脐带间充质干细胞ppt课件
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东营脐带干细胞保存PPT课件
脐带采集严格按照无菌操作，新生儿娩出后10秒钟内，在 距新生儿脐部约5厘米处用两把止血钳夹住，从两钳间剪断 脐带后结扎，新生儿抱走正常处理
采集脐带时，用普通管采集5ml脐血，用做病原学检测。 也可采集胎盘血或母血
采集脐血样后，将脐带内脐血尽量躯赶干净，结扎脐带， 隔离穿刺部位
.
29
待胎盘娩出1分钟内，在靠近胎盘处结扎后剪断脐带，结扎 的脐带用浸有0.9%生理盐水及75%酒精的无菌医用纱布擦 试脐带，清除脐带表面羊水、血液及胎粪等污物，污染严 重者先用生理盐水充分冲洗
.
24
美国FDA批准间充质干细胞临床试验疾病明细
❖ 美国FDA批准MSC进行临
床试验
❖ 获得FDA批准上市：MSC
治疗GVHD、克罗恩病、 急性放射综合征（辐射 病）
❖ 临床III期：1型糖尿病
、急性心肌梗塞、慢性 阻塞性肺病（COPD）、 膝关节炎
❖ 临床I期：病骨再生
.
25
采集方法
.
26
❖无菌一次性脐带采集包： ❖含脐带保存液的采集瓶1个
婴儿脐带间充质干细胞救治雷诺氏症的患者 2010年8月
.
22
胜利油田中心医院治疗脑梗（ 2010年11月）
• 病人第二天可以独立下地行走 • 病人第四天右臂肌力从0级恢复到3级 • 病人第十一天精神状
态明显改善，面部表 情丰富，并开始主动 和他人交流。
.
23
自闭症患儿干细胞治疗后尝试入读普通学校
.
6
➢储存脐带 健康期待
.
7
脐带保存
分娩采集脐带
传统方法
提取间充质干细胞
临
长
床
期
治
保
疗
采集脐带时，用普通管采集5ml脐血，用做病原学检测。 也可采集胎盘血或母血
采集脐血样后，将脐带内脐血尽量躯赶干净，结扎脐带， 隔离穿刺部位
.
29
待胎盘娩出1分钟内，在靠近胎盘处结扎后剪断脐带，结扎 的脐带用浸有0.9%生理盐水及75%酒精的无菌医用纱布擦 试脐带，清除脐带表面羊水、血液及胎粪等污物，污染严 重者先用生理盐水充分冲洗
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24
美国FDA批准间充质干细胞临床试验疾病明细
❖ 美国FDA批准MSC进行临
床试验
❖ 获得FDA批准上市：MSC
治疗GVHD、克罗恩病、 急性放射综合征（辐射 病）
❖ 临床III期：1型糖尿病
、急性心肌梗塞、慢性 阻塞性肺病（COPD）、 膝关节炎
❖ 临床I期：病骨再生
.
25
采集方法
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26
❖无菌一次性脐带采集包： ❖含脐带保存液的采集瓶1个
婴儿脐带间充质干细胞救治雷诺氏症的患者 2010年8月
.
22
胜利油田中心医院治疗脑梗（ 2010年11月）
• 病人第二天可以独立下地行走 • 病人第四天右臂肌力从0级恢复到3级 • 病人第十一天精神状
态明显改善，面部表 情丰富，并开始主动 和他人交流。
.
23
自闭症患儿干细胞治疗后尝试入读普通学校
.
6
➢储存脐带 健康期待
.
7
脐带保存
分娩采集脐带
传统方法
提取间充质干细胞
临
长
床
期
治
保
疗
脐带血培训演示ppt课件
移植过程
包括预处理、造血干细胞的输注和免疫抑制治疗等步骤。预处理通常采用大剂量 放化疗，以清除体内的肿瘤细胞和异常克隆细胞，为造血干细胞的植入创造条件 。
术后管理
包括预防感染、定期随访和监测等。患者需要居住在无菌层流病房中，以减少感 染的风险。同时，医生会定期监测患者的血常规、生化指标等，以评估移植效果 和调整治疗方案。
神经干细胞（NSCs）
脐带血中的NSCs具有分化为神经元和 胶质细胞的潜能，可用于神经再生。
脑损伤修复ຫໍສະໝຸດ 脊髓损伤治疗利用脐带血培养的神经干细胞移植到 脊髓损伤部位，可促进神经再生和功 能恢复。
脐带血中的神经营养因子和抗炎因子 可促进脑损伤修复，改善神经功能。
其他组织器官再生医学应用
肝脏再生
脐带血中的肝干细胞和生 长因子可促进肝脏再生， 治疗肝硬化、肝衰竭等疾 病。
脐带血组成
脐带血中含有丰富的造血干细胞 、间充质干细胞以及其他多种细 胞成分，具有极高的医学价值。
脐带血采集与保存方法
采集方法
在新生儿娩出后，通过专业的采集技 术，将残留在脐带和胎盘中的血液收 集起来。
保存方法
采集后的脐带血需要进行严格的检测 和处理，然后冷冻保存在零下196摄 氏度的液氮中，以确保细胞的活性和 数量。
提高公众认知度和接受度
加强科普宣传
通过科普讲座、宣传资料等多种形式，向公众普及脐带血的知识和 重要性，提高公众对脐带血的认知度和接受度。
推动临床应用
鼓励医生和医疗机构积极采用脐带血进行治疗，通过实际疗效提高 公众对脐带血的信任和认可。
完善法规政策
制定和完善脐带血相关的法规和政策，规范脐带血的采集、存储和使 用流程，保障公众权益和安全。
