体外诊断试剂临床试验方案.doc

体外诊断试剂临床试验方案产品名称：同型半胱氨酸测定试剂盒（循环酶法）型号规格：R1： 24mL×1 R2：7mL×1
实施者：
承担临床试验的医疗机构：医院
临床试验类别：临床验证
临床试验负责人：（签字）
年月日
说明
1、医疗器械产品在临床试验前，必须制定临床试验方案。

2、临床试验方案由医疗机构和实施者共同设计、制定。

实施者与医疗机构签署双方同意的临床试
验方案，并签订临床试验合同。

3、市场上尚未出现的第三类植入体内或借用中医理论制成的医疗器械，临床试验方案应当向医疗
器械技术审评机构备案。

4、医疗机构和实施者应当共同制定每病种的临床试验例数及持续时间，以确保达到试验预期目
的。

5、临床试验类别分临床试用和临床验证。

1 临床试验的背景
同型半胱氨酸(Hcy)是一种含硫基的氨基酸，是蛋氨酸代谢的中间产物，其本身并不参与蛋白质的合成，血浆中的半胱氨酸约70%与白蛋白结合为结合型，其余的游离型则主要以二硫同型半胱氨酸和二硫键结合的同型半胱氨酸—半胱氨酸化合物形式存在。

只有少量的还原型同型半胱氨酸存在于血浆中，我们通常指的是总的同型半胱氨酸浓度。

Hcy的测定方法主要有高效液相色谱法(HPLC)、荧光偏振免疫检测法(FPLA)方法，及酶联免疫技术测定法及可酶循环法。

其中酶循环法因其操作简便、快速不需要特殊仪器，且可进行全自动分析等优点，成为最受临床实验室欢迎的测定方法。

本公司同型半胱氨酸测定试剂盒（循环酶法）研发工作已完成，为了验证该试剂盒在临床应用上的适用性和准确性，现开展临床验证工作。

2、产品的机理、特点与试验范围
2.1 检验原理：酶法
在TCEP作用下，氧化型HCY（同型半胱氨酸）转化为游离型HCY，游离型HCY与底物S-腺苷甲硫氨酸（SAM）反应生成甲硫氨酸与S-腺苷同型半胱氨酸(SAH),SAH被SAH水解酶水解成腺苷和HCY,形成的HCY可循环加入反应而放大了检测信号,腺苷在ADA作用下变成次黄嘌呤和氨,氨在谷氨酸脱氢酶的作用下,使NADH转化为NAD+ ,样本中的HCY与NADH的变化成正比;
HCY+SAM HMTase SAH+Met
SAH+ SAHase HCY+Ado
Ado ADA Inosine+NH3
NH3+NADH+2-Oxoglutarate GLDH Glutamate+NAD++H2O
2.2 特点
液体双试剂，开瓶即用，无需要配制，测定准确，快速，可自动化分析。

2.3 预期用途
用于体外定量测定人体血清中同型半胱氨酸的浓度。

3 产品的适应症或功能
Hcy水平与心血管疾病密切相关，是引发动脉硬化和冠心病的1个独立危险因素。

血液中增高的Hcy因为刺激血管壁引起动脉血管的损伤，导致炎症和管壁的斑块形成，最终引起心脏血流受阻。

高同型半胱氨酸尿症患者，由于严重遗传缺陷影响Hcy代谢，造成高Hcy血症。

轻微的遗传缺陷或VB 营养缺乏会伴随中度或轻度的Hcy升高，也会增加心脏病的危险。

血清同型半胱氨酸增高见于: 高血
压、冠心病、心梗或脑梗、慢性肾功不全等。

4、临床试验的项目内容和目的
4.1 目的
通过对本公司试剂盒的产品性能指标进行测定以及和对照组产品针对同一临床样本的对比试验验证与对照产品是否等效，并且从而验证产品在临床测定中的安全性和有效性。

4.2 项目内容
测试试剂盒的准确性、重复性、线性范围的性能指标以及与对照组产品针对临床样本的对比试验的数据进行统计分析来验证本公司同型半胱氨酸测定试剂盒（循环酶法）与对照产品等效。

