Purification and Characterization of β-Glucosidase from a Newly Isolated Strain Tolypocladium c
摘要-昆明医科大学
姓名:武静出生年月：1983年1月基本情况：昆明医科大学，基础医学院，讲师，博士，硕导社会职务：无招生专业：生物化学与分子生物学研究领域：多肽和蛋白质的结构与功能研究培养研究生情况：无电子邮件：wujing_205@个人简介：受教育经历：2006.9-2012.1 中国科学院昆明动物研究所，动物模型与人类疾病机理重点实验室，多肽和蛋白质的结构与功能研究，硕士-博士；2001.9-2005.7 云南大学，生命科学学院，生物科学，学士。
研究工作经历2012.7-至今，昆明医科大学，基础医学院生物化学与分子生物学系。
主持或参加科研项目及人才计划项目情况：1. 项目类别：国家基金（地区基金）；项目批准号：81360253；项目名称：蚋唾液腺中免疫调节多肽的结构和功能研究；起止时间：2014.01-2017.12；资助经费：49万；项目状态：在研。
代表性论著期刊论文：1. Wei L, Che HL, Han Y, Lv J, Mu LX, Lv LC, Wu J*, Yang HL. The first anionic defensin from amphibians. Amino Acids. 2015 Mar 24. (共享通讯作者)2. Wei L, Mu L, Wang Y, Bian H, Li J, Lu Y, Han Y, Liu T, Lv J, Feng C, Wu J*, Yang HL. Purification and characterization of a novel defensin from the salivary glands of the black fly, Simulium bannaense. Parasit Vectors. 8(1):71, 2015. (共享通讯作者)3. Wei L, Huang C, Yang H, Li M, Yang J, Qiao X, Mu L, Xiong F, Wu J*, Xu W.A potent anti-inflammatory peptide from the salivary glands of horsefly. Parasit Vectors. 2015; 8:556.（通讯作者）4. Wu J, Mu L, Zhuang L, Han Y, Liu T, Li J, Yang Y, Yang H, Wei L. A cecropin-like antimicrobial peptide with anti-inflammatory activity from the black fly salivary glands. Parasit Vectors. 2015; 8:561.5. Wei L, Wu J, Liu H, Yang H, Rong M, Li D, Zhang P, Han J, Lai R.A mycobacteriophage- derived trehalose-6,6'-dimycolate-binding peptide containing both antimycobacterial and anti-inflammatory abilities. FASEB J. 27(8):3067-3077, 2013. (共享第一作者)6. Wu J, Liu H, Yang H, Yu H, You D, Ma Y, Ye H, Lai R. Proteomic analysis of skin defensive factors of tree frog Hyla simplex. J Proteome Res.10(9): 4230-4240.(2011)7. Wu J, Wang Yipeng, Liu H, Yang H, Ma D, Li J, Li D, Yu H, Lai R. Two immunoregulatory peptides with antioxidant activity from tick salivary glands. J Biol Chem. 285(22):16606-16613.（2010）Name: Jing WuDate of Birth: January, 1983E-mail: wujing_205@Research Interests：Structure-Function Relation of Bioactive Peptides and Proteins Education and Appointments：2012.7-Current, School of Basic Medical Sciences, Kunming Medical University, lecturer2006.9-2012.1, Kunming Institute of Zoology, Chinese Academy of Sciences, M.S. & Ph.D2001.9-2005.7, College of Life Science and Technology, Yunnan University, B.S. Selected Publications：1、Wei L, Che HL, Han Y, Lv J, Mu LX, Lv LC, Wu J*, Yang HL. The first anionic defensin from amphibians. Amino Acids. 2015 Mar 24. (Co-corresponding author)2、Wei L, Mu L, Wang Y, Bian H, Li J, Lu Y, Han Y, Liu T, Lv J, Feng C, Wu J*, Yang HL. Purification and characterization of a novel defensin from the salivary glands of the black fly, Simulium bannaense. Parasit Vectors. 8(1):71, 2015. (Co- corresponding author)3、Wei L, Wu J, Liu H, Yang H, Rong M, Li D, Zhang P, Han J, Lai R.A mycobacteriophage- derived trehalose-6,6'-dimycolate-binding peptide containing both antimycobacterial and anti-inflammatory abilities. FASEB J. 27(8):3067-3077.（2013）(Co-first author)4、Wu J, Liu H, Yang H, Yu H, You D, Ma Y, Ye H, Lai R. Proteomic analysis of skin defensive factors of tree frog Hyla simplex. J Proteome Res.10(9): 4230-4240.(2011)5、Wu J, Wang Y, Liu H, Yang H, Ma D, Li J, Li D, Yu H, Lai R. Two immunoregulatory peptides with antioxidant activity from tick salivary glands. J Biol Chem. 285(22):16606-16613.（2010）。
3-羟基异丁酸脱氢酶
Purification and Characterizationof 3-Hydroxyisobutyrate Dehydrogenase from Rabbit Liver*
(Received 87)
