微生物检验重点知识
微生物检验主要知识点总结
微生物检验主要知识点总结一、微生物检验的概念微生物检验是指利用现代生物学技术手段检验和鉴定食品、饮用水、药品、环境等物品中微生物的种类和数量的一种实验室检验方法。
微生物检验的主要目的是为了评估物品中微生物的数量及种类是否达到卫生标准,以保障人们的健康和安全。
二、微生物检验的重要性1. 保障公共卫生:微生物检验可以及时发现食品、饮用水、药品等物品中存在的微生物污染,有针对性地采取相应的措施,从而保障公共卫生。
2. 保障产品质量:微生物检验可以帮助企业检测产品是否受到微生物污染,保障产品的质量和安全。
3. 疾病预防:微生物检验可以检测出病原微生物,为疾病的预防和控制提供科学依据。
三、微生物检验的主要流程1. 采样:根据不同的检验对象,选择合适的采样方法和设备进行样品采集。
2. 样品处理:将采集的样品进行处理,以提取出微生物进行检测。
3. 细菌培养:将样品中的微生物分离培养,以获取单一的微生物种类。
4. 微生物鉴定:通过形态学、生理生化特性、分子生物学等方法对微生物进行鉴定。
5. 微生物计数:对样品中的微生物进行计数或定量。
6. 结果分析:根据检验结果,评估样品是否符合相关的卫生标准。
四、微生物检验中的常用方法1. 培养法:将样品涂在含有营养物质的培养基上,利用条件恰当的培养环境,使样品中的微生物进行生长。
2. 影像法:通过显微镜观察培养好的微生物,观察其形态特征,进行鉴定。
3. 生化鉴定法:根据微生物的代谢过程,通过一系列的生化反应,鉴别微生物属种。
4. 分子生物学方法:利用PCR、DNA测序等技术,对微生物进行鉴定。
五、微生物检验中的常见问题1. 选择合适的检验方法:不同的微生物污染可能需要不同的检测方法,需根据具体情况选择合适的方法。
2. 样品的处理和保存:样品的处理和保存条件对检验结果有着重要的影响,需要严格按照标准操作。
3. 检验结果的分析和判断:检验结果可能存在假阳性、假阴性等情况,需要结合其他信息进行分析和判断。
检验师微生物检验知识点集锦
检验师微生物检验知识点集锦微生物检验是现代医学中的重要检验项目之一,主要用于检测病原微生物的存在和种类,以及对药敏试验进行评估。
作为初级检验师,你需要掌握以下几个方面的知识点:1.微生物基础知识-微生物的分类和命名规则:包括细菌、真菌、病毒和寄生虫等分类。
-微生物的形态和结构:掌握不同类别微生物的形态特征和结构组成,如细菌的形状、胞壁和胞质等。
-微生物的生长条件:了解微生物的生长条件,包括温度、湿度、pH值和营养物质等。
2.微生物检验方法-样品采集及处理:理解不同样品(如血液、尿液、分泌物等)的采集方法和处理步骤,以确保样品的准确性和可靠性。
-培养方法:熟悉不同微生物的培养方法,包括琼脂培养基的配制、接种方法和培养条件等。
-鉴定方法:了解常见微生物的鉴定方法,包括形态学鉴定、生化试验和分子生物学方法等。
-药敏试验:掌握药敏试验的原理和操作步骤,用于评估微生物对不同抗生素的敏感性,并为临床治疗提供参考。
3.常见病原微生物-常见病原菌:学习常见病原菌的分类、形态和致病特点,如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌等。
-常见病毒和真菌:了解一些常见的病毒和真菌的致病性和检测方法,例如流感病毒、念珠菌等。
-传染病的检测:学习不同传染病的检测方法,包括艾滋病、结核病和流行性感冒等。
4.质控和质量管理-质量控制:了解微生物检验中的质量控制措施,如内外质控、质量标准和质量评估等,确保结果的准确性和可靠性。
-安全措施:掌握微生物检验过程中的安全措施,如个人防护、试剂的正确使用和实验室的卫生管理等。
除了以上的基础知识,你还需要掌握实验中的仪器操作、数据分析和结果解读等技能。
微生物检验是一个综合性较强的检验项目,需要不断学习和实践,提高自己的技术水平和判断能力。
微生物检验技术知识点
微生物检验技术知识点1.培养方法:培养是微生物检验的基础,通过将样品接种到培养基上,使微生物在合适的环境中繁殖生长。
培养方法包括常规培养和不同培养手段。
常见的培养手段有液体培养、固体培养和胶体培养等。
2.鉴定方法:微生物的鉴定是判断其种属、属或是菌株的过程。
传统的鉴定方法包括形态学、生理生化特性和生物学特性等,而现代鉴定方法则应用了分子生物学等技术。
常用的鉴定技术有酶联免疫吸附试验(ELISA)、脱氧核糖核酸(DNA)杂交和聚合酶链反应(PCR)等。
3.纯化和分离方法:对于复杂的微生物种群,需要进行纯化和分离,以便对特定的微生物进行进一步的研究。
纯化和分离方法包括传统的分光技术、平板法和筛选法,以及最新的流式细胞术、脉冲场凝胶电泳(PFGE)和DNA测序技术等。
4.对微生物的抗生素敏感性检测:抗生素敏感性是指微生物对抗生素的反应情况。
抗生素敏感性检测可以帮助医生选择最有效的抗生素治疗细菌感染疾病。
目前常用的抗生素敏感性检测方法包括纸片扩散法、E测试和微量稀释法等。
5.流行病学监测:微生物检验技术在流行病学监测中发挥着重要作用。
通过对微生物种群的监测和分析,可以及时发现并控制传染病的传播。
流行病学监测常用的技术包括病原体分子鉴定、序列分析和生物信息学分析等。
6.污染控制技术:微生物检验技术也在环境和食品安全方面发挥着重要作用。
通过对环境和食品中微生物的检验,可以评估污染程度,并采取相应的控制措施。
常用的污染控制技术包括灭菌消毒、高温杀菌和辐照等。
7.微生物基因工程:微生物基因工程是指利用基因工程技术对微生物进行改造,以生产有用的产物或者改善微生物的特性。
微生物基因工程的应用广泛,可以用于制药、农业、环境工程等领域。
常见的微生物基因工程技术包括基因克隆、基因敲除和基因转导等。
总之,微生物检验技术是一门广泛应用于医学、生物学、环境工程等领域的技术。
通过不断地研究和创新,微生物检验技术将为疾病诊断、污染控制和资源利用等问题提供更好的解决方法。
微生物检验(完整版)
微生物检验(完整版)微生物检验是一种用于检测和鉴定微生物的方法,它在医学、食品安全、环境保护等领域都有着重要的应用价值。
微生物检验可以帮助人们了解微生物的种类、数量、分布以及对人类和环境的影响,从而采取相应的控制和预防措施。
本文将从微生物检验的基本原理、常见方法和应用领域等方面进行介绍。
一、微生物检验的基本原理。
微生物检验的基本原理是通过对样品中的微生物进行分离、培养、鉴定和计数,从而得到微生物的种类和数量。
其主要包括以下几个步骤:1. 取样,首先需要从待检样品中取得适当的样品,如食品、水、空气、土壤等。
取样的方法和条件需根据具体的检验要求和标准来确定。
2. 分离,将样品中的微生物分离出来,通常采用的方法有稀释涂布法、滤膜法、过滤法等。
分离出的微生物可以进行后续的培养和鉴定。
3. 培养,将分离出的微生物进行培养,提供适当的营养物质和环境条件,促使微生物的生长和繁殖。
培养的时间和温度等条件需根据不同的微生物种类来确定。
4. 鉴定,对培养出的微生物进行形态学、生理学和生物化学特性等方面的鉴定,确定其种属和数量。
常用的鉴定方法有显微镜观察、生化试验、分子生物学方法等。
5. 计数,对培养出的微生物进行计数,得到微生物的数量。
常用的计数方法有平板计数法、膜过滤法、涂片计数法等。
二、微生物检验的常见方法。
微生物检验的常见方法主要包括传统方法和现代方法两大类。
1. 传统方法,传统方法主要包括涂布法、滤膜法、过滤法、薄层法等。
这些方法简单易行,成本低廉,适用于一般的微生物检验需求。
但传统方法通常需要较长的培养周期,且对微生物的种类和数量有一定的限制。
2. 现代方法,现代方法主要包括PCR法、蛋白质质谱法、流式细胞术等。
这些方法具有高灵敏度、高特异性和高通量的特点,能够快速准确地检测和鉴定微生物。
但现代方法的设备和技术要求较高,成本较高,适用于对微生物检验有较高要求的领域。
三、微生物检验的应用领域。
微生物检验在医学、食品安全、环境保护等领域都有着重要的应用价值。
微生物检验基础知识点总结
微生物检验基础知识点总结微生物检验是临床诊断中的重要技术手段,通过对患者样本中的微生物进行分离、鉴定和药敏试验,可以确定感染性疾病的病原体及其对药物的敏感性,为临床治疗提供重要依据。
微生物检验涉及到许多基础知识点,下面将分别从微生物分类、微生物培养、微生物鉴定和药敏试验等方面来总结微生物检验的基础知识点。
一、微生物分类微生物是一种广泛分布于自然界中的生物体,包括细菌、真菌、病毒和原生动物等。
而在临床微生物检验中,最常见的微生物主要是细菌和真菌。
下面将分别介绍细菌和真菌的分类。
1. 细菌的分类细菌是一类单细胞生物,其形态多样,包括球菌、杆菌、螺旋菌等。
从生物学特性上可分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
(1)革兰氏阳性菌革兰氏阳性菌直接在植物或培养基上形成蓝、紫色颗粒。
细胞壁是由聚糖和一种特殊的脂质组成。
革兰氏阳性菌包括葡萄球菌、链球菌等。
这类细菌能在治疗性的延续性用药下适度存活。
(2)革兰氏阴性菌革兰氏阴性菌则是指革兰氏润湿的时候是红色的细菌,单层数细胞壁,比革兰氏阳性菌的致病能力更强,但是也更容易受到抗菌素或药物的影响。
这类细菌包括大肠杆菌、沙门氏菌等。
2. 真菌的分类真菌是一种含有真核细胞核的微生物,包括酵母菌和菌丝菌两类。
(1)酵母菌酵母菌是一种单细胞真菌,能在酵母天然的酵母营养生长,大部分为革兰氏染色阳性,不表现形成孢子的原始生长特性。
酵母菌包括念珠菌、假丝酵母等。
(2)菌丝菌菌丝菌是一类多细胞真菌,其细胞由菌丝组成,通常由菌落分离。
它们通常是真菌,因为它们在呼吸和生长条件下形成的真菌菌丝。
菌丝菌包括白色念珠菌、曲霉菌等。
二、微生物培养微生物培养是微生物检验中的重要环节,通过在适当的培养基上提供适当的温度、湿度、氧气和营养物质,使微生物在含有以上条件的环境中进行繁殖和生长。
1. 培养基的分类与特点培养基是一种含有适量营养成分的物质,用于微生物的生长和繁殖。
根据不同的需求和用途,培养基可分为富营养基、简单基、选择基和不同温度适应基等。
微生物学检验重点知识总结
