鸭子白细胞介素2IL-2酶联免疫分析

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鸡禽流感2型AIV2酶联免疫分析ELISA

鸡禽流感2型（AIV-2）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于检测鸡血清，血浆及相关液体样本中禽流感2型（AIV-2）水平。

实验原理：本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫法（ELISA）测定标本中鸡禽流感2型（AIV-2）。

用纯化的鸡禽流感2型（AIV-2）抗体包被微孔板，制成固相抗体，可与样品中禽流感2型（AIV-2）相结合，经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后再与HRP标记的禽流感2型（AIV-2）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），与CUTOFF值相比较，从而判定标本中鸡禽流感2型（AIV-2）的存在与否。

1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。

离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清。

检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。

通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。

离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清。

保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

5. 组织标本：切割标本后，称取重量。

加入一定量的PBS，PH7.4。

用液氮迅速冷冻保存备用。

标本融化后仍然保持2-8℃的温度。

人Human白细胞介素-2IL-2ELISA检测试剂盒使用方法

人(Human) 白细胞介素-2（IL-2）ELISA 检测试剂盒使用方法用途：人IL-2 ELISA试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、缓冲液中细胞上清液及各种体液中的IL-2 。

本试剂盒可以检测天然和重组的IL-2 。

本试剂盒专用于科研、而非用于临床诊断。

试验原理：人IL-2 试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知IL-2 浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。

先将IL-2 和生物素标记的抗体同时温育。

洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。

再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。

产生颜色。

颜色的深浅和样品中IL-2 的浓度呈比例关系。

试剂盒内容及其配制自备材料1．蒸馏水。

2．加样器：5ul、10 ul、50 ul、100 ul、200、500 u、1000lul。

3．振荡器及磁力搅拌器等。

安全性1．此试剂盒的人血制品中的HbsAg、和抗HIV为阴性，但没有实验室可完全保证此血制品不会传染肝炎、AIDS或其它传染病，依据当地的安全条例处理本试剂盒里的成份及血清和血浆等样品。

2．避免直接接触终止液和底物A、B。

一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。

3．实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。

4．不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

操作注意事项1．试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。

稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

2．实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

3．不用的其它试剂应包装好或盖好。

不同批号的试剂不要混用。

保质前使用。

4．使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

5．使用干净的塑料容器配置洗涤液。

使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

6．洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

7．底物A应挥发，避免长时间打开盖子。

底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。

细胞因子九项检测科普

细胞因子九项检测科普什么是细胞因子细胞因子是一类介导细胞间相互作用的蛋白质，它们可以作为信号分子在细胞和细胞之间进行通讯。

细胞因子在机体的免疫反应、炎症反应以及许多其他生理过程中发挥重要的调节作用。

不同类型的细胞产生不同种类的细胞因子，比如肿瘤坏死因子、白细胞介素等。

为什么需要进行细胞因子九项检测细胞因子九项检测是通过检测某些关键细胞因子的水平，来评估机体的免疫状态和炎症程度的一种检测方法。

这些细胞因子的水平变化与很多疾病的发生和发展密切相关，包括慢性炎症性疾病、自身免疫性疾病、肿瘤等。

进行细胞因子九项检测可以帮助临床医生更好地了解疾病的病理过程、判断疾病的严重程度以及制定更合理的治疗方案。

此外，对于某些疾病的预后判断和效果评价也具有一定的参考价值。

细胞因子九项检测包括哪些指标细胞因子九项检测通常包括以下几个重要的指标：1.白细胞介素-2（IL-2）：它是一种重要的T细胞生长因子，对免疫系统的调节具有重要作用。