Paul M. Rougraff, Ralph PaxtonS, Martha Kuntz, DavidW. Crabb, and Robert A. Harris8 J. From the Departments of Biochemistry and Medicine, Indiana University School of Medicine, Indianqpolis,Indiana 46223 3-Hydroxyisobutyrate dehydrogenase (3-hydroxy- tural, kinetic, and regulatory features. In 1957, Robinson and 2-methyl propanoate: oxidoreductase, NAD+ EC Coon (1)reported on the characteristics of HIB dehydrogen1.1.1.31) was purified 1800-fold from rabbitliver by ase isolated from pig kidney. Pseudomonas aeruginosa (2) and detergent extraction, differential solubility in polyeth- Candida rugosa (3) enzymes have also been studied. Addiylene glycol and (NH4)%S04, column and chrotional characterization of mammalian HIB dehydrogenase is phenyl-Sepharose, matography on DEAE-Sephacel, of interest because 3-hydroxyisobutyrate increases in serum CM(carboxymethy1)-Sepharose,Affi-Gel Blue, and U1- and urine in ketoacidosis (4),and it is a good substrate for trogel AcA-34. The enzyme had a native Mr 74,000 hepatic gluconeogenesis (5). Furthermore, the exact pathways of and appeared to be a homodimer with subunit M, = for complete catabolism of the R- and S-isomersof 3-hydrox34,000. The enzyme was specific for NAD+. It oxidizedyisobutyrate remain uncertain for want of a description of the both S-3-hydroxyisobutyrate and R-3-hydroxyisobu- kinetics and substrate specificities of the enzymes involved tyrate, butthe kc.JKm was approximately 360-fold higher for the S-isomer. Steady state kinetic analysis (6). Recently, it was shown that HIB dehydrogenase is a major indicates an ordered Bi Bi reaction mechanism with contaminant in commercial preparations of RhodopseudomoNAD+ binding before 3-hydroxyisobutyrate. The enzyme catalyzed oxidation of S-3-hydroxyisobutyrate nas spheroides 3-hydroxybutyrate dehydrogenase (EC between pH 7.0 and 11.6 with optimal activity between 1.1.1.30; Ref. 7). Since the latter is used for enzymatic determination of serum ketone bodies @), serum and tissue 3pH 9.0 and 11.0. The enzyme apparently does not have hydroxybutyrate concentrations may have been significantly a metal ion requirement. Essential sulfhydryl groups may be present at both the 3-hydroxyisobutyrate and overestimated in numerous studies because of the contribution by 3-hydroxyisobutyrate. For this reason and because of NAD+binding sites since inhibitionbysulfhydryla binding agents w s differentially blocked by each sub- our limited understanding of the physiological regulation of strate. The enzymeis highly sensitive to product inhi- valine catabolism, it is important to determine 3-hydroxyisobition by NADH which may play an important physbutyrate concentrations in biological samples. Because HIB iological role in regulating the complete oxidation of dehydrogenase willprove useful for this purpose and for valine beyond the formation of 3-hydroxyisobutyrate. elucidating 3-hydroxyisobutyrate catabolism, we sought an inexpensive source and purification procedure for this enzyme. Rabbit liver is relatively rich in HIBdehydrogenase (1) and is commercially available in the frozen state. We report here the homogeneous purification and characterization of 3-Hydroxyisobutyrate dehydrogenase (3-hydroxy-2-meth- rabbit liver HIB dehydrogenase. ylpropanoate: NAD’ oxidoreductase, EC 1.1.1.31; HIB dehydrogenase)’ catalyzes an NAD’-dependent, reversible oxidaEXPERIMENTAL PROCEDURES’ tion of 3-hydroxyisobutyrate to methylmalonate semialdehyde. This mitochondrial enzyme, essential for valine catabolism, has not been well characterized with respect to strucRESULTS