微生物学检验重点知识总结微生物学是研究微生物的结构、生理、生化、生态以及与人类和环境的关系的一门学科。
在微生物学检验中,掌握以下重点知识是非常重要的。
1.微生物分类学:微生物可以分为原核生物和真核生物。
原核生物包括细菌和古细菌,真核生物包括真菌、原生动物和线虫等。
了解微生物的分类和命名体系,对于正确识别和鉴定微生物是至关重要的。
2.微生物培养技术:微生物的培养是检验微生物的基础。
掌握常见的微生物培养方法,如液体培养、平板培养和深层培养等,并了解培养基的配制和消毒操作的方法。
3.微生物的生长特性:微生物的生长特性包括生长曲线、生长速率、最适生长温度和最适生长pH等。
了解微生物的生长特性对于选择合适的培养条件和进行微生物检验是非常重要的。
4.微生物的鉴定方法:微生物的鉴定是微生物学检验的重点。
常见的微生物鉴定方法包括形态学观察、生理生化特性检测、免疫学检测和分子生物学检测等。
掌握常用的微生物鉴定方法和技术,可以准确快速地鉴定微生物。
5.微生物与人类健康的关系:微生物在人类健康中起着重要作用。
了解微生物对人类健康的影响,如微生物的致病机制、致病微生物的鉴定和抗微生物药物的应用等,有助于预防和治疗微生物引起的疾病。
6.微生物在环境中的作用:微生物在环境中起着重要的生态作用。
了解微生物在土壤、水体和大气中的功能和影响,对于环境保护和资源利用具有重要意义。
7.微生物学检验方法:微生物学检验方法包括微生物计数、微生物培养、抗微生物药敏试验、细菌鉴定和病毒检测等。
掌握常见的微生物学检验方法和技术,能够准确、快速地检测微生物。
8.检验结果的解读和分析:对于微生物学检验结果的解读和分析是非常重要的。
了解常见的微生物学检验参数和阈值,能够根据检验结果判断微生物的致病性和药物敏感性等。
总结起来,微生物学检验的重点知识包括微生物的分类和命名、微生物培养技术、微生物的生长特性、微生物的鉴定方法、微生物与人类健康的关系、微生物在环境中的作用、微生物学检验方法以及检验结果的解读和分析等。
临床微生物检验知识点
临床微生物检验知识点1.微生物学基础知识:了解细菌、真菌、病毒、寄生虫等病原微生物的基本特征,包括形态、生长要求、代谢特性等。
2.微生物的分离和培养:熟悉常规培养基的选择和制备,掌握不同微生物的适宜培养条件,如温度、pH值、氧气需求等。
3.微生物鉴定:根据微生物的形态和特性进行初步鉴定,如形态学特征、革兰氏染色、厌氧性检测等。
此外,还可以使用生物化学试纸、血清学试验、分子生物学等方法进行鉴定。
4.耐药性检测:对微生物进行药敏试验,了解其对各类抗生素、抗真菌药物、抗病毒药物的敏感性和耐药性。
这有助于临床医生选择合适的药物治疗感染。
6.检验流程和规范:了解微生物检验的标本采集、处理和保存的基本要求,掌握各类检验方法的操作步骤,遵守无菌操作规范,以保证检验结果的准确性和可靠性。
7.抗生素治疗和微生物学监测:了解抗生素的分类、作用机制和临床应用,以及微生物的产生耐药性的机制和监测方法。
合理应用抗生素,避免滥用和不当使用,是临床微生物检验的重要目标之一8.感染控制:了解医院感染控制的基本原则和措施,包括手卫生、环境清洁、消毒灭菌、隔离措施等。
临床微生物检验在感染控制中发挥着重要作用,通过对患者、环境和医务人员的监测,提供科学依据进行感染防控。
9.病原微生物的定量检测:对一些病原微生物,如HIV、肺结核菌等,需要进行定量检测。
这有助于预测疾病进展、评估治疗效果和制定治疗方案。
10.新技术和新方法的应用:随着科技的进步,临床微生物检验也不断发展,新的方法和技术被广泛应用,如实时荧光PCR、质谱技术、核酸杂交等。
了解这些新技术的原理和应用,可以提高检验的灵敏度和特异性。
总结起来,临床微生物检验的知识点涉及微生物学基础、分离培养、鉴定、药敏试验、诊断、标本采集处理、抗生素治疗和感染控制等方面。
掌握这些知识,可以提高临床微生物检验的准确性和可靠性,为临床医生提供更科学的诊断和治疗建议。
微生物检验技术重点
微生物检验技术重点第一章绪论1.食品卫生标准的内容:感官指标、理化指标、微生物指标2.食品微生物检验的意义:是衡量食品卫生质量的重要指标,也是判定被检食品能否食用的科学依据;可以判断食品加工环境及食品卫生的情况,为卫生管理工作提供科学依据;可以有效地防止或减少食物中毒和人畜共患病的发生;保证产品的质量,避免不必要的损失.3.食品微生物检验的范围:生产环境的检验;原辅料的检验;食品加工、储藏、销售等环节的检验;食品的检验4.食品卫生标准中的微生物指标:菌落总数、大肠菌群、致病菌、霉菌及其毒素、其他指标5.菌落总数:是指在被检样品的单位重量(g)、容积(ml)或表面积(cm2)内,所含能在严格规定的条件下(培养基及其PH、培养温度与时间、计数方法等)培养所生成的细菌集落总数6.大肠菌群(MPN):需氧与兼性厌氧,在37℃能分解乳糖产酸产气,以革兰氏阴性杆菌为多。
7.致病菌主要包括:沙门氏菌、致贺氏菌、金黄色葡萄球菌、致病性链球菌、大肠埃希菌、小肠结肠炎耶尔森菌、副溶血性杆菌8.食品微生物检验方法的新进展:(1)微量生化反应系统:API-细菌鉴定系统;(2)气相色谱法;(3)荧光免疫分析(4)电阻抗技术(5)放射测量法(6)PCR技术9.食品微生物检验的概念:食品微生物检验是应用微生物学的理论与方法,研究外界环境和食品中微生物的种类、数量、性质、活动规律、对人和动物健康的影响及其检验方法与指标的一门学科第二章配置实验室:(1)环境(2)人员(3)设备(4)检验用品(5)培养基与试剂环境:实验室环境不应影响检验结果的准确性;实验室的工作区域应与办公室区域明显分开;实验室工作面积和总体布局应能满足从事检验工作的需要,实验室布局应采用单方向工作流程,避免交叉污染;实验室内环境的温度、湿度、照度、噪声和洁净度等应符合工作要求;一般样品检验应在洁净区域进行,洁净区域应有明显的标示;病原微生物分离鉴定工作应在二级生物安全实验室进行微生物实验室建设与布局:1、应考虑和周围环境的关系;一、二级生物安全实验室无需特殊选址,可共用普通建筑物,宜在建筑物一段或一侧。
微生物实验知识点
微生物实验知识点微生物实验是指对微生物进行观察、培养、检测及相关实验操作的科学研究方法。
下面是一些关于微生物实验的知识点:1.实验室安全:进行微生物实验时,必须遵守实验室的安全规范,包括佩戴实验手套、口罩和实验服。
同时,实验室的环境要定期消毒,以防止微生物的交叉污染。
2.微生物培养基:微生物实验常用的培养基有固体培养基和液体培养基。
固体培养基可以用于分离纯培养和观察菌落形态,而液体培养基常用于大规模培养微生物。
3.纯培养与混合培养:纯培养是指从一种微生物中分离出单一的菌株进行培养,得到纯净的培养物;混合培养是指将两种或多种微生物一起培养,观察它们之间的相互作用。
纯培养和混合培养的选择取决于实验的目的和研究内容。
4.微生物的分离与鉴定:微生物实验常用的分离方法包括涂布法、稀释法和过筛方法。
通过形态特征观察、生理生化测试、分子生物学技术等方法,可以鉴定微生物的种属和菌株。
5.微生物生长曲线:微生物生长曲线是研究微生物生长动力学的重要实验方法,通过连续测量微生物的生物量、代谢产物或生长速率,可以得到微生物在一定条件下的生长曲线,以了解微生物的生长特性。
6.抗菌药物敏感性试验:抗菌药物敏感性试验是评价微生物对不同抗菌药物的敏感性和抗性的实验方法。
通过测定微生物对抗菌药物的最小抑菌浓度(MIC)或抑菌圈直径,可以判断微生物对抗菌药物的敏感程度。
7.酶活性检测:微生物实验中常用酶活性检测来评估微生物酶的产生与活性。
通过观察酶的底物转化情况、染色反应、电泳分析等方法,可以确定微生物是否具有特定酶的活性。
8.微生物的遗传转化:遗传转化是指微生物通过吸收外源性的遗传物质,如质粒DNA或线性DNA片段,加入到自身的遗传物质中。
通过转化实验可以在微生物中引入外源基因、观察基因的表达和相关功能的变化,进一步研究微生物基因的功能。
这些知识点涵盖了微生物实验的基本概念、常用实验方法和技术应用,希望对你有帮助!。
最新微生物检验技术知识点
最新微生物检验技术知识点
微生物检验技术是一种重要的微生物学实验技术,用于检测和鉴定病
原体,以及检测水质、食品、微生物活性及药物有效性等等。
其主要包括
培养方法、显微镜观察、荧光电镜检测、抗原检测、PCR技术(聚合酶链
反应)、单克隆技术、DNA杂交、PFGE(凝胶电泳)、微生物统计分析等。
一、培养方法
培养方法是最常用的微生物检验技术之一,它可以检测和鉴定潜在的
病原体,例如细菌、真菌、病毒和衣原体等。
它包括简单培养、麦氏体培养、选择性培养、厌氧培养、杂质培养、耐热培养等。
它可以显示被检测
的微生物在培养基上的增生情况,以及微生物特异现象,如色泽、形态和
细胞大小等,从而可以鉴别微生物。
二、显微镜观察
显微镜观察是一种检测微生物的重要技术,它可以清晰的观察到微生
物的形态结构。
它主要分为普通显微镜观察(细胞膜)、冰冻电镜观察
(细胞质)、核磁共振观察(细胞核)和荧光显微镜观察(荧光成分)等。
它可以观察微生物细胞材料的形状、大小和分子结构,从而帮助确定微生
物的身份和鉴定。
三、荧光电镜检测
荧光电镜是一种高灵敏度的显微技术,其原理主要是将荧光标记的抗
原或抗体与样品交叉结合。
微生物检验基础知识
微生物检验基础知识
微生物检验是一种使用显微技术对微生物进行观察和测量的方法。
以下是微生物检验的基础知识:
1. 微生物的概念:微生物是微小的生物,通常需要使用显微镜才能看到。
它们包括细菌、病毒、真菌、藻类等。
2. 微生物检验的分类:微生物检验可以分为细菌检验、病毒检验、寄生虫检验和真菌检验等。
3. 微生物检验的方法:微生物检验的方法包括直接观察、分离培养、血清学试验、生化反应等。
4. 微生物检验的步骤:微生物检验的步骤包括采集样品、制备培养基、接种、培养、观察和鉴定等。
5. 微生物检验的应用:微生物检验在医学、环境监测、食品卫生等领域有广泛应用。
例如,在医学领域中,微生物检验可以帮助医生诊断疾病,监测感染情况,并选择合适的药物治疗。
在环境监测中,微生物检验可以用来检测水源、土壤等环境的污染情况。
6. 微生物的特点:微生物具有体积小、数量大、繁殖快等特点。
同时,它们也具有广泛的分布和多样的种类,可以在各种环境中生存和繁殖。