2.白细胞介素-4（IL-4）：它是一种重要的T细胞细胞因子，能够促进B细胞的增殖和抗体产生。

3.白细胞介素-6（IL-6）：它是一种重要的炎症介质，能够促进炎症反应的发生和发展。

4.白细胞介素-8（IL-8）：它是一种重要的趋化因子，在炎症反应中发挥重要作用。

5.白细胞介素-10（IL-10）：它是一种重要的免疫抑制因子，能够抑制炎症反应和免疫系统的活性。

6.肿瘤坏死因子-α（TNF-α）：它是一种重要的炎症介质，参与许多炎症性疾病的发生和发展。

7.干扰素-γ（IFN-γ）：它是一种重要的免疫调节因子，能够促进宿主免疫系统的抗病毒和抗肿瘤反应。

8.变态反应因子（IgE）：它是一种抗体，参与机体的过敏反应。

9.血清白细胞介素-17（sIL-17）：它是一种炎症介质，与自身免疫性疾病的发生和发展密切相关。

细胞因子九项检测的应用领域细胞因子九项检测在许多疾病的诊断和治疗中具有重要的应用价值。

以下是一些常见领域：1. 免疫性疾病细胞因子九项检测可以帮助医生评估免疫性疾病的炎症程度和免疫状态，例如类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮等。

慢性精神分裂症患者血清IL-2、IL-4和IL-10水平及与精神症状的相关性

慢性精神分裂症患者血清IL-2、IL-4和IL-10水平及与精神症状的相关性罗雅艳;何红波;张杰;周燕玲;范妮【摘要】目的探讨慢性精神分裂症患者血清白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素4 (IL-4)和白细胞介素10(IL-10)的水平变化及其与精神症状的相关性.方法于2012年12月-2013年10月在广州医科大学附属脑科医院采用抽签法选取符合《国际疾病分类(第10版)》(ICD-10)诊断标准的40例慢性精神分裂症住院患者为患者组,同期通过广告招募64例健康对照者为对照组.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测两组血清IL-2、IL-4和IL-10水平,采用阳性和阴性症状量表(PANSS)评估患者组的精神症状.结果患者组血清IL-2水平高于对照组[(25.85±6.06)pg/mLvs.(12.63±1.90)pg/mL],差异有统计学意义(P<0.05);两组血清IL-4 水平[(7.36±1.54)pg/mL vs.(8.76±3.13)pg/mL]和IL-10水平[(4.29±0.87)pg/mL vs.(3.76±1.17)pg/mL]比较,差异均无统计学意义(P均>0.05);患者组血清IL-2、IL-4和IL-10水平与病程、住院时长、抗精神病药治疗剂量及PANSS评分均无线性相关(P均>0.05).结论慢性精神分裂症患者的血清IL-2水平高于健康对照者,IL-4和IL-10水平与对照者比较未见差异;IL-2、IL-4和IL-10水平与患者的精神症状未见线性相关性.%Objective To assess serum concentrations of Interleukin-2 (IL-2), IL-4 and IL-10 in chronic schizophrenia patients and to analyze the correlations between the serum cytokine levels with the patients' psychiatric symptoms.Methods Random sampling method was applied to choose 40 chronic schizophrenia inpatients diagnosed according to International Classification of Diseases-tenth edition(ICD-10) diagnostic criteria at the Affiliated Brain Hospital of Guangzhou Medical Universityfrom December 2012 to October 2013 as patient group.64 healthy control subjects were recruited through advertisements at the Affiliated Brain Hospital of Guangzhou Medical University during the same period as control group.Enzyme-linked Immune Sorbent Assay (ELISA) was applied to detect serum IL-2, IL-4 and IL-10 concentrations in control group and patient group.The Positive and Negative Syndrome Scale (PANSS) was applied to estimate the psychotic symptoms of schizophrenia patients.Results Serum IL-2 concentrations were significantly higher in schizophrenia patients (25.85±6.06) pg/mL than controls (12.63±1.90)pg/mL (P<0.05), while IL-4 (7.36±1.54) pg/mL and IL-10 (4.29±0.87) pg/mL concentrations in patients were not significantly different from IL-4(8.76±3.13) pg/mL and IL-10 (3.76±1.17) pg/mL concentrations in controls (P>0.05).Serum IL-2, IL-4 and IL-10 concentrations showed no significant associations with duration of illness, duration of admission, antipsychotic dose, PANSS scores in patients (P>0.05).Conclusion IL-2 levels are increased in chronic schizophrenia patients, while IL-4 and IL-10 levels in chronic schizophrenia patients are not significantly different from those in controls.IL-2, IL-4 and IL-10 levels are not associated with psychiatric symptoms.【期刊名称】《四川精神卫生》【年(卷),期】2017(030)002【总页数】5页(P121-125)【关键词】精神分裂症;细胞因子;白细胞介素2;白细胞介素4;白细胞介素10【作者】罗雅艳;何红波;张杰;周燕玲;范妮【作者单位】广州医科大学附属脑科医院,广州市惠爱医院,广东广州 510370;广州医科大学附属脑科医院,广州市惠爱医院,广东广州 510370;广州医科大学附属脑科医院,广州市惠爱医院,广东广州 510370;广州医科大学附属脑科医院,广州市惠爱医院,广东广州 510370;广州医科大学附属脑科医院,广州市惠爱医院,广东广州510370【正文语种】中文【中图分类】R749.3精神分裂症(Schizophrenia)是一种严重的慢性精神疾病，影响全球约1%的人口[1]。

