学习微生物培养的基本技术
合集下载
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
值变化
3（重庆）下列有关大肠杆菌的叙述，正确的
是
D
A大肠杆菌以复制方式进行繁殖，其拟核是
一个环状DNA分子
B在含葡萄糖和乳糖的培养基上，大肠杆菌
首先利用乳糖作碳源
C用大肠杆菌工程菌生产干扰素时．应及时
添加核酸等生长因子
D处于对数期的大肠杆菌．常作为生产用的
菌种和科研的材料
Biblioteka Baidu
②接种环灼烧灭菌
③右手无名指和小指夹住棉塞（不能放下）， 灼烧管口一周
④接种环伸入试管内，在末长菌的部位冷却， 后挑取少量菌体，立即抽出
⑤在火焰旁迅速将接种环由斜面底部向外轻轻 画蛇形细线
⑥抽出接种环，再用火焰灼烧管口，并在火焰 上方将棉塞塞上
⑦熄灭酒精灯 ⑧填写标签
5、培养
25◦ C 5——7天 37 ◦ C 24小时
课堂练习
1．不同微生物生长所要求的最适温度不同。 请就测定大肠杆菌生长最适温度的实验回答 下列问题：
(1)配制的相应培养基可属于 AC 。
A．天然培养基 B．半固体培养基 C．液体培养基 D．伊红一美蓝选择培养基
(2)依次按称量、溶化、调pH、分装(每管 5ml)、 加棉塞 、包扎的顺序，完成培养 基的配制，再用 高压蒸气灭菌法 （方法） 灭菌后，取8支试管，分别标明20℃、 28℃、37℃、45℃四种温度，每种温度2 管。
(3)向每管中接人处于 对数 期的大肠杆 菌2(因44菌)为h测。液细定0胞结．内果lm的显l，示蛋混，白匀4质。5和℃在核下相酸的应菌温等体度发最下生少培了，养不 可逆的破坏。
（2008理综天津卷）31、（16分）
莠去津是一种含氮的有机化合物，它是广泛使
用的除草剂之一。
⑴莠去津的作用机理之一是阻断光反应中的电
（3）为了尽快观察到细菌培养的实验结果， 应将接种了湖水样品的平板置于恒__温_培__养箱_ 中培养，培养的温度设定在37℃。要使该实验 所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种 _无_菌__水__作为对照进行实验。
（4）培养20小时后，观察到平板上有形态 和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有 __多___种细菌。一般说来，菌落总数越多， 湖水遭受细菌污染的程度越___高____。
学习微生物培养的 基本技术
实验原理
1.配制培养基时要注意原料的选择和调 节适宜的PH
2.配制好的培养基必须经过灭菌，灭菌 是指杀死一定环境中的所有微生物细 胞、芽孢和孢子。
3.对不同的材料，应当采取不同的灭菌 方法：培养基一般采用高压蒸汽灭菌 法，而接种环则用火焰灼烧法
方法步骤：
一、细菌的培养技术：
1、培养基的配制：
1、称量 2、溶化 加入材料（蛋白胨、牛肉膏、琼脂等 34、 、调 培养PH基的1m分加7o．装热l/4L溶～的化7N．aO6H溶液，PH试纸， 5、加棉塞 棉塞能防止杂菌污染，保证通气 6、包扎 良好。不能太松、不难太紧，2/3
在管内
2、灭菌
开锅加水 放入待灭菌的材料：管口向上，竖放，不能
（5）如果提高培养基中NaCl的浓度，可以 用于筛选耐___盐____细菌，这种培养基被 称为选__择__性培养基 。
16．在光亮处用一种培养液分别培养绿藻和酵母 菌，其结果如右图，造成这种结果的原因是培养 液中 A．缺少无机盐 B．含氧量太高 C．缺少有机养分 D．不含二氧化碳
C
