Her2／neu基因定量检测方法的建立
以HER2／neu为靶点抗肿瘤治疗研究进展
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人 ＨＥ ／ ｅ Ｒ２ ｎ ｕ基 因定 位 于 ｌ ７号染 色 体 短臂 ， 表达 产物 为分 子 量 ｉ ５ Ｄ ８ ｋ ａ的单链 跨 膜 糖蛋 白， 即
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族 包 括 Ｅ Ｒ （ ＲＩ或 Ｅ ｂ ｉ 、 Ｅ ２ ｎ ｕ（ ｅ ＧＦ ＨＥ ｒＢ ） Ｈ Ｒ ／ ｅ ｎ ｕ
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乳腺癌病人血清HER-2neu检测及其临床意义.
作者：朱美琴，滕小玉，姜文奇，刘冬耕，张东生，周宁宁【摘要】【目的】本研究分析晚期乳腺癌患者血清HER-2/neu的水平与预后的关系，并探讨其临床意义。
【方法】酶联免疫法（ELISA）检测94例晚期乳腺癌患者血清HER-2/neu的浓度，分析血清与组织中HER-2/neu表达的相关性，并分析其与患者预后的关系。
【结果】 94例晚期乳腺癌患者就诊时的血清HER-2/neu浓度为0.34～275.25 ?滋g/L（平均浓度为23.69 ?滋g/L）。
血清HER-2/neu浓度的高低与化疗的有效性、疾病进展时间的长短无关。
晚期乳腺癌患者的血清HER-2/neu浓度与肿瘤组织中HER-2/neu表达强阳性是一致的。
【结论】血清HER-2/neu尚不能确立为独立的预后指标，需要更多的病例进行分析。
【关键词】乳腺肿瘤；血清HER-2/neu；酶联吸附法；预后 Abstract:【Objective】 This study was to analyze the relationship between the serum HER-2/neu protein levels and prognosis in advanced breast cancer patients. 【Methods】 The serum HER-2/neu protein levels of 94 advanced breast cancer patients were detected using ELISA method. The relationship between the protein level and patient prognosis were analyzed retrospectively. Besides, the consistency of expression in serum and tissue was also analyzed. 【Results】 The concentrations of serum HER-2/neu were 0.34 μg/L to 275.25 μg/L (mean 23.69 μg/L). HERe was no correlation between serum HER-2/neu levels and time to progress (TTP). In addition, the level of serum HER-2/neu was concordance with strong expression of HER-2/neu in tumor tissue in advanced breast cancer. 【Conclusion】The clinical utility of serum HER-2/neu as a prognostic indicator has not yet been established and needs more cases to evaluate.Key words: breast neoplasm; serum HER-2/neu; enzyme-linked immunosorbnent assay（ELISA）; prognosis［J SUN Yat-sen Univ(Med Sci), 2007, 28（6）:678-682］乳腺癌已成为女性最常见的恶性肿瘤，也是常见的女性肿瘤死亡原因[1]。
her2检查流程
her2检查流程When it comes to the process of undergoing a HER2 test, it can be quite a daunting experience for many individuals. The test is commonly done to determine the presence of the HER2 gene in breast cancer cells, which can affect the course of treatment and prognosis. For those who have been diagnosed with breast cancer, the HER2 test is a crucial step in their treatment journey.当涉及接受HER2检查的流程时，对许多人来说，这可能是一种令人畏惧的经历。
该检查通常用于确定乳腺癌细胞中是否存在HER2基因，这可能会影响治疗方案和预后。
对于那些被诊断患有乳腺癌的人来说，HER2检查是治疗过程中至关重要的一步。