肿瘤疫苗研发
包括预处理、造血干细胞的输注和免疫抑制治疗等步骤。预处理通常采用大剂量 放化疗，以清除体内的肿瘤细胞和异常克隆细胞，为造血干细胞的植入创造条件 。
术后管理
包括预防感染、定期随访和监测等。患者需要居住在无菌层流病房中，以减少感 染的风险。同时，医生会定期监测患者的血常规、生化指标等，以评估移植效果 和调整治疗方案。
神经干细胞（NSCs）
脐带血中的NSCs具有分化为神经元和 胶质细胞的潜能，可用于神经再生。
脑损伤修复ຫໍສະໝຸດ 脊髓损伤治疗利用脐带血培养的神经干细胞移植到 脊髓损伤部位，可促进神经再生和功 能恢复。
脐带血中的神经营养因子和抗炎因子 可促进脑损伤修复，改善神经功能。
其他组织器官再生医学应用
肝脏再生
脐带血中的肝干细胞和生 长因子可促进肝脏再生， 治疗肝硬化、肝衰竭等疾 病。
脐带血组成
脐带血中含有丰富的造血干细胞 、间充质干细胞以及其他多种细 胞成分，具有极高的医学价值。
脐带血采集与保存方法
采集方法
在新生儿娩出后，通过专业的采集技 术，将残留在脐带和胎盘中的血液收 集起来。
保存方法
采集后的脐带血需要进行严格的检测 和处理，然后冷冻保存在零下196摄 氏度的液氮中，以确保细胞的活性和 数量。
提高公众认知度和接受度
加强科普宣传
通过科普讲座、宣传资料等多种形式，向公众普及脐带血的知识和 重要性，提高公众对脐带血的认知度和接受度。
推动临床应用
鼓励医生和医疗机构积极采用脐带血进行治疗，通过实际疗效提高 公众对脐带血的信任和认可。
完善法规政策
制定和完善脐带血相关的法规和政策，规范脐带血的采集、存储和使 用流程，保障公众权益和安全。
肿瘤疫苗研发
脐带间充质干细胞课件课件
者术中均未发生严重并发症，术后无不 良反应。
第30页，幻灯片共39页
12例肝硬化患者脐带间充质干细胞
移植前后实验室指标变化
ALB(g/L) ALT(U/L) TBIL(μmol/L) PT(s)
移 植 前 30.69±4.32 122.78±89.32 35.32±21.61 17.89±4.49
第22页，幻灯片共39页
间充质干细胞质量要求
• 细菌检测
• 内毒素检测 • 革兰氏检测
• 支原体检测
• 活性检测≥90%
阴性
第23页，幻灯片共39页
细胞发放
• 1.细胞的保存(基质：生理盐水或者保存液） • 2.运输要求：时间、温度 • 3.病人信息填写完整 • 4.样本检测合格
第24页，幻灯片共39页
为慢性乙型肝炎，肝硬化, ChildPugh分级B级9例，C级3例。健康婴儿 脐带提取间充质干细胞经实验室传代、
扩增，取108制成40ml混悬液，第一次
经肝动脉注入，第二次以后为静脉输
注，每周一次，共4次。4周后复查生
化指标。
第29页，幻灯片共39页
结果
食欲改善、体力好转11例（91.66%）；
腹胀减轻11例（91.66%）；腹水减少、 下肢浮肿减轻10例（83.33%）。12例患
第18页，幻灯片共39页
间充质干细胞原代培养
• 细胞补液和换液（原代培养）
• 1. 制备五天补液（观察是否有细胞爬出）
• 2.八天换液
第19页，幻灯片共39页
间充质干细胞的冻存
• 细胞收集前须给检测送样做细菌检测和流
式（CD90+、CD105+、CD166+） • 冷冻保护剂（胎牛血清+DMSO） 配制：
第30页，幻灯片共39页
12例肝硬化患者脐带间充质干细胞
移植前后实验室指标变化
ALB(g/L) ALT(U/L) TBIL(μmol/L) PT(s)
移 植 前 30.69±4.32 122.78±89.32 35.32±21.61 17.89±4.49
第22页，幻灯片共39页
间充质干细胞质量要求
• 细菌检测
• 内毒素检测 • 革兰氏检测
• 支原体检测
• 活性检测≥90%
阴性
第23页，幻灯片共39页
细胞发放
• 1.细胞的保存(基质：生理盐水或者保存液） • 2.运输要求：时间、温度 • 3.病人信息填写完整 • 4.样本检测合格
第24页，幻灯片共39页
为慢性乙型肝炎，肝硬化, ChildPugh分级B级9例，C级3例。健康婴儿 脐带提取间充质干细胞经实验室传代、
扩增，取108制成40ml混悬液，第一次
经肝动脉注入，第二次以后为静脉输
注，每周一次，共4次。4周后复查生
化指标。
第29页，幻灯片共39页
结果
食欲改善、体力好转11例（91.66%）；
腹胀减轻11例（91.66%）；腹水减少、 下肢浮肿减轻10例（83.33%）。12例患
第18页，幻灯片共39页
间充质干细胞原代培养
• 细胞补液和换液（原代培养）
• 1. 制备五天补液（观察是否有细胞爬出）
• 2.八天换液
第19页，幻灯片共39页
间充质干细胞的冻存
• 细胞收集前须给检测送样做细菌检测和流
式（CD90+、CD105+、CD166+） • 冷冻保护剂（胎牛血清+DMSO） 配制：
脐带间充质干细胞
脐带间充质干细胞扩增培养方法
