荧光
荧光的原理及应用
荧光光谱的测量 步骤
荧光光谱的应用 领域
荧光光谱在生物医学领域的应用：通过荧光光谱技术对生物分子进行检测和分析， 可用于疾病诊断、药物研发和生物成像等方面。
荧光光谱在环境科学领域的应用：通过荧光光谱技术对水体、土壤等环境样品中 的有机污染物进行检测和分析，可用于环境监测和污染治理等方面。
荧光光谱在化学分析领域的应用：通过荧光光谱技术对化学物质进行定性和定量 分析，可用于化学分析、材料科学和药物化学等领域。
激发态的稳定性：激发态不稳定，电子会释放能量回到基态
荧光发光过程：质吸收能量后，电子从基态跃迁至激发态，再回到基态时释放能量， 发出荧光光子
荧光物质吸收能量 电子从基态跃迁至激发态 电子从激发态返回基态时释放能量 发出荧光
PART FOUR
荧光颜色与物质组成：荧光颜色与物质组成密切相关，不同物质具有不同的荧光颜色。
激发态不稳定：激 发态不稳定，会释 放能量回到基态
释放能量：释放能 量以荧光的形式释 放
荧光物质：荧光物 质需要具有吸收能 量和释放能量的能 力
PART THREE
荧光物质吸收能量
电子从基态跃迁至激发态
激发态不稳定，释放能量 回到基态
释放能量以光的形式表现
激发态的形成：电子吸收能量从基态跃迁至激发态
PART SIX
高灵敏度：荧光技术具有高灵敏度， 能够检测到微量的荧光物质。
快速：荧光技术通常具有快速检测 的优点，可以在短时间内完成大量 样本的检测。
添加标题
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特异性：荧光技术具有特异性，能 够针对特定的目标进行检测。
方便：荧光技术通常使用简单的设 备和操作流程，方便用户使用。
荧光颜色与物质结构：物质结构对荧光颜色也有影响，如共轭体系的存在会导致荧光颜色发 生变化。
荧光的原理
荧光的原理1. 荧光简介1.1 什么是荧光荧光是一种物质在受到紫外线激发后，能够吸收部分能量并在可见光区域重新辐射出来的现象。
荧光现象广泛存在于自然界中，也被广泛应用于科学研究、工业生产和日常生活中。
1.2 荧光与自然光的区别荧光与自然光相比具有以下特点： - 荧光是在受到外部激发后才能产生，而自然光是由光源自发辐射产生的。
- 荧光具有特定的激发波长和发射波长，而自然光波长连续分布。
- 荧光具有特定的荧光寿命，即荧光物质从激发态到基态所需的时间，而自然光不存在寿命概念。
2. 荧光的产生机制2.1 能级跃迁荧光的产生涉及物质分子或原子电子的能级跃迁过程。
当物质受到外部激发时，原子的电子由基态跃迁到激发态，吸收了能量。
在激发态经历一段时间后，电子会发生从高能级到低能级的跃迁并重新辐射出能量。
2.2 荧光共振能量转移在某些情况下，荧光不仅可以由单个物质分子或原子产生，还可以由多个物质之间的能量共振转移引起。
这种情况下，一个物质的激发态能量可以被传递给另一个物质的基态，从而引发荧光发射。
2.3 荧光物质的选择要实现高效的荧光发射，需要选择适合的荧光物质。
荧光物质的选择因应用场景而异，常见的荧光物质包括有机染料、荧光蛋白、量子点等。
3. 荧光的应用3.1 荧光显微镜荧光显微镜是利用荧光物质在特定波长的激发下发射可见光的特性进行图像观察的仪器。
通过标记样品中的靶标分子，荧光显微镜可以实现细胞、组织甚至分子的高分辨率成像。
3.2 荧光探针荧光探针是通过标记特定的分子或化合物以实现对其状态或环境的监测。
通过选择适当的荧光探针，可以实现对生物体内pH值、离子浓度、蛋白质结构等多种参数的实时监测。