01-博士研究生课-高级生物化学与分子生物学-专题-mRNA分子的选择性剪接-黄东阳
剪接体的剪接
• 大部分剪接是依赖剪接体（spliceosome),这类内 含子称为剪接体内含子（spliceosomal introns)。 • 剪接体：由一些特殊的RNA-蛋白质复合体——小 核内核糖核蛋白（small nuclear ribonucleoproteins，snRNP, 常发音为snurps) 与一些其它蛋白质构成。 • 每个snRNP含有一个100-200核苷酸长度的小核 内RNA（small nuclear RNAs, snRNAs)。 • 真核细胞细胞核内比较常见的剪接体snRNA有5 种，因富含U，故称U1,U2,U4, U5和U6。每种 snRNA至少与7个蛋白质亚单位（共约50种蛋白） 构成复合体snRNP ，这是一些从酵母到人类都高 度保守的核酸和蛋白质序列。
• 一个核糖2’-或3’羟基对RNA骨架中的磷 （phosphorus)发动亲核攻击（nucleophilic attack),原磷酸二酯键断开，形成新的磷酸二 酯键。 • Group I 剪接反应需要一个鸟嘌呤核苷即核 苷酸辅助因子（nucleotide cofactor )的3’羟 基作为剪接第一步的亲核基团 （nucleophile)，而不是作为能量。鸟苷3’羟 基与内含子的5’末端形成磷酸二酯键。露出 的外显子的3’羟基即可作为亲核基团去攻击 内含子的3’末端。最后导致内含子被精确切 除，外显子连接在一起。 • Group II内含子的反应形式与Goup I相似， 不同的是，第一步亲核攻击是由内含子当中 的adenosine (A)残基中的2’羟基担当并形成 一个分支的索套结构作为中间体。
• 原始转录本（primary transcript)：一个新合成 的RNA分子。真核生物的mRNA、tRNA分子和细 菌的tRNA分子的原始转录本受到广泛的修饰。 mRNA分子的原始转录本也称前体mRNA （precursor mRNA)，一般包含一个基因的全序 列，尽管编码多肽的序列可能是非连续的。 • 内含子（Intron）：一个转录本的分隔编码区域 的非编码序列。真核细胞基因的大部分都含有内 含子，但有少数例外，如：组蛋白基因(histone) 和酵母的一些基因。内含子长度一般在50-20,000 核苷酸之间。 • 外显子（exon):一个转录本的编码序列 （片段）。 真核生物的mRNA分子外显子的长度多在1000核 苷酸以下，以100-200核苷酸居多。 • 剪接（splicing)：将内含子从原始转录本移去并 将外显子连接在一起, 形成一个成熟的、功能性 RNA分子的过程。
汞离子对草鱼血清和肾脏溶菌酶活性的影响
汞离子对草鱼血清和肾脏溶菌酶活性的影响刘占才1,2,牛俊英1,孔祥会2,郭彦玲2,郭春丽2(1.焦作师范高等专科学校生物系,河南焦作454001;2.河南师范大学生命科学学院,河南新乡453007)摘要 测定暴露于不同汞离子质量浓度(0、0.05、0.10、0.15、0.20、0.25m g/L)下草鱼血清和肾脏溶菌酶(LSZ)活性。
在试验剂量和时间范围内结果显示,汞对草鱼血清和肾脏LSZ活性有剂量—效应关系和H orm ensis现象。
在0.05和0.10m g/L浓度胁迫下,分别对血清和肾脏LSZ有激活作用;在高于0.05和0.15m g/L浓度胁迫下分别对血清和肾脏LSZ有显著的抑制作用(P<0.01)。
试验表明汞离子对草鱼具有显著的免疫毒性。
关键词 H g2+;草鱼;溶菌酶;血清;肾脏中图分类号 S917 文献标识码 A 文章编号 0517-6611(2007)09-02615-02E ffect of H g2+on Lysozym e A ctivity in Serum and K idney of G rass C arpLIU Zh an2cai et al (Departm ent of Biology,Jiaozu o T eachers C ollege,Jiaozu o,H enan454001)Abstract In this study,the biochem istry m eth ods were ad opted to determ ine the activity of Lys ozym e(LSZ)in serum and kidney of G rass carp (Ctenopharyngodon idella)ex posed at different H g2+concentrations for32week.T he results sh owed that w ith in a range of ex posure d osages and duration, there existed linearity relationship between d osage2response in term of H g2+on LSZ in serum and kidney.LSZ activity in serum was significantly increased at0.05m g/L(P<0.05)and in kidney significantly increased at0.10m g/L(P<0.01).W hile LSZ activity in serum was m arkedly descended at m ore than0.05m g/L(P<0.01),and in kidney m arkedly decreased at0.20m g/L and0.25m g/L(P<0.05and P<0.01).All the results indicated that H g2+possessed obviously immun o2toxicity to G rass carp.K ey w ords H g2+concentration;Lys ozym e;S erum;K idney;G rass carp 汞作为鱼类生长发育的非必需元素,是当前最危险的环境污染物之一。
学术期刊版式设计中应遵循的基本原则
学术期刊版式设计中应遵循的基本原则李凤琴(应用生态学报编辑部,辽宁沈阳110016)摘要结合学术期刊的版式特点,阐述了学术期刊版式设计应遵循的基本原则:内容与形式和谐统一;层次清晰,节奏分明;比例协调, 对称有度;静动相宜,虚实互补,强调了版式设计中应注重人本主义因素。
关键词学术期刊;版式设计;基本原则;人本主义中图分类号G232. 3 文献标识码 A 文章编号0517 - 6611 (2008) 13 - 05676 - 02Basic Principles for the F ormat Design of Academic JournalsLI F eng2q in ( Ed itorial Departmen t of C hinese Journal of A pplied Ec olog y ,S henyang Liaoning 110016)Abstract C omb ining with the forma t characteristics of acad emic jou rnal , the basic principles in the forma t desig n of academic jou rnal should b e follow ed as harmoniou s unity of content and form , clear layer and rhythm , harmoniou s proportion and mod erate symmetry , d ynamic and static balance , the recipro 2 cal o f false and true. I t was emphasized that attention should b e paid to the hu manistic factors in the forma t d esig n.K ey w ords Acad emic journal ; Forma t d esig n ; B asic principle ; Hu manism学术期刊作为一种信息和知识的载体,对现代科学研究中信息的传播和交流起着非常重要的作用[1 - 2 ] 。