通过以上基础知识的学习,可以对微生物检验有一个基本的了解和认识。
如有更深入的学习需求,建议阅读微生物检验相关书籍或咨询专业人士。
临床微生物检验知识点
临床微生物检验知识点临床微生物检验是通过对临床样本进行微生物学检验,利用各种实验方法和技术手段,对病原微生物进行鉴定、分离、培养和药敏试验,从而帮助医生进行准确诊断和合理治疗的一项重要检测技术。
以下是一些临床微生物检验的知识点。
1.微生物的鉴定:通过观察病原微生物的形态特征、生理生化指标、生物学特征等,进行鉴定。
常用的方法包括显微镜观察、革兰染色、培养特性观察等。
2.微生物的分离:将样本中的微生物分离出来,使其能够单独生长并进行后续的检验和鉴定。
常用的方法包括涂布法、稀释涂布法、过滤法等。
3.微生物的培养:将分离后的微生物进行培养,使其能够增殖形成纯种,并提供足够的数量用于进一步检验。
常用的培养基包括富养基、选择性富养基、增菌富养基等。
4.微生物的药敏试验:通过对分离的病原微生物进行不同抗菌药物的敏感性试验,确定该微生物对抗菌药物的敏感性和抗药性。
常用的方法有纸片法、扩散法、微量稀释法等。
5.微生物的快速检测方法:为了达到更快速、准确的临床微生物检测结果,目前发展了许多快速检测方法,如PCR技术、基因测序技术、质谱技术等。
6.微生物的标本采集和保存:正确的标本采集对于临床微生物检验结果的准确性和可靠性至关重要。
常见的标本有血液、尿液、痰液、脑脊液、伤口分泌物等。
标本采集后应存放在适当的条件下,以避免微生物的生长和变质。
7.常见病原微生物的检验:临床微生物检验主要涉及到常见的病原微生物,如细菌、真菌、病毒和寄生虫等。
对于每种病原微生物的检验方法和操作要点有所不同。
8.质量控制:临床微生物检验对质量控制要求较高,包括内、外质控。
内质控主要通过引入质控菌株进行培养和药敏试验等操作,确保检测结果的准确性和可靠性。
外质控则是通过参加各种质量评估项目来衡量实验室的检测质量。
在临床微生物检验过程中,需要严格遵守相关的操作规范和质量控制要求,以确保检验结果的准确性和可靠性。
临床医生在接到微生物检测结果后,应结合临床病情和患者的病史等信息,合理解读检验结果,并进行科学的诊断和治疗。
微生物学检验重点知识归纳总结(超详细)(精华版)
绪论1. 微生物的定义与特点一,微生物的概念与特点; 微生物的分类;1. 微生物(microorganism )是一群个体微小,结构简洁,肉眼不能直接观察,必需借助于光学显微镜或电子显微镜放大数百倍至数万倍才能观看到的微小生物的总称;2. 微生物的特点个体微小,结构简洁比表面积大,吸取多,转化快繁衍快,代谢强适应强,易变异种类多,分布广1. 微生物类型依据微生物大小,结构和组成不同分为三类型2. 病原微生物的定义病原微生物:是指能引起动物,植物或人类产生疾病的微生物;3. 医学微生物学的进展简史;.微生物的发觉与讨论(1)列文虎克创造显微镜,最早观看到微生物;微生物学讨论的创始人:巴斯德,科赫,李斯特第一章第一节细菌的基本性状细菌的形状与结构1.细菌细胞壁的结构和功能,肽聚糖结构及其化学组成;革兰阳性与革兰阴性细菌细胞壁的主要区分(一)细胞壁化学组成与结构,革兰染色共有组分:肽聚糖特别组分:G+ 菌,G- 菌不同革兰阳性菌细胞壁特别组分:磷壁酸革兰阴性菌细胞壁特别组分:外膜革兰阴性菌细胞壁肽聚糖2.细胞壁的功能::聚糖骨架,四肽侧链(1)维护细菌固有形状和抗击低渗作用;(2)物质交换作用;(3)屏障作用;(4)免疫作用;(5)致病作用;(6)与细菌药物敏锐性有关;G+ 菌与G- 菌细胞壁结构比较. 细菌细胞膜的结构与真核细胞基本相同,. 细菌细胞膜可形成一种特有的结构,称2.细菌荚膜,鞭毛和菌毛的功能;荚膜:功能:由磷脂和多种蛋白质组成,中介体;但不含胆固醇;有抗吞噬和抗击杀菌物质的杀菌作用,增强细菌的侵袭力,构成细菌致病力的重要因素之一;②具有免疫原性;③鉴别细菌和血清学分型鞭毛:功能:细菌的运动器官菌毛一般菌毛:具有黏附性,与细菌致病性有关;性菌毛:与细菌的遗传变异相关3.芽胞结构特点,意义,与消毒灭菌的关系;细菌L 型的形状特点,检验要点;芽胞:某些细菌(主要为革兰阳性杆菌)在肯定条件下,细胞质浓缩脱水而形成一个折光性很强,具有多层膜状结构,通透性很低的圆形或卵圆形的小体;L 型细菌:细胞壁缺陷的细菌;常发生在作用于细胞壁的抗菌药物治疗过程中;依据细胞壁缺陷程度分:原生质体(完全失去细胞壁,见于原生质球(细胞壁部分缺损,见于G+菌,仅在高渗环境中存活)G-菌,在高渗或非高渗环境中均能存活)4.G+ 菌和G- 菌细胞壁结构的差异及其意义;其次节细菌的生理细菌的生长条件,生长周期及各期的特点;IMViC 试验的组成及机制;细菌分解及合成代谢产物的种类及意义;细菌的生长繁衍(一)细菌生长繁衍的条件1. 充分的养分物质2. 相宜的酸碱度3. 合适的温度4. 必要的气体环境包括:水,碳源,氮源,生长因子等;多为~;多数病原菌为35℃~37℃;O2 和CO 2;主要是按细菌对O2 的需要与否,将细菌分为:细菌生长繁衍的规律细菌的繁衍方式:无性二分裂;细菌的繁衍速度:大多数细菌20~30 分钟即可分裂一次;2.细菌的养分类型和养分机制,自氧菌与异氧菌的概念;3.细菌的生长曲线及其特点;(一)能量代谢细菌猎取能量的途径——生物氧化;细菌能量代谢的主要类型:(二)分解代谢检测细菌糖分解产物的常用试验:糖发酵试验,甲基红试验,VP 试验等;检测细菌蛋白质和氨基酸分解产物的常用试验:吲哚(靛基质)试验,硫化氢试验,苯丙氨酸脱氨酶试验等;其他检测细菌分解产物的常用试验:尿素分解试验,枸橼酸盐利用试验等;第三节细菌与环境1 正常菌群的概念和生理功能;条件致病菌的概念2.正常菌群的生理功能;条件致病菌的概念3.消毒,灭菌,无菌,无菌操作等概念;高温消毒灭菌法及其应用;二,细菌的掌握(一)基本概念:消毒杀死物体或介质中病原微生物的方法;灭菌杀灭物体或介质中所有微生物的方法;无菌无活菌存在的状态;无菌操作防止微生物进入机体或物体的操作技术;防腐防止或抑制细菌生长繁衍的方法;4.常用物理和化学消毒灭菌方法及其应用;噬菌体与宿主的相互关系;其次章真菌的基本性状真菌的概念真菌的分类真菌孢子与细菌芽胞的区分第三章病毒的基本性状病毒的大小病毒的结构病毒的增殖病毒的复制周期第四章微生物与感染细菌致病三大因素细菌内外毒素的区分毒血症,菌血症,败血症,脓毒血症的概念全身感染的类型其次篇第五章第一节微生物检验的基本技术细菌的检验技术细菌形状检验技术细菌染色的一般程序染色标本检查的一般程序革兰氏染色法,抗酸染色法的原理,方法; 2.革兰染色法【方法】其次节细菌的接种与培育技术调配—溶化—调Ph—过滤澄清—分装—灭菌—检定—储存细菌在各种培育基上的生长现象及观看要点;培育基的概念培育基的分类第三节细菌的生化鉴定技术糖( 醇,苷)类发酵试验,O/F 试验,MR 试验,VP 试验的原理,操作,结果判定要点及其应用;I 试验,C 试验,氧化酶,触酶,血浆凝固酶氢氧化钾拉丝试验及理,操作要领,观看结果要点及其应用;一,碳水化合物的代谢试验1,糖(醇,苷)类发酵试验KIA 和TSI 的试验原原理:多糖→单糖→丙酮酸→酸性产物→pH ↓ →呈酸性变色(或显现气泡2,O/F 试验(或产气)原理:依据细菌在分解葡萄糖的代谢过程中对氧分子需求的不同,将细菌分为氧化,发酵和产碱型三类3,甲基红试验原理:细菌发酵葡萄糖,产生丙酮酸,进一步分解生成大量混合酸,使培育pH 下降至以下,加入甲基红后,出现红色反应;为甲基红试验阳性;4,V-P 试验原理:细菌分解葡萄糖产生丙酮酸,丙酮酸脱羧生成乙酰甲基甲醇,在碱性环境中,乙酰甲基甲醇被氧化为二乙酰,二乙酰与胍基化合物结合,生成红色化合物,是为V-P 试验阳性;5,β-半乳糖苷酶试验(ONPG )原理:有的细菌可产生β -半乳糖苷酶,能分解邻硝基酚β-D 半乳糖苷(ONPG) 而生成黄色的邻硝基苯酚,该试验也称为ONPG 试验;6,七叶苷水解试验原理:某些细菌能分解七叶苷产生葡萄糖与七叶素,七叶素与培育基中的Fe2+结合后,形成黑色的化合物,使培育基变黑;二,蛋白质和氨基酸的代谢2,硫化氢试验硫化氢与培育基中的亚铁盐或铅盐结合生原理:细菌产生酶,分解含硫氨基酸生成硫化氢,成黑色化合物;3,尿素酶试验原理:细菌产生脲酶,水解尿素生成氨和二氧化碳,培育基呈碱性反应4,苯丙氨酸脱氨酶试验使苯丙氨酸脱氨形成苯丙酮酸,苯丙酮酸与三氯化铁作用,原理:细菌产生苯丙氨酸脱氨酶,形成绿色化合物三,碳源利用试验枸橼酸盐利用试验细菌在生长过程中分解枸橼酸原理:有的细菌能利用培育基中的枸橼酸盐作为唯独的碳源,盐产生碳酸盐,使培育基呈碱性反应四,酶类试验1,氧化酶(细胞色素氧化酶)试验,能将二甲基对苯二胺或四甲基对苯二胺氧原理:某些细菌具有氧化酶(细胞色素氧化酶)化生成红色的醌类化合物2,触酶试验继而形成氧分子显现原理:细菌产生的触酶(过氧化氢酶)能催化过氧化氢放出初生态氧,气泡;3,凝固酶试验(试管法)原理:金黄色葡萄球菌能产生凝固酶,使血浆中的纤维蛋白原转变为不溶性的纤维蛋白;4,凝固酶试验(玻片法)原理:金黄色葡萄球菌能产生凝固酶,使血浆中的纤维蛋白原转变为不溶性的纤维蛋白5,硝酸盐仍原试验原理:某些细菌能仍原培育基中的硝酸盐为亚硝酸盐,亚硝酸盐与醋酸作用,生成亚硝酸,亚硝酸与试剂中的对氨基苯磺酸作用生成重氮磺酸,再与α-萘胺结合,生成N- α-萘胺偶氮苯磺酸(红色化合物第六章真菌检验技术真菌感染性疾病的微生物学检查原就第七章病毒检验技术病毒标本的采集和运输留意事项;第八章细菌对抗菌药物敏锐试验药物敏锐试验的基本概念,常用方法抗菌药物敏锐试验方法纸片扩散法稀释法E-test 法需氧菌及兼性厌氧菌的药物敏锐试验告);(K-B 法和稀释法的原理,方法,结果判定及正确发报第三篇第十章常见微生物鉴定技术需氧和兼性厌氧球菌葡萄球菌,链球菌,肺炎链球菌,淋病奈瑟菌的主要形状特点,培育特性,分类依据及分类;病原性球菌标本采集种类,检验鉴定程序,鉴定要点,检验鉴定依据及报告要点;第十一章革兰阴性需氧和兼性厌氧杆菌第一节肠杆菌科概述肠杆菌科细菌:杆菌,多数有鞭毛,菌毛2.发酵葡萄糖,兼性厌氧3.氧化酶阴性4.仍原硝酸盐为亚硝酸盐5.