3.3 荧光分析技术荧光分析技术是利用荧光现象进行定量分析的方法。
荧光分析技术具有高灵敏度、高选择性和快速响应等优点，被广泛应用于环境监测、食品安全检测、医学诊断等领域。
3.4 荧光材料荧光材料是指能够发出荧光的材料。
荧光、磷光定义
荧光、磷光定义
荧光：
荧光是指某些物质吸收高能量的光（如紫外线或X射线）后，电子被激发至较高能级，在很短时间内（通常为纳秒至毫秒级别）就返回到较低能级，并在此过程中释放出能量较小、波长长于激发光的光子。
这种发光现象随激发光源的消失而迅速停止。
荧光材料的发光效率高，但寿命短，常见于荧光灯、荧光染料、荧光标记等领域。
磷光：
磷光则是另一种光致发光现象，类似于荧光，物质同样因吸收高能量的光而使电子跃迁到激发态。
然而，不同于荧光，磷光物质的电子从激发态下降至基态的过程中，会发生所谓的三重态跃迁，由于这一过程涉及到自旋禁戒效应，导致跃迁速率大大降低。
因此，即使激发光源停止后，磷光物质仍能继续发光一段时间，发光时间可以从几毫秒到几小时不等。
典型的磷光材料包括夜光粉、某些宝石（如萤石）以及某些塑料制品中的发光添加剂。
荧光现象名词解释
荧光是指物体在接受到电磁波或其他类型的激发能量之后发出的光。
荧光现象可以在自然界中观察到，比如萤火虫、海葵和一些气体等都可以发出荧光。
荧光也可以被人工制造，比如荧光灯和荧光漆等。
荧光是通过物质中的分子或原子在接受到电磁波或其他类型的激发能量之后，把这些能量转化成更高能量的光的过程。
当分子或原子被激发时，它们会从低能状态转化到高能状态。
然后，当它们从高能状态回到低能状态时，就会发射出荧光。
荧光现象在医学、农业、工业和科学研究中都有广泛应用。
例如，荧光素质检测可以用来检测细胞中某些蛋白质的含量，而荧光显微镜可以用来查看细胞的形态和结构。
此外，荧光技术还广泛应用于生物技术、化学反应监测和生物传感等领域。
荧光的名词解释
荧光的名词解释荧光——一个耳熟能详的名词，似乎总能勾起人们对绚丽光芒的向往和好奇。
它是一种特殊的光现象，具有独特的特性和应用。
在日常生活中，我们可以通过荧光来点亮房间，享受夜晚的美丽景色；在科学和技术领域，荧光更是有着广泛的应用，为我们带来许多创新和便利。
在本文中，我将对荧光进行全面解释，并深入探讨荧光的起源、产生机制以及应用领域。
1. 荧光的起源荧光这个名词源于拉丁文“fluor”，意为“流动”。
而荧光的意义远不止这个简单的含义。
“荧光”最早在华人古籍中被记载，称作“白晖光”。
古人对荧光的研究相对较少，直到19世纪，科学家们才开始对荧光进行系统的研究。
2. 荧光的产生机制荧光的产生是通过激发物质使其吸收能量，然后再以光的形式释放出来。
这个过程可以简单解释为：当某种物质受到热、电或光的激发时，其内部的电子能级会发生变化，跳至更高的能级。
然后，电子会在短时间内掉回到低能级，释放出余下的能量。
这个能量会以光的形式散发出来，形成我们所看到的荧光。
3. 荧光的种类荧光可以分为两种类型：自发荧光和受激荧光。
自发荧光是指某些物质本身具有荧光属性，无需外界激发即可发出光线。
代表性的例子就是荧光粉、荧光灯等。
而受激荧光则需要外界的能量激发才能产生光线。
受激荧光广泛应用于荧光染料、荧光标签等领域。
4. 荧光的应用领域荧光的应用领域非常广泛，从科学研究到日常生活中都能看到它的身影。
在生物医学领域，荧光成像技术被广泛应用于细胞观察、病理诊断、药物筛选等方面。
在环境保护领域，荧光检测仪器被用来测量空气和水中的污染物浓度。
在材料工程领域，荧光材料被用来制作LED、荧光涂料等。