核心原料：生物源胶原蛋白-RHC
生物源胶原蛋白(关键词：生物源、胶原蛋白、胶原) 〔备选名称：RHC、酵母胶原蛋白、发酵型胶原蛋白〕1. 生物源胶原蛋白1.1 生物源胶原蛋白定义胶原蛋白被称为“骨中之骨，肤中之肤”，是人体最重要的结构蛋白质，约占蛋白总量30%，广泛存在于人体的皮肤、骨骼、肌肉、软骨等组织中，起支撑、修复、保护等重要作用，在肌肤细胞的生长、更新过程中起着重要作用。
20岁时真皮层中胶原蛋白含量达70%以上，随着年龄增长，胶原蛋白不断流失，25岁进入流失高峰，40岁时已不足年轻时一半。
科学合理的补充胶原蛋白能稳固肌底支撑，提供肌肤营养，起到保湿锁水，滋润皮肤，延缓衰老，消除皱纹等成效。
生物源胶原蛋白，又称RHC〔Recombinant Human-source Collagen〕，是根据人胶原蛋白的结构特性，利用先进生物科学技术和国际领先发酵技术，通过微生物〔如活性酵母〕高密度发酵，绿色别离纯化工艺生产的一种高分子的生物源蛋白，与人胶原蛋白高度一致。
1.2 生物源胶原蛋白特点1.2.1 同质性生物源胶原蛋白是根据人胶原蛋白的特点进行结构设计，因此与人胶原蛋白结构高度一致，生物相容性好，亲和性和渗透性好，无排异反应，不易致敏。
1.2.2 无病毒隐患从动物组织提取的胶原蛋白存在携带病毒的隐患，直接限制了其应用领域。
生物源胶原蛋白是利用酵母高密度发酵获得，从根源上防止了病毒隐患，所使用的原料来源可控，成分简单，具有良好溯源性，不存在动物源杂质，弥补了传统胶原蛋白的缺陷，成为更安全的新型高科技胶原蛋白。
1.2.3 纯度高，分子量确切纯度可达99.5%以上，不含其它杂蛋白。
分子量与人胶原蛋白相近，犹如人体自身物质。
1.2.4 水溶性好通过生物发酵技术获得的胶原蛋白为水溶性蛋白，与各种性质的功能原料都能良好的复配，可加工性强，在下游应用和产品开发上更具优势。
1.2.5 无排异反应生物源胶原蛋白是利用生物科学技术，根据人胶原蛋白结构特性进行设计，摒弃了容易引起免疫排异反应的氨基酸残基，不存在动物胶原蛋白序列，其应用于人体时不会发生排异反应。
文献阅读(血红素铁)
血红素检测一般基于改良的碱性溶液方法，血红素转化为均一显色产物。
在400nm颜色同样品的血红素浓度直接线性相关，经优化的配方显著减少其他物质对检测结果的交叉反应并提供更高的灵敏度:血液和尿液血红素检测试剂盒（北京博尔诚公司）也可以用Elisa法:QuantiChrom Heme Assay Kit 血红素检测试剂盒（上海优维宁公司）血红素标准品可以购买sigma公司的产品。
如果长期用可以从猪血中分离提取氯化血红素。
方法可以参照马永征，宋宏新，李敏康（陕西科技大学）的报告：猪血的抗凝处理、红细胞和血浆的分离。
收集经检验合格的新鲜猪血，用0.38％的柠檬酸钠溶液与血液按体积比1：9混合抗凝，抗凝血在转速为4000r/min(离心力为1790g)下，离心10min，分别收集红细胞和血浆，用于提取氯化血红素和凝血酶。
研究了氯化血红素的提取条件。
优化后的条件为：(1)加入红细胞体积1/5的去离子水，实验条件下，超声波功率200W，破碎10min，得到血红蛋白溶解液。
(2)选用鞣酸法从超声波破碎红细胞得到的血红蛋白溶解液中提取氯化血红素。
向血红蛋白溶液中加入红细胞体积5倍的丙酮，用1mol/L 稀HCl调其pH值为2.2，抽滤，收集提取液。
向提取液中加入5％鞣酸，静置12h 后产生沉淀。
抽滤，收集沉淀，并对其用去离子水、50％的乙酸、95％乙醇、乙醚依次各洗涤二次，所得产品放入干燥器避光干燥，最后得到红紫色固体。
通过分析对比氯化血红素标准品和样品的红外光谱图和紫外/可见光谱图，确定所得产品为氯化血红素。
猪血中高纯度血红素的提取工艺(1) 【摘要】目的：确立最佳溶血方法，建立高产量、高纯度血红素提取工艺。
方法：新鲜抗凝猪血为原料，比较了水溶胀法、乙醇法以及超声波法对红细胞溶血效果，以盐酸丙酮配比，盐酸丙酮与溶血液体积比对猪血中血红素提取的影响。
结果：确立超声波法进行红细胞溶血，36.5%浓盐酸与丙酮的体积为1%的血红素抽提液，与溶血液的体积比为5∶1抽提10分钟，最终可从新鲜猪血中得到红素6.0 g/L，纯度达99.8%。
identification and characterization中文
identification and characterization中文"Identification and characterization" 的中文翻译为“鉴定和表征”。
在科学研究中，“identification” （鉴定）是指确定或确认一种
物质、物体、生物体等的身份、属性、存在或类型。
这包括使用各种技术和方法，如化学分析、光谱分析、DNA分析、图
像处理等来获得可靠的信息和证据，从而准确地识别和区分不同的物质、物体或生物体。
与此类似，”characterization”（表征）是指对一种物质、物体、生物体等进行全面和详细的描述和解析。
通过表征，科学家们可以研究和确定物质的可观测性质、结构、组成、形态、性能等，以及其在不同条件下的行为和反应。
表征方法包括光学显微镜、电子显微镜、X射线衍射、核磁共振、质谱分析等。
“Identification and characterization” 是科学研究中常用的两个重
要步骤，它们为我们提供了深入了解和研究各种物质、物体和生物体的工具和技术。
通过鉴定和表征，科学家们能够获得关于物质性质、结构和功能的全面信息，为进一步的研究和应用奠定基础。
酵母蔗糖酶的提取方法
酵母蔗糖酶的提取方法摘要：采用甲苯自溶法、冻融法、SDS抽提法3种方法从酵母中提取蔗糖酶，经质量分数50%的乙醇分级沉淀、MonoQ阴离子交换柱层析纯化后，制得高纯度的酵母蔗糖酶。
比较了上述3种提取方法并对该酶的部分性质进行了研究。
纯化的酶经等电聚焦测定，等电点为5.6，SDS-PAGE鉴定其相对分子质量为60kD。
以蔗糖为底物测得酵母蔗糖酶的表观米氏常数Km为0.013mol／L。
结果显示3种提取方法各有优劣，冻融法和SDS抽提法的提取效率远高于传统的甲苯自溶法。
其中SDS抽提法的效率最高，加之其操作简便，更适合于酵母蔗糖酶大规模的制备提取。
关键词：酵母；蔗糖酶；提取；纯化蔗糖酶(Sucrase，EC 3．2．1．26)又称转化酶(Invertase)。
可作用于B一1，2糖苷键，将蔗糖水解为D-葡萄糖和D-果糖。
由于果糖甜度高，约为蔗糖的1．36～1．60倍，在工业上具有较高的经济价值。
可用以转化蔗糖，增加甜味，制造人造蜂蜜，防止高浓度糖浆中的蔗糖析出，制造含果糖和巧克力的软心糖，还可为果葡糖浆的工业化生产提供新的方法。
目前关于酵母中蔗糖酶提取纯化方面的研究较多，以甲苯自溶法最为常见。
作者采用甲苯自溶法、冻融法、SDS抽提法3种不同的方法从酵母中提取蔗糖酶，将冻融法和SDS法提取的蔗糖酶进一步纯化，并对其基本性质进行了研究。
通过不同提取方法的比较，为酵母蔗糖酶在食品工业中的应用和蔗糖酶基因工程产品的下游技术开发，提供了实验依据。
1材料与方法1．1材料酵母，安琪酵母股份有限公司提供；MonoQ(10／10)阴离子交换层析柱、PhastGelIEF3-9胶，Amersham公司提供。
1．2主要化学试剂和仪器十二烷基硫酸钠(SDS)，Serva公司提供；等电点标准品，Amersham公司提供；其余试剂均为国产分析纯或生化试剂。