触酶(+)肠道挑选性培育基:麦康凯琼脂,伊红美蓝琼脂,SS琼脂等肠杆菌科抗原:O抗原(菌体抗原),K 抗原(荚膜抗原),H抗原(鞭毛抗原)等肠杆菌科鉴定依据: 1.革兰染色2. 触媒,氧化酶,硝酸盐仍原3.KIA ,MIU ,IMViC , 其他生化反应4.血清玻片凝集(鉴定到种,型或血清型)IMViC 试验:吲哚(I ),甲基红(M),VP(V),枸橼酸盐利用(C)四种试验,常用于鉴定肠道杆菌;二,埃希菌属形状染色: 1. 短杆菌2. 革兰染色阴性3. 有鞭毛4. 有菌毛培育特性:符合肠杆菌特点EMB——紫黑色有金属光泽乳糖发酵菌落S-S ——桃红色乳糖发酵菌落生化反应:IMViC(++-- )大肠杆菌KIA:A A +-血清型表示法:O:K:HETEC肠毒素:耐热肠毒素(ST)o不耐热肠毒素(L T),65 C30min 被破坏引起腹泻的大肠埃希菌:肠产毒性大肠埃希菌ETEC肠致病性大肠埃希菌EPEC肠侵袭性大肠埃希菌EIEC肠出血性大肠埃希菌EHEC肠凝结性大肠埃希菌EAECEIEC 毒力测定试验:豚鼠眼结膜试验卫生学标准:每ml 饮水中细菌总数≤100 个,每1000ml 水中大肠杆菌菌群数≤ 3 个,每100 ml 瓶装汽水,果汁中,大肠杆菌菌群数≤三,沙门菌属5 个;对人类有致病性:肠热症;食物中毒;败血症-形状染色:G杆菌;周身鞭毛培育和生化反应:不分解乳糖分解葡萄糖;分解蛋白质,产生H2S伤寒沙门菌菌落特点(EMB,MA C):无色透亮菌落伤寒沙门菌菌落特点(SS):无色透亮或半透亮,中心黑色菌落伤寒沙门菌KIA:K A-+标本实行:第1-2W,血,骨髓;第2-3W,粪便,尿;全程取骨髓肥达反应: 用已知伤寒沙门菌O,H 和甲型副伤寒沙门菌和乙型副伤寒沙门菌H 抗原与病人血清做定量凝集试验,用以帮助诊断肠热症;TO≥1:80,TH≥1:160;PA,PB 均≥1:80 才有意义;动态观看:双份血清抗体四倍上升有诊断意义四,志贺菌属形状染色:符合肠杆菌特点,有菌毛,无鞭毛,无动力是本菌与其它肠道致病菌主要区分点培育特性:肠道鉴别培育基上的无色透亮,乳糖不发酵菌落抗原分类:依据O抗原分4 群,40 余型,我国常见 B 群A 群——痢疾志贺菌群——福氏志贺菌BC群——鲍氏志贺菌群——宋氏志贺菌D培育和生化反应:不分解乳糖分解葡萄糖菌落特点(EMB,MA C):无色透亮菌落KIA:K A--MIU:---外毒素: A 群(Ⅰ,Ⅱ型)产生志贺毒素(ST)有3 种生物活性1. 肠毒素:类似ETEC毒素,霍乱肠毒素作用——水样泻2. 细胞毒性:对人肝细胞,肠黏膜细胞有毒性,引起变性坏死3. 神经毒性:损耗动物神经系统(麻痹,死亡)快速诊断:荧光菌球试验;协同凝集试验六,变形杆菌属形状染色:有周鞭毛培育特性:扩散生长,有迁徙生长现象;在培育基中(含5%琼脂)加入%石炭酸就形成单个菌落;肠道挑选性培育基上形成无色透亮菌落变形杆菌KIA:K A+ +MIU:+ +/- +八,耶尔森菌属历史:三次世界性大流行,是我国重点监控的自然疫源性传染病;—形状染色:G 球杆菌,两极浓染培育特性:一般培育基,生长缓慢,24-48h ,R 型“破草帽”状菌落菌落特点(EMB,MA C):无色透亮菌落甲类烈性传染病:鼠疫(黑死病)常见临床类型:腺鼠疫,败血型鼠疫,肺鼠疫标本采集:临床标本(淋巴结穿刺液,血液或痰标本);非临床标本(尸检取病变组织,鼠标本应严格消毒体表,再进行采集)其次节弧菌科一群菌体短小,弯曲成弧形或直杆状的革兰阴性细菌;具有一端单一鞭毛,运动快速;弧菌科细菌广泛分布于自然界,以水中最为多见弧菌属(一)霍乱弧菌霍乱弧菌的疫源地:印度恒河三角洲(O1群,古典生物型);印尼苏拉威西岛(O1群,埃托生物型);孟加拉湾(O139 群)已发生七次世界性的霍乱大流行:均由霍乱弧菌的O1群引起,前六次为霍乱弧菌的古典生物型,第七次为埃尔托生物型形状:新从患者标本中分别出的细菌革兰染色阴性,弧形或逗点状;在患者“米泔水”样便中,可呈头尾相接的“鱼群”样排列;菌体一端有鞭毛,悬滴观看时呈“穿梭”样运动培育特性:养分要求不高,故用Ph8.4-9.2 碱性培育基;分别(挑选)能在无盐培育基中生长(区分其它弧菌);在的碱性胨水中经35℃4~6h 增菌后可在液体表面大量繁衍形成菌膜抗击力:较弱;水源性传播,水性爆发;怕酸,正常胃酸4min霍乱肠毒素(C T):最猛烈的致泻毒素吐泻期:猛烈吐泻,米泔样免疫力:病人愈后可获得坚固免疫O1 群霍乱弧菌的O 抗原:由A,B,C 三种抗缘由子组成;通过不同组合可形成三个型别:由AB组成小川型,AC组成稻叶型,ABC组成彦岛型常用的挑选性培育基:1. 硫代硫酸盐- 枸橼酸盐- 胆盐- 蔗糖(TCBS) 琼脂平板:霍乱弧菌发酵蔗糖产酸,菌落呈黄色2.4 号琼脂,庆大霉素琼脂:生长并将培育基中的碲离子仍原成元素碲, 形成灰褐色菌落中心3. 能在无盐培育基上生长古典生物型和埃尔托生物型的区分试验:羊红细胞溶血;鸡红细胞凝集;V-P 试验;多粘菌素 B 敏锐试验;Ⅳ组噬菌体裂解;Ⅴ组噬菌体裂解标本采集和运输:在发病早期,尽量在使用抗菌药物之前采集标本;取患者“米泔水”样便,亦可实行呕吐物或尸体肠内容物,或实行肛门拭子;标本应防止接触消毒液;实行的标本最好就地接种碱性胨水增菌;不能准时接种者可用棉签挑取标本或将肛门拭子直接插入卡-布运输培育基中动力和制动试验:直接取“米泔水”样便,制成悬滴( 或压滴) 标本后,在暗视野或相差显微镜下直接观看呈穿梭样运动的细菌;同法重新制备另一标本涂片,在悬液中加入 1 滴不含防腐剂的霍乱多价诊断血清( 效价≥1:64) ,可见最初呈穿梭状运动的细菌停止运动并发生凝集,就为制动试验阳性快速诊断:将标本接种于含有霍乱弧菌荧光抗体的碱性蛋白胨水中,经37℃4~6h,如有霍乱弧菌,在荧光显微镜下可见发荧光的菌球;本法适用于做大量标本的初筛SPA协同凝集试验:以霍乱弧菌IgG 型抗体与SPA阳性葡萄球菌结合作为试剂,与米泔水样便或增菌液作玻片凝集,立刻显现明显凝集者(+++)为阳性粘丝试验:将%去氧胆酸钠水溶液于霍乱弧菌混匀制成深厚菌液,1min 内悬液由混变清,并变得粘稠,以接种环挑取时可以拉出丝来(二)副溶血性弧菌具有嗜盐性形状:革兰阴性杆菌,有鞭毛(极单毛)培育特性:在无盐培育基上不能生长,最适合生长的氯化钠浓度为 3.5%,超过8%不能生长TCBS琼脂平板: 蔗糖不发酵而呈蓝绿色菌落第三节非发酵革兰阴性杆菌非发酵革兰阴性杆菌:一大群不发酵葡萄糖或仅以氧化形式利用葡萄糖的需氧或兼性厌氧,无芽胞的革兰阴性杆菌一,假单胞菌属铜绿假单胞菌所致疾病:条件致病菌;医院感染的重要病原菌;大面积烧伤创面感染的重要病原菌生物学特性:革兰阴性,长短不一,单鞭毛,氧化酶阳性生长温度:25~42℃分别培育与鉴定: 1. 血平板上毛玻璃样,金属光泽,生姜味2. 可产生多种色素:荧光素与绿脓素血琼脂平板:透亮溶血环O/F 试验:氧化型第四节其他革兰阴性苛氧菌一,嗜血杆菌属流感嗜血杆菌所致疾病:原发化脓性感染及继发性感染,包括脑膜炎,鼻咽炎,关节炎,心包炎,鼻窦炎及中耳炎等生物学特性:革兰阴性短小球杆菌分别培育:需要X,V 因子;养分要求高,血琼脂平板培育基,巧克力琼脂培育基菌落特点:巧克力琼脂培育基, 小,无色透亮菌落卫星现象:当流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌一起培育时,靠近葡萄球菌菌落的流感嗜血杆菌菌落较大,远离葡萄球菌菌落的流感嗜血杆菌菌落较小四,布鲁菌属传染源:病兽,以羊,牛,猪多见传播途径:病兽的组织,尿,乳液等通过人体的皮肤,呼吸道,消化道进入人体易感人群:发病以青壮年为主,从事兽医,皮毛加工,屠宰的工人发病率较高临床表现:长期发热,多汗;关节疼痛及全身乏力,疼痛微生物特性:革兰阴性短小球杆菌培育特性:需氧菌,养分要求较高;生长缓慢(5~7 天)第十二章革兰阳性需氧和兼性厌氧杆菌革兰阳性无芽胞杆菌白喉棒状杆菌+形状与染色: G瘦长微弯的杆菌;一端或两端膨大呈棒状;常排列呈V,L,X 等文字形;异染颗粒——形状上的鉴别特点培育特性:养分要求高,吕氏血清斜面或鸡蛋斜面亚碲酸钾BAP:挑选鉴别培育基,黑色菌落——鉴别依据毒力试验: 1. 体外法:琼脂平板毒力试验(Elek 平板毒力测定);SPA协同凝集试验;对流电泳2. 体内法:用豚鼠作毒素革兰阳性需氧芽胞杆菌属- 抗毒素中和试验其次节炭疽芽胞杆菌临床意义:炭疽是人兽共患的急性传染病,皮肤炭疽,肠炭疽,肺炭疽等炭疽毒素:爱护性抗原,致死因子,水肿因子传染源:患病食草动物及其制品或被污染物传播途径: 1. 接触——皮肤炭疽食用——肠炭疽2.吸入——肺炭疽3.+形状染色: 致病菌中最大的G杆菌;两端平切,竹节状;有毒株可有明显荚膜芽胞: 1. 椭圆形,小于菌体,位于菌体中心2. 多在有氧条件下形成,25~30℃,在培育基中,土壤内,动物尸体解剖后暴露在空气中,都易形成芽胞3. 在活体或完整未解剖尸体内不形成芽胞,尸体严禁解剖培育特性: 1. 一般培育基上卷发状菌落:12~15h 不溶血,18~24h 稍微溶血3. 肉汤:絮状沉淀生长4. 明胶:37℃18~24h 表面液化成漏斗状,由于细菌沿穿刺线向四周扩散形成倒松树状;5.NaHC O3BAP:有毒株-- 黏液型菌落,挑取时呈粘丝状( 鉴别要点)无毒株—粗糙型菌落抗原构造: 1. 菌体多糖抗原:与毒力无关,耐热,耐腐败,长时间煮沸仍能与特异性抗体发生环状沉淀反应(Ascoli 热沉淀反应),特异性不高,可作追溯性诊断2. 荚膜多肽抗原:荚膜肿胀试验,对本菌鉴定有意义标本的采集与处理: 死于败血症的动物,严禁宰杀和解剖,可消毒皮肤后割取耳朵,舌尖采集少量血液串珠试验: 炭疽芽胞杆菌在每毫升含有0.05-0.5U 青霉素的培育基中,可发生形状变异,形成大而匀称的圆球状并相连如串珠状第十三章分枝杆菌属分枝杆菌是一类瘦长略带弯曲的杆菌,含有分枝菌酸,有分枝生长的趋势而得名;具有抗酸性,故又称抗酸杆菌;结核分枝杆菌所致疾病:通过呼吸道,消化道和损耗的皮肤等多途径感染机体,引起多种脏器的结核病,其中以肺结核为多见致病物质:荚膜,脂质和蛋白质等菌体成分免疫性:有菌免疫或称传染性免疫,细胞免疫在抗感染免疫中起重要作用微生物特性: 1. 分枝状,略带弯曲的抗酸杆菌,抗酸性染色法染色后结核分枝杆菌呈红色,背景呈蓝色2. 