VEGF_A对人肝癌细胞体外形成血管生成拟态能力的影响

·论著·

VEGF-A对人肝癌细胞体外形成

血管生成拟态能力的影响

李蕊1，孙保存1，2*，孙丹1，刘铁菊1，赵秀兰1，董学易1

（1天津医科大学病理学教研室，天津300070；2天津医科大学肿瘤医院）

摘要：目的探讨血管内皮生长因子（VEGF）对人肝癌细胞体外形成血管生成拟态（VM）能力的影响。方法采用不同浓度的VEGF-A诱导人肝癌PLC细胞，分别用划痕实验、明胶酶谱法分析不同浓度VEGF-A对PLC细胞迁移性和侵袭性的影响；三维培养观察VEGF-A对PLC细胞形成VM能力的影响；Western blot法检测VEGF-A处理后的血管内皮钙黏附素（VE-cadherin）表达。结果VEGF-A呈剂量依赖性增强肝癌PLC细胞的迁移率和侵袭相关蛋白MMP-9的活性，促进管道样结构形成及VE-cadherin表达（P均＜0．05）。VEGF-A水平与管道数量呈正相关（r=0．929，P＜0．05）。结论VEGF-A可增强肝癌PLC细胞的迁移和侵袭能力，促进其VM形成，使肿瘤组织血供丰富，促进肿瘤浸润和转移。

关键词：肝肿瘤；血管内皮生长因子；血管生成拟态；明胶酶类

中图分类号：R735．7文献标志码：A文章编号：1002-266X（2011）45-0001-03

Effects of VEGF-A on vasculogenic mimicry in human hepatocellular carcinoma cells in vitro

LI Rui1，SUN Bao-cun，SUN Dan，LIU Tie-jü，ZHAO Xiu-lan，DONG Xue-yi

（1Department of Pathology，Tianjin Medical University，Tianjin300070，P．R．China）

Abstract：Objective To study the effects of vascular endothelial growth factor（VEGF）on vasculogenic mimicry （VM）of human hepatocellular carcinoma cells in vitro．Methods Hepatocellular carcinoma cells PLC were induced with various concentrations of VEGF-A．The migration and invasion abilities of PLC when treated with various concentrations of VEGF-A were detected by wound-healing and Gelatin zymography assay．The effects of VEGF-A on vasculogenic mimicry in PLC cells were detected in three-dimensional cultures，and the expressions of vascular endothelial cadherin（VE-cadherin）were detected after treated with VEGF-A by Western blot．Results VEGF-A could enhance the ability of the migration，and the activities of invasion-related protein MMP-9in dose-dependent manner，and also promote the VM formation and the expression of VE-cadherin of PLC cells（P＜0．05）．The correlation between the level of VEGF-A and the quantities of the pipelines were positive significantly（r=0．929，P＜0．05）．Conclusion VEGF-A can promote the migration，invasion and the ability of VM formation in the hepatocellular carcinoma cells PLC，and then promote the blood supply of tumor，and the invasion and metastasis of tumor．

Key words：hepatic neoplasm；vascular endothelial growth factor；vasculogenic mimicry；gelatinases

肝癌是常见恶性肿瘤，因癌细胞血供丰富，易发生转移，且治疗困难，故肝癌病死率很高。肿瘤血供除来自内皮依赖性血管外，血管生成拟态（VM）也是其来源之一。既往研究表明，血管内皮生长因子（VEGF）与肝癌的复发、转移及预后密切相关。近年研究发现，肝癌组织中存在VM［1］。目前，关于VEGF-A对人肝癌细胞体外形成VM能力的影响少

基金项目：国家自然科学基金项目（30830049）；中瑞国际合作项目（09ZCZDSF04400）；天津市科技计划项目（09JCYBJC12100）。

*通讯作者见报道，2009 2011年，我们对此进行了相关研究。现报告如下。

1材料与方法

1．1材料人肝癌细胞系PLC/PRF/5由本研究室保存；兔抗人VE-cadherin多克隆抗体、β-actin兔抗人多克隆抗体、VEGF-A购自美国；辣根过氧化物酶标记山羊抗兔IgG抗体购自北京中杉金桥生物公司。1．2检测方法

1．2．1细胞培养采用含10%胎牛血清的DMEM 培养基，在37ħ、5%CO2培养箱中培养人肝癌细胞株，细胞长至90%融合时，以0．25%胰酶消化传代。

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山东医药2011年第51卷第45期