除此之外，荧光还被应用于艺术灯具、装饰品等方面。
5. 荧光的特点与优势荧光的特点使其具备许多优势。
首先，荧光具有强烈的视觉冲击力，能够吸引人们的注意。
其次，荧光可见光谱范围广，可以发出不同颜色的光线，丰富了视觉效果。
此外，荧光的发光时间较长，可以在黑暗环境中持续发光，提供照明作用。
常用荧光 波长
常用荧光波长
荧光是一种物质在受到激发后发出的可见光，常用荧光波长包括蓝色、绿色、黄色和红色。
本文将从这四个方面介绍常用荧光的特点和应用。
一、蓝色荧光
蓝色荧光的波长一般在400-500纳米之间。
在日常生活中，我们经常接触到蓝色荧光的物品，比如保健品中的荧光染料和荧光笔。
此外，蓝色荧光还被广泛应用于科学研究领域，如细胞和分子生物学研究中的荧光探针。
二、绿色荧光
绿色荧光的波长一般在500-600纳米之间。
绿色荧光在荧光显微镜、荧光指示剂和荧光染料中得到了广泛的应用。
荧光显微镜利用绿色荧光染料的特性，可以在细胞和组织水平上观察生物分子的运动和相互作用。
此外，绿色荧光还被用于生物医学领域的分子标记和荧光成像。
三、黄色荧光
黄色荧光的波长一般在550-600纳米之间。
黄色荧光的应用范围非常广泛，包括荧光灯、液晶显示器和荧光染料等。
黄色荧光的特点是亮度高、稳定性好和发光时间长，因此在照明和显示领域有着重要的应用。
四、红色荧光
红色荧光的波长一般在600-700纳米之间。
红色荧光具有较长的波长，因此在光学成像和生物医学领域有着广泛的应用。
红色荧光染料可以用于标记生物样品中的特定分子，通过荧光显微镜观察其分布和变化。
此外，红色荧光还被用于红外线光学成像和光学通信等领域。
总结起来，常用荧光波长包括蓝色、绿色、黄色和红色。
这些荧光的特点和应用各不相同，但都在科学研究、生物医学和光学领域发挥着重要的作用。
通过研究和应用这些荧光，我们可以更好地理解和探索自然界的奥秘，并为人类的生活和健康提供更多的可能性。
荧光的意思是什么
荧光的意思是什么
荧光，又作“萤光”，是指一种光致发光的冷发光现象。
当某种常温物质经某种波长的入射光照射，吸收光能后进入激发态，并且立即退激发并发出比入射光的波长长的出射光；很多荧光物质一旦停止入射光，发光现象也随之立即消失。
具有这种性质的出射光就被称之为荧光。
另外有一些物质在入射光撤去后仍能较长时间发光，这种现象称为余辉。
在日常生活中，人们通常广义地把各种微弱的光亮都称为荧光，而不去仔细追究和区分其发光原理。
也指温度低的冷光。
荧光是什么原理
荧光是什么原理荧光是一种物质在受到激发后发出的可见光的现象。
这种现象在我们日常生活中并不陌生，比如荧光灯、荧光笔、荧光贴纸等都是利用了荧光的原理。
那么，荧光究竟是什么原理呢？下面我们就来详细解释一下。
首先，我们需要了解荧光的激发过程。
荧光的激发是通过吸收高能量的光子或电子来实现的。
当物质受到激发后，其内部的电子状态会发生变化，从基态跃迁到激发态。
在这个过程中，物质会吸收能量，然后在退激发的过程中释放出能量，这个释放出的能量就是我们所看到的荧光。
其次，荧光的发射过程也是非常重要的。
当物质处于激发态时，它会很快地退激发，释放出能量。
这个能量的释放是以光子的形式进行的，也就是说，物质在激发态下会发出光。
这就是我们所看到的荧光现象。
除了上述的激发和发射过程，荧光的原理还与能级结构有关。
在物质的原子或分子中，存在着不同能级的电子。
当这些电子受到激发后，会跃迁到更高的能级，然后在退激发的过程中释放出能量。
这种能级结构对于荧光的产生起着至关重要的作用。