UV一2201型紫外可见光分光光度计，Shimadzu公司制造；Waters650型高级蛋白纯化系统，Waters公司制造；PhastSystem全自动快速水平电泳仪，Amersham公司制造；高速冷冻离心机，Hitachi公司制造；冷冻干燥器，Labconco公司制造；电泳仪，Bio-Rad公司制造；精密酸度计，Orion公司制造。
嗜水气单胞菌胞外蛋白酶ECPase54的纯化及特性分析
南京农业大学学报 1996,19(3):88～94 J ournal of N anj ing A gricultur al Univer sity嗜水气单胞菌胞外蛋白酶ECPase54的纯化及特性分析李焕荣 陈怀青 陆承平**(南京农业大学动物医学院,南京210095)摘要 嗜水气单胞菌(A h)J-1株的液体培养物上清在56℃或与乙二胺四乙酸(EDT A)或丝氨酸蛋白酶抑制剂苯甲基磺酰氟(PM SF)作用,其胞外蛋白酶(ECP ase)的活力有不同程度的下降。
将酪蛋白掺入丙烯酰胺聚合后,加A h J-1上清作SD S-PA G E,37℃原位消化,染色,显示上清中存在至少5种分子量不同的蛋白酶。
A h J-1株的培养上清经硫酸铵沉淀、D EAE-纤维素离子交换层析和Sephadex G-200分子筛层析,获得一种纯化的蛋白酶。
不经2-巯基乙醇处理后,分子量约为54000,而经2-巯基乙醇处理的样品,分子量为35000,且酶活性丧失。
该酶对热稳定,EDT A可抑制其活性,PM SF对其无影响。
此酶属于热稳定金属蛋白酶(T SM P),建议命名为ECPase54。
它的最适pH为7.5,米氏常数(K m)为1.77m g/ml,对Ver o细胞有毒性,腹腔注射能致死小白鼠。
关键词 嗜水气单胞菌;胞外蛋白酶;纯化;特性分析中图分类号 S852.61PURIFICATION AND CHARACTERIZATION OF EXTRACELLULAR PROTEASEECPASE54FROM AEROMONAS HYDROPHILALi Huanrong,Chen Huaiqing and Lu Cheng ping(Colleg e of Veter inary M edicine,Nanjing Agric Univ,Nanjing210095) ABSTRACT A t lea st fiv e ex tr acellular pr oteases(ECPase)in A eromonas h y d rop hila str ain J-1culture su-per natant w er e assa yed by in situ pr oteo ly tic act ivity on SDS-PA G E containing0.1%casein.O ne of the ECPases fr om the supernatant w as pur ified by ammonium sulfate precipit atio n,a nion-ex chang e chr o-mato gr aphy on DEA E-cellulo se and Sephadex G-200g el filt ration chr o matog ra phy.SDS-P A GE of the pu-rified pr otease indicated that2-M E reduced sample migr ated at35000,w hile non-reduced sample migr ated at54000.T his pr ot ease was accor dingly desig nat ed ECPase54.T he activit y o f ECP ase54w as inhibited by EDT A,but not by P M SF o r by heating at56℃fo r30min.It sho w ed that the ECPase54w as a ther-mostable metallo pr o tease(T SM P).T he ECPase54w ith optimum pH7.5and K m1.45mg/ml po ssessed pro tyo ly tic and cy tot ox ic activ ities.It also elicit ed lethal t ox icit y to mice.Key words A er omonas hy dr op hila;ex tr acellular pro tease;purificatio n;character ization 嗜水气单胞菌可引致人和多种动物发病,在公共卫生上占有一定地位。
漆酶的研究进展及其应用
漆酶的研究进展及其应用刘岩;刘锐;苏新国;赵冠里;杨昭【摘要】Laccase is a kind of polyphenol oxidase. Because of its wide distribution in nature,laccase has broad ap⁃plication prospects in environmental protection,textile,printing and dyeing,food and chemical synthesis,etc. It has received extensive attention and research in recent years.This paper introduces the research progress and outstand⁃ing application of laccase,providing the new prospects and direction for bacterial laccase.%漆酶是一种多酚氧化酶，由于其在自然界分布广泛，并且在环保、纺织、印染、食品、化学合成等方面都具有广泛的应用前景，近年来得到了广泛的关注和研究。
该文主要综述了国内外漆酶的研究进展及其应用，为细菌漆酶提供新的应用前景和方向。
【期刊名称】《安徽农学通报》【年(卷),期】2016(022)013【总页数】4页(P25-27,159)【关键词】漆酶;研究进展;应用【作者】刘岩;刘锐;苏新国;赵冠里;杨昭【作者单位】广东食品药品职业学院，广东广州 510520;仲恺农业工程学院，广东广州 510225;广东食品药品职业学院，广东广州 510520;广东食品药品职业学院，广东广州 510520;广东食品药品职业学院，广东广州 510520【正文语种】中文【中图分类】Q814漆酶（EC 1.10.3.2）又名蓝色多铜氧化酶，可以氧化包括酚类物质、多酚类物质、苯胺、木质素、多环芳香烃甚至无机物等一系列物质，以分子氧气为电子受体，生成反应过程中唯一的副产物水。
端粒——稳定线性染色体的末端结构
周金秋研究员：端粒——稳定线性染色体的末端结构【生物谷编者按】2009年10月5日，在端粒及端粒酶领域具有突破性研究成果的三位科学家获得了本届诺贝尔生理医学奖。
与此同时，生物谷有幸邀请到国内端粒和端粒酶研究领域的知名专家--周金秋研究员就端粒及端粒酶的发现历程，特别是三位获奖科学家在该领域的研究成果进行系统的回顾，同时对本届诺贝尔生理医学奖展开了精彩评论。
生物谷编者按】2009年10月5日，在端粒及端粒酶领域具有突破性研究成果的三位科学家获得了本届诺贝尔生理医学奖。
与此同时，生物谷有幸邀请到国内端粒和端粒酶研究领域的知名专家--周金秋研究员就端粒及端粒酶的发现历程，特别是三位获奖科学家在该领域的研究成果进行系统的回顾，同时对本届诺贝尔生理医学奖展开了精彩评论。
2009年诺贝尔奖专家点评：/z/Nobelprize09/viewpoints/2009年的诺贝尔生理医学奖被授予了三位美国科学家：Elizabeth Blackburn, Carol Greider和Jack Szostak，以奖励他们在线性染色体的末端结构--端粒的功能与合成方面的杰出贡献。
在过去的30多年时间里，他们的工作解决了一个重要的生物学问题：即线形染色体的末端如何实现完整复制以及如何避免核酸酶的降解而维持染色体的稳定性。