鸭白细胞介素-2基因克隆、原核表达及生物学活性检测

第２９卷第４期２００８年ｌＯ月
华南农业大学学报
ＪｕｎｌｏｏｔｉａＡｇｉｕｔｒｌＵｎｖｒｉｏｒａｆＳｕｈＣｈｎｒｌｕａｉｅｓｔｃｙ
Ｖｏ．９．Ｎ．１２ｏ４
０ｃ．２０ｔ０８
鸭白细胞介素一因克隆、核表达及２基原生物学活性检测
胞增殖的活性．
关键词：；白细胞介素一；因克隆；原核表达；鸭２基生物学活性
中图分类号：５１Ｑ８Ｑ１：７６文献标识码：Ａ文章编号：０ — １Ｘ（０８０ —０３０１１４１２０）４０８ —４０
ＣｌｎｉｎｄＰｒｋａｙｔｃＥｘｒｓｉｎｆＤｕｃｎｔｒｅｉ－ｅｅｏｎｇａｏｒｏｉｐｅｓｏｏｋＩｅｌｕｋｎ－Ｇｎ２
ａｔｃｉｎｏｔｏｃｉｉｙｎｄＤｅｅｔｏｆＩｓＢｉａｔｖｔ
ＺＨＡＮＧｎＸｉ，ＣＵＩＭｉ，ＦＡＮＧｎｇｙｎｇｎＨｏ — ｉ，ＨＥｎ —ｈｎ，ＬＵＯｎｌＤｏｇｓｅｇＭａ —ｉｎ
（ｏｅｅｏｅｒａｙＭｅｉｎＳｕｈＣｉａＡｒｕｔａＵｉｒｔ，ｕｎｚｏ６２１ｌｇｆｔｉｒｄｃｅ，ｏｔｈｇｃｕｌｎｖｓｙＧａｇｈｕ１４；ＣｌＶｅｎｉｎｉｌｒｅｉ５０
张欣崔敏房红莹，，，贺东生，罗满林
（１华南农业大学兽医学院，东广州５０４；建农林大学动物科学学院，广１６２２福福建福州３００）５０２摘要：根据Ｇｎａｋ发表的鸭白细胞介素－（Ｌ２基因序列设计并合成了特异性引物，ｅＢｎ２Ｉ－）以经ＣｎｏＡ诱导的广州白鸭外周血淋巴细胞提取的总ＲＡ为模板，Ｒ —ＣＮ用ＴＰＲ方法扩增出长度为３０ｂ６ｐ的目的基因片段．将该基因克隆到ｐ１一ｉｐｅｅｔ上，ＭＤ８Ｔｓｌｖｃｏｍｒ经酶切、ＣＰＲ鉴定及序列测完整克隆．构建的表达质粒ｐＴＩ一ＢｍＨ、ｈ双酶切鉴定构建正确；ＳＳＰＧＥ — ２经ａＩＸｏＩＬ经Ｄ —ＡＥ分析，在约３０出现新的蛋白条带，３０处０Ｗｅｅｎｂｏｉｇｓｒ—ｌｔ分析表明，ｔｔｎ融合蛋白能够被抗Ｈｓｉ单克隆抗体识别，体外活性检测表明，重组蛋白具有促进淋巴细

鸡白细胞介素2IL

鸡白细胞介素2（IL-2）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定鸡血清，血浆及相关液体样本中白细胞介素2（IL-2）的含量。