采用无血清培养基（可含10%受者灭活血清）将 细胞调成悬液，按2×10^4/cm^2接种于培养 瓶， 37℃、5%的CO2条件下培养4d后全量换液， 吸弃非贴壁细胞。每3d换液，细胞覆盖瓶底80% 时，0.25%胰蛋白酶-1mmol/L EDTA消化，按1： 3传代。培养3周左右，胰酶消化细胞，细胞悬液 2000r/min离心5min，弃上清后加入生理盐水混匀， 2000r/min离心5min，重复2次。
脐带间充质干细胞培养结果
新分离的脐带单个核细胞呈纺锤形
原代培养6h后有大量细胞贴壁，贴 壁细胞呈梭形、多角形
培养7天细胞呈长梭形，细胞平行或 漩涡状排列。培养10天细胞可达 80%融合。传代后的细胞形态无明显 改变，排列更加整齐。
脐带间充质干细胞在临床上的应用
1.能具有较强的免疫调节作用，可用于治疗 红斑狼疮和硬皮病等自身免疫性疾病，降 低细胞或器官移植后的免疫排斥反应，提 高细胞或器官移植的成功率。
酶消化法
培养方法
组织块贴壁法
酶消化法
• 去除血管，将脐带组织剪成1~3cm大小组织块， 用无血清培养基洗2次，将组织浸泡在0.1%胶原 酶中，37℃消化4~6小时。加入生理盐水（消化 液体积的2倍），2000r/min离心5min，弃上清， 加入2.5%胰蛋白酶，37℃处理30min，加入生理 盐水（消化液体积的2倍），100目滤网过滤，滤 液2000r/min离心5min，弃上清。重复两次。细胞 计数，将细胞调成一定浓度用于培养。
组织块贴壁法
• 取新鲜健康脐带，用PBS冲洗干净后，用剪刀镊 子剔去血管，剥出里面的华通氏胶，将所得组织 充分剪碎至1 mm^3大小，加入α-MEM培养液置 于37℃，5%的CO2培养箱培养，培养液中含10% FBS，100U/ml青霉素，100U/ml链霉素。脐带组 织培养5-7天后，可见有部分细胞从组织块周围爬 出，形态呈细小的梭形，一周后，细胞开始迅速 增殖，形成大小不等的细胞集落。
脐带间充质干细胞PPT
脐带间充质干细胞的研究进展
分离与培养技术
01
02
03
酶消化法
使用特定的酶如胶原酶、 胰酶等分解脐带组织，释 放出间充质干细胞。
组织块贴壁法
将脐带组织切割成小块， 贴壁培养，让间充质干细 胞从组织块中爬出并扩增。
流式细胞术分离法
利用间充质干细胞的表面 标记物，通过特定的抗体 进行免疫分离。
诱导分化与基因编辑
再生医学
组织工程
脐带间充质干细胞具有多向分化潜能，可诱导分化为多种组 织细胞，如骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞等。在组织工程领 域，可用于构建人工组织器官，为器官移植提供新的来源。
损伤修复与再生
脐带间充质干细胞可分泌多种生长因子和细胞因子，具有促 进损伤组织修复和再生的能力。在损伤修复领域，可用于治 疗烧伤、创伤等，促进受损组织的再生与修复。
技术挑战与解决方案
技术挑战
脐带间充质干细胞的分离、培养和分化等技术在实践中仍面临一些技术难题，如低分离效率、低细胞活率等。
解决方案
加强基础研究，深入了解脐带间充质干细胞的生物学特性和调控机制；采用先进的分离和培养技术，提高细胞的 分离效率和活率；加强国际合作，共享技术和资源，推动干细胞技术的进步。
05
脐带间充质干细胞的挑战与解 决方案
伦理挑战与解决方案
伦理挑战
脐带间充质干细胞的研究和应用涉及到伦理问题，如胚胎和胎儿的权益、人类基因编辑 等。
解决方案
建立严格的伦理审查机制，确保研究符合伦理标准；加强公众教育和科普，提高公众对 干细胞研究的认知和理解；尊重和保护受试者的权益，确保研究过程的公正和透明。
社会影响与普及程度
疾病治疗
脐带间充质干细胞在多种疾病的 治疗中展现出巨大潜力，有望为
分离与培养技术
01
02
03
酶消化法
使用特定的酶如胶原酶、 胰酶等分解脐带组织，释 放出间充质干细胞。
组织块贴壁法
将脐带组织切割成小块， 贴壁培养，让间充质干细 胞从组织块中爬出并扩增。
流式细胞术分离法
利用间充质干细胞的表面 标记物，通过特定的抗体 进行免疫分离。
诱导分化与基因编辑
再生医学
组织工程
脐带间充质干细胞具有多向分化潜能，可诱导分化为多种组 织细胞，如骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞等。在组织工程领 域，可用于构建人工组织器官，为器官移植提供新的来源。
损伤修复与再生
脐带间充质干细胞可分泌多种生长因子和细胞因子，具有促 进损伤组织修复和再生的能力。在损伤修复领域，可用于治 疗烧伤、创伤等，促进受损组织的再生与修复。
技术挑战与解决方案
技术挑战
脐带间充质干细胞的分离、培养和分化等技术在实践中仍面临一些技术难题，如低分离效率、低细胞活率等。
解决方案
加强基础研究，深入了解脐带间充质干细胞的生物学特性和调控机制；采用先进的分离和培养技术，提高细胞的 分离效率和活率；加强国际合作，共享技术和资源，推动干细胞技术的进步。
05