The process of the HER2 test typically involves a biopsy of the breast tissue, where a small sample of the tumor is removed and sent to a laboratory for analysis. This procedure can cause anxiety and discomfort for many patients, as they wait for the results that will determine their treatment plan. The waiting period can be agonizing, as individuals grapple with the uncertainty of their diagnosis and the potential implications for their health.HER2检查的流程通常涉及对乳腺组织进行活检，即取出肿瘤的小样本并发送到实验室进行分析。
检验科-HER2临床意义简介
HER-2/neu检测的临床价值
检验科黄艳
一、什么是HER-2/neu？
HER-2/neu，简称HER-2，是人类表皮生长因子受体的英文缩写，HER-2蛋白属跨膜受体样蛋白，由细胞外区（配体结合）、跨膜区（传导信号）和细胞内区（激酶活性）组成（如下图）。
二、HER-2检测方法？
1、组织蛋白：免疫组织化学；
2、组织基因：荧光原位杂交；
3、血清蛋白：化学发光法。
三、HER-2增高的后果？
1、促进细胞的生长和增殖----肿瘤发生；
2、抑制细胞凋亡；
3、诱导血管新生；提高细胞运动能力，导致肿瘤浸润和转移。
四、组织HER-2检测的临床意义？
乳腺癌、胃癌：评估患者是否适合接受靶向治疗（曲妥珠单抗）；判断预后及复发。
五、血清HER-2检测的意义及优点？
1、与组织HER-2检测互补，尤其对肿瘤异质所致的组织HER-2检测假阴性结果是很好的补充；
2、取材方便，适合评估疗效，预测复发和转移；
3、乳腺疾病的鉴别诊断。
六、血清HER-2推荐检测策略。
乳腺癌HER-2neu基因检测与Herceptin治疗
乳腺癌HER 22/neu 基因检测与Herceptin 治疗郑绘霞综述 阚 秀审校 作者单位:030001山西医科大学第一医院病理科(郑绘霞),100044北京大学人民医院病理科(阚 秀) 关键词:HER 22/neu 基因;Herceptin ;乳腺癌中图分类号:R737.9 文献标识码:B 文章编号:100125930(2001)022*******研究发现HER 22/neu 基因扩增或过表达的乳腺癌倾向于早期复发且患者生存期缩短,且化疗及三苯氧胺治疗效果不佳,这种基因对乳腺癌患者极为不利。
人们希望能有1种抗癌基因的药物问世,特别是抗HER 22/neu 基因的药物,既具有下调HER 22/neu 基因的作用,又可增强对化疗药物的敏感性,延长患者的生命。
近年Herceptin 的研制成功给乳腺癌治疗带来了希望,开辟了生物学靶向治疗的新时期。
该药已于1998年经美国FDA 批准,正式应用于乳腺癌的治疗中,并取得了明显疗效,令人鼓舞。
现就HER 22/neu 基因的检测及Herceptin 的治疗状况作一综述介绍。
1 HER 22/neu 基因简介neu 基因首先从化学物质刺激诱发的大鼠神经母细胞瘤的DNA 中成功分离,其为表皮生长因子受体家族成员之一。
与neu 相对应的人类基因,根据克隆来源的不同分别称为HER 22(源于cDNA 文库)、c 2erbB 22(源于基因组DNA )和erbB 2相关基因(源于高度扩增的乳腺癌细胞系),习惯上称为HER 22/neu 。
该基因定位于人染色体17q21,编码185kD 的跨膜糖蛋白(p185)。
p185蛋白是由1255个氨基酸组成的酪氨酸激酶受体,在羧基端有自身磷酸化位点,HER 22/neu 基因家族成员还有E GFR 、HER3、HER4[1]。
HER 22/neu 基因是1种原癌基因。
主要在胚胎发育时开始表达,成年后正常组织中可检到少量的HER 22/neu 基因,20%～30%的乳腺癌HER 22/neu 基因扩增或过表达,卵巢癌、肺癌、胃癌、前列腺癌中也可检出,证明其与这些肿瘤的发生也有一定相关性。
血清HER2检测简介 PPT
HER-2 检测方法
组织HER2检测方法
血清HER2检测方法
蛋白胞外段
化学发光法
HER-2 检测方法
大家学习辛苦了，还是要坚持
继续保持安静
组织HER-2 检测的临床意义
乳腺癌
胃癌
评估是否适合接受靶向治疗（曲妥珠单抗） 判断预后及复发
组织HER-2 推荐检测流程
HER-2 检测临床意义
乳腺癌患者分型
肿瘤细胞
HER-2/neu 原癌基因
HER-2/neu mRNA
HER-2/neu 肿瘤蛋白（p185）
促进存活 血管新生
侵袭 转移
HER-2/neu 蛋白结构
胞外段：extracellular domin, ECD，组织蛋白酶酶切后形 成，可通过血清检测。
曲妥珠单抗结合位点 胞内段：tyrosine kinase，细 胞内酪氨酸激酶区域。
血清HER2检测简介
什么是HER-2/neu?
HER-2/neu即人类表皮生长因子受体－2（Human Epidermal growth factor Receptor-2,HER2），属于表皮生长因子受体家族，目前的研究发现 该家族具有HER-1、HER-2、HER-3、HER-4四个成员。
什么是HER-2/neu?
➢ 自上世纪80年代被发现后， 曾被命名为c-erb B2、neu、 p185蛋白等，目前已被正式 命名为HER-2/neu，简称 HER-2 。
➢ 原癌基因，跨膜受体样蛋白 ➢ 具有酷氨酸激酶样活性 ➢ 无配体，通过与其它蛋白相
互作用促进细胞生长
什么是HER-2/neu?
什么是HER-2/neu?
