脐带间充质干细胞

• 6. 自体免疫性疾病晚期。
• 7. 恶性肿瘤。
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• 8. HIV 阳性
案例分析
干细胞临床应用
一、肝硬化
细胞移植有可能成为肝硬化治疗的最
什么是脐带间充质干细胞？
• 脐带间充质干细胞 （Mesnchymal Stem Cells， MSCs）是指存在于新生儿脐带 组织中的一种多功能干细胞，它 能分化成许多种组织细胞。
间充质干细胞
间充质干细胞（ mesenchymal stem cells，
MSC）是干细胞家族的重要成员，来 源于发育早期的中胚层和外胚层。 MSC最初在骨髓中发现，因其具有多 向分化潜能、造血支持和促进干细胞 植入、免疫调控和自我复制等特点而 日益受到人们的关注。
节免疫以及分离培养操作简便等特点
作为种子细胞，临床上主要用于 治疗机体无法自然修复的组织细 胞和器官损伤的多种难治性疾病
作为免疫调节细胞，治疗免疫排 斥和自身免疫性疾病
脐带间充质干细胞具有临床应用价值
• • 泌尿系统：肾实质的修复； • • 消化系统：肝组织的修复； • • 内分泌系统：胰岛细胞的修复； • • 神经系统：脑、脊髓损伤的修复； • • 血液系统：化疗、放疗后造血系统
3、知情同意：
治疗前准备
• 1). 安全检测:菌检； • 2). 个体化治疗方案设计：每一位病
人的治疗方案，都根据其评价结果具 体制定; • 3). 需要的细胞数量； • 4). 细胞的使用方法； • 5). 可能出现的不良反应及应对措施。
间充质干细胞质量要求
• 细菌检测 • 内毒素检测 • 革兰氏检测 • 支原体检测 • 活性检测≥90%
• 2.八天换液
间充质干细胞的冻存
• 细胞收集前须给检测送样做细菌检测 和流式（CD90+、CD105+、CD166+）
• 冷冻保护剂（胎牛血清+DMSO） 配制：DMSO 10%
• 冷冻方式 深低温冰箱梯度降温
细胞治疗程序
1、治疗前咨询： 明确诊断，明确疾病处于哪一期；
2、治疗风险： 分析利弊；可能的副作用；获益
的修复； • • 循环系统：心肌修复、血管修复； • • 免疫系统：调节免疫，移植治疗时可
降低免疫排斥反应； • • 衰竭器官的结构和功能的修复和再生：
最终替代组织和器官移植。
间充质干细胞治疗途径
• 腰穿途径 • 静脉途径 • 局部种植 • 介入途径
优势
• 1、取材方便：采集过程简单、无痛苦， 不影响母子健康；
华通氏胶的提取与培养 • 华通氏胶提取： • 1.消毒 • 2.清洗 • 3.分离出两条动脉和一条静脉 • 4.剥取华通氏胶 • 5.剪碎华通氏胶（大小1mm3 ） • 6.接种至培养皿培养（密度2-3g/10cm
皿）
间充质干细胞原代培养
• 细胞补液和换液（原代培养）
• 1. 制备五天补液（观察是否有细胞爬 出）
阴性
细胞发放
• 1.细胞的保存(基质：生理盐水或者保 存液）
• 2.运输要求：时间、温度 • 3.病人信息填写完整 • 4.样本检测合格
MSC治疗禁忌证：
• 1. 怀孕。
• 2. 精神病。
•
3. 3. 4.
严重的心、肝、肾、肺功能不全。 不合能并控其制 他的有严致重命感危染险。的疾病。
• 5>.6一5岁般）受。者年龄不超过65岁 （个别患者
• 间充质干细胞的制备原理：
脐带华通氏胶内富含间充 质干细胞，通过分离获得华通 氏胶后，并进行体外培养，利 用间充质干细胞贴壁生长和可 体外扩增特性，可获得更多的 间充质干细胞。
组织块分 离法
免疫五项检测均为阴性
工艺流程简介
供者筛选 发放 运输
临床应用
采集 复苏
接收 冻存
制备 培养
信息反馈
间充质干细胞的制备方式
• 2、细胞数量丰富：增值能力强，可为组 织器官的修复和再生提供所需的大量细胞；
• 3、免疫原性低：具有独特的免疫调 节功 能，自体使用不引起免疫排斥反应，异体 移植还可降低免疫反应；
• 4、不涉及社会、伦理及法律方面的更多 争议。
前景
• 干细胞治疗是继药物治疗、手术治疗 之后的又一场医疗革命。目前，发达 国家已经开始将干细胞治疗技术用于 临床治疗自身免疫性疾病、心肌梗死、 脊髓损伤、心力衰竭等疾病。
间充质干细胞治疗疾病的原理
• 替代和修复死亡和受损伤的细胞； • 激活休眠和处于抑制状态的细胞； • 旁分泌作用（分泌神经营养因子、抗
凋亡因子等）
涉及病症
肝脏疾 病
糖尿 病
神经系 统疾病
心血管 疾病
间充质
骨关
干细胞
节疾
病
烧伤
血液系 统疾病
多向分化
是关键
鉴于间充质干细胞具有多向分化潜能、
能支持造血和促进造血干细胞植入、调
脐带——获取干细胞的另一来源
我国科学家2006年首次从新生婴儿废弃的
脐带组织中得到了一种多能干细胞，称 作脐带间充质干细胞(UC-MSC)。UCMSC具有胚胎干细胞类似的增殖能力和 多向分化潜能，且来源丰富、取材方便、 低病毒感染率、无伦理障碍，又没有胚 胎干细胞产生畸胎瘤的问题，并且抗原 性很低。不产生免疫排斥反应，异体使 用无需HLA配型。
样本接收标准
• 脐带的接收标准： 1.样本信息一致、无误，并能追溯至脐带所 有人。 2.母血采集量≥5ml 脐血检测样本采集量≥5ml 3. 采集套装内容完整，无缺失；采集信息 登记完整、字迹清楚易辨认。 4.无可能造成供者基因型异常的家族史。 5.供者健康调查表登记信息无异常。
间充质干细胞的制备方式
间充质干细胞前景
干细胞的魅力在于：一旦身体需要，这
些细胞可按照发育途径通过分裂而产 生分化成熟的体细胞。也许在某一天， 人们突然发现，人体器官可以在实验 室按需要、按流程生产，血细胞、脑 细胞、骨骼、心肌细胞、肝脏、神经 等的更换都不成问题，即使患上白血 病、帕金森氏症和癌症这些不治之症 也能绝处逢生。
供者筛选
• 供者需要提供供者的既往病史、 现病史、家族史等资料。
样本采集运输要求
• 脐带采集标准： 1.脐带长度不得低于20cm 2.脐带两端均在2-3cm处结扎 3.脐带保存液在有效期内，并且无明显颜色变
化 4.脐带保存瓶无漏液现象，密封严实、无裂横 5.采集套装内容完整，无缺失 6.采集信息登记完整、字迹清楚易辨认 7.脐带运输时间在规定范围内 8.温度控制在适度范围内（0度-25度）