另外，荧光的颜色也与其原理密切相关。
不同物质在受到激发后会释放出不同波长的光，这就决定了荧光的颜色。
比如，荧光笔中的荧光剂会在受到紫外线激发后发出明亮的蓝色或绿色荧光，而荧光灯中的荧光粉则会发出白色的荧光。
这些颜色的差异源自于物质本身的性质和结构。
总的来说，荧光的原理是通过激发物质的内部电子状态，使其处于激发态，然后在退激发的过程中释放出能量，产生可见光的现象。
荧光的产生与激发过程、发射过程、能级结构和物质的性质都有密切的关系。
通过对荧光原理的深入了解，我们可以更好地应用荧光技术，同时也能更好地认识和理解周围的世界。
自然界荧光现象
自然界荧光现象
荧光是自然界中常见的发光现象，它发生在某些物质吸收特定波长的光能后立即释放出较短波长的光。
这种过程是非热的，并且通常在几纳秒到几百微秒的时间内完成。
以下是一些自然界中的荧光现象：
1. 生物荧光：许多生物体能够产生荧光，包括细菌、真菌、昆虫、鱼类和海洋生物等。
例如，萤火虫通过化学反应产生荧光，而深海中的许多动物则利用荧光进行伪装或交流。
2. 矿石和宝石：某些矿物和宝石，如磷灰石、方解石和钻石，在紫外线下会发出荧光。
这些矿物质可以被用来制作独特的装饰品，当暴露在紫外线下时会产生引人注目的效果。
3. 植物叶绿素：叶绿素在受到阳光照射后会发射出荧光，这一过程被称为叶绿荧光。
这是由于植物光合作用的一部分，其中多余的光能以荧光的形式释放出来。
4. 水体：某些湖泊和河流含有荧光藻类或其他微生物，它们会在夜晚发出蓝绿色的光，形成“蓝色泻湖”或“星河瀑布”的景象。
5. 化石燃料：石油和其他化石燃料有时会在紫外线下发出荧光，这是因为它们含有某些化合物，如芳香烃，能够在吸收紫外线后发出可见光。
6. 生物标记：科学家使用荧光分子作为标记物来研究细胞内的各种过程，这在生物学和医学领域非常有用。
这些荧光分子可以通过与目标分子结合或嵌入细胞膜等方式追踪细胞活动。
荧光现象不仅具有科学价值，而且因其美丽和神秘性而在艺术和文化中占有特殊地位。
荧光的简介及其应用
荧光的简介及其应用【摘要】日常生活中荧光类物品随处可见，在自然科学中它也同样做出了巨大的贡献。
荧光吸收了外界能量后，能发出不同波长和不同强度的光，一旦外界能源消失，则荧光也随之消失。
可用荧光这一特性进行荧光分析检测以及生物探针的标记。
【关键词】荧光荧光分析DNA 蛋白质【正文】日常生活中荧光类物品随处可见，荧光笔，荧光粉，荧光板，荧光灯，这些日常用品在为我们带来便捷的同时也给予了我们美的享受。
荧光究竟是什么物质，它在自然科学中又有哪些应用呢，下面让我们对荧光进行更深入的探究。
一荧光的简介自然界存在这样一类物质，当吸收了外界能量后，能发出不同波长和不同强度的光，一旦外界能源消失，则这种光也随之消失，这种光称为荧光。
外界提供能量的方式有多种，如光照、加热、化学反应及生物代谢等。
根据激发光的波长不同，荧光可分为Ｘ射线荧光、紫外可见荧光和红外荧光等。
根据发射荧光的粒子不同，荧光又可分为分子荧光和原子荧光，由于不同的物质其组成与结构不同，所吸收光的波长和发射光的波长也不同。
二荧光的产生物质分子的能级包括一系列电子能级、振动能级和转动能级。
分子吸收能量后，从基态最低振动能级跃迁到第一电子激发态或更高电子激发态的不同振动能级（这一过程速度很快，大约10-15 s），成为激发单重态分子。
激发态分子不稳定，可以通过以下几种途径释放能量返回基态：一振动驰豫这一过程只能发生在同一电子能级内，即分子通过碰撞以热的形式损失部分能量，从较高振动能级下降到该电子能级的最低振动能级上。