脐带间充质干细胞的挑战与解 决方案
伦理挑战与解决方案
伦理挑战
脐带间充质干细胞的研究和应用涉及到伦理问题，如胚胎和胎儿的权益、人类基因编辑 等。
解决方案
建立严格的伦理审查机制，确保研究符合伦理标准；加强公众教育和科普，提高公众对 干细胞研究的认知和理解；尊重和保护受试者的权益，确保研究过程的公正和透明。
社会影响与普及程度
疾病治疗
脐带间充质干细胞在多种疾病的 治疗中展现出巨大潜力，有望为
成体干细胞(间充质干细胞,造血干细胞)ppt课件
造血干细胞的微环境
骨髓微环境中的一些转录因子和蛋白分子对 造血干细胞的移行、增殖和分化起了调控作用。
干细胞因子
与干细胞表面的 C-kit 受体结合 GATA-2对造血前体细胞的增殖与存活是关键的 加强细胞的粘附作用 GATA-1调节红系、巨核细胞等的存活、增殖 参与维持干细胞数目的恒定 和成熟
PU1的表达可促使造血干细胞子代前体细胞进 一步分化产生淋巴系， 而且间充质干细胞相对容易在体外被诱导 分化为成骨细胞和软骨细胞，所以间充质 干细胞在骨损伤，先天骨组织畸形的治疗 方面将有广泛的应用。
间充质干细胞
间充质干细胞的来源
来源于发育早期的中胚层 和外胚层。 MSC最初在骨髓中发现。
具有多向分化潜能，理想
的种子细胞。
间充质干细胞的形态
在个体出生后， 间充质干细胞附于 骨髓窦的内腔面， 形成一种包埋于窦 状网络中的三维细 胞网络。
光学显微镜
扫描电镜
间充质干细胞的表面标志
SH2、SH3、CD29、CD44、CD71、CD90、 CD106、CD120a、及CD124等
成体干细胞的概念
存在于成年个体的许多组织和器官
特点
修复 再生 自我更新
使组织和器官保持生长和衰退的 动态平衡。
成体干细胞的可塑性
成体干细胞可以突破其 “发育限制性”，跨系， 甚至跨胚层分化为其他类 型组织细胞
造血干细胞起源
（hemopoietic stem cell,HSC）是存 在于造血组织中的一群原始造血细 胞，它不是组织固定细胞，可存在 于造血组织及血液中。造血干细胞 在人胚胎2周时可出现于卵黄囊， 第4周开始转移至胚肝，妊娠5个月 后，骨髓开始造血，出生后骨髓成 为干细胞的主要来源。在造血组织 中，所占比例甚少，如在小鼠骨髓 中105核细胞中的有10个，在脾中 105有核细胞中只有0.2个。
间充质干细胞PPT课件
*临床应用：急性心肌梗死；缺血性心 肌病；慢性心功能不全。
MSC在神经系统疾病中的应用
*临床应用：新生儿缺氧-缺血性脑病（HIE小儿脑瘫 ）；神经变性疾病，如肌萎缩侧索化症（ALS）、帕金 森病、阿尔茨海默病等。
*干细胞可释放神经营养因子及重建运动神经元微环境 等机制来保护濒死的运动神经元。
ALS病，全称叫“肌肉萎缩性侧面硬化病”， 是一种运动神经元疾病，常在病后3～5年内 死亡。ALS病通常以手肌无力、萎缩为首发 症状，一般从一侧开始以后再波及对侧，随 病程展出现上、下运动神经元混合损害症 状。
体内——MSC单独或与HSC共移植促进骨髓造血 。 因此，单独移植MSC或与HSC共移植，可以发挥其强大的支 持造血，维持免疫稳态的优点，达到治愈疾病的目的。
MSC与基因治疗：
*趋化能力——基因改造后使其携带抗肿瘤基因并大量迁移至肿 瘤病灶。
多向分化——基因工程改造，MSC的组织修复功能得到进一步 的提高。
A为MSCs处理组 B为VSMCs处理组 C为PBS处理组 位于肌纤维间 被染成紫色的颗粒为毛 细血管 （ x400）
比较可知MSCs处理组毛细血管密度最大
支持造血：
•骨髓正常造血依赖于造血干细胞与其生存的造血微环境， MSC是骨髓微环境的前体细胞，因此MSC发挥了强大的支 持造血能力。 •依据：体外——MSC与HSC共培养促进造血克隆形成、增 殖和分化成熟。
*有效的基因治疗要要求： -可以通过一种载体将基因转运向靶细胞； -这种基因转移过程必须具有靶向性； -转入的基因可以在靶细胞内或靶细胞周围表达； -基因的表达产物必须有效且表达时间必须足够长； -整套系统在体内必须具有安全性。
*问题：MSC可通过免疫抑制作用而促进肿瘤生长；注射的干细 胞在体内的迁移路径在各个器官中的分布值得深入探究。
MSC在神经系统疾病中的应用
*临床应用：新生儿缺氧-缺血性脑病（HIE小儿脑瘫 ）；神经变性疾病，如肌萎缩侧索化症（ALS）、帕金 森病、阿尔茨海默病等。
*干细胞可释放神经营养因子及重建运动神经元微环境 等机制来保护濒死的运动神经元。
ALS病，全称叫“肌肉萎缩性侧面硬化病”， 是一种运动神经元疾病，常在病后3～5年内 死亡。ALS病通常以手肌无力、萎缩为首发 症状，一般从一侧开始以后再波及对侧，随 病程展出现上、下运动神经元混合损害症 状。
体内——MSC单独或与HSC共移植促进骨髓造血 。 因此，单独移植MSC或与HSC共移植，可以发挥其强大的支 持造血，维持免疫稳态的优点，达到治愈疾病的目的。
MSC与基因治疗：
*趋化能力——基因改造后使其携带抗肿瘤基因并大量迁移至肿 瘤病灶。