线性染色体"末端复制问题"早在20世纪三十年代，科学家Barbara McClintock 和Hermann Muller就发现，区别于一般的DNA断裂，染色体末端不会发生相互融合；此外，只有包含有末端的染色体片段才能被完整复制。
因此，科学家们推测，真核生物线性染色体的末端是一种特化的结构，Muller将之命名为端粒（Telomere，在古希腊语中，telos表示末端，而meros 表示片段）。
然而在当时，人们还不知道端粒与随机产生的DNA断裂末端有什么差异。
20世纪五六十年代，当科学家们尝试解析真核生物如何实现染色体DNA的精确复制时，又一个端粒相关的难题产生了。
脲酶抑制剂的研究综述
Hans Journal of Medicinal Chemistry 药物化学, 2019, 7(1), 1-6Published Online February 2019 in Hans. /journal/hjmcehttps:///10.12677/hjmce.2019.71001A Review of Studies on Urease InhibitorsXiaojing Wu, Rui Shi, Wanchun Nie, Xiaolin Zhang, Jie QinSchool of Life Sciences, Shandong University of Technology, Zibo ShandongReceived: Nov. 20th, 2018; accepted: Dec. 5th, 2018; published: Dec. 12th, 2018AbstractUrea in soil can be decomposed into ammonia under the action of urease, which reduces the utili-zation rate of nitrogen. Urease in human body causes various diseases. The structure of urease ac-tive centers from different sources and the binding modes of several inhibitors with active centers are introduced. The urease inhibitors of metal ions, hydroxamic acids, phosphoramides, phos-phates, heterocyclic compounds and metal complexes are reviewed; the problems and prospect are put forward.KeywordsUrease, Urease Active Center, Urease Inhibitor脲酶抑制剂的研究综述吴孝婧，石蕊，聂琬纯，张晓琳，秦洁山东理工大学，生命科学学院，山东淄博收稿日期：2018年11月20日；录用日期：2018年12月5日；发布日期：2018年12月12日摘要土壤中的尿素在脲酶的作用下能够被分解为氨气，致使氮利用率降低，人体中的脲酶会引起各种疾病。
嗜热菌产酶现状的研究_潘丽贞
Science and Technology of Food Industry专题综述2012年第3期嗜热菌是应用最广泛的一种极端微生物，自1969年Brock T.D.和他的同事从美国黄石国家公园的温泉中分离到最适生长温度高达70℃的水生栖热菌，接下来30多年中嗜热菌的研究取得了重要进展，尤其近十年来嗜热菌已成为科学界的研究热点之一。
嗜热菌并非单一的菌属或菌群，而是广泛分布于各种不同的菌群中，如芽孢杆菌属、梭状芽孢杆菌属、栖热菌属、热厌氧杆菌属（Thermoanaerobacter ）、闪烁杆菌属（Fervidobacterium ）、热袍菌属（Thermotoga ）及产水菌属（Aquifex ）等[1]。
目前已有约70个属140种嗜热菌得到了鉴定，均属于古细菌及真细菌。
嗜热菌有代谢快、生长率高、世代时间短、酶的热稳定性高等优点，在造纸行业、环境保护、能源利用、烟草业、石油开采、液体燃料生产、生物转化及抗生素生产等领域都有广泛的应用。
嗜热菌的主要应用之一是嗜热酶的开发应用。
目前已知的从嗜热菌中分离出来的酶具有极高的热稳定性、传质速率高、耐有机溶剂等特点，可降低酶制剂的制备成本、提高酶促效率、减少能耗，其催化功能优于目前在各种工业生产中应用的酶，故在生物化工合成中有着广泛的应用。
1几种嗜热酶目前大多数的常温酶都发现了其对应的嗜热酶，如脂肪酶、蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶、糖苷酶、酰胺酶、植酸酶、几丁质酶、漆酶、乙醇脱氢酶、腈水解酶、过氧化氢酶等，以下主要介绍几种用量较大以及近来新发现的酶。
1.1脂肪酶脂肪酶能够催化脂类化合物的水解、合成和酯交换，广泛应用于油脂水解、食品风味和香味改进、医药生产、皮革绢纺脱脂、低等油脂改性等，并可作为洗涤剂与化妆品的添加剂。
脂肪酶因其具有高度的立体选择性而倍受关注。
Yasser R.Abdel-Fattah 等[2]分离出一株疑似Geobacillus thermoleovorans 的脂肪酶产生菌，该菌产生的脂肪酶在60℃，pH8下稳定，经100℃处理1h ，剩余酶活为30%。
植物蛋白质分离纯化的研究进展
植物蛋白质分离纯化的研究进展植物蛋白质在现代人类生活中发挥着日益重要的作用，其分离纯化已成为蛋白质研究的重要课题之一。
本文在概述了植物蛋白质预处理方法的基础上，对植物蛋白质分离纯化技术如膜分离技术、离心分离技术、凝胶层析技术、盐析法、等电沉淀法、电泳、离子交换层析、等进行了综述，并对植物蛋白分离纯化的发展进行了展望。
标签：植物蛋白质；提取；分离纯化Abstract：Plant protein plays an increasingly important role in modern life，and the isolation and purification of target protein from plant has become one of the hot topics in protein research. In this paper，based on introducing pretreatment methods of plant samples，the protein isolation techniques such as membrane separation，centrifugation，gel chromatography，salting out，isoelectric precipitation，electrophoresis，ion exchange chromatography，are reviewed，and the development or the protein purification plant is prospected.Key words：plant protein；extraction；isolation and purification蛋白質是生命活动的物质承担者，存在于所有生物中。
蛋白质参与生物形态结构的建成，基因表达的调节，生物信息传递，生物分子催化、代谢以及学习、防御等多种生命活动过程。
中国传统文化论文参考文献范例