HER-2 是乳腺癌生存期和复发的独立预测因子
中国胃癌HER2检测-指南解读
FISH，HER2红色信号增多，局部呈 簇状，CEP17信号1-2个， 比值7.2，有扩增（100×） 图片来自SCC
HER2检测-DSISH DSISH：实验室应先进行严格的对比试验和程序优化
严格按照所用全自动染色仪器的优化程序和SOP执行
DSISH HER2黑色信号扩增，呈簇状； CEP17红色信号1-2个；比值15，有 扩增(100×)
图片由 W Hanna提供
固定较差示例：胃癌HER2 IHC检测
固定不完全会导致假阳性检 查结果
胞质染色可能由于使用了不 恰当的固定方式
图片由Targos Molecular Pathology.提供
固定较差示例：HER2 ISH检测
固定不完全导致探针信号较弱或缺失
过度染色会导致持续性自发荧光 探针信号可能较弱或缺失
HER2
IHC 检测报告
检测信息： 抗体信息(克隆号／生产商) 检测方法 手工/半自动 □ 全自动 □ 对照设置情况 3+ □ 0□ 样本量是否足够用于评估 是□ 否□ 具有膜着色的肿瘤细胞的百分比 % 着色的异质性 有□ 无□ 肿瘤细胞膜染色模式 完整□ 基底和侧膜（U-shaped)□ 两者皆有□
IHC 1+和IHC 0 病例，IHC 2+/ISH - 病例视为HER2阴性
胃癌HER2检测应在有能力的实验室进行 检测质量取决于标本的采集、处理过程、IHC/ISH 检测方法和评 判标准的执行
问题一
1. 请问您所在的医院胃癌HER2检测是否属于常规检测项目 ？ A.是 B.否 C.不清楚
实验室质量控制 （2）
实验室内、外部质量控制和SOP的主要要求如下 准备开展GC HER2检测的实验室应选择1～2家已较好开 展该项检测的实验进行25～100例标本的对比验证 或通过参加有关外部质量控制活动来实现，外部质控阳 性和阴性结果的一致性应达到90％以上，每年应进行 1～2次 从事GC HER2检测的实验室技术人员和病理医师应进行 必要的培训和资格考核
高灵敏血清HER2蛋白检测方法的建立及临床应用
回收率为 ８ ６ ． ８ ４ ％ 一１ １ ６ ． ４ ０ ％ 。使 用本方 法检 测临 床标本 ，
结果 显示 Ｈ Ｅ Ｒ ２阳性 的转移性 乳腺 癌 患者血 清 Ｈ Ｅ Ｒ ２含 量
测 。 １ 材料 与 方法
明显高于早期乳腺癌患者及健 康人 的平 均水平 （ Ｐ＜０ ． ０ ５ ） 。 因此 本研究 成 功建 立 了 双抗 体 夹 心 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 法检 测 人 血 清
安徽 医科 大学学报
Ａ ｃ ｔ ａ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ａ ｔ ｉ ｓ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ｉ ｎ ａ ｌ ｉ ｓ Ａ ｎ ｈ ｕ ｉ ２ ０ １ ７ Ｎ ｏ ｖ ； ５ ２ （ １ １ ）
・１ ７ ３ １・
网络 出版 时 间 ： ２ ０ １ ７— ９—８ １ ２ ： ３ ７ 网 络 出版 地 址 ： ｈ ｔ ｔ ｐ ： ／ ／ ｋ ｎ ｓ ． ｃ ｎ ｋ ｉ ． ｎ ｅ ｔ ／ ｋ ｃ ｍ ｓ ／ ｄ ｅ ｔ ａ ｉ ｌ ／ ３ ４ ． １ ０ ６ ５ ． Ｒ ． ２ ０ １ ７ ０ ９ ０ ８ ． １ ２ ３ ７ ． ０ ３ ３ ． ｈ ｔ ｍｌ
活 时能 够影 响肿 瘤 细胞 的增 殖 和 存 活 ， 其 过 表 达 成 为乳 腺 癌 与 胃癌 等 肿 瘤 的一 个 独 立 的 预 后 危 险 因 素 “ Ｊ 。 目前 临 床上 以 Ｈ Ｅ Ｒ ２为靶点 的治疗 药 物 已