5 总体设计
5.1 产品性能测定
对同型半胱氨酸测定试剂盒（循环酶法）的准确性、精密度（批内变异系数）、线性范围等性能指标进行测试。

5.2．与对照商品化试剂盒进行平行试验。

5.2.1 临床样本的选择
（1）样本要求
不溶血血清。

样品2-8℃可稳定7天
（2）样本数量
根据《体外诊断试剂临床研究技术指导原则》，第二类产品的临床研究的总样本数为200例，由于第二类产品的临床试验单位要求为两家或两家以上。

所以本方案要求在此次临床试验中样本数量不少于100例，其中被测物的测定结果在参考范围之外的样本（异常值样本）为30例，被测物的测定结果在参考范围之内的样本（正常值样本）为70例，符合统计学的要求。

5.2.2 对照产品的要求
选择已批准上市且为目前临床普遍认为质量较好的同方法或原理产品作为对照产品。

同时应注明对照产品的生产厂家名称、产品规格型号、注册证号、生产批号、有效期、测试原理。

5.3 对比试验的统计处理
将临床研究的试剂盒与对照产品对同一组临床样本进行测定，分别记录两组测定结果，当临床样本全部测定完成后将记录的两组数值进行交叉列表分析，计算临床研究产品的与对照产品的异常值符合率、正常值符合率和的总的一致性。

5.4 成功或失败的可能性分析
（1）产品方面
由于液态试剂的本身状态限制，可能会对包装运输的要求较高。

这就要求包装人员包装时加内塞，拧紧瓶盖，以保证试剂的密封性；运输人员需用加冰袋的泡沫箱密封包装，防止在运输过程中发生漏液、碎瓶的现象。

出现失败的原因可能是运输中造成产品质量的破坏，导致产品失效。

（2）试验设计方面
如果根据统计结果得出的结论是临床研究试剂盒与对照产品的任何一项符合率达不到要求，说明本临床研究试剂盒与对照产品不等效。

5.5 临床评价标准
5.5.1 产品性能
产品性能测定结果应达到下述要求：
根据本公司同型半胱氨酸测定试剂盒（循环酶法）说明书和仪器操作说明书设定参数。

（1）准确性
测定定值质控品，三次测定的均值在规定的靶值范围内。

（2）精密度
批内：变异系数CV≤5%
同一批次试剂对同一标本进行10次重复测定，计算标本测定结果平均值，根据下列公式计算变异系数：
CV批内（%）=
()()
X
1
n
/
X
Xi2
∑-
-
×100%
式中：
式中：X i —第i次的测定值；
X —试剂测定结果的平均值；
i — 1，2，3，……，n;
n —测定次数。

（3）线性范围
在0.5-55.0ｕmol/L范围内，线性回归的相关系数r≥0.990，
选择在浓度在线性范围上限附近的样本,按下表稀释成五个不同浓度（浓度在0.5-55.0ｕmol/L 范围内），按试剂说明书中的参数进行检测，得出实际浓度，根据相关系数计算公式计算实际浓度与理论浓度的回归系数。

r=
]
)([])([2
2
2
2
∑∑∑∑∑∑∑-⋅-⋅-i i i i i
i i i Y Y n X X n Y X Y X n
式中：
i X —— 测定管溶液的浓度均值；
i Y —— 与测定管溶液浓度相对应的稀释比例；
i —— 1,2，3，……，n ； n —— 测定样本数。

5.5.2.对比试验的统计分析
交叉列表分析，以商品化的试剂盒为对照试剂盒，计算临床研究试剂盒的异常值符合率、正常值符合率及总的一致性。

判断标准：异常值符合率：≥90%，正常值符合率：≥90%，总的一致性≥90%
5.6 临床试验持续时间及其确定理由
临床试验持续时间没有严格要求，可以根据样本情况确定，只要能够完成本方案规定的内容即可。

但是由于本产品开瓶稳定性为2℃-8℃稳定30天，所以本试验需要在一个月内完成临床试验。

5.7 每病种临床试验例数及其确定理由
医学统计学要求，正常值样本和病理值样本均不少于30例。

本试验根据产品的功能特点及统计学原理的要求，被测物为异常值的样本计划入组30例，例数符合统计学要求与《体外诊断试剂临床研究技术指导原则》、《医疗器械临床试验规定》的要求。