中国传统文化论文参考文献一、中国传统文化论文期刊参考文献[1]. 思想：中国传统文化的马克思主义化.《武汉理工大学学报（社会科学版）》.被北京大学《中文核心期刊要目总览》收录PKU.被南京大学《核心期刊目录》收录CSSCI.2015年3期.张靖.[2].论马克思主义与中国传统文化相交融.《理论学刊》.被北京大学《中文核心期刊要目总览》收录PKU.被南京大学《核心期刊目录》收录CSSCI.2015年11期.田鹏颖.[3].《中国科学技术史》:马克思主义与中国传统文化的双重体现.《广西社会科学》.被北京大学《中文核心期刊要目总览》收录PKU.被南京大学《核心期刊目录》收录CSSCI.2015年2期.王凤祥.安维复.[4].中国传统文化对科技型人才聚集的知识溢出效应分析.《中国科技论坛》.被中信所《中国科技期刊引证报告》收录ISTIC.被北京大学《中文核心期刊要目总览》收录PKU.被南京大学《核心期刊目录》收录CSSCI.2009年11期.牛冲槐.杨玲.芮雪琴.[5].中国传统文化的包容性发展及其当代启示.《理论学刊》.被北京大学《中文核心期刊要目总览》收录PKU.被南京大学《核心期刊目录》收录CSSCI.2014年12期.周东娜.[6].中国传统文化对的影响.《湖南社会科学》.被北京大学《中文核心期刊要目总览》收录PKU.被南京大学《核心期刊目录》收录CSSCI.2015年2期.胡艳辉.[7].论中国传统文化与马克思主义的“亲和性”基于几组概念内涵的分析. 《湖北社会科学》.被北京大学《中文核心期刊要目总览》收录PKU.被南京大学《核心期刊目录》收录CSSCI.2014年9期.王增智.[8].本土化与全球化的交融——中国传统文化走出去问题探析.《理论学刊》.被北京大学《中文核心期刊要目总览》收录PKU.被南京大学《核心期刊目录》收录CSSCI.2014年2期.赵跃.[9].中国传统文化中的生态德育思想析论.《理论导刊》.被北京大学《中文核心期刊要目总览》收录PKU.被南京大学《核心期刊目录》收录CSSCI.2014年8期.李华伟.[10].中国传统文化对本土企业核心价值观的影响.《商业研究》.被北京大学《中文核心期刊要目总览》收录PKU.被南京大学《核心期刊目录》收录CSSCI.2014年6期.马君.尹志欣.二、中国传统文化论文参考文献学位论文类[1].全球化背景下中国传统文化的现代转换.被引次数：20作者：刘志国.马克思主义理论与思想政治教育山东大学2007（学位年度）[2].马克思主义中国化与中国传统文化的互动研究.被引次数：5作者：罗晔.马克思主义中国化研究西南大学2011（学位年度）[3].马克思主义与中国传统文化结合的必然性研究.作者：王乾.马克思主义基本原理河北农业大学2013（学位年度）[4].中国传统文化在大学生德育教育中的科学利用.被引次数：6作者：邵海金.思想政治教育山东大学2011（学位年度）[5].中国传统文化元素在央视公益广告中的运用.被引次数：1作者：刘彦辰.新闻与传播郑州大学2014（学位年度）[6].全球化背景下中国传统文化的继承与发展研究.被引次数：6作者：齐晓静.马克思主义基本原理济南大学2012（学位年度）[7].马克思主义与中国传统文化相结合的基本经验.被引次数：2作者：丛琳.马克思主义中国化研究沈阳师范大学2011（学位年度）[8].论中国传统文化在流行音乐中的传承.作者：王鹏飞.马克思主义基本原理陕西科技大学2015（学位年度）[9].中国传统文化耻感意识研究.被引次数：1作者：陈德胜.中国哲学安徽大学2012（学位年度）[10].中国传统文化的当代价值研究.被引次数：7作者：朱雪.马克思主义中国化研究西华大学2013（学位年度）三、相关中国传统文化论文外文参考文献[1]Insecttea,awonderfulworkintheChineseteaculture. LijiaXuHuiminPanQifangLeiWeiXiaoYongPengPeigenXiao 《FoodResearchInternational》,被EI收录EI.被SCI收录SCI.20132[2]Cellbasedhighthroughputproliferationandcytotoxicityassaysforsc reeningtraditionalChineseherbalmedicines. DingLiRuZangShangTianYangJufangWangXiaoningWang 《Processbiochemistry》,被EI收录EI.被SCI收录SCI.20133[3]PotentialofLABstartercultureisolatedfromChinesetraditionalferm entedfoodsforyoghurtproduction.. XueHanLanweiZhangPengYuHuaxiYiYingchunZhang 《InternationalDairyJournal》,被EI收录EI.被SCI收录SCI.20142[4]Effectoffermentedricecultureonthemicrobiological,biochemicalan dsensorycharacteristicsoflowsaltdouchi,atraditionalChinesefermentedso ybeancondiment..HuipingHu,JianxiongHao,YongqiangCheng,LijunYin,YanliMa,ZhenweiYu,Lite Li《InternationalJournalofFoodScienceandTechnology》,被EI收录EI.被SCI收录SCI.20124[5]PredominantbacteriadiversityinChinesetraditionalsourdough.. GuohuaZhangGuoqingHe《JournalofFoodScience》,被SCI收录SCI.20137/9[6]CultureofChinesecarpsusinganaerobicfermentedcowmanureandcompar isonofsurvivalandgrowthfactorsversustraditionalculture..Fallahi,M.Amiri,A.Arshad,N.Moradi,M.Roohi,J.D.《IranianJournalofFisheriesSciences》,被SCI收录SCI.20131[7]PhysicaldistressandcancercareexperiencesamongChineseAmericanan dnonHispanicWhitebreastcancersurvivors.Wang,J.H.Y.Adams,I.Huang,E.AshingGiwa,K.Gomez,S.L.Allen,L.《GynecologicOncology:AnInternationalJournal》,被SCI收录SCI.20123[8]TheApplicationofChineseTraditionalCultureinGraphicDesign. ShiyangLi2015[9]Aninvitrosystemtostudycyclopeptideheterophyllinbbiosynthesisin themedicinalplant<i>Pseudostellariaheterophylla</i>.. XuWenYanZhuHongTaoTanNingHuaTangJunZhangYingJunCerny,R.L.Du,L.C.《PlantCell,TissueandOrganCulture:AnInternationalJournaloninVitroCult ureofHigherPlants》,被EI收录EI.被SCI收录SCI.20121[10]PurificationandcharacterizationofUDPG:ginsenosideRdglucosyltr ansferasefromsuspendedcellsofPanaxnotoginseng.CaiJunYueJianJiangZhong《Processbiochemistry》,被EI收录EI.被SCI收录SCI.200512四、中国传统文化论文专著参考文献[1]中国传统文化现状与中医发展策略.李峰.郭艳幸.何清湖，2014第五届全国中医药博士生学术论坛[2]基于中国传统文化的心理疏导初探.杨晨光.朱沐尘，2013第四届中国中西医结合学会心身医学专业委员会换届大会暨第七届全国中西医结合心身医学学术交流会[3]冲撞、适应及融合佛教对中国传统文化的适应与相融性机制探讨.金易明，2012当代佛教与文化繁荣研讨会[4]中国传统文化与城市规划之结合以孔孟文化轴概念规划为例.孔利.蒋琛.曹威，20122012中国城市规划年会[5]论中国传统文化对当代大学生的德育功能及实现途径.赵梦影.姜剑.万慧琳，20112011年全国高校学生工作年会[6]中国传统文化与城市规划之结合以孔孟文化轴概念规划为例.孔利.蒋琛.朱旻，20122012城市发展与规划大会[7]植根中国传统文化沃土浇灌“杏林国学讲坛”之花湖北中医药大学建设富有特色的校园文化探索与实践.胡真.柳剑，2012第三届全国医药院校繁荣发展哲学社会科学高层论坛[8]回归“哲人之邦”套话近30年来俄罗斯作家对中国传统文化的利用与想像.刘亚丁，2011中国社会科学论坛(2011·国外中国学)暨“国际视野中的中国研究历史与现在”国际学术研讨会[9]论中国传统文化在华裔留学生教学中的价值.王雪溪，2014第四届两岸华文教师论坛[10]善待中国传统文化.施开红.万之，2012安徽省管子研究会2012年年会暨第七届管子学术研讨会。