２ ０ １ ７—０ ５— ２ ４接 收
等购 自中国科学 院上海细胞库 ； 抗Ｈ Ｅ Ｒ ２单克 隆抗 体 Ｈ ｕ Ａ ２ １与 Ｈｅ ｒ Ａ 购 自合 肥瀚 科迈 博 生物技 术 有 限
因此该研 究 探索 建立 一种 高灵 敏 的人 血清 Ｈ Ｅ Ｒ ２检
克隆进行培养 ， 并分离 、 纯化 抗原作为标准抗原 ， 建立可定 量
抗HER2单抗报告基因法检测抗体依赖性细胞吞噬作用生物学活性方法的建立及应用
抗HER2单抗报告基因法检测抗体依赖性细胞吞噬作用生物学活性方法的建立及应用抗HER2单抗报告基因法检测抗体依赖性细胞吞噬作用生物学活性方法的建立及应用摘要：抗腫瘤单抗疗法是目前治疗HER2阳性乳腺癌的首选方法之一。
抗体依赖性细胞吞噬作用（ADCC）是抗体药物的主要机制之一，通过激活免疫细胞来杀伤肿瘤细胞。
本研究旨在建立一种基于报告基因的方法，用于检测抗HER2单抗的ADCC活性，并在体外和体内模型中评估其生物学活性。
首先，我们选择了几种具有不同HER2表达水平的乳腺癌细胞株作为实验模型，包括HER2正常表达的细胞株（例如SK-BR-3），HER2低表达的细胞株和HER2过表达的细胞株。
然后，我们构建了一个基于报告基因的系统，其中包含一个报告基因（例如荧光素酶）和一个信号轨迹的启动子（例如NF-κB）。
该启动子被激活后，报告基因的表达水平可被测量。
在体外实验中，我们首先对单抗样品进行了质检，确保其纯度和活性。
然后，我们将单抗与不同HER2表达水平的乳腺癌细胞混合，并接种到细胞培养板中。
细胞吞噬作用的活性可以通过测量报告基因的表达水平来评估。
我们发现，抗HER2单抗可诱导免疫细胞对HER2过表达细胞的ADCC活性，而对HER2低表达或正常表达细胞的作用较小。
为了验证该方法在体内的应用价值，我们采用小鼠模型进行了进一步实验。
我们注射了HER2过表达的乳腺癌细胞到小鼠体内，然后给予抗HER2单抗治疗。
在治疗后，我们收集了小鼠的血样，并检测其中的抗体与细胞间的相互作用。
结果显示，抗HER2单抗能够诱导小鼠体内免疫细胞对肿瘤细胞的ADCC活性，从而抑制肿瘤的生长。
综上所述，我们成功地建立了一种基于报告基因的方法，用于检测抗HER2单抗的ADCC活性。
该方法可以在体外和体内对抗体的生物学活性进行评估，并为抗HER2单抗的临床应用提供了重要的参考依据。
这一方法的建立为进一步研究和开发抗体药物提供了新的途径。
关键词：抗体依赖性细胞吞噬作用，HER2阳性乳腺癌，报告基因，荧光素酶，NF-κB，体外实验，体内实验总之，我们成功地建立了一种基于报告基因的方法来评估抗HER2单抗的ADCC活性。
测定表皮生长因子受体和HER2-neu的基因表达及其水平与存活率之间相关性的方法[发明专利]
![测定表皮生长因子受体和HER2-neu的基因表达及其水平与存活率之间相关性的方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/0deaccca5901020206409c17.png)
专利名称：测定表皮生长因子受体和HER2－neu的基因表达及其水平与存活率之间相关性的方法
专利类型：发明专利
发明人：K·D·达南伯格
申请号：CN01822284.6
申请日：20011109
公开号：CN1488002A
公开日：
20040407
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明涉及用于医学，特别是癌症化疗中的预测方法。
本发明目的是提供一种通过检测患者肿瘤细胞中HER2－neu和/或EGFR mRNA的量，并把它与那些基因的预定阈表达水平进行比较，从而评价固定或固定且石蜡包埋的组织中HER2－neu和/或EGFR的表达水平，并预测患者肿瘤对使用受体酪氨酸激酶定向化疗方案进行治疗的可能敏感性的方法。