实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鸡白细胞介素-2（IL-2））水平。

用纯化的鸡白细胞介素-2（IL-2）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入鸡白细胞介素-2（IL-2），再与HRP标记的IL-2抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的鸡白细胞介素-2（IL-2）呈正相关。

用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中鸡白细胞介素-2（IL-2）浓度。

试剂盒组成：样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。

离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清。

检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。

通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。

离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清。

保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

5. 组织标本：切割标本后，称取重量。

加入一定量的PBS，PH7.4。

用液氮迅速冷冻保存备用。

人白细胞介素2(IL-2)说明书

人白细胞介素2（IL-2）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。

检测范围：96T40pg/ml-1200pg/ml使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中白细胞介素2（IL-2）含量。

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白细胞介素2（IL-2）水平。

用纯化的人白细胞介素2（IL-2）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素2（IL-2），再与HRP标记的白细胞介素2（IL-2）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的白细胞介素2（IL-2）呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人白细胞介素2（IL-2）浓度。

1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。

在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。

加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7.温育：操作同3。

8.洗涤：操作同5。

9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

银屑病患者IL-2、sIL-2R、IL-6和TNF-α的表达

银屑病患者ＩＬ－2、ｓＩＬ－2Ｒ、ＩＬ－6和ＴＮＦ－α的表达目的：探讨银屑病患者外周血单个核细胞（PBMC）分泌白细胞介素2（IL-2）、可溶性白细胞介素2受体（sIL-2R）、白细胞介素6（IL-6）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）的水平及意义。

方法：选取32例银屑病患者和15例正常人，分别作为病例组和对照组，分离培养其外周血PBMC，并用植物血凝素（PHA）诱导，酶联免疫吸附法（ELISA）检测诱导前后PBMC分泌IL-2、sIL-2R、IL-6和TNF-α的水平。

结果：①病例组PBMC培养上清液中IL-2水平在PHA刺激前低于对照组（P＜0.05），刺激后则明显低于对照组（P＜0.01）；②sIL-2R水平在刺激前与对照组间无显著性差异（P>0.05），刺激后明显高于对照组（P＜0.01）；③TNF水平在刺激前高于对照组（P＜0.05），刺激后显著高于对照组（P＜0.01）；④IL-6水平在刺激前明显高于对照组（P＜0.05），刺激后虽稍高于对照组，但无统计学意义（P>0.05）；⑤sIL-2R和TNF-α的水平与银屑病面积和严重程度指数（PASI）均呈显著正相关（r分别为0.53、0.68），IL-2的水平与PASI呈显著负相关（r=-0.46，P＜0.05）；⑥IL-6的水平与PASI不相关（r=0.30，P>0.05）。

结论：IL-2、sIL-2R、IL-6和TNF-α在银屑病的发病过程中发挥一定的作用。

[Abstract] Objective: To investigate the levels of IL-2、sIL-2R、IL-6 and TNF-α secreted from peripheral blood monouclear cells (PBMC) in the patients with psoriasis, and approach their significances. Methods: Selected 32 psoriasis patients as psoriasis group and 15 normal person as control, whose PBMC were cultured and induced by polyhydroxyalkanoate (PHA) in vitro. The levels of IL-2, sIL-2R, IL-6 and TNF-α were measured with sandwich ELISA in medium. Results: ①The spontaneous level of IL-2 in medium of psoriasis group was lower than that of the control (P＜0.05), while it was significantly lower than that of the control (P＜0.01)after being induced by PHA. ②The spontaneous level of sIL-2R of psoriasis group had no difference compared with that of the control (P>0.05), while the induced level of sIL-2R in psoriasis group was significantly higher than that of the control (P ＜0.01). ③The spontaneous level of TNF-α in psoriasis group was higher than that of the control (P＜0.05), and the induced level of TNF-α in psoriasis group became significantly higher than that of the control (P＜0.01). ④The spontaneous levels of IL-6 in psoriasis group was significantly higher than that of the control (P＜0.05), the induced level of IL-6 in psoriasis group was higher than that of the control , but there was no statistic significance(P>0.05). ⑤The analysis of correlation showed that the levels of sIL-2R (r=0.53)and TNF-α(r=0.68)were both correlated with PASI positively; IL-2 had negative correlation with PASI (r=-0.46, P＜0.05), and IL-6 had no correlation with PASI (r=0.30, P>0.05), Conclusion: IL-2, sIL-2R,IL-6 and TNF-α are all involved in the pathogenesis of psoriasis.[Key words] Psoriasis; Interleukin; Tumor necrosis factor alpha近年来的研究表明免疫功能调节异常在银屑病的发病中起着十分重要的作用，尤其是细胞因子导致的细胞免疫功能异常倍受关注。