多向分化——基因工程改造，MSC的组织修复功能得到进一步 的提高。
A为MSCs处理组 B为VSMCs处理组 C为PBS处理组 位于肌纤维间 被染成紫色的颗粒为毛 细血管 （ x400）
比较可知MSCs处理组毛细血管密度最大
支持造血：
•骨髓正常造血依赖于造血干细胞与其生存的造血微环境， MSC是骨髓微环境的前体细胞，因此MSC发挥了强大的支 持造血能力。 •依据：体外——MSC与HSC共培养促进造血克隆形成、增 殖和分化成熟。
*有效的基因治疗要要求： -可以通过一种载体将基因转运向靶细胞； -这种基因转移过程必须具有靶向性； -转入的基因可以在靶细胞内或靶细胞周围表达； -基因的表达产物必须有效且表达时间必须足够长； -整套系统在体内必须具有安全性。
*问题：MSC可通过免疫抑制作用而促进肿瘤生长；注射的干细 胞在体内的迁移路径在各个器官中的分布值得深入探究。
间充质干细胞培养及鉴定PPT23页
拉
60、生活的道路一旦选定，就要勇敢地 走到底 ，决不 回头。 ——左
16、云无心以出岫，鸟倦飞而知还。 17、童孺纵行歌，斑白欢游诣。 18、福不虚至，祸不易来。 19、久在樊笼里，复得返自然。 20、羁鸟恋旧林，池鱼思故渊。
间充质干细胞培养及鉴定
56、书不仅是生活，而且是现在、过 去和未 来文化 生活的 源泉。 ——库 法耶夫 57、生命不可能有两次，但许多人连一 次也不 善于度 过。— —吕凯 特 58、问渠哪得清如许，为有源头活水来 。—— 朱熹 59、我的努力求学没有得到别的好处， 只不过 是愈来 愈发觉 自己的 无知。 ——笛 卡儿
60、生活的道路一旦选定，就要勇敢地 走到底 ，决不 回头。 ——左
16、云无心以出岫，鸟倦飞而知还。 17、童孺纵行歌，斑白欢游诣。 18、福不虚至，祸不易来。 19、久在樊笼里，复得返自然。 20、羁鸟恋旧林，池鱼思故渊。
间充质干细胞培养及鉴定
56、书不仅是生活，而且是现在、过 去和未 来文化 生活的 源泉。 ——库 法耶夫 57、生命不可能有两次，但许多人连一 次也不 善于度 过。— —吕凯 特 58、问渠哪得清如许，为有源头活水来 。—— 朱熹 59、我的努力求学没有得到别的好处， 只不过 是愈来 愈发觉 自己的 无知。 ——笛 卡儿
脐带间充质干细胞PPTPPT课件
精品ppt
10
细胞治疗程序
1、治疗前咨询： 明确诊断，明确疾病处于哪一期；
2、治疗风险： 分析利弊；可能的副作用；获益
3、知情同意
精品ppt
11
治疗前准备
❖ 1)每一位病人的治疗方案，都根
据其评价结果具体制定; ❖ 3). 需要的细胞数量； ❖ 4). 细胞的使用方法； ❖ 5). 可能出现的不良反应及应对措施。
❖ 腰穿途径 ❖ 静脉途径 ❖ 局部种植 ❖ 介入途径
精品ppt
16
前景
❖ 干细胞治疗是继药物治疗、手术治疗之后的又一场 医疗革命。目前，发达国家已经开始将干细胞治疗 技术用于临床治疗自身免疫性疾病、心肌梗死、脊 髓损伤、心力衰竭等疾病。
精品ppt
17
谢谢
精品ppt
18
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工艺流程简介信息反馈信息反馈供者筛选采集接收制备培养复苏发放运输临床应用供者筛选采集接收制备培养复苏发放运输临床应用供者筛选采集接收制备培养复苏培养制剂与发放临床应用信息反馈3细胞冷冻前进行病原微生物检测和细胞生物学功能检测
脐带间充质干细胞
精品ppt
1
什么是脐带间充质干细胞？
❖ 脐带间充质干细胞（Mesnchymal Stem Cells，MSCs）是指存在于新 生儿脐带组织中的一种多功能干细胞 ，它能分化成许多种组织细胞。
精品ppt
4
间
充
质
干
细
胞
治
疗
疾
病
机
制
精品ppt
5
干细胞在人体内的变化
❖ 人体的衰老实质上是细胞的衰老，而疾病的产生是因为细胞 衰老到一定程度从而发生了变化。科学研究表明，衰老的重 要原因是体内干细胞的数量减少或者是干细胞的活性降低所 造成的。脐带干细胞，我们称它为零岁干细胞，它使人类征 服衰老不再只是梦想。
脐带间充质干细胞概述
脐带间充质干细胞概述医学实验班 70080103 王雪彤脐带是胎儿时期连接母体与胎儿的索状结构,其外被羊膜,内含2条脐动脉、1条脐静脉,在动静脉之间含有特殊的胚胎粘液样结缔组织———华尔通氏胶(Whartonps Jelly) ,从华尔通氏胶分离得到的基质细胞即为人脐带间充质干细胞(HUMSCs) 。
1人脐带间充质干细胞(HUMSCs) 的形貌分析:倒置显微镜下观察人脐带间充质干细胞贴壁生长, 为形态相对均一的梭形细胞,呈平行排列生长或旋涡状生长,低密度时较扁平, 密度增加趋于融合时细胞变细长。
扫描电镜下观察呈长条状纤维样, 细胞膜表面不光滑, 有小结节状物, 细胞无明显突起,细胞间无网络状连接。
透射电镜观察核大, 不规则, 核仁明显, 常染色质多, 异染色质少, 胞浆少。