17．右图是细菌的生长速度曲线，根据曲线回 答(总线(上需式13(如以段()4下菌中2)活后中属调)果缩。)营处3列数的酶细，间整段用短养于问目合菌2需代4期中作发物对题(段成数要谢包出生菌酵质数：。的量重产括。现长种周的期调最新 物死的速，期消的节多合 ，菌原度可，耗微时成 以和因下在曲；生对必 适活是降短线有物应需 应菌细的。时中害，的的 新)菌原间属最代代是酶 环接因内于多谢谢曲，境种是得这的产旺线辅，到到一时物盛中酶这新大时期的，的或种的量期对积生某调培微的应累长3些节养生是曲，迅段必方基物P速。h，，
子传递过程，影响NADP＋形成 NADPH ，
进而影响在 叶绿体基质
中进行光
合作用的暗反应过程，最终抑制杂草生长。
⑵从使用莠去津农田中，选到了能遗传的耐莠去津 杂草，将它与敏感莠去津植株杂交，结坚果见下表：
杂交亲本
后代中耐药型 后代中敏感型 植株比例（%） 植株比例（%）
耐药型♀×敏感 100
0
型♂
太挤 加盖 排出锅内冷空气：达49Kpa时，排气两次 维持：98 Kpa，20min 排气：锅内压力降为0时，才能排气
3、搁置斜面
将锅内试管等取出，在冷却至50℃时，搁置 斜面，斜面长度不能超过试管总长度的1/2
4、接种
洗净双手，用酒精擦拭 等手上酒精挥发以后，点燃酒精灯 接种
①左手夹住菌种试管和接种斜面试管，拧 松棉塞
敏感型♀×耐药 0
100
型♂
由表推断，控制该耐药性状的基因位
于 细胞质中
。
某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而
进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接
种及培养、菌落观察计数。请回答与此实验相 关的问题。
（1）培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细 菌培养提供了_氮_源__和_碳__源___。除此之外，培 养基还必须含有的基本成分是_无_机__盐_和 __水____。 （2）对培养基进行灭菌，应该采用的方法是 __高__压_蒸__汽灭菌 。
3（重庆）下列有关大肠杆菌的叙述，正确的
是
D
A大肠杆菌以复制方式进行繁殖，其拟核是
一个环状DNA分子
B在含葡萄糖和乳糖的培养基上，大肠杆菌
首先利用乳糖作碳源
C用大肠杆菌工程菌生产干扰素时．应及时
添加核酸等生长因子
D处于对数期的大肠杆菌．常作为生产用的
菌种和科研的材料
Biblioteka Baidu
②接种环灼烧灭菌
③右手无名指和小指夹住棉塞（不能放下）， 灼烧管口一周
④接种环伸入试管内，在末长菌的部位冷却， 后挑取少量菌体，立即抽出
⑤在火焰旁迅速将接种环由斜面底部向外轻轻 画蛇形细线
⑥抽出接种环，再用火焰灼烧管口，并在火焰 上方将棉塞塞上
⑦熄灭酒精灯 ⑧填写标签
5、培养
25◦ C 5——7天 37 ◦ C 24小时
课堂练习
1．不同微生物生长所要求的最适温度不同。 请就测定大肠杆菌生长最适温度的实验回答 下列问题：
(1)配制的相应培养基可属于 AC 。
A．天然培养基 B．半固体培养基 C．液体培养基 D．伊红一美蓝选择培养基
(2)依次按称量、溶化、调pH、分装(每管 5ml)、 加棉塞 、包扎的顺序，完成培养 基的配制，再用 高压蒸气灭菌法 （方法） 灭菌后，取8支试管，分别标明20℃、 28℃、37℃、45℃四种温度，每种温度2 管。
(3)向每管中接人处于 对数 期的大肠杆 菌2(因44菌)为h测。液细定0胞结．内果lm的显l，示蛋混，白匀4质。5和℃在核下相酸的应菌温等体度发最下生少培了，养不 可逆的破坏。
（2008理综天津卷）31、（16分）
莠去津是一种含氮的有机化合物，它是广泛使
用的除草剂之一。
⑴莠去津的作用机理之一是阻断光反应中的电