专性需氧,养分要求较高,最适生长温度为35℃,生长缓慢, 2 ~5w 才显现肉眼可见的如菜花样粗糙型菌落;结核菌素试验:纯蛋白衍生物(PPD),注入皮内后如受试者已感染结核,就结核菌素与致敏淋巴细胞特异性结合,形成迟发型超敏反应性炎症机体抗结核免疫特点:传染,免疫,超敏反应共存第十四章厌氧性细菌破伤风梭菌,产气荚膜梭菌,肉毒梭菌的形状特点,培育特性;厌氧性细菌的检验鉴定要点和报告方式;第十五章螺旋体,支原体,衣原体,立克次体第一节螺旋体螺旋体:是一种瘦长,松软,螺旋状,运动活泼的原核细胞型微生物钩端螺旋体所致疾病:钩端螺旋体病传染源与储存宿主: 自然疫源性疾病,鼠类和猪为主要储存宿主传播途径:间接接触传播(接触被含菌尿液污染的水源),血液传播,垂直传播生物学特性: 1. 螺旋一端或两端呈钩状2. 有两根周浆鞭毛,运动活泼-3. G,但不易着色,镀银染色成棕褐色梅毒螺旋体所致疾病:梅毒1. 先天性:母体通过胎盘传给胎儿2. 获得性:性传播获得性梅毒临床分期:分为三期1. Ⅰ期(初期)梅毒:感染后 3 周左右局部显现无痛性硬下疳,感染性极强;2. Ⅱ期梅毒:发生于硬下疳显现后2~8 周,全身皮肤,粘膜常有梅毒疹,全身淋巴结肿大3. Ⅲ期(晚期)梅毒:发生感染 2 年后,病变可波及全身组织和器官;基本损害为慢性肉芽肿;病损内螺旋体少但破坏性大-生物学特性:G,但不易着色,镀银染色呈棕褐色;对青霉素,四环素,红霉素等抗生素敏感微生物学检查:标本:Ⅰ,Ⅱ期梅毒取下疳渗出液,梅毒疹渗液或淋巴结穿刺液;先天性梅毒取脐血其次节支原体支原体:是一类没有细胞壁,形状上呈多样性,可通过细菌滤器,能在无生命培育基中生长-的最小的原核细胞型微生物;因其生长后能形成分枝长丝,故命名为支原体;G,但不易着色,Giemsa 染色呈淡紫色;油煎蛋样的菌落所致疾病:支原体肺炎冷凝集试验: 肺炎支原体感染后,患者血清中显现冷凝集素,能在0-4 ℃条件下凝集人红细胞(37℃时却无此效应);此凝集试验为非特异性的,是肺炎支原体感染的帮助诊断试验衣原体:是一类专性活细胞内寄生,具有特殊发育周期,且能通过细菌滤器的,介于立克次体与病毒之间的原核细胞型微生物第一胜利分别鉴定出沙眼衣原体:我国学者汤飞凡于1956 年能引起人类疾病的衣原体:主要有沙眼衣原体和肺炎衣原体-立克次体:是一类专性活细胞内寄生的G原核细胞型微生物,是引起斑疹伤寒,恙虫Q病,热等传染病的病原体;与节肢动物关系亲密,大多是人畜共患病的病原体反应(外斐反应):大部分立克次体与一般变形杆菌某些菌株(X19,X k,X2)的Weil-Felix菌体抗原有共同的抗原成分,故可用这些变形杆菌的菌体抗原与不同稀释度的患者血清做凝集反应,诊断立克次体病;第十六章常见真菌1.真菌的概念,生物学性状;真菌感染性疾病的微生物学检查原就;皮肤癣真菌,白假丝酵母菌,新生隐球菌的形状特点及微生物学检验;2.真菌感染性疾病的微生物学检查原就;皮肤癣真菌,白假丝酵母菌,新生隐球菌的形状特征及微生物学检验;第十七章常见病毒第一节呼吸道病毒1.正粘病毒(流感病毒)的结构,型别,抗原变异与流行的关系;微生物学检验;2.正粘病毒(流感病毒)的型别,抗原变异与流行的关系;其次节肝炎病毒1. HAV ,HBV ,HCV ,HDV ,HEV 五型肝炎病毒的生物学特性,微生物学检验;2.乙肝五项的结果分析及临床意义第三节逆转录病毒HIV 的微生物学检验;1. HIV 的生物学特性,致病性,免疫性与防治原就;2.HIV 的生物学特性;第四节其他病毒1.流行性乙型脑炎病毒,出血热病毒,狂犬病毒,疱疹病毒,人乳头瘤病毒的生物学特性及致病性;以上病毒的微生物学检验;2.流行性乙型脑炎病毒,出血热病毒,狂犬病毒,疱疹病毒,人乳头瘤病毒的生物学特性及致病性;第五节肠道病毒1.肠道病毒的共性,种类;2.脊髓灰质炎病毒的生物学特性,致病性与微生物学检验;第十八章临床常见标本的细菌学检验1.临床常见标本采集及运输,检验程序,报告方式,血液标本的细菌学检验,痰液标本的细菌学检验,脑脊液标本的细菌学检验;2.粪便标本的细菌学检验,尿液标本的细菌学检验,脓标本的细菌学检验;。
微生物检验重点知识点总结
微生物检验重点知识点总结微生物检验是临床生物化学检验中的一个重要分支,其主要目的是检测病原微生物的存在和种类,以帮助临床诊断和治疗。
微生物检验涉及到多种技术和方法,包括细菌培养、抗生素敏感性测试、真菌检测等。
在本文中,我们将对微生物检验的重点知识点进行总结,包括微生物培养、菌种鉴定、抗生素敏感性测试等方面。
一、微生物培养1. 细菌培养条件:细菌培养需要适宜的温度、pH值和营养物质。
一般来说,大多数细菌在37摄氏度下生长最适宜,pH值维持在7左右,而营养物质主要包括碳源、氮源和无机盐等。
2. 培养基的选择:根据不同的细菌种类和要求,可以选择不同种类的培养基。
常用的培养基包括营养琼脂、大肠杆菌培养基、葡萄球菌培养基等。
3. 培养方法:常用的细菌培养方法包括平板法、液体培养法和混悬液培养法。
其中,平板法是将含有琼脂的培养基均匀涂抹在培养皿上,使其凝固后可以在上面观察细菌的生长情况。
4. 培养时间:一般来说,细菌培养需要一定的时间来观察其生长情况。
常见的培养时间包括24小时、48小时和72小时等。
二、菌种鉴定1. 形态学鉴定:观察细菌的形态特征,包括细胞形状、大小、颜色等。
常用的方法包括显微镜下观察和染色法。
2. 生理生化鉴定:通过细菌的生理和生化特性来鉴定其种类,包括对碳水化合物的利用、氧气需求、氧化酶活性等。
3. 分子生物学鉴定:采用PCR技术和分子生物学方法对细菌的基因进行检测和分析,以确定其种属和亲缘关系。
三、抗生素敏感性测试1. 纸片扩散法:将含有不同抗生素的纸片放置在琼脂培养基表面,观察其抑菌圈的形成情况,以确定细菌的抗生素敏感性。
2. 微量稀释法:将一定浓度的抗生素溶液与不同浓度的细菌混合,通过改变抗生素浓度来确定最小抑菌浓度,从而确定其抗生素敏感性。
3. 自动化敏感性测试:通过自动化设备和方法对大量细菌菌株进行抗生素敏感性测试,提高测试效率和准确度。
以上是微生物检验的一些重点知识点总结,通过对微生物培养、菌种鉴定、抗生素敏感性测试等方面的了解,可以更好地开展微生物检验工作,为临床诊断和治疗提供有力的支持。
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13、遵守纪律的风气的培养,只有领 导者本 身在这 方面以 身作则 才能收 到成效 。—— 马卡连 柯 14、劳动者的组织性、纪律性、坚毅 精神以 及同全 世界劳 动者的 团结一 致,是 取得最 后胜利 的保证 。—— 列宁 摘自名言网
15、机会是不守纪律的。——雨果
1、最灵繁的人也看不见自己的背脊。——非洲 2、最困难的事情就是认识自己。——希腊 3、有勇气承担命运这才是英雄好汉。——黑塞 4、与肝胆人共事,无字句处读书。——周恩来 5、阅读使人充实,会谈使人敏捷,写作使人精确。——培根
第一章微生物检验基本知识
第一章微生物检验基本知识包括显微镜、染色技术、培养基制备技术、接种、分离纯化和培养技术等。
接种、分离纯化和培养技术一、接种将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种。
1、接种工具和方法接种和分离工具1.接种针2.接种环3.接种钩4.5.玻璃涂棒6.接种圈7.接种锄8.小解剖刀常用的接种方法有以下几种:1)划线接种这是最常用的接种方法。
即在固体培养基表面作来回直线形的移动,就可达到接种的作用。
常用的接种工具有接种环,接种针等。
在斜面接种和平板划线中就常用此法。
2)三点接种在研究霉菌形态时常用此法。
此法即把少量的微生物接种在平板表面上,成等边三角形的三点,让它各自独立形成菌落后,来观察、研究它们的形态。
除三点外,也有一点或多点进行接种的。
3)穿刺接种在保藏厌氧菌种或研究微生物的动力时常采用此法。
做穿刺接种时,用的接种工具是接种针。
用的培养基一般是半固体培养基。
它的做法是:用接种针蘸取少量的菌种,沿半固体培养基中心向管底作直线穿刺,如某细菌具有鞭毛而能运动,则在穿刺线周围能够生长。
4)浇混接种该法是将待接的微生物先放入培养皿中,然后再倒入冷却至45°C左右的固体培养基,迅速轻轻摇匀,这样菌液就达到稀释的目的。
待平板凝固之后,置合适温度下培养,就可长出单个的微生物菌落。
5)涂布接种与浇混接种略有不同,就是先倒好平板,让其凝固,然后再将菌液倒入平板上面,迅速用涂布棒在表面作来回左右的涂布,让菌液均匀分布,就可长出单个的微生物的菌落。
6)液体接种从固体培养基中将菌洗下,倒入液体培养基中,或者从液体培养物中,用移液管将菌液接至液体培养基中,或从液体培养物中将菌液移至固体培养基中,都可称为液体接种。
7)注射接种该法是用注射的方法将待接的微生物转接至活的生物体内,如人或其它动物中,常见的疫苗预防接种,就是用注射接种,接入人体,来预防某些疾病。
8)活体接种活体接种是专门用于培养病毒或其它病原微生物的一种方法,因为病毒必须接种于活的生物体内才能生长繁殖。
微生物检验技术 复习资料(全)
基础知识1.致腹泻病毒有轮状病毒是儿童胃肠炎的首要病原体;杯状病毒是引起成人和大龄儿童非细菌性胃肠炎暴发流行的主要病原体;肠道腺病毒主要感染2岁以下儿童;可用大肠癌细胞分离培养星状病毒2.急性出血性结膜炎的病原为肠道病毒70型或柯萨奇A组24型3.某小学3年级同一个班级3天内陆续有5名学生患有临床症状相似的疾病,他们的主要症状和体征是发热、食欲减退、一侧或双侧腮腺肿胀伴疼痛追问病史,5名学生均未接种过麻腮风3联疫苗他们可能患有流行性腮腺炎4.致癌物的最终确定应该依据流行病学调查,剂量反应关系,哺乳动物终生实验5.针对耶尔森菌的分离方法有使用冷增菌方法6.无芽胞厌氧菌可导致腹腔脓肿7.抗酸染色后细菌呈细长略带弯曲红色杆菌是结核分枝杆菌邮局一名工作人员发现一个信封内有白色粉末物质,怀疑是有毒物质,派你参与采样和检测。