胞质内细胞器较少, 以粗面内质网和线粒体为主, 内有大量游离核糖体, 部分细胞可见内质网肿胀。
——植块法培养获得的人脐带间充质干细胞(×200)例如三代细胞的形态学特征——人体脐带间充质干细胞离体培养后，培养至第三代。
第三代人脐带间充质干细胞以均一长梭形的细胞为主，细胞周边有较多的丝状伪足，见图1，2；并形成毗邻细胞之间的网状连接，见图3；细胞核较大，核膜清晰，含两三个核仁，核质比较小，见图4。
2人脐带间充质干细胞(HUMSCs) 的生物学特性：HUMSCs既非胚胎干细胞又非成体干细胞,是别于两者之间的一类新的多能间充质细胞,它们之间既有联系又有差异。
根据国际细胞疗法间充质与组织干细胞委员会( the Mesenchymal and Tissue Stem Cell Committee of the Internation2 al Society for Cellular The rapy)制定的最低标准, 脐带间充质干细胞（MSCs）需满足以下条件: 1)MSCs在标准培养条件下呈贴壁生长; 2 )MSCs表达CD105, CD73和CD90,不表达CD45, CD34, CD14或CD11b, CD79a 或CD19和HLA2DR; 3)MSCs在体外至少能向成骨细胞、脂肪细胞和软骨细胞分化。
MSC干细胞PPT课件
多潜能性、增殖能力有限 研究最早、了解最深 自体来源、无免疫排斥 MSC产率低,1-10MSC/106MNC 有病毒感染风险 有限临床应用
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体外培养扩增获取人UCMSC
原代贴壁
原代培养
传代扩增
对于原代细胞中混杂的其它异质细胞，利用MSC的贴壁和高增 殖潜能，通过连续传代，筛除那些不能贴壁生长和虽能贴壁生 长但增殖能力差的细胞，最后通过流式细胞术鉴定。
07年6月7日王恩庆的妻子药守清反映患者尿频和尿 急已恢复正常；皮肤表面黑斑明显变浅；右眼干涩和畏 光已改善；透视显示，肺结核引起的空洞好转80%；精 神状态和饮食情况趋于常人，体重由细胞疗法前的125 斤，增长为145斤，饮食恢复正常，每天不需他人陪同 可独立外出散步。
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患者，女性，26岁，类风湿病史10年。
第二天，当我醒来的时候，突然发现自己的手指明显消肿了，不仅是双手 ，其它肿胀的关节也不酸胀了，全身症状明显减轻，无数的早晨我都是在浑身 僵痛，四肢乏力、情绪低落中度过的，然而今天早晨却让我感受到了一个精神 焕发，充满力量，心情舒畅的我，整个人都很轻松，这对于一个类风湿病人来 说真的是太难得了，当时我非常激动，因为我真的没有想到效果会如此明显和 迅速，通过这次治疗让我再次树立了信心，重新点燃了生活的希望。
我是一名类风湿病的患者，今年26岁，类风湿病史10年，患病以来，长 期服药，并尝试过各种治疗方法，效果均不明显。8月5日，我进行了脐带间充 质干细胞移植治疗，治疗方法比我刚开始想象的简单的多，只是通过静脉输入 的方法将干细胞输入到我的血管，不到半个小时就做完了，没有任何的不适感 ，干细胞移植后就可以回家了。
Biology of Blood and Marrow Transplantation 13:1477-1486, 2007
MSC干细胞ppt演示课件
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A
B
A： CD31 、 CD34、CD45和HLA-DR阴性<2% B： CD90 、 CD73 、 CD105 、 CD29和CD44阳性>95%
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Day 7
Day 14
UC-MSC •形态相似 •梭形细胞 •平行排列或漩涡状生长
Day 7
Day 14
BM-MSC
(100X)
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脊髓损伤动物模型
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干细胞注射液
间充质干细胞治疗肝病技术，为传统医学难以解决的病毒性
肝炎导致肝硬化、肝功能衰竭提供新的治疗途径。该技术
2009年得到总后卫生部批准，在临床进行科研性质的使用 间充质干细胞修复脑中风后中枢神经损伤科研项目，2009年 在北京市科委立项，并得到专项科研经费资助； 获得“人脐带间充质干细胞抗肝纤维化注射液及其制备方法” 专利技术（ZL201010551722.8），并于2010年12月10日在 药监局注册；