（3）为了尽快观察到细菌培养的实验结果， 应将接种了湖水样品的平板置于恒__温_培__养箱_ 中培养，培养的温度设定在37℃。要使该实验 所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种 _无_菌__水__作为对照进行实验。
（4）培养20小时后，观察到平板上有形态 和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有 __多___种细菌。一般说来，菌落总数越多， 湖水遭受细菌污染的程度越___高____。
学习微生物培养的 基本技术
实验原理
1.配制培养基时要注意原料的选择和调 节适宜的PH
2.配制好的培养基必须经过灭菌，灭菌 是指杀死一定环境中的所有微生物细 胞、芽孢和孢子。
3.对不同的材料，应当采取不同的灭菌 方法：培养基一般采用高压蒸汽灭菌 法，而接种环则用火焰灼烧法
方法步骤：
一、细菌的培养技术：
1、培养基的配制：
1、称量 2、溶化 加入材料（蛋白胨、牛肉膏、琼脂等 34、 、调 培养PH基的1m分加7o．装热l/4L溶～的化7N．aO6H溶液，PH试纸， 5、加棉塞 棉塞能防止杂菌污染，保证通气 6、包扎 良好。不能太松、不难太紧，2/3
在管内
2、灭菌
开锅加水 放入待灭菌的材料：管口向上，竖放，不能
（5）如果提高培养基中NaCl的浓度，可以 用于筛选耐___盐____细菌，这种培养基被 称为选__择__性培养基 。
16．在光亮处用一种培养液分别培养绿藻和酵母 菌，其结果如右图，造成这种结果的原因是培养 液中 A．缺少无机盐 B．含氧量太高 C．缺少有机养分 D．不含二氧化碳
C
17．右图是细菌的生长速度曲线，根据曲线回 答(总线(上需式13(如以段()4下菌中2)活后中属调)果缩。)营处3列数的酶细，间整段用短养于问目合菌2需代4期中作发物对题(段成数要谢包出生菌酵质数：。的量重产括。现长种周的期调最新 物死的速，期消的节多合 ，菌原度可，耗微时成 以和因下在曲；生对必 适活是降短线有物应需 应菌细的。时中害，的的 新)菌原间属最代代是酶 环接因内于多谢谢曲，境种是得这的产旺线辅，到到一时物盛中酶这新大时期的，的或种的量期对积生某调培微的应累长3些节养生是曲，迅段必方基物P速。h，，
子传递过程，影响NADP＋形成 NADPH ，
进而影响在 叶绿体基质
中进行光
合作用的暗反应过程，最终抑制杂草生长。
⑵从使用莠去津农田中，选到了能遗传的耐莠去津 杂草，将它与敏感莠去津植株杂交，结坚果见下表：
杂交亲本
后代中耐药型 后代中敏感型 植株比例（%） 植株比例（%）
耐药型♀×敏感 100
0
型♂
太挤 加盖 排出锅内冷空气：达49Kpa时，排气两次 维持：98 Kpa，20min 排气：锅内压力降为0时，才能排气
3、搁置斜面
将锅内试管等取出，在冷却至50℃时，搁置 斜面，斜面长度不能超过试管总长度的1/2
4、接种
洗净双手，用酒精擦拭 等手上酒精挥发以后，点燃酒精灯 接种
①左手夹住菌种试管和接种斜面试管，拧 松棉塞
敏感型♀×耐药 0
100
型♂
由表推断，控制该耐药性状的基因位
于 细胞质中
。
某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而
进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接
种及培养、菌落观察计数。请回答与此实验相 关的问题。
（1）培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细 菌培养提供了_氮_源__和_碳__源___。除此之外，培 养基还必须含有的基本成分是_无_机__盐_和 __水____。 （2）对培养基进行灭菌，应该采用的方法是 __高__压_蒸__汽灭菌 。