药物分析

药物分析
一.
1.杂质检查:
2.杂质限量（Impurities limited):药物中所含杂质的最大允许量叫做杂质限量.
3.准确度（accuracy）:指用该方法测定的结果和真实值或参考值接近的程度,一般用
回收率%表示
4.精确度（precision）:指在规定的测试条件下,同一个均匀供试品,经多次取样测定
所的结果之间接近程度
5.药物分析（pharmaceutical analysis）:是利用分析测定手段,发展药物分析方法,
研究药物的质量规律,对药物进行全面检查和控制的科学
6.药物质量管理规范:GMP
7.药物标准:系根据药物自身的理化和生物学特点,按照批准的来源、处方、生产工艺、
贮藏运输条件等所制定的,用以检查药品质量是否达到用药要求并衡量其质量是否
稳定均一的技术规定.
8.恒重:除了另有规定外,系指供试品连续两次干燥或炽灼后的重量差异在0.3mg以下
的重量.
9.重金属(heavy metals):系指在实验条件下能和硫代乙酰胺或硫化钠作用显色的金
属杂质.
精密称定: 系指称取重量应准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

中性乙醇:
溶解度:系指在一定温度下、压力和溶剂的条件下,一定量的饱和溶液中溶质的含
量.
百分吸收系数:
滴定度（Titer）:系指每1ml规定浓度的滴定液所相当的被测药物的重量,《中国
药典》用毫克(mg)表示.
定量限：系指试样中被测物能被定量测定的最低量，其测定结果应具有一定的准确
度和精密度.
检测限：系指试样中被测物能被检测出的最低浓度或量。

17.特定杂质（Specified Impurities）：是指在质量标准中分别规定了明确的限度，
并单独进行控制的杂质；特定杂质包括结构已知的杂质和结构未知的杂质。

18.标准曲线（standard curve）：也称校正曲线或工作曲线，反映了体内样品中所测
定药物的浓度和仪器响应值的关系，一般用回归分析法所得的回归方程来评价。

19.提取回收率（extraction recovery）：是指从生物样本介质中回收得到待测物的响
应值和标准物质产生的响应值的比值，通常以%表示。

20.柯柏反应（Kober reaction）：指雌激素和硫酸-乙醇的呈色反应，在520nm附近有
最大吸收，可用于雌激素类药物含量的灵敏测定。

二. 填空
1.室温是指10～30℃.
2.干燥失重是检查药物中的水分和其他挥发性物质
3.酸碱度检查的水煮沸放冷.
硫酸盐的检查是在稀盐酸酸性条件下和BaCl2反应, 加酸的目的防止碳酸钡或
磷酸钡等弱酸形成钡盐沉淀对比浊的影响
4.氯化物检查的标准溶液是标准氯化钠
硫酸盐检查的标准溶液是标准硫酸钾
铁盐检查的标准溶液是标准铁溶液
5.砷盐的检查采用的方法古蔡氏法其原理是金属锌和酸作用产生新生态的
氢,和药物中微量砷盐反应生成具挥发性的砷化氢,遇溴化汞试纸,产生黄色或棕色
的砷斑,和一定量标准砷溶液所生成的标准砷斑比较,判断供试品中砷盐是否符合
限量规定常用试剂是碘化钾、酸性氯化亚锡、盐酸加 2ml标准砷溶液 .
6.有机残留物的检查方法是毛细管柱顶空进样等温法、毛细管柱顶空进样程序升温法、
溶液直接进样法原子吸收光度法用于
7.中国药典ChP 英国药典BP 美国药典USP欧洲药典EP日本药局方JP
国际药典 Ph.Int
8.芳伯胺基用重氮化-偶合反应鉴别
9.冷水温度系指2～10℃
冷贮温度系指2～10℃
10.中和法测定用双步滴定法排除水杨酸的干扰,直接滴定和剩余滴定法测定阿司匹
林
11.1.溴量法含酚羟基（溴代反应）、含双键（取代反应）、氧化反应
12.2.气相色谱：残留溶剂和V E 的含量测定
13.正相色谱：V A 和V D的含量测定
14.3.药典的组成凡例、正文、目录、索引P13
15.4.药典规定分析方法系统适应性试验理论塔板数、分离度、重复性（精密度）、拖
尾因子 P13
16.5.黄体酮的专属性反应C17—甲酮基的呈色反应（黄体酮和亚硝基铁氰化钠反应生
成蓝紫色产物）
17.6.反相高效液相色潽法中常用的扫尾剂为：醋酸铵、三乙胺、二乙胺、乙腈等。