临床医学检验技术(师)：临床免疫学检验试题及答案

临床医学检验技术(师)：临床免疫学检验试题及答案1、单选容易导致"钩状效应"引起假阴性的测定方法为（）A.双抗体夹心ELISAB.一步法ELISAC.间接ELISAD.捕获法ELISAE.竞争法E（江南博哥）LISA正确答案：B参考解析：由于一步法中固相抗体和酶结合物抗体与待测抗原的反应速率不同，待测抗原含量过高时，容易与酶结合物抗体反应而未能与固相抗体反应，从而导致"钩状效应"。

竞争法主要用于小分子测定或半抗原测定。

捕获法用于检测IgM类抗体，用于区分感染性疾病的病程。

2、单选抗原纰成和两种抗原相关性分析（）A.酶联免疫斑点试验（ELISPOT）B.双向免疫扩散C.免疫电泳D.单向免疫扩散E.免疫荧光正确答案：B3、单选肿瘤标志物不包括（）A.前列腺酸性磷酸酶B.前列腺特异性抗原C.神经元烯醇化酶D.α岩藻糖苷酶E.脂肪酶正确答案：E4、单选不需要组织配型的器官移植是（）A.干细胞移植B.皮肤移植C.肾移植D.心脏移植E.角膜移植正确答案：E参考解析：角膜组织属于免疫赦免组织，不会发生免疫反应。

移植角膜时不需要组织配型。

5、单选与巨细胞病毒亲合力最高的抗体类别是（）A.IgGB.IgAC.IgMD.IgDE.IgE正确答案：C参考解析：人体感染巨细胞病毒诱导免疫应答，优先产生抗体为IgM类，随着免疫应答不断加强IgG产量增加，含量最高的抗体属于IgG类。

亲合力是指抗体与抗原的结合能力，IgM为5聚体，抗原结合价为10。

因此，与巨细胞病毒亲合力最高的抗体类别是IgM。

6、单选参与急性排斥反应的主要细胞是（）A.CD8+TcB.CD4+ThC.DCD.BE.NK正确答案：A参考解析：急性排斥反应主要原因是细胞免疫应答。

CD8+Tc能直接识别异体MHC分子，是重要的效应细胞。

7、单选与自身免疫性血小板减少性紫癜密切相关的自身抗体是（）A.抗SS-DNAB.抗DS-DNAC.抗TSH受体D.抗变性IgGE.抗血小板正确答案：E参考解析：自身免疫性疾病患者血清中均可检测到高效价自身抗体或自身应答性T细胞。

细胞因子与细胞黏附因子的测定

细胞因子与细胞黏附因子的测定在现代医学和生物学的研究领域中，细胞因子与细胞黏附因子的测定具有至关重要的意义。

细胞因子是一类由免疫细胞和某些非免疫细胞经刺激而合成、分泌的具有广泛生物学活性的小分子蛋白质，而细胞黏附因子则是介导细胞间或细胞与细胞外基质间相互接触和结合的分子。