8.采样时的生物防护级别是一级生物防护9.为了迅速和正确地分析信封内白色粉末物质的来源和性质,你要采取的检测方法为动物接种、检测抗原和核酸10.开展检测的实验室条件应该具备BSL-2实验室11.运送信封内有白色粉末的标本,应该符合两个人乘坐单位车运送12.与细菌运动有关的结构是鞭毛13.可使细菌染色体畸变的原因是转座因子转移位置14.伤寒与副伤寒为乙类传染病,其传播方式为通过污染的食物、水经口传播15.人乳头瘤病毒感染实验室诊断最常用的方法是聚合酶链反应16.可通过垂直传播感染胎儿的病毒是风疹病毒,水痘一带状疱疹病毒,巨细胞病毒,人类免疫缺陷病毒17.可侵犯人体神经系统的病毒有肠道病毒70型,肠道病毒71型,脊髓灰质炎病毒,柯萨奇A组16型18.森林脑炎病毒在自然界存在的条件是森林、动物宿主和蜱19.培养分离流行性腮腺炎病毒,采样标本可来源于唾液、小便和脑脊液20.临床上常用下列哪种细胞分离腮腺炎病毒Vero21.当今人类中流行最广的虫媒病毒病是登革热22.病毒复制:只在活细胞内进行,从宿主细胞获得能量,病毒蛋白抑制宿主的DNA合成,利用宿主细胞的合成场所合成病毒蛋白质23.控制病毒遗传变异的主要成分是核酸24.对病毒干扰现象叙述是可使感染自然终止、与干扰素产生有关、与病毒竞争细胞受体有关、与缺陷性干扰颗粒有关25.决定病毒遗传、变异和复制的物质是核酸26.细胞融合有利于病毒的扩散27.迟发感染的特点是症状多为亚急性28.感染病毒的细胞在细胞核或胞浆内存在可着色的斑块状结构称为包涵体29.病毒中最易发生变异的病毒是流感病毒30.孕妇感染病毒后可引起胎儿先天性畸形的病毒是风疹病毒31.脊髓灰质炎病毒主要侵犯元脊髓前角运动神经32.对病毒衣壳的叙述是由多肽构成的壳粒组成,可增加病毒的感染性呈对称形式排列,可抵抗核酸酶和脂溶剂33.病毒免疫因素中中和抗体能阻止病毒吸附,分泌型IgA能阻止病毒从黏膜侵入,细胞免疫起主要作用,迟发型变态反应有局限病毒感染的作用34.生物安全柜的作用是保护操作者、环境和样品35.适合于登革病毒的分离和培养的细胞是C6/3636.狂犬病毒属于弹状病毒科37.荚膜是细菌的特殊结构,它具有很多功能,其中最重要的功能是抗吞噬38.检测沙眼病人标本时,一般采用做预处理的抗生素是链霉素39.分离军团病人的病原培养基是BCYE琼脂培养基40.在人工培养集中,能生长的最小的微生物是支原体41.缺乏细胞壁的原核细胞型微生物是螺旋体42.破伤风梭菌可导致毒血症43.慢性毒性试验的目的是确定长期接触毒物造成生物体损害的阈剂量、观察慢性毒性的毒作用靶器官、观察慢性毒性效应谱、观察慢性毒性作用特点44.根据流感病毒核蛋白与基质蛋白抗原性的不同,流感病毒又可分为3型45.常用的麻疹的诊断实验是ELISA检测急性期血清中特异性IgM抗体46.HIV抗体检测包括HIV抗体筛查试验和HIV抗体确认试验,国内常用的确认试验方法是免疫印迹试验47.人类可以从胃肠道的正常菌群获得的营养物质是B族维生素48.人类利用微生物资源开发的产品有米酒、酸奶、豆豉49.水痘-带状疱疹病毒的叙述是属疱疹病毒科、是DNA病毒、人类是唯一宿主、可长期潜伏于脊神经后根神经节内,再激活后引起带状疱疹50.细菌缺乏细胞壁结构在一定条件下仍可存活51.对L型细菌描述是L型细菌主要致病物质为毒素52.热原质的描述是G菌的热原质就是细胞壁中的脂多糖、液体中的热原质可用吸附剂或过滤等方法除去、是许多G-菌、少数G菌的一种合成性代谢产物、注入机体可致发热反应53.对病毒杀灭无效的因素是青霉素54.采取了患者的血液培养脑膜炎球菌时,符合标本采集和运送的原则是注意无菌操作采集标本、标本要立即送检并保温、保湿、在使用抗菌药物之前采集血液、采集的标本无菌操作接种到增菌肉汤中55.属于肠道正常菌群的是双歧杆菌56.为调整菌群严重失调,应使用益生素57.对于正常菌群的描述手足口病的主要病原是柯萨奇A组16型或肠道病毒71型58.手足口病的实验室诊断可采集的临床标本是粪便,咽拭子,疱疹液,血液59.手足口病的常用实验室诊断实验是RT-PCR60.2008年7月,3岁男孩,头痛、高热伴寒战2天就诊,2天后出现昏睡、颈项强直患儿居住地靠近水塘,家里养有生猪临床初步诊断是流行性乙型脑炎传播乙脑病毒的最重要的中间宿主是猪;乙脑主要传播媒介是三带喙库蚊61.用于乙脑病毒的分离和培养的细胞是C6/3662.携带和传播肾综合征出血热病病原的动物是鼠63.外来化合物经消化道吸收的主要方式是简单扩散64.伤寒病人发病第1周内,分离病原菌应采取的标本血液65.慢性寄生虫感染时,人体内Ig升高显著的是IgE66.进行肠道菌生化鉴定,除了IMViC试验,还要进行的试验是糖发酵试验67.拟态弧菌与霍乱弧菌生化特性上最重要的区别是拟态弧菌不发酵蔗糖68.流行性斑疹伤寒的病原体是普氏立克次体69.目前检测的鼠疫抗体主要是Fl抗体70.杀灭物体表面病原微生物的方法称为消毒71.患者3岁,突然高热,头痛,喷射状呕吐,皮肤出血点,颈项强直,脑脊液较混浊为确诊此病是流脑,脑脊液接种到巧克力琼脂上培养脑膜炎球菌时需要传染性非典型肺炎冠状病毒抗体中和试验检测的是总抗体72.人禽流感患者发病初期尚未产生抗体,用于确诊的方法是病毒核酸检测73.生殖器疱疹的主要病原是II型单纯疱疹病毒(HSV-2)74.传播途径包含性传播途径的病毒是人类免疫缺陷病毒,丙型肝炎病毒,II型单纯疱疹病毒,人乳头瘤病毒75.II型单纯疱疹病毒的分离主要采集小便76.按照《突发公共卫生事件应急条例》把突发公共卫生事件分为四级,其中把烈性病菌株或毒株等丢失事件划归为T级突发公共卫生事件77.产品质量检验机构在考核人员的工作成绩时,首先应考核检验质景78.检测大肠菌群一般使用超净工作台79.属于真核细胞微生物的是真菌80.判断灭菌是否彻底的指标是杀菌芽胞81.具有黏附作用以增强细菌侵袭力的结构是普通菌毛82.在人工培养集中,能生长的最小的微生物是支原体83.可以称为病毒体的是核衣壳84.卫生标准是指“为保护人的健康,对食品、医药及其他方面的卫生要求制定的标准”85.我国产品质量检验机构用于检验的仪器设备实行标志管理,可贴合格证的仪器设备是仪器设备经计量部门检定合格者86.《病原微生物实验室生物安全管理条例》规定我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物属于第一类病原微生物87.药敏试验中,MIC的含义是最低抑菌浓度88.不含有核酸的微生物是朊粒89.突变使细菌遗传物质发生溶原性转换基因重组质粒丢失核苷酸序列改变90.腹泻呈脓血便,有里急后重症状,曾称志贺样大肠埃希菌的是肠侵袭型大肠埃希菌(EIEC)91.某男性青年午餐后数小时出现头晕、恶心、腹痛、呕吐等症状呕吐物接种到血液琼脂平血培养出现完全溶血环,金黄色菌落培养滤液给幼猫腹腔注射4小时后出现呕吐,此病可初步诊断为金黄色葡萄球菌引起的食物中毒92.构体病的主要传染源是黑线姬鼠93.大肠菌群计数国家标准是GB4789.3-201094.我国法定计量单位中,属于国际单位制的辅助单位是平面角,弧度95.法定计量单位中,属于国际单位制中具有专门名称的导出单位是压力,帕96.苯扎溴铵用于皮肤表面消毒的常用浓度是0.05%~0.10%97.实验室常用干烤法灭菌的器材是玻璃器吼98.煮沸消毒法,煮沸100℃5分钟可杀死细菌繁殖体,可用于一般外科手术器械、注射器、针头的消毒,水中加入126~2%碳酸氢钠,可提高沸点到105℃,常用于食具消毒99.用于测量病毒大小的单位是纳米(nm)100.感染人的禽流感病毒Ⅱ型主要为HsNi、HgNZ和HTN7101.传染性非典型肺炎血清学诊断的金标准是传染性非典型肺炎冠状病毒抗体中和试验102.我国法定计量单位中,属于国家选定的非国际单位制单位是体积,升103.染色体畸变的描述是DNA断裂的结果、染色体结构异常、染色体数目异常、光镜下可见104.霍乱弧菌分离的说法是O1群与O139群霍乱弧菌营养要求简单、可采取直接分离和增菌后分离的方法、对于水样便可直接接种TCBS选择性平板、对于含菌量少的样品宜用碱性蛋白冻水增菌105.荚膜是细菌的特殊结构,它具有很多功能,其中最重要的功能是抗吞噬106.霍乱弧菌依据0抗原的不同有200多血清群,其中致病的有0i群霍乱弧菌107.可以通过气溶胶方式传播的立克次体是Q热立克次体108.在生物学上的位置介于细菌与原虫之间螺旋体109.缺乏细胞壁的原核细胞型微生物是支原体110.通过性菌毛相互连接沟通进行DNA转移的是接合111.细菌直接摄取外源DNA的是转化112.引起人类痢疾的病原菌是志贺菌113.人类肠道的正常菌群是粪链球菌114.我国法定计量单位中,属于国际单位制的基本单位是质量,千克115.对L型细菌描述正确的是L型细菌主要致病物质为毒素116.大肠菌素属于细菌素117.破伤风梭菌可导致毒血症118.嗜冷菌最适温为10~20℃,嗜温菌为20~40℃,嗜热菌为50~60℃119.细菌代谢所需能量主要以生物氧化作用而来120.饮用水中1ml菌落总数不超过100个,1000ml水中大肠杆菌群不超过3个121.流感病毒主要传播途径是空气飞沫122.有芽胞破伤风菌需沸水煮3h才杀死水中加入2%碳酸钠能将沸点提到105℃又能防止金属生锈123.滤菌器用于除菌的孔径是0.22µm,另外以石棉板为滤板的金属滤器称Seitz滤器(蔡氏滤器)按滤孔大小124.影响基因表达的因素有调控部位,调节蛋白,效应分子125.质粒不依赖染色体而复制,不相容性,转移性,指令性主要有耐药质粒,Col质粒(编码肠毒素)Vi质粒(编码细菌与致病性有关的蛋白)126.细菌主要的繁殖方式为二分裂方式繁殖127.溶原性转换是指噬菌体的基因与细菌染色体DNA的重组128.属于逆转录病毒的是人类免疫缺陷病毒129.在检测工作公正性的措施中,包括明确对所有险测提供相同质量的服务,检测结果不受行政的、经济的和其他方面利益的干预,为用户保守技术秘密,检验人员不从事所检产品的技术开发工作130.在选择使用检测检验方法时,应优先选择的方法是具有GB或GB/T号的标准方法131.检验方法是卫生标准的重要部分要确保卫生标准的量值准确,检测检验方法要规范化和标准化132.我国第一部实验室生物安全国家标准是《实验室生物安全通用要求》133.与动物细胞比较,细菌所特有的一种重要结构是具有核糖体134.与细菌黏附于黏膜的能力有关的结构是菌毛135.细菌所具有的细胞器是核糖体136.细菌对糖的吸收是基团移位137.