更特别是，本发明提供寡核苷酸引物对EGFR和HER2－neu，及使用它们分别检测EGFR和HER2－neu mRNA水平的方法。
申请人：应答遗传公司
地址：美国加利福尼亚州
国籍：US
代理机构：中国专利代理(香港)有限公司
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乳腺癌HER2neu基因荧光原位杂交诊断体系的建立及应用的开题报告
乳腺癌HER2neu基因荧光原位杂交诊断体系的建立及应用的开题报告一、研究背景乳腺癌是妇女最常见的恶性肿瘤之一，且其发生率不断增加。
HER2/neu基因在乳腺癌乃至其他肿瘤中起着重要作用，是影响恶性肿瘤生长、进展及预后的重要遗传因素之一。
HER2/neu基因的放大或突变可导致其蛋白表达增加，从而导致肿瘤恶化。
因此，针对HER2/neu基因进行诊断和治疗，成为乳腺癌治疗的重要手段。
目前，荧光原位杂交(FISH)是诊断HER2/neu基因的最可靠、最准确的方法之一。
FISH技术可以快速、直观地检测HER2/neu基因有无异常。
因此，建立一种HER2/neu基因荧光原位杂交诊断体系，对于乳腺癌的诊断和治疗都具有重要的临床意义。
二、研究内容本研究拟建立一种HER2/neu基因荧光原位杂交诊断体系，并对其在乳腺癌诊断中的应用进行探究。
主要研究内容包括以下几个方面：1. 建立HER2/neu基因荧光原位杂交诊断体系。
该体系的建立需要考虑多个因素，比如荧光标记、探针合成、FISH实验条件等。
在初步实验基础上，逐步优化体系，并验证其可靠性和准确性。
2. 对HER2/neu基因荧光原位杂交诊断体系在乳腺癌检测中的应用进行探究。
该研究将从临床样本出发，应用HER2/neu基因荧光原位杂交诊断技术，对乳腺癌患者进行检测。
同时，结合其他临床资料，分析其诊断效果及与其他诊断方法的比较，以确定该技术的临床应用价值。
3. 对HER2/neu基因荧光原位杂交诊断致癌机制的研究。
该研究将通过基因测序和表达分析等方法，深入探究HER2/neu基因荧光原位杂交诊断对人类乳腺癌的诱导效应，以及相关的分子机制。
三、研究意义1. 建立HER2/neu基因荧光原位杂交诊断体系，有助于更准确、更快速地诊断乳腺癌，并能为临床治疗提供准确的分子靶向治疗指导。
2. 对HER2/neu基因荧光原位杂交诊断体系在乳腺癌检测中的应用进行探究，能够确定该技术的临床应用价值，并为后续实现该技术的临床推广提供科学依据。
neu基因荧光原位杂交诊断体系的建立及应用的开题报告
乳腺癌HER2/neu基因荧光原位杂交诊断体系的建立及应用的开题报告1.课题研究背景乳腺癌是一种常见的恶性肿瘤，而HER2/neu基因是乳腺癌中最常见的遗传性异常。
HER2/neu基因的过度表达会导致肿瘤的生长和转移，因此HER2/neu基因在乳腺癌的诊断和治疗中具有重要的意义。
近年来，荧光原位杂交技术已成为一种广泛应用于病理学诊断领域的基因诊断技术，通过将荧光标记并标定至某个位点的核酸探针与待检测样本中的靶标核酸序列特异性杂交，可实现对该序列的定位和表达的定量分析，被广泛地应用于基因组学、生物学、医学等领域。
因此，建立乳腺癌HER2/neu基因荧光原位杂交诊断体系，对于准确、快速、敏感地诊断乳腺癌，指导个性化治疗，具有重要的临床实用价值。
2.课题研究内容本课题旨在建立一种有效的乳腺癌HER2/neu基因荧光原位杂交诊断体系，并探究其应用于乳腺癌诊断的现实应用性。
具体内容如下：第一部分：文献综述和方法优化通过搜集相关文献，综述HER2/neu基因在乳腺癌中的作用，并深入研究荧光原位杂交技术的原理、方法、优缺点以及在乳腺癌诊断中的应用情况。