由于这一部分能量以热的形式释放，而不是以光辐射形式发出，故振动驰豫属于无辐射跃迁。
二．内转换即激发态分子将多余的能量转变为热能，从较高电子能级降至较低的电子能级。
内转换也属于无辐射跃迁。
三．荧光较高激发态分子经无辐射跃迁降至第一电子激发单重态的最低振动能级后，仍不稳定，停留较短时间后（约10-8 s，称作荧光寿命），以光辐射形式放出能量，回到基态各振动能级，这时所发射的光称为荧光。
荧光的原理及应用
荧光的原理及应用
一、荧光原理
荧光是物质，在一定能量下受到光或放射粒子作用，能发射可见光的
一种性质，就是热量变成光的过程，一般来说荧光是物质由激发态到稳定
态的能量转变形式。
当入射的光线照射到物质上时，累积足够的能量将其
激发，激发的物质处在一个特殊状态，进行一系列振荡，产生可见光谱，
使物质发光，然后激发物质在由高能量到低能量的过程中释放所发出的光，形成可见光，这就是荧光现象。
二、荧光应用
1、荧光检测：光是与物质的性质有关的，因此针对特定的物质，可
以使用荧光应用它的特性，结合化学检测技术，可以对物质进行检测，比
如医学检测中的生物抗体，采用荧光检测技术可以更准确、更灵敏地检测
出它们。
2、鉴定及画边：荧光技术也可以用来快速分辨特定的物质，比如它
可以根据荧光光谱的特征，鉴定入射的物质，甚至一些有毒物质。
它也可
以用来绘制图像边界，比如近视眼检查时，可以用荧光技术来分析眼角膜
的边界，准确地检查眼睛结构。
3、发生机理研究：荧光技术也可以用来研究物质发光的机理，它可
以研究物质在激发状态下的发射光谱，物质放射光谱的变化以及物质的发
光机理。
荧光的原理及应用
荧光的原理及应用原理•荧光是指物质受到激发后，能够产生可见光的现象。
•荧光的产生是由于物质中的电子在受到能量激发后从基态跃迁到激发态，并在激发态停留一段时间后返回基态时释放出能量而产生的。
荧光的产生过程1.光激发：荧光物质受到光激发后，吸收能量并激发其中的电子。
2.能量传递：被激发的电子会在激发态停留一段时间，这时会与周围的分子进行能量传递。
3.辐射发射：在能量传递过程中，能量最终被释放出来，以可见光的形式发射出去。
荧光的应用生物学•荧光在生物学中广泛应用于细胞成像、蛋白质定位、基因表达等方面。
•通过特定荧光染料或标记物，可以对生物体内的细胞和分子进行研究和观察。
化学分析•荧光分析技术在化学分析中具有很高的灵敏度、选择性和多样性。
•荧光分析可以用于测定各种痕量物质，如药物、污染物等。
材料科学•荧光材料在荧光显示器、荧光灯、固态激光器等方面得到广泛应用。
•通过调控材料中的掺杂物，可以改变材料的荧光性质，用于实现不同颜色的荧光发射。
环境监测•荧光技术在环境监测中起着重要作用，可以用于检测污染物、水质、空气质量等。
•通过荧光探针或荧光标记物，可以快速、准确地检测环境中的有害物质。
医学诊断•荧光在医学诊断中有广泛应用，如荧光显微镜、荧光染料等。
•荧光成像技术可以帮助医生观察和诊断疾病，如肿瘤、心血管疾病等。
安全标识•荧光材料常用于制作标识和标牌，以增加可视性和警示效果。
•荧光标识在夜间或有限光照条件下能够发出明亮的荧光光芒，提供安全保护和警示提示。
总结荧光作为一种特殊的发光现象，具有广泛的应用领域。
在生物学、化学分析、材料科学、环境监测、医学诊断和安全标识等方面都有重要的作用。
随着科技的发展，对荧光的研究和应用也在不断深入，为各个领域带来了更多的创新和突破。
荧光的概念
荧光的概念
嘿，朋友们！今天咱来聊聊荧光这玩意儿。