细菌形态、染色、生物活性很典型的时期是对数生长期138.荚膜是具有免疫原性,可用于鉴别细菌,可增强细菌对热的抵抗力,具有抗吞噬作用,化学成分可是多糖,也可是多肽等139.去除热原质最好的方法是蒸馏法140.B SL-3以上实验室应该使用全排生物安全柜141.超净工作台的作用是保护环境和样品142.检测致病菌一般使用生物安全柜143.转位因子为存在于细菌染色体或质粒上的一特异的核苷酸序列可在DNA中移动,主要有三类:插入顺序(最小的转位因子),转座子,转座噬菌体144.我国最早实验室生物安全卫生行业标准是《微生物实验室生物安全通用准则》145.沙门菌检验国家标准是GB/T4789.4-2010146.决定病毒具有感染性的是核酸147.病毒单纯疱疹病毒1型可引起人类口唇疱疹148.属于病毒界的微生物是噬菌体149.引起人类克一雅病,库鲁病的病原是朊病毒(朊粒)150.通过消化道传播的病毒是HEV151.在乙型肝炎患者血清中可查出病毒颗粒的形态是小球形颗粒、管形颗粒和Dane颗粒rE,颗粒152.乙型肝炎病毒最重要的传播途径是输血及血源性传播153.肠道病毒包括脊髓灰质炎病毒,肠道病毒71型(EV71),甲型肝炎病毒(HAV),ECHO病毒154.孕妇感染风疹病毒早期诊断常用的诊断方法有孕妇血清中特异性IgM抗体155.登革热病毒的传播途径是虫媒传播156.培养基的制备和质量控制规定标准是GB/T4789.28157.食品微生物检验的生物安全标准应该符合GB19489 158.属于非细胞型微生物的是衣原体159.原生质体与原生质球都是细胞壁缺陷的细菌160.肽聚糖的结构由聚糖骨架,四肽侧链和五肽交联桥(G-无交联桥)磷壁酸为G+特有,分壁和膜两种161.外膜层由脂多糖,脂质双层,脂蛋白组成细胞质内有核蛋白体(蛋白合成地),核质(主要遗传物质)质粒,162.R NA主要存在于细胞质中占细菌干重的10%,DNA存在于染色体和质粒中163.细菌营养转运的方式有离子,透性酶,磷酸酶164.营养摄取的机制是被动扩散,主动吸收基团转位165.人乳头瘤病毒可引起尖锐湿疣166.与细菌的运动有关的结构是鞭毛167.革兰染色阴性,弧形或逗点状的细菌是霍乱弧菌168.菌体细长弯曲,革兰染色阳性,亚甲蓝染色可见菌体内有异染颗粒的细菌是白喉杆菌169.革兰染色阳性呈竹节状排列的大肠杆菌是炭疽芽胞杆菌170.代谢第三阶段通过三羧酸循环将第二阶段产物分解成C02171.为防止肠道传染病发生,蔬菜、瓜果可选用的最佳消毒剂是84消毒液172.血清学检测时,电解质浓度通常是0.9%173.对肝炎患者用过的餐具进行消毒最好选用过氧乙酸174.最快的细菌计数方法是显微镜直接计数法175.人类皮肤上的正常菌群是铜绿假单胞菌176.源性疾病的病原菌是单核增生李斯特菌177.名儿童忠低热、阵发性痉挛性咳嗽,偶有特殊的”鸡呜”样吼声患者鼻咽分泌物涂片镜检可见革兰阴性短小杆菌,咳痰涂片荧光抗体染色镜检亦可见病原菌此病原菌可初步判断为百日咳杆菌感染178.莱姆病主要病原体是伯氏道疏螺旋体179.腹泻旱脓血便,有里急后重症状,曾称志贺样大肠埃希菌的是肠侵袭型大肠埃希菌(EIEC)180.结核病近年来重新抬头的原因主要是耐药性的出现专业知识3.红细胞在Alsever液中的保存期限4℃保存1个月4.一般的细菌生长最适宜的PH值是PH7.0-7.65.含有糖的培养基,高压时避免糖的破坏,在压15分钟时压力应为0.56kg/cm26.在病毒的提纯过程中,将大部分细胞碎块和其他杂质去除的最有效最常用的方法是低速离心7.离子交换层析主要用于分离和纯化蛋白,常用介质是纤维素8.凝胶过滤法主要用于蛋白或核酸分离,此法又称分子筛层析法,常用介质是葡聚糖9.噬菌体用于细菌鉴定的原理正确的是噬菌体可以根据细菌某些受体来裂解目标菌10.紫外透射仪的用途是紫外光下看DNA条带11.鉴定肠杆菌科的基本条件是发酵葡萄糖,氧化酶阴性,还原硝酸盐12.PAGE原理是凝胶介质形成立体多孔网状结构,分离条带上边是大分子13.过硫酸铵在PAGE制备中起的作用是催化聚合14.SDS-PAGE是十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳,十二烷基硫酸钠作用是解离蛋白15.聚丙烯酰胺凝胶电泳中,凝胶不仅有分子筛效应,还具有浓缩效应,两性电解质是制备该电泳凝胶不同pH重要物质,用聚丙烯酰胺制备等电聚焦凝胶,主要用于蛋白质分离16.琼脂糖凝胶电泳用于核酸分离与纯化,分离DNA片段最佳范围为200bp~50kb17.人喉癌上皮细胞Hep-218.传代保存菌种的方式很容易造成菌种突变而失去原来的性质,因而现代微生物实验室中,除了少数不耐冷的细菌,或者只作为短期使用的工作菌株时,已经不再使用传代保存的方式了分离培养螺旋体时需用Korthof培养基其中含有10%的兔血清19.破碎细菌细胞作用常用的方法是酶处理法、SDS处理等,较少用冻融法20.含有万古霉素和多粘菌素B的巧克力琼脂培养基常用于分离脑膜炎球菌21.试管凝集法检测军团菌时,抗体的阳性标准为≥1:32022.结核菌素试验时,72小时后结果判断为弱阳性反应,其局部肿大直径范围为≥20mm23.三糖铁培养基与双糖铁培养基的区别在于加与不加蔗糖24.细菌染色标本制作基本步骤涂片—干燥—固定—染色25.钩端螺旋体适宜的生长温度是28℃26.用显微镜检验已染色的标本最合适的亮度是很强27.病毒实验中用于浸泡和清洁玻璃器材的清洁浸泡液含有硫酸和重酪酸钾28.观察细菌内部的超微结构需要采用电子显微镜29.病毒分离培养常用的细胞类型可分为原代细胞、二倍体细胞和传代细胞三大类传代细胞与原代细胞的根本区别是能否在体外无限传代30.组织培养细胞接种必须首选敏感细胞的关键原冈是病毒对细胞的感染性具有严格的选择性和特异性31.病毒蚀斑技术是指病毒在已长成的单层细胞上形成的局限性病灶改变32.既可用于病毒的纯化又可用于病毒悬液中感染病毒含量的测定的实验技术是病毒空斑技术33.组织培养是分离和培养病毒以及进行病毒学实验研究的简便而有效的丁具和手段在组织培养系统中判定病毒增殖的最直接方法是观察细胞病变34.CPE可以表现为严重的细胞破坏、肿大、颗粒增多、细胞融合成合胞体或无明显细胞变化35.病毒的分子生物学鉴定包括病毒核酸和蛋白质测定,蛋白质测定可使用免疫测定技术、电泳技术和质谱技术等36.欲对血清培养基进行灭菌,宜选用间歇灭菌法37.血清、抗毒素等可用滤菌器过滤方法除菌38.在病人死后,用于分离病毒的尸体标本的采集时限是6小时内39.用组织制作分离病毒的标本时,通常将组织制成10%的悬液保存40.细胞培养技术全过程的关键是防止污染41.高压蒸汽灭菌器杀灭所有细菌芽胞和繁殖体要求103.4kpa的压力121.3℃15~25min42.对粪便标本增菌培养沙门氏菌合适的培养基是亚硒酸盐胱氨酸增菌液43.美兰在细菌学中也是常用染料之一,它是指碱性染料44.细菌生长繁殖中所需营养物质,其中葡萄糖、淀粉、甘露醇等属于碳源45.对患者进行传染病诊断时,常常采用CFT,在CFT反应必不可少的成份是补体,在一般的CFT反应中所用的补体是来源于豚鼠Power by YOZOSOFT相关专业知识1.在细菌里能发现蛋白质合成开始的位置的是rRNA和mRNA之间一段互补序列2.生物基因组分子量巨大3.-次精确的测定生物基因组的方法称为高通量检测技术4.就模板DNA而言,影响PCR的主要因素是模板的数量,模板的纯度5.-般DNA的物理图谱表示的方式为以直线图式6.多重PCR需要的引物对为多对引物7.PCR产物的分析方法有酶切分析,分子杂交,序列分析,电泳分析8.可以用鼠疫杆菌多重PCR电泳产生的条带判断弱毒株的方法为产生一条目标条带和一条对照条带9.多重PCR电泳产生的一条对照条带或多数不规则的条带判断结果为阴性结果10.多重PCR电泳没有产生条带判断结果为无效结果11.在真核生物核糖体的五种主要的组蛋白中,在进化中最不保守的是Hl蛋白12.质粒载体是在天然质粒的基础上为适应实验室操作而进行构建的,构建方法为人工构建13.DNA标本的保存方法为冷冻14.生物芯片的最大特点为生物芯片的主要特征是高通量、微型化和自动化15.在DNA凝胶电泳过程中,不同构象的DJ\TA的泳动率通常为超螺旋>线性>切口环状16.在PCR反应中,经过n次循环,理论上DNA链的数目扩增了2n倍17.提高质粒的收获量,可以在细菌生长到足够量时加入抑制蛋白合成的抗生素18.生物芯片的描述是常用的生物芯片分为三大类,即基因芯片、蛋白质芯片和芯片实验室,生物芯片的主要特点是高通最、微型化和自动化,生物芯片是近年来在生命科学领域中迅速发展起来的一项高新技术,基因芯片可分为主动式芯片和被动式芯片19.基因芯片的应用领域包括疾病诊断,环境监测,食品卫生,药物筛选20.体内DNA复制时必须具备的引物是NA和RNA21.属于酶切技术的是DNA物理图谱22.肺炎病人痰标本为翠绿色脓痰,应考虑绿脓杆菌感染23.采用抗原体反应对传染病进行诊断,抗原与抗体的比例为3:224.急性、亚慢性、慢性毒性试验分别选择动物年龄为初成年,性刚成熟,初断乳25.急性经口染毒,为了准确地将受试物染人消化道中,多采用灌胃26.距慢性毒性试验对动物的要求是大鼠100g左右,小鼠15g左右27.在核酸分子杂交技术基础之上又发展了一系列检测DNA和RNA的技术,其中包括Southernblotting,菌落杂交,Northernblotting,dotblotting28.医生怀疑某患者可能有链球菌和肺炎链球菌感染,拟进行环状沉淀试验鉴定其微量抗原,以助于疾病的诊断。
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一、名词解释:1、溶原性细菌:获得温和噬菌体核酸的细菌。
2、前噬菌体:温和噬菌体整合于细菌染色体(宿主基因组)中的核酸称为前噬菌体。
3、侵袭力:病原微生物能突破宿主的防御系统,在机体内定植、繁殖和扩散的能力。
4、正常菌群MIC(最低抑菌浓度):在体外试验中,抗菌药物抑制培养基中某种细菌生长最低药物浓度,是药物抗菌活性指标,提示药物的抑菌能力(µg/ml)5、MRSA:耐甲氧西林金黄色葡萄球菌6、迁徙生长现象:变形杆菌在固体培养基上呈扩散性生长,形成以菌种接种部位为中心的,厚薄交替同心圆型的层层波状菌苔7、菌丝:真菌在适宜的环境中,由孢子出芽形成芽管,逐渐延长呈丝状,称为菌丝。