对它们的准确测定，不仅有助于深入理解生理和病理过程，还为疾病的诊断、治疗及预后评估提供了重要的依据。

细胞因子的种类繁多，包括白细胞介素（IL）、干扰素（IFN）、肿瘤坏死因子（TNF）、集落刺激因子（CSF）等。

这些细胞因子在免疫调节、炎症反应、造血过程、细胞生长和分化等方面发挥着关键作用。

例如，白细胞介素-1（IL-1）能够引起发热和炎症反应，白细胞介素-2（IL-2）则对 T 细胞的增殖和活化起着重要的促进作用。

细胞黏附因子则主要分为整合素家族、选择素家族、免疫球蛋白超家族、钙黏蛋白家族等。

它们参与了细胞的迁移、免疫细胞的识别和活化、炎症反应的发生以及肿瘤的转移等过程。

比如，整合素在细胞与细胞外基质的黏附中起关键作用，而选择素则在白细胞向炎症部位的迁移中发挥重要作用。

那么，如何对这些细胞因子和细胞黏附因子进行测定呢？目前，常用的测定方法主要包括生物学测定法、免疫学测定法和分子生物学测定法。

生物学测定法是基于细胞因子的生物学活性来进行检测的。

例如，通过检测细胞因子对特定细胞的增殖、分化或功能的影响来定量细胞因子的活性。

这种方法的优点是能够反映细胞因子的生物活性，但缺点是操作复杂、耗时较长，且敏感性和特异性相对较低。

免疫学测定法则是利用抗原抗体反应的原理来检测细胞因子。

常见的方法有酶联免疫吸附试验（ELISA）、放射免疫测定（RIA）、免疫荧光测定（IFA）等。

ELISA 是目前应用最为广泛的一种方法，其原理是将细胞因子的抗体包被在固相载体上，然后加入待检样品，使细胞因子与抗体结合，再通过检测与细胞因子结合的酶标记抗体的活性来定量细胞因子的含量。

鹅白细胞介素2IL2ELISA试剂盒使用规范

鹅白细胞介素2（IL-2）ELISA试剂盒使用规范本试剂盒仅供研究使用。

检测范围：96T0.6ng/L - 16ng/L使用目的：本试剂盒用于测定鹅血清、血浆及相关液体样本中白细胞介素2（IL-2）含量。

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鹅白细胞介素2（IL-2）水平。

用纯化的鹅白细胞介素2（IL-2）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素2（IL-2），再与HRP标记的白细胞介素2（IL-2）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的白细胞介素2（IL-2）呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中鹅白细胞介素2（IL-2）浓度。

标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀待测样品孔。

在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。

加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7.温育：操作同3。

8.洗涤：操作同5。

9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

鹅白细胞介素2IL-2ELISA试剂盒使用规范

鹅白细胞介素2（IL-2）ELISA试剂盒使用规范本试剂盒仅供研究使用。

检测范围：96T0.6ng/L - 16ng/L使用目的：本试剂盒用于测定鹅血清、血浆及相关液体样本中白细胞介素2（IL-2）含量。

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鹅白细胞介素2（IL-2）水平。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的白细胞介素2（IL-2）呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中鹅白细胞介素2（IL-2）浓度。

标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀待测样品孔。

在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。

加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7.温育：操作同3。

8.洗涤：操作同5。

银屑病患者IL-2、sIL-2R、IL-6和TNF-α的表达

银屑病患者IL-2、sIL-2R、IL-6和TNF-α的表达陈艳蕾【期刊名称】《中国医药导报》【年(卷),期】2007(004)023【摘要】目的:探讨银屑病患者外周血单个核细胞(PBMC)分泌白细胞介素2(IL-2)、可溶性白细胞介素2受体(sIL-2R)、白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平及意义.方法:选取32例银屑病患者和15例正常人,分别作为病例组和对照组,分离培养其外周血PBMC,并用植物血凝素(PHA)诱导,酶联免疫吸附法(ELISA)检测诱导前后PBMC分泌IL-2、sIL-2R、IL-6和TNF-α的水平.结果:①病例组PBMC培养上清液中IL-2水平在PHA刺激前低于对照组(P＜0.05),刺激后则明显低于对照组(P＜0.01);②sIL-2R水平在刺激前与对照组间无显著性差异(P＞0.05),刺激后明显高于对照组(P＜0.01);③TNF水平在刺激前高于对照组(P＜0.05),刺激后显著高于对照组(P＜0.01);④IL-6水平在刺激前明显高于对照组(P＜0.05),刺激后虽稍高于对照组,但无统计学意义(P＞0.05);⑤sIL-2R和TNF-α的水平与银屑病面积和严重程度指数(PASI)均呈显著正相关(r分别为0.53、0.68),IL-2的水平与PASI呈显著负相关(r=-0.46,P＜0.05);⑥IL-6的水平与PASI不相关(r=0.30,P＞0.05).结论:IL-2、sIL-2R、IL-6和TNF-α在银屑病的发病过程中发挥一定的作用.【总页数】2页(P11-12)【作者】陈艳蕾【作者单位】胜利石油管理局胜利医院皮肤科,山东东营,257055【正文语种】中文【中图分类】R758.4【相关文献】1.银屑病患者外周血T-淋巴细胞亚群和血清IL-2、SIL-2R和TNF-α检测的临床意义 [J], 牟勖东2.斯奇康注射液及迪银片对银屑病患者血清sIL-2R、IL-2、TNF-α的影响 [J], 董玉苓;李青3.银屑病患者IL-2、sIL-2R、IL-6和TNF-α的表达 [J], 陈艳蕾4.银屑病患者Th17细胞相关因子及IL-2、SIL-2R、TNF-α检测的临床意义 [J], 周洋;曹丽华;文晓婷5.脐血输注对妇科恶性肿瘤患者外周血中IL-2、IL-6和sIL-2R的诱导表达和T细胞亚群改变 [J], 潘小玲;彭芝兰;何跃东;刘兴会因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