同时，对荧光原位杂交技术的各个环节进行优化，包括核酸标记、杂交条件、检测方法等，以保证诊断体系的敏感性和准确性。
第二部分：HER2/neu基因荧光原位杂交诊断体系的建立和验证建立HER2/neu基因荧光原位杂交诊断体系，包括核酸探针的制备、样本处理、核酸杂交、荧光显微镜检测等，进而对该诊断体系进行验证和优化调整。
验证过程中，采用大量的乳腺癌组织和非癌组织样本，比较其荧光杂交结果和免疫组化检测结果的一致性，同时评估该诊断体系在诊断乳腺癌中的可靠性、准确性和临床应用性。
第三部分：临床应用将介绍该核酸荧光原位杂交诊断体系成功应用于乳腺癌临床诊疗实践中，比较其结果与传统临床诊断和免疫组化检测在乳腺癌治疗方案确定中的一致性和差异性，并对该诊断体系在乳腺癌治疗中的指导作用进行探究。
HER2neu联合细胞表位的预测筛选、基因克隆、表达及鉴定的开题报告
HER2neu联合细胞表位的预测筛选、基因克隆、表
达及鉴定的开题报告
研究背景：
乳腺癌是世界范围内最常见的女性恶性肿瘤，HER2neu是乳腺癌中一个重要的标记，与该癌的恶性程度、患者的预后密切相关。
因此，HER2neu作为乳腺癌的一个生物标记物被广泛研究。
目前，HER2neu联合细胞表位的预测筛选、基因克隆、表达及鉴定成为研究的热点。
研究目的：
本研究旨在探究HER2neu联合细胞表位的预测筛选、基因克隆、表达及鉴定的技术路线和方法，为乳腺癌的诊断和治疗提供新的思路和方法。
研究方法：
1. 预测筛选：采用计算机辅助设计方法，经过数据库检索，挑选HER2neu联合细胞表位的潜在抗原。
2. 基因克隆：通过PCR扩增方法，从乳腺组织中提取HER2neu基因，将其克隆至表达载体中，得到目的基因的表达载体。
3. 表达和鉴定：使用重组蛋白表达系统，将表达载体转染至ExpiCHO细胞中，通过Western Blot或ELISA等分析手段，鉴定表达的目的蛋白。
同时，使用免疫组织化学法和透射电子显微镜观察蛋白表位与细胞表位的相互作用。
研究意义：
该研究可以为乳腺癌的诊断和治疗提供新的手段和思路。
HER2neu 联合细胞表位潜在抗原的预测筛选可作为开发新的抗肿瘤疫苗的方法；HER2neu基因的克隆和表达可以为基因治疗提供新的途径；表达的目的
蛋白的鉴定可以为开发新型抗肿瘤药物提供参考。
因此，该研究对于提高我国乳腺癌的诊断和治疗水平，具有十分重要的意义。
HER-2neu血清学检测
有效率
HER-2 ECD>15μg/L FISH (+)
76％ 33％ Herceptin+Docetaxel
Esteva FJ, et . J Clin Onclo. 1800-1808(2002)
Daisy Zhang Page 27
63%
HDX/ BM
四、血清HER-2 ECD检测的临床应用
HDX/ BM
FDA批准的HER-2 ECD检测用途
转移性乳腺癌
明确HER-2状态 (IHC 或 FISH)
基线
HER-2/neu < 15 ng/mL
基线 阴性 阳性
建议HER-2靶向治疗
HER-2/neu ≥ 15 ng/mL
定期监测
即使基线HER-2 ECD水平低于 15ng/mL，在随访过程中，HER-2也 有可能转阳，提示复发或转移可能
HER-2/neu mRNA 血清检测 HER-2/neu 原癌基因
HER-2 ECD 胞外区
乳腺癌细胞
IHC/FISH images courtesy of RY Osamura, MD, Tokai University School of Medicine
Daisy Zhang Page 14 HDX/ BM
化学发光免疫分析
血清
血清中脱落的HER-2 ECD
定量结果
Page 15
四、血清HER-2 ECD检测的临床应用