你们知道吗，荧光就像是黑夜中的小精灵，在黑暗中闪闪发光，给我们带来惊喜。
你想想看，要是在一个黑漆漆的夜晚，突然看到一些东西发出幽幽的光，那得多有意思啊！
比如说萤火虫，那可是大自然的荧光使者啊！夏天的夜晚，它们在草丛里飞来飞去，一闪一闪的，就像一盏盏小灯笼，多可爱呀！小时候，我总喜欢去捉萤火虫，把它们放在瓶子里，看着那点点荧光，心里别提多高兴了。
这就好像拥有了一个属于自己的小星空。
还有那些荧光棒，在演唱会上那可是大显身手啊！大家拿着荧光棒挥舞，整个场地都被点亮了，那场面，简直嗨翻了天！那一道道荧光，不就像是我们的热情在燃烧吗？
荧光可不只是好玩好看哦，它在很多地方都有大用处呢！在一些安全标识上，就会用到荧光材料，这样在黑暗中也能让人清楚地看到，避免危险发生。
这多重要啊，就好像是给我们的安全上了一道保险。
再想想那些荧光颜料，艺术家们用它们能创造出多么奇妙的作品啊！在黑暗中，那些用荧光颜料画出来的画就像活过来了一样，是不是很神奇？
生活中要是多一些荧光，是不是感觉会更有意思呢？晚上走在路上，路边的标识是荧光的，不用开手电筒也能看得清路。
要是家里的一些小物件也能发荧光，那找东西可就方便多了，不用摸黑瞎找啦！
荧光啊，就像是生活中的一个小惊喜，随时都能给我们带来快乐和方便。
它虽然不是那种光芒万丈的亮，但却有着自己独特的魅力。
它不需要多耀眼，只要在那里，默默地发着光，就能让我们感受到它的存在。
所以说呀，荧光这东西可真是个宝啊！它让我们的生活变得更加丰富多彩，更加有趣。
我们可不要小瞧了这小小的荧光哦，它说不定能在什么时候给我们带来大大的惊喜呢！大家说是不是呀！。
荧光的简介及其应用
荧光的简介及其应用【摘要】日常生活中荧光类物品随处可见，在自然科学中它也同样做出了巨大的贡献。
荧光吸收了外界能量后，能发出不同波长和不同强度的光，一旦外界能源消失，则荧光也随之消失。
可用荧光这一特性进行荧光分析检测以及生物探针的标记。
【关键词】荧光荧光分析 DNA 蛋白质【正文】日常生活中荧光类物品随处可见，荧光笔，荧光粉，荧光板，荧光灯，这些日常用品在为我们带来便捷的同时也给予了我们美的享受。
荧光究竟是什么物质，它在自然科学中又有哪些应用呢，下面让我们对荧光进行更深入的探究。
一荧光的简介自然界存在这样一类物质，当吸收了外界能量后，能发出不同波长和不同强度的光，一旦外界能源消失，则这种光也随之消失，这种光称为荧光。
外界提供能量的方式有多种，如光照、加热、化学反应及生物代谢等。
根据激发光的波长不同，荧光可分为Ｘ射线荧光、紫外可见荧光和红外荧光等。
根据发射荧光的粒子不同，荧光又可分为分子荧光和原子荧光，由于不同的物质其组成与结构不同，所吸收光的波长和发射光的波长也不同。
二荧光的产生物质分子的能级包括一系列电子能级、振动能级和转动能级。
分子吸收能量后，从基态最低振动能级跃迁到第一电子激发态或更高电子激发态的不同振动能级（这一过程速度很快，大约10-15 s），成为激发单重态分子。
激发态分子不稳定，可以通过以下几种途径释放能量返回基态：一振动驰豫这一过程只能发生在同一电子能级内，即分子通过碰撞以热的形式损失部分能量，从较高振动能级下降到该电子能级的最低振动能级上。
由于这一部分能量以热的形式释放，而不是以光辐射形式发出，故振动驰豫属于无辐射跃迁。
二．内转换即激发态分子将多余的能量转变为热能，从较高电子能级降至较低的电子能级。
内转换也属于无辐射跃迁。
三．荧光较高激发态分子经无辐射跃迁降至第一电子激发单重态的最低振动能级后，仍不稳定，停留较短时间后（约10-8 s，称作荧光寿命），以光辐射形式放出能量，回到基态各振动能级，这时所发射的光称为荧光。