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脐带 MSC 具有与骨髓来源 MSC 相似的免疫特性，即 HLA-ABC呈阳性表达，HLA-DR呈阴性表达。 有研究显示， HLA-ABC 的表达率在脐带和骨髓 MSC 分别为50％～75％和＞75％，脐带MSC的HLA-ABC 的表达低于骨髓。 提示 UC-MSC 可能具有与 BM-MSC 相似或更低的免 疫原性。
脐带组织含有的细胞种类较少、MSC 含量大约为1个MSC/1600有核细胞。
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来源丰富、采集简便，对供者无不良影响 数量丰富，增殖能力强，可多次使用 基因稳定、不易突变、使用安全可靠 免疫原性低，具有免疫调节功能，使用时不 引起免疫排斥反应，还可抑制该反应 具有很强的促进造血恢复功能，广泛的临床 应用范围，可治疗多种疾病
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法和环境按照相应的标准进行严格控制。
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供者筛选
❖ 供者需要提供供者的既往病史、 现病史、家族史等资料。
❖ 经过一系列病原微生物检测，检 测合格后进入制备程序。
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间充质干细胞在什么条件下储存？ 能够保存多长时间？
❖ 细胞收集前须给检测送样做细菌检测和流式检 测。
❖ 我们采用液氮深低温罐（-196℃）保存脐带间 充质干细胞，可以长期保存 。
反应，可抑制该反应； ❖ 5、可广泛用于多系统疾病治疗及美容保健抗衰老。
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病间 机充 制质
干 细 胞 治 疗 疾
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干细胞在人体内的变化
❖ 人体的衰老实质上是细胞的衰老，而疾病的产生是因为细胞 衰老到一定程度从而发生了变化。科学研究表明，衰老的重 要原因是体内干细胞的数量减少或者是干细胞的活性降低所 造成的。脐带干细胞，我们称它为零岁干细胞，它使人类征 服衰老不再只是梦想。
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间充质干细胞质量要求
❖ 细菌检测 ❖ 内毒素检测 ❖ 革兰氏检测 ❖ 支原体检测 ❖ 流式检测 ❖ 活性检测≥90%
阴性
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细胞发放
❖ 1.细胞的保存：生理盐水（含人血白蛋白） ❖ 2.运输要求：时间、温度 ❖ 3.病人信息填写完整 ❖ 4.样本检测合格
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MSC治疗禁忌证：
❖ 1. 怀孕。 ❖ 2. 精神病。 ❖ 3. 严重的心、肝、肾、肺功能不全。 ❖ 4.不能控制的严重感染或其他有致命危险的疾病。 ❖ 5. 一般受者年龄不超过65岁 （个别患者>65岁）。 ❖ 6. 自体免疫性疾病晚期。 ❖ 7. 恶性肿瘤。 ❖ 8. HIV 阳性
脐带间充质干细胞
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什么是脐带间充质干细胞？
❖ 脐带间充质干细胞（Mesnchymal Stem Cells，MSCs）是指存在于新 生儿脐带组织中的一种多功能干细胞 ，它能分化成许多种组织细胞。
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脐带间充质干细胞应用范围
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脐带间充质干细胞的优势
❖ 1、来源丰富、采集简便，对母亲和新生儿无任何不良影响； ❖ 2、数量多，增殖能力强，可多次使用； ❖ 3、基因稳定、不易突变、使用安全可靠； ❖ 4、免疫原性低，具有免疫调节功能，使用时不引起免疫排斥
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工艺流程简介
供者筛选
采集
接收
制备
发培放养
复苏
冻存
培养
制剂运与输发放
临床应用
信息反馈
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如何对脐带干细胞进行质量控制的？
❖ 1）严格控制脐带运输条件； ❖ 2）脐带采集液进行病原微生物检测； ❖ 3）细胞冷冻前进行病原微生物检测和细胞生物学
功能检测； ❖ 4）细胞储存过程中定期对储存环境进行监测； ❖ 5）临床使用前对细胞进行严格检测； ❖ 6）对与细胞制造有关的人员、设备、原材料、方
.