一、判断HER-2状态
二、患者预后判断 三、内分泌治疗或化疗的疗效预测 四、靶向治疗的疗效预测 五、患者随访，预测复发
Daisy Zhang
Page 16
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第 ４期
２０ ０ ８年 ７月
ＪＭｏ ａ ｄ Ｖｏ． ３Ｎｏ ４Ｊ １２０ ｄＬ ｂＭｅ ， １２ ， ． ，ｕ． ０８
１ １
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（． ｐ ｒ ｎ ｆ Ｌ ｂ ｒｔｒ ａ ｎ ｓ ， 口 Ｄｅ ａ ｔ ｔ ａ ｏａｏｙ Ｄｉｇ ｏｉ ｍｅ ｏ ｓ ｂ Ｄｅ ａ ｔ ｎ ｔｏｏｙ Ｓ ａ ｇ ａ ｈ ｎ ｚ ｅ ｇ Ｈ０ｐｔｌＳ ａ ｇ ａ ２ ０ ０ ， ｈｎ ） ． １ｒ ） ｍｅ ｔ Ｐａｈ ｌ ， ｈ ｎ ｈ ｉ ａ ｇ ｈ ｎ ｓｉ ， ｈ ｎ ｈ ｉ ０ ０ ３ Ｃ ｉａ ｆ ｏ ｇ Ｃ ａ
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光 探 针 技 术 ， 建 克 隆 载 体 ｐ Ｍ— — ｒ ／ｅ 构 ＧＥ Ｔ Ｈｅ２ ｎｕ作 为 定 量模 板 ， 过 荧 光 强 度 达 到 一 定 阈值 时 的 循 环 数 来 定 量 起 始模 板 ， 通 以 建 立 实 时 荧光 定 量 ＲＴ Ｐ Ｒ 方 法 ； 且 在 Ｇ ｎＡｍｐ５ ０ —Ｃ 并 ｅｅ ７ ０型 检 测 仪 上 测 定 １ 例 经 免 疫 组 织化 学 法 证 实 Ｈ ｒ／ ｅ Ｏ ｅ ２ｎ ｕ表 达
Ａｎ ｌ ｓ ｆＨｅ ｎ ｕ Ｇｅ ｅｂ ａ ｔ ａ ｉｅＲ — ＣＲ ａｙ ｉ ０ ｒ ／ ｅ ｎ ｖＱｕ ｎ ｉ ｔ Ｔ Ｐ ｓ ２ ｔ ｖ
ＬＵ ｉ ｉ， Ｈｕ — 。 ＧＥＮＧ ｎ －ｉｎ ， Ｕ Ｎ ｉｇ ， ｑ Ｈｏ ｇ ｌ Ｓ ａ Ｊｎ ＸＵ ＨＡＮ ｕ ｎ ｘ ｎ 。 Ｙｉ， Ｈ ａ — ｉｇ
Ａｂ ｔａ ｔ Ｏｂ ｅｔｖ Ｔｏ ｅｔ ｂｉｈ ａｓ ｅ ｉ ｃｆｕ ｒ ｇ ｎｃｑ ａ ｔｔｔｖ ｔ ｏ ｏ ｅｅ ｔｎ ｈ ｘ ｒｓ ｉｎ ｏ ｒ ／ ｅ ｅ ｅ ｓｒ ｃ ｊ ｃｉｅ ｓａ ｌ ｐ ｃｆ ｌｏ ｏ ｅ ｉ ｕ ｎ ｉ ｉｅｍｅ ｈ ｄｆ ｒｄ ｔｃｉｇ ｔｅｅ ｐ ｅ ｓｏ ｆ ｓ ｉ ａ Ｈｅ ２ ｎ ｕ ｇ ｎ
Ｈｅ ２ ｎ ｕ基 因表 达 水 平 ， 进 一 步 应 用 于乳 腺 癌 预 后 判 断及 术后 治 疗 方 案 的选 择 奠 定 了基 础 。 ｒ／ ｅ 为
关 键 词 ： ｒ／ ｅ ； 转 录聚合 酶链 反应 ； Ｈｅ２ ｎ ｕ 逆 乳腺 癌 中图 分类 号 ： ３ ． ３ Ｒ７ ７ ９ 文 献标 志码 ： 文章编 号 ： ６ １７ １ （０ ８ ０ — １ — ４ Ｒ７ ｏ ４ ； ３ ． Ａ １ ７ —４ ４ ２ ０ ） ４０ １０
ｍ ｅ ａ ｅ ｃ ａ ｎ ｒ ａ ｔｏ （ ｒ ｓ ｈ ｉ ｅ ｃ ｉ ｎ ＲＴ— Ｒ） ｓ ｓ ｔｕ ｂ ｓ ｄ ｏ ｌ ｏ ｅ ｃ ｎ ｑ ａ ｔ ｏ ｏ ｏ ｙ Ｉ ｈｓ ｍ ｅ ｈ ｄ。 ｒ ｋ ｒ ｏ ｉ ｅ — ＰＣ ｗａ ｅ ｐ， ａ ｅ ｎ ｆ ｒ ｓ ｅ ｔＴａ Ｍ ｎ ｍｅ ｈ ｄ ｌ ｇ ． ｎ ｔ ｉ ｕ ｔ ｏ ａｐ ｏ ａｙ ｔ ｘ ｃ
（ 上海长 征 医 院
ａ 实验 诊 断科 ； ． ． ｂ 病理 科 ， 上海
２００ ） ０ ０ ３
摘 要 ： 目的 建 立人 Ｈｅ２ ｎ ｕ基 因 ｍＲ ｒ／ ｅ ＮＡ 荧 光 定 量 检 测 方 法 ， 价 该 方 法 的 准确 性 及 稳 定性 。方 法 基 于 Ｔ ｑ ｎ荧 评 ａ Ｍａ
