间充质干细胞特性ppt课件
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
殖，并维持至第10 代。 ➢白金萍等发现，胎盘MSC连续传代15 代后细胞仍维持增殖
能力和典型的成纤维细胞样形态学特征。据研究，胎盘 MSC培养后数目可达10亿，可以供多人多次使用。 ➢Pal研究，人BMSC在DMEM-LG和DMEM/F12 (葡萄糖含量 3.15g/L)培养基中可生长至25代。
5
CD8的最常见形式组 成的一个CD8 α和CTD细8胞
β的链条。
可识别由MHC I类分子 提呈的内源性抗原肽。
胞外的 CD8 α与I 类MHC分
靶细
胞
14
15
③分泌可溶性细胞因子
细胞因子（cytokine，CK）是免疫原、丝裂原或其他刺激 剂诱导多种细胞产生的低分子量可溶性蛋白质，具有调节固 有免疫和适应性免疫 、血细胞生成、细胞生长以及损伤组织 修复等多种功能。
8Baidu Nhomakorabea
②无MHC限制性
主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex， MHC) 是指脊椎动物某一染色体上编码主要组织相容性抗原、 控制细胞间相互识别、调节免疫应答的一组紧密连锁基因群。 人类的MHC通常称为HLA基因或HLA复合体，其编码的分子 表达于白细胞上，称为人类白细胞抗原(human leucocyte antigen，HLA)。
间充质干细胞的特性
2020/3/28
1
间充质干细 胞定义
间充质干细 胞主要特性
高度自我增殖多向分化 低免疫原性无MHC限制性 来源丰富 损伤趋化作用归巢功能 免疫调节损伤修复
2
3
4
①高度自我增殖
贴壁后快速生长是MSCs的一个重要特性，反映了细胞自我 更新的能力。MSC体外传代次数一般20-50代。 ➢人羊膜MSC和人绒毛膜MSC可贴壁生长并可在培养皿中增
a：最近，宾夕法尼亚大学和杜克大学的研究人员发现肺组织损伤后修复是 通过TGFβ信号调控的。这是第一次研究表明一种已经分化充分的细胞可以 在适当的条件下，恢复到以前的状态。
b：英国伦敦国王学院的科学家们研究发现，如果将一群存在于心脏中的 干细胞除去，心脏将无法进行修复；但是当重新注入这些心脏干细胞之后， 它们会返回心脏并且进行修复。
瑞典科
学家发
现牙齿
内神经
系统细
10
①损伤趋化：
MSC具有很强的向机体损伤部位和肿瘤部位迁移的能力。当机体发生损伤和炎症反应时，会分泌很多炎症因 子和趋化因子，MSC会根据体内的信号向损伤部位迁移，在迁移到达损伤部位后才能有效发挥其免疫调节、组 织修复或者其他方面的作用。据研究，骨髓和胎盘MSC比脐带MSC具有更强的迁移能力，迁移能力差异与纤溶 酶原激活抑制剂1（plasminogen activator inhibitor-1 PAI-1）的表达量有关。
例子：山东大学齐鲁医院团队研究发现，移植的骨髓MSC 可定向归巢到受损胰岛，可分化为胰岛素分泌细胞。
12
13
T细胞可以根据是否表达CD4或CD8共同受体分子而划 分为两个亚群。CD8+T细胞通过直接杀伤作用，主要负责对 靶细胞的清除。如被病毒感染的细胞和表达有肿瘤特异性新 抗原的细胞。
包含一对CD8链。
胰腺 含N2添加物的DMEM(Gibco)、10mmol/L烟酰胺
心肌
DMEM、10%胎牛血清、10ng/mL碱性成纤维生长因子、含有丁酸和维甲酸的 透明质酸和50ng/mL激活素A的混合物
7
①低免疫原性 干细胞免疫原性指干细胞表达的抗原能够刺激机体形成特
异抗体或致敏淋巴细胞，引起宿主免疫应答的特性。免疫表 型是鉴定MSC的重要指标，一定程度上反映了细胞的特性。
分为白细胞介素、干扰素、肿瘤坏死因子、集落刺激因 子、生长因子和趋化因子六大类。
16
a：体外研究发现MSCs可以通过分泌肝细胞生长因子 （HGF），转化生长因子-a（TGF- a ）等在内的多种可溶性 细胞因子来抑制T淋巴细胞的增殖。 b：Aggarwal等认为MSCs分泌的前列腺素E2是抑制淋巴细胞 增殖的因素。Tang研究发现MSCs可以分泌血管内皮生长因子 (VEGE)、HGF、成纤维细胞因子(FGF)、胰岛素样生长因子1（IGF-1）等参与心肌前体细胞增生分化，抗心肌纤维化。