5.8 选择对象范围、选择对象数量及选择理由 5.8.1 选择对象范围
选择对象：在临床试验单位生化实验室进行同型半胱氨酸含量测定的就医人。

同型半胱氨酸测定试剂盒（循环酶法）为人血清或血浆中同型半胱氨酸的体外定量测定试剂，临床上只用于辅助诊断，
并不具有确切的诊断意义，故在临床上主要区分为含量测定正常值与异常值而非确定的病种，将临床研究对象分为同型半胱氨酸含量测试为异常值组和同型半胱氨酸含量测试为正常值组，符合统计学要求与《体外诊断试剂临床研究技术指导原则》、《医疗器械临床试验规定》的要求。

（1）同型半胱氨酸含量测试为异常值组入选标准
年龄18~80，男女不限，用对照产品测定超出其参考范围为异常值的患者，每家临床试验单位为30例。

（2）同型半胱氨酸含量测试为正常值组入选标准
年龄18~80，男女不限，用对照产品测定在其正常参考范围内为正常值的就医人，其中包括正常人群与同型半胱氨酸含量测试为正常值的患者。

每家临床试验单位为70例。

5.8.2 选择对象数量及选择理由
根据《体外诊断试剂临床研究技术指导原则》，第二类产品的临床研究的总样本数为200例，由于第二类产品的临床试验单位要求为两家或两家以上。

所以每家临床试验单位临床样本数不少于100例，其中被测物为异常值的样本为30例，正常值样本为70例，符合统计学的要求。

5.9 副作用预测及应当采取的措施
同型半胱氨酸测定试剂盒（循环酶法）属于体外诊断试剂，不进入人体，测试结果只用于临床验证试验数据统计分析，不作为辅助诊断的依据，因此在使用过程中不会对在临床试验单位检验室进行同型半胱氨酸含量检测的就医人增加任何直接的风险及副作用。

5.10 临床性能的评价方法和统计处理方法
5.10.1 临床性能的评价方法
通过对产品准确性、精密度（批内变异系数）、线性范围性能指标的测试，各项达到临床评价标准来验证产品在临床中的准确性、有效性。

5.10.2 对比试验及统计处理方法
（1）交叉列表分析：以商品试剂盒为对照组，计算临床研究试剂盒的异常值符合率、正常值符合率及总的一致性。

异常值符合率：≥90%，正常值符合率：≥90%，总的一致性≥90%
异常值符合率=【E/（D+E）】×100%
正常值符合率=【G/（G+H）】×100%
总的一致性=【（G+E）/C】×100%
（2）通过临床性能评价及统计学处理方法验证同型半胱氨酸测定试剂盒（循环酶法）与对照产品等效，从而验证产品的安全性、有效性。

5.11、伦理委员会评审意见与受试者知情同意书
因为此次临床试验使用医院日常工作测定后的剩余样本（为日常在临床试验单位检验室进行同型半胱氨酸含量测定的就医人检测完成后剩余的样本量，并非为临床试验专门采集的样本），所以此次临床试验不涉及个人隐私可不经受试者同意。

同型半胱氨酸测定试剂盒（循环酶法）属于体外诊断试剂，在临床试验中不需要与患者直接接触，不向病人提供检测报告，且试验结果只用于对比研究，不作为辅助诊断依据，不会给受试者带来任何风险，因此“知情同意书”这项内容可以省略。

5.12 各方承担的职责
公司：
（1）负责为负责临床试验的医疗机构提供试验用试剂，及相关技术资料；
（2）与实施者共同设计、制定临床试验方案，双方签署临床试验方案及协议。

临床试验机构：浙江大学医学院附属儿童医院
（1）与实施方共同设计、制定临床试验方案，双方签署临床试验方案及协议；
（2）如实记录受试产品试验数据；
（3）提交临床研究报告，并对报告的正确性及可靠性负责；
（4）对实施方提供的资料负有保密义务。

临床试验人员在试验中的主要职责
临床试验人员简历。