多种缓冲液配方
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1. PBS缓冲液:磷酸氢二钠–磷酸二氢钠缓冲液(0.2)
pH 0.2 0.2
mol/L
Na2HPO
4
(毫升)
0.3 0.3
mol/L
NaH2PO
4
(毫升)
pH
0.2 0.2
mol/L
Na2HPO
4
(毫升)
0.3 0.3 mol/L
NaH2PO4
(毫升)
5.8 8.0 92.0 7.0 61.0 39.0
5.9 10.0 90.0 7.1 67.0 33.0
6.0 12.3 8
7.7 7.2 72.0 2
8.0
6.1 15.0 85.0
7.3 77.0 23.0
6.2 18.5 81.5
7.4 81.0 19.0
6.3 22.5 7
7.5 7.5 84.0 16.0
6.4 26.5 73.5
7.6 87.0 13.0
6.5 31.5 68.5
7.7 89.5 10.5
6.6 3
7.5 62.5 7.8 91.5
8.5
6.7 43.5 56.5
7.9 93.0 7.0
6.8 49.5 51.0 8.0 94.7 5.3
6.9 55.0 45.0
Na2HPO4·2H2O分子量= 178.05,0.2 mol/L溶液为85.61克/升。
Na2HPO4·2H2O分子量= 358.22,0.2 mol/L溶液为71.64克/升。
Na2HPO4·2H2O分子量= 156.03,0.2 mol/L溶液为31.21克/升。
2. 碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液(0.1M)
Ca2+、Mg2+存在时不得使用
pH
0.1MNa2CO3(毫升) 0.1MN2HCO3(毫升) 20℃37℃
9.16 8.77 1 9
9.40 9.12 2 8
9.51 9.40 3 7
9.78 9.50 4 6
9.90 9.72 5 5
10.14 9.90 6 4
10.28 10.08 7 3
10.53 10.28 8 2
10.83 10.57 9 1
Na2CO2·10H2O分子量=286.2;0.1M溶液为28.62克/升。
N2HCO3分子量=84.0;0.1M溶液为8.40克/升。
3. 乙酸–乙酸钠缓冲液(0.2 mol/L)
pH(1 8℃) 0.2 0.2
mol/L
NaAc
(毫升)
0.3 0.3
mol/L
HAc
(毫升)
pH(1
8℃)
0.2 0.2
mol/L
NaAc
(毫升)
0.3 0.3 mol/L
HAc
(毫升)
2.6 0.75 9.25 4.8 5.90 4.10
3.8 1.20 8.80 5.0 7.00 3.00
4.0 1.80 8.20
5.2 7.90 2.10
4.2 2.65 7.35
5.4 8.60 1.40
4.4 3.70 6.30
5.6 9.10 0.90
4.6 4.90
5.10 5.8 9.40 0.60
Na2Ac·3H2O分子量= 136.09,0.2 mol/L溶液为27.22克/升。
4. HEPES缓冲液
(1) 500ml 1 M HEPES, pH = 7.0 Stock solution的配制
119.15 g HEPES 溶解在400ml蒸馏水中,加0.5~1M 的NaOH水溶液调节至少所需pH(HEPES的有效pH 范围是6.8~8.2),然后用蒸馏水定容至500ml,于4摄氏度保存
(2) 加少量盐的HEPES Buffer配方(500ml)
HEPES 6.5g、NaCl 8.0g、Na2HPO4.7H2O 0.198g、用0.5M NaOH 水溶液调节pH 值,最后定容。
(3) 2×HEPES缓冲盐溶液的配制
将1.6g NaCl、0.074g KCl、0.027g Na2HPO4.2H2O、0.2g葡聚糖(glucan or dextran)和1g HEPES溶解在90ml的蒸馏水,用0.5M NaOH调节至所需pH值,再用蒸馏水定容至100ml即可。
(4) 100 x HEPES缓冲液(1mol/L)
取23.8g HEPES溶于90ml双蒸水中,用NaOH调pH至7.5一8.0,然后用水定容至100ml,过滤除菌,分装小瓶(2ml/瓶),4℃或-20℃保存. 100 x 贮存液(l mol/L),使用前取99ml 培养液加入lml贮存液,最终应用浓度仍为10mmol/L。