骨 高糖DMEM、10%胎牛血清、10-8mol/L地塞米松、10nmol/L羟化维生素D3
骨骼肌 高糖DMEM、10%胎牛血清、5%人/马血清、50µmol/L氢化可的松
血管 基质胶、50ng/mL血管内表皮生长因子、2%胎牛血清
神经
①高糖DMEM、10%胎牛血清、30µmol/L全反式维甲酸 ②100µmol/L丁酸酯羟 基茴香醚、10µmol/L福斯克林、2%二甲基亚砜、5U/mL肝素、5nmol/L k252a、25nmol/L KCl、2mmol/L丙戊酸、10ng/mL碱性成纤维生长因子、 10ng/mL血小板源性生长因子-BB、1×N2添加物
11
②干细胞归巢机制 干细胞归巢是指自体或外源性的干细胞在多种因素的影
响下，从血管内皮细胞定向性迁移至靶向组织并定植存活的 过程。分为三个步骤：识别此处微内皮血管，透过内皮，最 后进入靶组织再生。“归巢”是一个多步骤协调的复杂过程， 许多细胞因子、化学因子、黏附因子和细胞外基质降解蛋白 酶参与其中。其中炎性趋化是其最重要的特征。
无MHC限制性：MSCs移植可减少异基因造血干细胞引起 的移植物抗宿主反应（graft-versus-host-disease，GVHD）。
例子：将羊膜及绒毛膜细胞移植入新生的猪和鼠体内， 通过两种人重复DNA区域进行检测发现这两种动物体内多个 器官都可检测到微小嵌合体。
9
3.来源丰富
充满 争议
去年，
例子:薛群等发现，胎盘来源的MSCs包括CD40/CD40L、 B7/CD28、ICOS、4-1BB、OX40/OX40L 等在内的共刺激分 子均不表达，表明其免疫原性很低。
MSCs不表达或仅表达可忽略水平的主要组织相容性复 合物（MHC）和T细胞共刺激因子B7，具有低免疫性。
例子： HLA-DR （MHC-II类分子）主要表达于淋巴细 胞上，胎盘来源的MSC一般不表达此类抗原。
②多向分化潜能
6
羊膜MSCS诱导分化条件
分化
条件培养基
脂肪 软骨
高糖DMEM、10%胎牛血清、0.5mmol/L异丁基甲基黄嘌呤、1µmol/L地塞米松、 10µg/mL胰岛素、200µmol/L吲哚美辛
高糖DMEM、1%胎牛血清、6.25µg/mL胰岛素、10ng/mLTGF-β、50ng/mL维生 素C
能力和典型的成纤维细胞样形态学特征。据研究，胎盘 MSC培养后数目可达10亿，可以供多人多次使用。 ➢Pal研究，人BMSC在DMEM-LG和DMEM/F12 (葡萄糖含量 3.15g/L)培养基中可生长至25代。
5
CD8的最常见形式组 成的一个CD8 α和CTD细8胞
β的链条。
可识别由MHC I类分子 提呈的内源性抗原肽。
胞外的 CD8 α与I 类MHC分
靶细
胞
14
15
③分泌可溶性细胞因子
细胞因子（cytokine，CK）是免疫原、丝裂原或其他刺激 剂诱导多种细胞产生的低分子量可溶性蛋白质，具有调节固 有免疫和适应性免疫 、血细胞生成、细胞生长以及损伤组织 修复等多种功能。
8Baidu Nhomakorabea
②无MHC限制性
主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex， MHC) 是指脊椎动物某一染色体上编码主要组织相容性抗原、 控制细胞间相互识别、调节免疫应答的一组紧密连锁基因群。 人类的MHC通常称为HLA基因或HLA复合体，其编码的分子 表达于白细胞上，称为人类白细胞抗原(human leucocyte antigen，HLA)。
间充质干细胞的特性
2020/3/28
1
间充质干细 胞定义
间充质干细 胞主要特性
高度自我增殖多向分化 低免疫原性无MHC限制性 来源丰富 损伤趋化作用归巢功能 免疫调节损伤修复
2
3
4
①高度自我增殖
贴壁后快速生长是MSCs的一个重要特性，反映了细胞自我 更新的能力。MSC体外传代次数一般20-50代。 ➢人羊膜MSC和人绒毛膜MSC可贴壁生长并可在培养皿中增
a：最近，宾夕法尼亚大学和杜克大学的研究人员发现肺组织损伤后修复是 通过TGFβ信号调控的。这是第一次研究表明一种已经分化充分的细胞可以 在适当的条件下，恢复到以前的状态。
b：英国伦敦国王学院的科学家们研究发现，如果将一群存在于心脏中的 干细胞除去，心脏将无法进行修复；但是当重新注入这些心脏干细胞之后， 它们会返回心脏并且进行修复。