鸭白细胞介素2(IL-2)克隆表达及生物活性检测的开题报告

鸭白细胞介素2（IL-2）克隆表达及生物活性检测的
开题报告
一、研究背景及意义
白细胞介素2 （IL-2）是一种重要的免疫调节因子，能够促进T细
胞和自然杀伤细胞的增殖和分化，增强细胞免疫反应。

因此，IL-2在临
床上被广泛应用于肿瘤、感染、自身免疫疾病等方面的治疗。

但是，由
于IL-2自身的不稳定性和高度抗原性，从而受到自身免疫应答的影响，
研究人员通过克隆表达技术来获得高纯度的重组IL-2，并进一步研究其
生物学活性、组织染色等方面的性质。

二、研究内容和目的
本研究旨在构建鸭白细胞介素2（IL-2）克隆表达系统，采用质粒转染的方式，将鸭IL-2基因克隆到表达载体中，通过表达、纯化和活性鉴
定等方法，获得高纯度的重组鸭IL-2。

三、研究方法
1.构建鸭IL-2克隆表达质粒
将鸭白细胞中的IL-2基因扩增，通过PCR克隆到表达载体中，包括启动子、启动子元件、选择标记等。

2.质粒转染
将构建好的鸭IL-2克隆表达质粒转染到E.coli BL21（DE3）细胞中，诱导鸭IL-2的表达和积累。

3.纯化
采用亲和层析法和透析法对重组鸭IL-2进行纯化和精制，获得高纯
度的重组蛋白。

4.生物活性检测
采用MTT法或放射性同位素标记法，对重组鸭IL-2的生物学活性进行检测，包括对T细胞和自然杀伤细胞的增殖和分化的影响。

四、预期结果和意义
通过构建鸭白细胞介素2克隆表达系统，成功获得高纯度的重组鸭IL-2，并进一步研究其生物学活性和组织染色等方面的性质，可以为研究鸭免疫系统、疾病治疗等领域提供有益的参考数据和理论支持。

鸡禽流感2型AIV2酶联免疫分析ELISA

鸡禽流感2型（AIV・2）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于检测鸡血清，血浆及相关液体样本中禽流感2型（AIV-2）水平。

实验原理：本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫法（ELISA）测左标本中鸡禽流感2型（AIV-2）o用纯化的鸡禽流感2型（AIV-2）抗体包被微孔板，制成囿相抗体，可与样品中禽流感2型（AIV-2）相结合，经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后再与HRP标记的禽流感2型（AIV-2）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

用酶标仪在450nm波长下测立吸光度（0D值），与CUTOFF值相比较，从而判左标本中鸡禽流感2型（AIV-2）的存在与否。

1.血淸:室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2OOO-3OOO转/分）。

仔细收集上淸，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

2•血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2OOO-3OOO转/分）。

仔细收集上淸，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上淸，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上淸：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。

离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上淸。

检测细胞内的成份时，用PBS （PH7.2-7.4）稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。

通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。

离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上淸。

保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

5. 组织标本：切割标本后，称取重量。

加入一立量的PBS, PH7.4。

用液氮迅速冷冻保存备用。

标本融化后仍然保持2-8C的温度。