重组人溶菌酶的研究进展
重组人溶菌酶的研究进展庞恋苏;李亚男【摘要】人溶菌酶是一种人体内天然存在的具有抗菌、抗病毒、抗炎、增强免疫力等特性的蛋白质.它直接作用于细菌细胞壁,因此,细菌对其完全不存在耐药性,也无免疫原性.利用基因工程生产出的重组人溶菌酶不仅具有人溶菌酶的优点,同时也克服了人溶菌酶活性低、产量低、不便于制备、无法稳定保存等缺点.在抗菌药物滥用、耐药菌株广泛存在的今天,由于其特性可以弥补众多抗生素的不足,具有广泛的临床应用前景.本文就针对重组人溶菌酶的研究进展做一综述.%Recombinant Human lysozyme is a kind of protein that has antibacterial,anti-viral,anti-inflammatory and immunological properties.Recombinant human lysozyme is a natural antibacterial agent,directly acting on bacterial cell wall.It has no drug resistance in bacteria and immunogenicity.Recombinant human lysozyme not only has the advantage of human lysozyme but also has better antibacterial activity,more production,easy to prepare and stable preservation.It has very promising clinical application prospectespecially bacterial resistant strains are widespread.The research progress of recombinant human lysozyme is reviewed.【期刊名称】《中华老年口腔医学杂志》【年(卷),期】2017(015)005【总页数】4页(P306-309)【关键词】溶菌酶;重组人溶菌酶;药理作用;生物功能【作者】庞恋苏;李亚男【作者单位】解放军医学院北京 100853;解放军总医院口腔修复科北京 100853【正文语种】中文【中图分类】R780.1溶菌酶起源于1922年Flem ing在人的鼻粘液中发现一种能够溶解细菌细胞壁的物质，并将其命名为“Lysozyme”，即溶解细菌的蛋白质。
糖尿病并发气性坏疽一例报道并文献复习
糖尿病并发气性坏疽一例报道并文献复习简丽;何阳杰;李启富;贾蓓;赵启全【期刊名称】《中国感染控制杂志》【年(卷),期】2017(016)004【总页数】4页(P372-374,382)【关键词】糖尿病;气性坏疽;大肠埃希菌;合并感染【作者】简丽;何阳杰;李启富;贾蓓;赵启全【作者单位】大足区人民医院,重庆大足 402360;大足区人民医院,重庆大足402360;重庆医科大学附属第一医院,重庆 400016;重庆医科大学附属第一医院,重庆 400016;大足区人民医院,重庆大足 402360【正文语种】中文【中图分类】R515.9大肠埃希菌是肠杆菌科中常见的细菌，为革兰阴性杆菌，能发酵多种糖类产酸、产气。
本例患者为大肠埃希菌感染所致背部皮下软组织，脾脏后缘、左肾后方、左侧后腹部、盆腔及左下肢大量积气、积液，其临床表现为气性坏疽，在大肠埃希菌感染病例中实属罕见，故结合文献复习与大家分享，以提高对糖尿病合并产气细菌感染的认识。
1.1 病史患者，女性，58岁，2015年7月7日因“左侧腰部包块10 d，左下肢肿痛5 d”入院。
3月前确诊为2型糖尿病，间断不规律服用格列齐特缓释胶囊2 mg ，1次/d ，二甲双胍片0.85 g，2次/d，参芪降糖胶囊1粒，3次/d 等药物。
饮食控制差，血糖控制情况不详。
10 d前，患者无明显诱因出现左侧腰部包块伴胀痛，中下腹部疼痛，于当地卫生院输液治疗无明显好转，包块迅速增大，伴胀痛。
5 d前，患者逐渐出现左下肢肿胀、麻木、疼痛不适，伴左下肢活动障碍，恶心、呕吐，遂来我院就诊。
既往无外伤及手术史。
体格检查：体温36.5℃，脉搏98次/分，呼吸20次/分，血压83/57 mmHg，体重指数17.89 kg/m2，精神淡漠，脱水貌，颜面无水肿，双肺未闻及干湿啰音。
心界不大，律齐，各瓣膜听诊区未闻及明显杂音。
左侧腰部可见大小约为15 cm×10 cm包块，质硬，边界清楚，无明显波动感，皮温稍高，包块顶部皮肤发红，无破溃，无流脓及渗液，包块周围皮下可扪及明显捻发感。
purification翻译
purification翻译purification的中文翻译是“净化”或“纯化”。
这个词可以用于多种领域，包括环境科学、化学、生物学和心灵修炼等。
以下是一些关于purification的用法和中英文对照例句：1. Environmental Purification:- The purification of contaminated water is essential for maintaining a healthy ecosystem. (水的净化对于维护健康的生态系统至关重要。
)- Air purification systems are used to remove pollutants and improve indoor air quality. (空气净化系统用于去除污染物，改善室内空气质量。
)2. Chemical Purification:- The process of distillation is commonly used for the purification of liquids. (蒸馏过程常用于液体的纯化。
)- Crystallization is a technique used for the purification of solid substances. (结晶是一种用于固体物质纯化的技术。
)3. Biological Purification:- The liver plays a crucial role in the purification of toxins from the body. (肝脏在身体毒素的净化中起着关键作用。
)- The purification of DNA is necessary for many molecularbiology experiments. (DNA的纯化对于许多分子生物学实验是必要的。
)4. Spiritual Purification:- Meditation is a practice that allows for the purification of the mind and the attainment of inner peace. (冥想是一种允许净化心灵并达到内心平静的修炼。