瑞典科
学家发
现牙齿
内神经
系统细
10
①损伤趋化：
MSC具有很强的向机体损伤部位和肿瘤部位迁移的能力。当机体发生损伤和炎症反应时，会分泌很多炎症因 子和趋化因子，MSC会根据体内的信号向损伤部位迁移，在迁移到达损伤部位后才能有效发挥其免疫调节、组 织修复或者其他方面的作用。据研究，骨髓和胎盘MSC比脐带MSC具有更强的迁移能力，迁移能力差异与纤溶 酶原激活抑制剂1（plasminogen activator inhibitor-1 PAI-1）的表达量有关。
例子：山东大学齐鲁医院团队研究发现，移植的骨髓MSC 可定向归巢到受损胰岛，可分化为胰岛素分泌细胞。
12
13
T细胞可以根据是否表达CD4或CD8共同受体分子而划 分为两个亚群。CD8+T细胞通过直接杀伤作用，主要负责对 靶细胞的清除。如被病毒感染的细胞和表达有肿瘤特异性新 抗原的细胞。
包含一对CD8链。
胰腺 含N2添加物的DMEM(Gibco)、10mmol/L烟酰胺
心肌
DMEM、10%胎牛血清、10ng/mL碱性成纤维生长因子、含有丁酸和维甲酸的 透明质酸和50ng/mL激活素A的混合物
7
①低免疫原性 干细胞免疫原性指干细胞表达的抗原能够刺激机体形成特
异抗体或致敏淋巴细胞，引起宿主免疫应答的特性。免疫表 型是鉴定MSC的重要指标，一定程度上反映了细胞的特性。
分为白细胞介素、干扰素、肿瘤坏死因子、集落刺激因 子、生长因子和趋化因子六大类。
16
a：体外研究发现MSCs可以通过分泌肝细胞生长因子 （HGF），转化生长因子-a（TGF- a ）等在内的多种可溶性 细胞因子来抑制T淋巴细胞的增殖。 b：Aggarwal等认为MSCs分泌的前列腺素E2是抑制淋巴细胞 增殖的因素。Tang研究发现MSCs可以分泌血管内皮生长因子 (VEGE)、HGF、成纤维细胞因子(FGF)、胰岛素样生长因子1（IGF-1）等参与心肌前体细胞增生分化，抗心肌纤维化。
骨 高糖DMEM、10%胎牛血清、10-8mol/L地塞米松、10nmol/L羟化维生素D3
骨骼肌 高糖DMEM、10%胎牛血清、5%人/马血清、50µmol/L氢化可的松
血管 基质胶、50ng/mL血管内表皮生长因子、2%胎牛血清
神经
①高糖DMEM、10%胎牛血清、30µmol/L全反式维甲酸 ②100µmol/L丁酸酯羟 基茴香醚、10µmol/L福斯克林、2%二甲基亚砜、5U/mL肝素、5nmol/L k252a、25nmol/L KCl、2mmol/L丙戊酸、10ng/mL碱性成纤维生长因子、 10ng/mL血小板源性生长因子-BB、1×N2添加物
11
②干细胞归巢机制 干细胞归巢是指自体或外源性的干细胞在多种因素的影
响下，从血管内皮细胞定向性迁移至靶向组织并定植存活的 过程。分为三个步骤：识别此处微内皮血管，透过内皮，最 后进入靶组织再生。“归巢”是一个多步骤协调的复杂过程， 许多细胞因子、化学因子、黏附因子和细胞外基质降解蛋白 酶参与其中。其中炎性趋化是其最重要的特征。
无MHC限制性：MSCs移植可减少异基因造血干细胞引起 的移植物抗宿主反应（graft-versus-host-disease，GVHD）。
例子：将羊膜及绒毛膜细胞移植入新生的猪和鼠体内， 通过两种人重复DNA区域进行检测发现这两种动物体内多个 器官都可检测到微小嵌合体。
9
3.来源丰富
充满 争议
去年，
例子:薛群等发现，胎盘来源的MSCs包括CD40/CD40L、 B7/CD28、ICOS、4-1BB、OX40/OX40L 等在内的共刺激分 子均不表达，表明其免疫原性很低。
MSCs不表达或仅表达可忽略水平的主要组织相容性复 合物（MHC）和T细胞共刺激因子B7，具有低免疫性。
例子： HLA-DR （MHC-II类分子）主要表达于淋巴细 胞上，胎盘来源的MSC一般不表达此类抗原。
②多向分化潜能
6
羊膜MSCS诱导分化条件
分化
条件培养基
脂肪 软骨
高糖DMEM、10%胎牛血清、0.5mmol/L异丁基甲基黄嘌呤、1µmol/L地塞米松、 10µg/mL胰岛素、200µmol/L吲哚美辛
高糖DMEM、1%胎牛血清、6.25µg/mL胰岛素、10ng/mLTGF-β、50ng/mL维生 素C