卅 的 乳腺 癌 组 织 标 本 ， 时对 最 大值 及 最 小值 重 复 测 量 。结 果 同 Ｈｅ ２ ｎ ｕ动 态检 测 范 围 为 １ 。 １ 贝／ ｇ Ｒ ｒ／ｅ Ｏ～ Ｏ 拷 ＮＡ（≥ Ｏ ｒ ．
９６ ， ９ ） 内参 ａｔ ｃｉ 动 态检 测 范 围 为 １。 １ 贝／ ｇＲＮＡ （＞ ０ ９ ８ 。 ０例 检 测 癌 组 织的 Ｈｅ２ ｎｕ表 达 范 围为 ６ ６ ｎ的 Ｏ～ Ｏ 拷 ｒ ，９ ）１ ｒ ／ｅ ．×
ｐ ｅ ｓｎ ｅ ｔｒｐ ｒ ｓｉ ｇｖ ｃｏ ＧＥＭ — Ｈｅ ２ ｎ ｕｗａ ｏ ｓ ｒｃ ｅ ｓａｓａ ｄ ｒ ｌｓ ｄ． Ｔ— ｒ ／ ｅ ｓｃ ｎ ｔｕ ｔｄａ ｔ ｎ ａ ｄｐａ ｍｉ ＲＮＡ ｕ ｎ ｉｃ ｔ ｎｗａ ａ ｅ ｎｔ ｅｔ ｒ ｓ ｏｄ ｑ ａ ｔｆ ａｉ ｓｂ ｓ ｄｏ ｈ ｈ ｅ ｈ ｌ ｉ ｏ ｃ ｃｅ Ｃ ） ａｕ ｓｗｈ ｎｕ ｉｇ Ｇｅ ｅ ｙ ｌ（ ｔ ｖ ｌｅ ｅ ｓｎ ｎ Ａｍｐ ５ ０ ｅ ｕ ｎ ｅＤｅ ｅ ｔ ｎＳ ｓｅ ｏ ｅ ａ ｎ ｈ ｐ ｃｆｃｅ ｐ ｅ ｓｏ ｆＨｅ ２ ｎ ｕ ｉ ７ ０Ｓ ｑ ｅ ｃ ｔ ｃｉ ｙ ｔ ｍｓｔ ｘ ｍｉ ｅｔ ｅｓ ｅ ｉｉ ｘ ｒｓ ｉｎｏ ｒ ／ ｅ ｎ ｏ １ ｒａ ｔｃ ｎ ｅ ｐ ｃｍｅ ｏ ｆｒ ｄＨｅ ２ ｎ ｕ 卅 ｂ ０ ｂ ｅ ｓ ａ ｃ ｒｓ ｅ ｉ ｎｃ ｎｉｍｅ ｒ ／ ｅ ｙｉ ｕ ｏ ｉｔ ｃ ｅ ｃ ｌ ｔ ｏ ． ｓ ｌ Ｔｈ ｙ ａ ｉ ｒｎ ｅｏ ｈ ｓ ｍｍ ｎ ｈｓｏ ｈ ｍｉａ ｍｅｈ ｄ Ｒｅ ｕ ｔ ｓ ｅｄ ｎ ｍ ｃ ａ ｇ ｆ ｅａ— ｔ ｓｙ ｗａ ０ ～ １ ｃ ｐ ／ ｇ ｍＲＮＡ ｎ ｈ ｔｏ ｎ ｏ ｅ ｏ ｓｓａ ｄ ｒ ￣ｗａ ０ ～ １ ｏ ｙ ￣ ． ｎ １ ｒａ ｔｃ ｎ ｅ ｐ ｃｍｅ ． ａ ｓ １ ０ ｏ ｙ ￣ ａ ｄ ｔ ａ ｆｅ ｄ ｇ ｎ ｕ ｔｎ ａ ｄ ｓ１ ０ｃ ｐ ／ ｇ Ｉ ０ｂ ｅ ｓ ａ ｃｒｓ ｅｉ ｎ ｔ ｅＨｅ ２ ｎ ｕ ｅ ｐ ｅ ｓｏ ａ ｇ ｓｆｏ ６ ６ １ ４ ７× １ ｏ ｙ ￣ ｎ ｈ ｅ ｅ ｔｄ ｍｅ ｓ ｒ ｄｖ ｌｅ ｆｔ ｅｍａ ｉ ｍ ｎ ｈ ｒ ／ ｅ ｘ ｒｓｉ ｎｒ ｎ ｅ ｒ ｍ ． × ０～ ． ０ ｃ ｐ ／ ｇ ａ ｄ ｔ ｅｒｐ ａｅ ａ ｕ ｅ ａｕ ｓｏ ｈ ｘｍｕ ａ ｄ ｍｉｉ ｍ ａｕ ｒ （ ． ５士 ０ ５ ） １ ｏ ｙ ￣ ｎ （ ． ６士 ０ ７ ） １ ｃ ｐ ／ ｇ，ｒ ｓ ｅ ｔ ｅｙ Ｃｏ ｃｕ ｉｎ Ａｎ ｌｓｓｏ ｎｍｕ ｖ ｌｅｗｅ ｅ ４ ６ ． ５ × ０ ｃ ｐ ／ ｇａ ｄ ７ ３ ．５ × ０ ｏｙ￣ ｅ ｐ ｃｉ ｌ． ｎ ｌｓｏ ｖ ａｙ ｉ ｆ Ｈｅ ２ ｎ ｕｇ ｎ ｙｑ ａ ｔｔｔｖ ｒ ／ ｅ ｅ ｅｂ ｕ ｎ ｉ ｉｅＲＴ— ＣＲ ｃｕ ａｅａ ｄｓａ ｉ ｉｈ ｉ ｔ ｅｆｒｔｓｅ ｏ ｈ ｔ ｏ ｏｂ ｓ ｄｉ ｅｅ ｔ ｇ ａ Ｐ ｉ ａ ｃ ｒ ｔ ｎ ｔｂｌ ｗｈｃ ｓ ｈ ｉｓ ｔ ｐｆｒｔ ｅｍｅｈ ｄ ｔ ｅｕ ｅ ｎｓ ｌｃｉ ｓ ｅ ｎ
１ ４ ７ Ｏ 拷 贝／ ｇ 最 大值 １ Ｏ ～ ． ×１ ， Ｏ次 重 复 测 量 值 为 （ ． ５ ． ５ ×１ 贝／ ｇ 最 小 值 １ ４ ６ 士０ ５ ） ０ 拷 ， Ｏ次重 复 测 量 值 为 （ ， ６ ５ ７ ３ 士０ ７ ）
× １ 拷 贝 ／ ｇ 结 论 成 功 建 立 人 Ｈｅ２ｎ ｕ基 因表 达 Ｒ Ｐ Ｒ 检 测 方 法 ， 有 较 高 的 准 确 性 和 稳 定 性 ， 用 于检 测 Ｏ 。 ｒ／ ｅ Ｔ— Ｃ 具 可