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物 理 化 学 常 数 仪 器 装 置 及 作 用
化合物
摩尔质量
性 状
b.p(oC)
m.p(oБайду номын сангаас)
d
n
溶解度
I F
I
操 作 中 应 注 意 的 问 题 预 习 要 求 讲 解 要 点 实 验 内 容 数 据 处 理 参 考 文 献 思 考 题 对 本 实 验 的 建 议
1. 荧光分析的灵敏度很高，受环境因素影响较大，有时荧光强度 F 会有一些波动，若不存在光分 解和光聚合的情况下属正常。 2. 一定要在统一的实验条件下进行定量测定，如入射光强、狭缝、温度、酸度等，否则结果不具 可比性。 3. 合理选择 λem 和 λex，以使测定的灵敏度和选择性最好。 1. 了解荧光产生的机理。 2. 仪器的结构。 1. 2. 3. 4. 5. 荧光产生的机理。 荧光产生的条件。 与吸收光谱比较的优、缺点，适用范围。 检测方式与 UV-Vis 的不同，为什么灵敏度要好于吸收光谱法。 生产和生活中常见的荧光现象。
1．用 VB2 标准试剂配制标准系列溶液。 2．激发光谱和发射光谱的测绘 调整合适的仪器灵敏度，用标准系列中第三份溶液测绘 VB2 标准溶液激发光谱和发射光谱。λex=365nm， λem=527nm。 3．λem=527nm 处，测定标准系列溶液，制得 VB2 的工作曲线。
1．未知试样的测定，根据待测液的荧光强度，从标准曲线上求得其浓度。 2. 计算药片中 VB2 的含量，用 mg/片表示。
武汉大学编《仪器分析》
1. 在直角方向检测得到的是物质的发光强度，不包含光源的干扰，且在暗背景下检测亮信号，因 此灵敏度很高。 2. 以激发光谱中 F 最大处的 λex 作为激发波长，可以得到最大荧光发射强度。
CH2 CH3 N N H CHOH CHOH CHOH CH2OH N NH O O
实 验 原 理 及 反 应
CH3
在食物中维生素 B2 一般都以磷酸核黄素和二核苷酸腺嘌呤黄素的结合形式存在，而且它们都是或紧或 松地和蛋白质结合着，若用酸和酶水解都可以使其成为游离的维生素 B2。VB2 在 430～440 nm 波长光的照 射下，发出绿色荧光，其峰值波长为 535 nm。VB2 的荧光在 pH＝6～7 时最强，在 pH＝11 时消失。 下图为 VB2 激发光谱及荧光光谱示意图。
基础化学实验准备实验卡
实验名称
年级-专业 目 的 和 要 求 2004 级 化学 计划学时
荧光光度分析法测定维生素 B2 3～4
日 期 2006.04.01 准备教师 何 疆
1．学习和掌握荧光光度分析法测定 VB2 的基本原理和方法。 2．熟悉荧光分光光度计的结构及使用方法。 经紫外光或波长较短的可见光照射后，一些物质会发射出比入射光波长更长的辐射，称为荧光。以测量 荧光的强度和波长为基础的分析方法叫做荧光光度分析法。 对同一物质而言，若 alc<<0.05，即对很稀的溶液，荧光强度 F 与该物质的浓度 c 有以下的关系 F ＝2.3ΦF I0abc 式中：ΦF -荧光量子效率；Io -入射光强度；a-荧光分子的吸收系数；b-试液的吸收光程。 Io 和 I 不变时 F ＝ Kc 维生素 B2 是桔黄色无臭的针状结晶，又叫核黄素。易溶于水而不溶于乙醇等有机溶剂，在中性或酸性 溶液中稳定，光照易分解，对热稳定。其结构式为：