 工业化 生产 手性 苯 乙醇 提供 了翔 实 的实 验数 据．
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转 化 率 为 指标 ， 定 了底物 浓 度 、 量 、 冲液 的浓 度 和 ｐ 反 应 温 度 、 床 转 速 以及 反 应 时 间 等 因 素 对 拆 分 效 果 测 酶 缓 Ｈ、 摇
的影 响 ． 果显 示 ， 最 佳 条件 下 ， 物 Ｒ ａ苯 乙醇 ｅ 达 到 ９ ． ， 化 率 ４ ． 应 液 进 行 过 硅 胶 柱 分 离 后 ， － 一 结 在 产 ＿一 ｅ ７２ 转 ８ 反 Ｒ ａ 苯 乙醇 的产 率 为 ３ ，ｅ 为 ９ ； 乙酸 苯 乙 酯在 碱 性 条件 下 水 解 得 到 Ｓ 一 乙醇 产率 为 ４ ， 值 为 ８ ． Ｏ ｅ值 ８ －苯 ａ Ｏ ｅ ｅ ５
摇床 ， 上海精 弘 实验设 备有 限公 司 ； 效液 相色谱 仪 ， ｒ ｎＰ ｏ ｔｒ４ ０ 乙酸苯 乙酯 、 乙醇 为西 格玛 奥 高 Ｖａｉ ｒ Ｓａ １ ． ａ 苯
收 稿 日期 ： ０ ００ — ８ ２ １ — ３０ 基 金 项 目 ： 江 省 科 技 厅 项 目（ ｏ ７ ２ １ ０ ． 浙 ２ ｏ ｃ １５ ）
些 重要 的手性 中 间体 ， 能够 在一些 复杂 天然 产物 的不对 称合 成 中被用作 最初 的手性 中心． 也 习惯 上称 为苯 乙醇 的有两 种 ， ａ苯 乙醇和 苯 乙醇 ， 中 ａ苯 乙醇存 在 和 ｓ 两 种光学 异构 体． 即 一 其 一 一 手
性 ａ苯 乙醇 的不对称 合 成方法 很 多 ， 中酶催 化不 对称合 成手 性 ａ苯 乙醇 具有 反应 条件 温和 、 一 其 一 区域选 择性 和立 体选 择性 较高 等优 点． 随着 制药 工业 对手性 化合 物需 求 的 日益增 长 和人类 环保 意识 的增加 ， 酶催 化工
作 者 简 介 ： 小 春 （ ７ 一 ） 女 ， 卢 １ １ ， 浙江 杭 州 人 ， 程 师 ， ９ 工 主要 从 事药 物 分 析 研 究 ． — ｉ： ｕ ｉ ｃ ｕ ２）４ ｈ ｔ ｉ ｃ ｒ Ｅ ｍａ １ ｘａ ｈ ｎ （ ＠ ｏ ｍａ ． ｏ ｌ ０ ０ ｌ ｎ
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关 键 词 ：脂肪 酶 ；一 乙醇 ； 性 拆 分 ； 艺 优 化 ａ苯 手 工 中 图分 类 号 ：Ｑ８ ４ ９ １ ． 文 献标 志码 ：Ａ
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文 章 编 号 ：１ ７ — ３ Ｘ ２ １ ） ４０ ５ — ５ ６ ４２ ２ （ Ｏ ０ ０ — ２ ２０
苯 乙醇是 一种 芳香 醇 ， 香料 、 在 涂料 、 纺织 工业 、 药 、 光 材 料等 方 面 具有 广 泛 的用 途＿ ． 年来 ， 医 感 １近 ］ 随 着 相关 行业 的发展 ， 国内外对 手性 苯 乙醇 的需 求不 断增加 ． 手性 苯 乙醇是 许多 手性药 物合 成 的关 键 手性砌 块 和平 台化合 物＿ ］在 手性 合成 中占有 重要 的地 位 ， ２ ， 。 它可 以被 用 来从 一 些 非 常简 单 的起 始 原料 去 制备 一
艺 作 为 一 种 绿 色 的 手 性 技 术 ， 成 为 目前 化 学 制 药 领 域 中研 究 和 应 用 的热 点 之 一 ． 法 拆 分 主 要 是 通 过 酶 已 酶
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Ｖｏ１９ ＮＯ． ． ４
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苯 乙醇 的酶 法 拆分 工 艺优 化
卢 小春 赖 敦 岳 裴 曾飞。 陈振 明 ， ， ，
（ ． 力健 （ 州 ） 药 有 限公 司 ， 江 杭 州 ３ ０ １ ； ． 州 师 范 大 学 生物 和 可 持 续 技 术 中心 ， １眼 杭 制 浙 １０８２杭 浙江 杭 州 ３ ０ １ ） １ ０ ２
摘 要 ：使 用 一种 重组 脂肪 酶对 乙 酸 苯 乙 酯进 行 选 择 性 水 解 拆 分 以 得 到 ａ 苯 乙醇 ． 究 首 先 以选 择 性 和 一 研
醇 ， 把 Ｒ 苯 乙酯 水 解 得 到 Ｒ一 乙 醇 ［ ］ 此 外 Ｊｃ ｕ ｓＤ ｏ ｉ＿采 用 Ｎｏ ｏ ｙ ３ 脂 肪 酶 ， 化 戊 酸 ａ苯 再 一 苯 ４． ａ ｑ ｅ ｒ ｕｎ７ ｖ ｚ ｍ４ ５ 催 一
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第 ９卷第 ４期
２１ ０ ０年 ７月
杭州师 范 大学学 报 （ 自然 科 学 版 ）
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