细胞治疗程序
1、治疗前咨询： 明确诊断，明确疾病处于哪一期；
2、治疗风险： 分析利弊；可能的副作用；获益
3、知情同意
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治疗前准备
❖ 1). 安全检测:菌检； ❖ 2). 个体化治疗方案设计：每一位病人的治疗方案，都根据
其评价结果具体制定; ❖ 3). 需要的细胞数量； ❖ 4). 细胞的使用方法； ❖ 5). 可能出现的不良反应及应对措施。
.ห้องสมุดไป่ตู้
间充质干细胞移植途径
❖ 腰穿途径 ❖ 静脉途径 ❖ 局部种植 ❖ 介入途径
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前景
❖ 干细胞治疗是继药物治疗、手术治疗之后的又一场 医疗革命。目前，发达国家已经开始将干细胞治疗 技术用于临床治疗自身免疫性疾病、心肌梗死、脊 髓损伤、心力衰竭等疾病。
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谢谢
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供者筛选
❖ 供者需要提供供者的既往病史、 现病史、家族史等资料。
❖ 经过一系列病原微生物检测，检 测合格后进入制备程序。
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间充质干细胞在什么条件下储存？ 能够保存多长时间？
❖ 细胞收集前须给检测送样做细菌检测和流式检 测。
❖ 我们采用液氮深低温罐（-196℃）保存脐带间 充质干细胞，可以长期保存 。
反应，可抑制该反应； ❖ 5、可广泛用于多系统疾病治疗及美容保健抗衰老。
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病间 机充 制质
干 细 胞 治 疗 疾
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干细胞在人体内的变化
❖ 人体的衰老实质上是细胞的衰老，而疾病的产生是因为细胞 衰老到一定程度从而发生了变化。科学研究表明，衰老的重 要原因是体内干细胞的数量减少或者是干细胞的活性降低所 造成的。脐带干细胞，我们称它为零岁干细胞，它使人类征 服衰老不再只是梦想。
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间充质干细胞质量要求
❖ 细菌检测 ❖ 内毒素检测 ❖ 革兰氏检测 ❖ 支原体检测 ❖ 流式检测 ❖ 活性检测≥90%
阴性
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细胞发放
❖ 1.细胞的保存：生理盐水（含人血白蛋白） ❖ 2.运输要求：时间、温度 ❖ 3.病人信息填写完整 ❖ 4.样本检测合格
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MSC治疗禁忌证：
❖ 1. 怀孕。 ❖ 2. 精神病。 ❖ 3. 严重的心、肝、肾、肺功能不全。 ❖ 4.不能控制的严重感染或其他有致命危险的疾病。 ❖ 5. 一般受者年龄不超过65岁 （个别患者>65岁）。 ❖ 6. 自体免疫性疾病晚期。 ❖ 7. 恶性肿瘤。 ❖ 8. HIV 阳性
脐带间充质干细胞
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什么是脐带间充质干细胞？
❖ 脐带间充质干细胞（Mesnchymal Stem Cells，MSCs）是指存在于新 生儿脐带组织中的一种多功能干细胞 ，它能分化成许多种组织细胞。
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脐带间充质干细胞应用范围
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脐带间充质干细胞的优势
❖ 1、来源丰富、采集简便，对母亲和新生儿无任何不良影响； ❖ 2、数量多，增殖能力强，可多次使用； ❖ 3、基因稳定、不易突变、使用安全可靠； ❖ 4、免疫原性低，具有免疫调节功能，使用时不引起免疫排斥
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工艺流程简介
供者筛选
采集
接收
制备
发培放养
复苏
冻存
培养
制剂运与输发放
临床应用
信息反馈
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如何对脐带干细胞进行质量控制的？
❖ 1）严格控制脐带运输条件； ❖ 2）脐带采集液进行病原微生物检测； ❖ 3）细胞冷冻前进行病原微生物检测和细胞生物学
功能检测； ❖ 4）细胞储存过程中定期对储存环境进行监测； ❖ 5）临床使用前对细胞进行严格检测； ❖ 6）对与细胞制造有关的人员、设备、原材料、方
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细胞治疗程序
1、治疗前咨询： 明确诊断，明确疾病处于哪一期；
2、治疗风险： 分析利弊；可能的副作用；获益
3、知情同意
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治疗前准备
❖ 1). 安全检测:菌检； ❖ 2). 个体化治疗方案设计：每一位病人的治疗方案，都根据
其评价结果具体制定; ❖ 3). 需要的细胞数量； ❖ 4). 细胞的使用方法； ❖ 5). 可能出现的不良反应及应对措施。
.ห้องสมุดไป่ตู้
间充质干细胞移植途径
❖ 腰穿途径 ❖ 静脉途径 ❖ 局部种植 ❖ 介入途径
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前景
❖ 干细胞治疗是继药物治疗、手术治疗之后的又一场 医疗革命。目前，发达国家已经开始将干细胞治疗 技术用于临床治疗自身免疫性疾病、心肌梗死、脊 髓损伤、心力衰竭等疾病。
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谢谢
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