8、二相性真菌:有些真菌在不同寄生环境和培养条件下可出现两种形态,称二相性真菌9、病毒体:一个成熟有感染性的病毒颗粒称为病毒体二、填空、判断、选择、问答部分(一)革兰氏染色的三个原理,操作步骤与临床意义【选择题】1、原理:(1)渗透学说:革兰阳性菌细胞壁结构较紧密,肽聚糖层厚,含脂质少,脱色时乙醇不易渗入,反而使细胞壁脱水,通透性下降,胞内结晶紫与碘的复合物不易渗出。
格兰阴性菌细胞壁结构较疏松,肽聚糖层薄,含脂质多,易被乙醇溶解,是细胞壁通透性增加,胞内结晶紫与碘的复合物易被乙醇溶解溢出而被脱色。
【主要学说——细胞壁结构学说:G+菌和G-菌的细胞壁成分差异大,对脱色剂的反应不同】(2)化学学说:革兰阳性菌含大量核糖核酸镁盐可与结晶紫、碘牢固结合,而不易被乙醇脱色。
革兰阴性菌内所含核糖核酸镁盐少,故易被脱色。
(3)等电点学说:革兰阳性菌的等电点(pH2~3)比格兰阴性菌(pH4~5)低,在相同pH的条件下,革兰阳性菌比格兰阴性菌所带的负电荷多,与带正电荷的碱性染料结合较牢固,而不易脱色。
2、操作步骤:①细菌涂片、干燥,经火焰固定(菌膜>1cmX1cm)②结晶紫染色1min,水洗甩干③加碘液媒染1min,水洗甩干④加95%乙醇脱色30s,水洗甩干⑤用稀释复红或沙黄复染30s,水洗吸干后镜检3、临床意义:①鉴别细菌②选择治疗用药③与细菌致病性有关(二)细菌的基本结构及功能、细菌的特殊结构及功能、细菌的变异机理【选择题】细菌蛋白质的合成场所:核糖体(同时也是药物作用的部分)细菌内毒素的化学成分:脂多糖1、细菌的基本结构基本结构:由外向内依次为细胞壁、细胞膜、细胞质和核质等。
(1)细胞壁a.主要功能:①维持细菌固有形态②抵抗低渗作用③物质交换作用2、化学组成和结构a.肽聚糖:是细菌细胞壁的主要成分,也是原核细胞所特有的成分革兰阳性菌的肽聚糖(多):聚糖骨架、四肽侧链和五肽交联桥三部分构成的三维网架结构革兰阴性菌的肽聚糖(少):聚糖骨架、四肽侧链两部分构成的二维网架结构b.磷壁酸:革兰阳性菌细胞壁特有。
作用:调节、维护细菌细胞内离子平衡作用,是革兰阳性菌重要的表面抗原,与细菌致病性有关。
壁磷壁酸:由肽聚糖延伸;膜磷壁酸:由细胞膜延伸c.外膜层:革兰阴性菌细胞壁特有。
细胞壁肽聚糖外侧,由外向内依次为脂多糖、脂质双层、脂蛋白三部分①脂多糖:格兰阴性菌内毒素,脂质A为主要毒性成分第1/12页(2)细胞膜:一层柔软而富有弹性的半渗透性双层脂质生物膜结构,脂质双层中镶嵌有多种蛋白质。
中介体:细胞膜内陷折叠而成的囊状结构。
(3)细胞质有质粒(是染色体外遗传物质)包括:F质粒(至育性质粒)R质粒(耐药性质粒)Vi质粒(毒力质粒)2、细菌的特殊结构(鞭毛、荚膜、芽孢和菌毛)(1)鞭毛:附着在菌体上面胞壁外的细长呈波浪形弯曲的丝状物。
a.类型:周毛菌,单毛菌,双毛菌,丛毛菌。
b.作用和意义:①是细菌的运动器官②与细菌致病性有关③与细菌鉴定、分类及分型有关(2)菌毛:是指菌体表面具有比鞭毛更细、短而直的丝状附属物。
化学本质:蛋白质a.普通菌毛:是细菌的黏附器官,与细菌致病性密切相关b.性菌毛:F质粒控制,表面有性菌毛的称为雄性菌(F+),无性菌毛称为雌性菌(F-)(3)荚膜:某些细菌在细胞壁外包绕的一层黏液性物质。
化学本质:多糖类,少数为多肽通常在机体内和营养丰富的培养基中易形成荚膜a.作用:①抗吞噬②抗杀伤③抗干燥④与致病性有关⑤细菌鉴别和分型的依据⑥免疫原性(4)芽孢:是某些细菌在一定条件下细胞质、核质浓缩脱水而形成的一个折光性很强,具有多层膜状结构、通透性很低的圆形或卵圆形的小体。
a.形成条件:缺乏营养物质,有害代谢产物的堆积b.性质:休眠状态,非繁殖态。
芽孢可脱离母体单独存活c.特性:①保留原菌活性②细菌的休眠状态③可转变为繁殖体(不是繁殖方式)d.作用和意义:①增强细菌抵抗力②判断灭菌效果的指标③鉴别细菌(5)细菌的非典型形态与结构细菌L型:即细菌细胞膜缺陷型,无细胞壁仍可存活主要生物学特性:①多形性②大多数染成革兰阴性③普通培养不上涨(3%~5%高渗培养)④缓慢生长⑤荷包蛋样菌落(中间凸起,四周扁平)⑥可返祖3、细菌变异的机制(1)基因突变——点突变突变:是指细菌遗传物质的结构发生突然而稳定的改变,所致的变异现象可遗传给后代。
(2)基因转移及重组a.基因转移:外源性遗传物质由供体菌转入受体菌细胞内的过程。
b.基因重组:供体菌的基因进入受体菌细胞,并在其中自行复制与表达,或与受体菌DNA整合在一起的过程。
c.基因转移及重组的方式:转化、接合、转导、溶原性转换、原生质融合等①转化:受体菌直接摄取环境中供体菌游离的DNA片段,并将其整合至自身基因组中,从而获得供体菌的部分遗传性状。
②接合:通过性菌毛相互沟通,将遗传物质从供体菌直接转移给受体菌。
③转导:以噬菌体为载体。
将供体菌的遗传物质转移到受体菌,经重组而使受体菌获得供体菌的某些遗传性状。
④溶原性转换。
⑤原生质融合。
第2/12页(三)培养基的制备方法,常用培养基的原理及用途(SS MAC MIU O/F采用的指示剂,结果观察等),常见生化反应的原理1、制备程序:调配—>溶化—>矫正pH—>过滤澄清—>分装—>灭菌—>检定—>保存矫正pH:一般将培养基的pH值矫正至7.4~7.6。
由于培养基经高压灭菌后,其pH降低约0.1~0.2,因此矫正时pH应比实际值高0.1~0.2分装:①基础培养基:一般分装于三角烧瓶,灭菌后备用;②琼脂平板;③半固体培养基:一般分装于试管中,分装量约为试管长度的1/3,灭菌后直立凝固待用;④琼脂斜面:分装量约为试管1/5,灭菌后趁热放置斜面凝固,斜面长度约为试管长度的2/3;⑤液体培养基:分装与试管,分装量为试管长度的1/3,灭菌后备用保存:标记名称、制备时间等,保鲜袋内存放于4℃冰箱或冷暗处,保存时间一般不超2周。
2、常用培养基的原理及用途(1)SS:强选择分离致病肠杆菌(2)MAC:弱选择分离正常肠杆菌(3)MIU:①原理:见各试验各自原理。
动力:有鞭毛的细菌有动力,穿刺培养后穿刺线不清晰。
②用途:检测细菌动力+靛基质试验(吲哚试验)+尿素酶试验③结果观察:a.接种线变宽、变模糊,培养基变浑浊为动力阳性;b.加入靛基质试剂后形成玫瑰吲哚,则为靛基质试验阳性;c.整只试管变为桃红色,则为尿素酶试验为阳性(产生尿素酸分解培养基中尿素产碱,使酚磺酞指示剂显桃红色)(4)KIA:①原理:乳糖发酵+葡萄糖发酵+葡萄糖产气+硫化氢②用途:肠杆菌科细菌的鉴定和鉴别。
③结果判断:a.整个培养基呈黄色,则乳糖发酵阳性;b.斜面呈红色,则葡萄糖发酵阳性;c.试管底部有气泡,说明葡萄糖产气阳性;d.整只试管变黑,则硫化氢阳性(细菌能分解培养基中硫氨基酸,可产生H2S,H2S与培养基中枸橼酸钠铵铁反应,产生黑色FeS)(5)O/F:①原理:细菌分解葡萄糖产生有机酸,使培养基pH下降,培养基由绿色变为黄色。
指示剂溴麝香草酚蓝(黄色<—绿色—>蓝色)②用途:用于肠杆菌和非发酵菌的鉴别,葡萄球菌和微球菌的鉴别③结果判断:O:开放管变黄,封闭管不变(绿色);F:开放管变黄,封闭管也变黄;K:开放管不变,封闭管变绿(产碱);N:开放管不变,封闭管也不变(不利用)3、常见生化反应的原理(一)十个基础试验IMViC试验:I——吲哚试验 M——甲基红试验 V——V-P试验 C——枸橼酸盐试验1、糖(醇、苷)类发酵试验①原理:细菌分解糖产生有机酸,使培养基pH下降,指示剂溴甲酚紫由紫变黄(酚红则是由红变黄),如该菌具有甲酸解氢酶,可进一步分解甲酸产生H2和CO2,使倒插管中出现气泡。
②方法:细菌接种糖发酵管,37℃、24h孵育后观察结果③结果判断:有的细菌能分解某些糖产酸产气(AG/+),有的只能产酸而不产气(A/+),有的则不能分解糖类(N/-)2、葡萄糖氧化/发酵试验(O/F试验)①原理:细菌分解葡萄糖产生有机酸,使培养基pH下降,指示剂溴麝香草酚蓝(黄色<—绿色—>蓝色)②方法:2支试管,一只加灭菌的液体石蜡覆盖,使培养基与空气隔绝;另一只不加灭菌的液体石蜡,培养基暴露于空气中。
35℃培养18~24h后,观察结果③结果判断:氧化型细菌(O)——仅在有氧环境中分解葡萄糖,在无氧环境中不分解,加液体石蜡不变色,不加液体石蜡变色;发酵型细菌(F)——在有氧或无氧环境中都能分解葡萄糖,两管均变色第3/12页不利用型细菌(N)——有氧或无氧的环境中都不能分解葡萄糖,两管均不变色产碱型细菌(K)——开放管变蓝,封闭管不变色3、甲基红试验(MR试验)①原理:细菌发酵葡萄糖产生丙酮酸,丙酮酸进一步分解成甲酸、乙酸、乳酸等混合酸,培养基pH下降至4.4以下,加入甲基红指示剂变为红色,为MR试验阳性;若因其他因素使培养基pH在5.4以上,则甲基红指示剂呈黄色,为MR试验阴性。
②方法:将待测菌接种于葡萄糖蛋白胨水中,35℃培育18~24h,滴加甲基红试剂,呈现红色为MR试验阳性,黄色为阴性4、V-P试验①原理:有些细菌在发酵葡萄糖产生丙酮酸后,能使丙酮酸脱羧生成中性的乙酰甲基甲醇,其在碱性环境中北空气中的氧氧化成二乙酰,二乙酰与培养基内蛋白胨中精氨酸所含胍基发生反应,生成红色化合物。
②方法:将待测菌接种于葡萄糖蛋白胨水中,35℃培育18~24h,按每毫升培养基加入0.3%肌酸或肌酐的40%KOH溶液0.1ml,充分混匀后观察,出现红色为V-P试验阳性。
5、靛基质试验(吲哚试验)①原理:某些细菌含色氨酸酶,分解培养基中的色氨酸产生靛基质(吲哚),靛基质与对二甲基氨基苯甲醛反应,生成红色复合物。
②方法:将待测菌接种于葡萄糖蛋白胨水中,35℃培养18~24h,再在培养基中加入靛基质指示剂(对二甲基氨基苯甲醛),试剂与培养基两液面接触处呈红色为阳性,无色为阴性。
6、硫化氢试验①原理:有些细菌能分解培养基中的含硫氨基酸,产生H2S,H2S与培养基中Fe2+(或Pb2+)反应生成黑色的硫化亚铁或硫化铅②方法:接种细菌,35℃培养18~24h,呈现黑色沉淀者为阳性,无变化者为阴性7、尿素酶试验①原理:有些细菌能产生尿素酶,可分解尿素生成氨和CO2,氨在水液中形成碳酸铵,使培养基呈碱性②方法:将待检菌接种于尿素培养基中,培养后出现红色为阳性,不变色(橙色)为阴性。