18.7.精密称定：称取重量应准确至所取重量的千分之一。

19.8.凯式定氮法加入硫酸钾目的：控制温度；加入硫酸铜目的：辅助氧化。

20.9.药典规定的实验室温度为：10~30℃。

21.10.铁盐检查常用显色剂为：硫氰酸铵。

22.加入过硫酸铵的目的为：将二价铁变为三价铁。

23.11.氧瓶燃烧法在燃烧瓶底部融封一根铂丝的目的：加速燃烧。

24.12.为消除Vc注射液中抗氧剂亚硫酸氢钠的干扰应：测定前加丙酮和甲醛。

25.13.重氮化-偶合反应是用来鉴定：芳伯氨基。

26.14.抗生素的含量测定：高效液相色谱法（HPLC）。

27.15吩噻嗪类药物的终点指示剂为：用冰醋酸和醋酐的混合溶液为溶剂，以电位法确
定滴定终点。

28.16.需要检查酮体的药物是：肾上腺素。

29.17.溴量法：（1）试剂：盐酸；（2）加HI的目的：置换出碘；（3）指示剂：淀粉
30.18.亚硫酸钠反应中加KI的目的：提高反应速度
31.19.鉴别：是指存放在标签中的药物20.甾体有关物质的检查常用
HPLC
32.21.恒重：指供试品连续两次干燥或灼烧的重量差异在0.3mg以下的重量
33.22.绿奎宁反应：用于鉴别喹啉类衍生物
34.23.HPLC的RSD<2.0%；容量分析的RSD<0.2%
35.24.制剂中糖类的干扰：强氧化剂干扰测定，如高锰酸钾；弱氧化剂不干扰测定，如
硫酸铈
36. 25.准确度用回收率表示，计算：原料药：回收率（%）=加入量测定值×100%；制剂：加入量
本底量测得量-×100%.
37. 精密度用相对标准偏差表示
38. 26.左氧氟沙星和有氧氟沙星的鉴别：可用配合交换手性流动相法测定；手性配基（L-
脯氨酸，D-苯丙氨酸)+二价金属(Cu 2+)
39. 27.四氮唑比色法用于皮质激素药物含量测定。

40. 28.正相色谱的流动相：正己烷，正戊醇 41. 29.%11CM E 它是指在一定波长下，溶液浓度为1%（W/V ），厚度为1cm 时的吸光度。

42. 30.需要检查酮体的药物是：肾上腺素。

43. 31.氧瓶燃烧法适用于什么药物检查 卤素；含磷、硫药物；硒杂质检查；金属有机
物R-0-Me （有机酸或酸的金属盐）；有机金属药物R —Me 。

44. 32.药物化学鉴别需要具备什么条件 需具备反应迅速、现象明显的特点。

45. 33.亚硝酸钠滴定法指示反应终点的方法为 ：永停滴定法
46. 34.氢化可的松的鉴别：C 17位α-醇酮基，用四氮唑比色
47. 35.HPLC 系统适应性条件：精密度，分离度（＞1.5），拖尾因子，理论塔板数。

48. 36.喹诺酮类药物性质：酸碱两性，紫外吸收，旋光性，分解反应，和金属离子反应，
溶解性
三. 选择题
1. 中国药典规定阴凉处
2. 药物杂质检查限量不超过百万分之一的是
3. 中国药典用硫酸酰胺法检查是
4. 药物检查的要求
5. 可用限量法测定含量(含双键)的药物
6. 我国药典判断亚硝酸钠的方法
7. 巴比妥和硝酸银反应生成的盐是
8. 亚硝酸钠中加 增加氧化氮的浓度
1. 非水滴定法测定含氮杂环类药物的滴定剂是高氯酸
2. 精密度常用相对标准差来表示是对的 准确度使用相对标准偏差来表示不对使用
回收率 精密度常用回收率来表示是不对的,
3. 铁盐检查时加入过硫酸铵的作用是将二价铁氧化成三价铁 铁盐检查时常加的显
色剂是
4. 古蔡氏法检查砷中常加醋酸铅棉花的作用是吸收硫化物遇酸生成的硫化氢
5. 可发生硫色素反应的是维生素B
6. 绿化物检查中所带的酸性条硝酸
7. 盐酸普鲁卡因胺可用硝酸铁来鉴别是因为具有脂肪酸
8. 限量法测定司可巴比妥钠是 双键结构
9. 化学和原料药反应测定首选的是容量分析方法 极易溶解
系指溶质1g(ml)能在溶剂不到1ml 中溶解 易溶
系指溶质1g(ml)能在溶剂1～不到10ml 中溶解 溶解
系指溶质1g(ml)能在溶剂10～不到30ml 中溶解 略溶 系指溶质1g(ml)能在溶剂30～不到100ml 中溶解
微溶系指溶质1g(ml)能在溶剂100～不到1000ml中溶解
极微溶解系指溶质1g(ml)能在溶剂1000～不到10000ml中溶解
几乎不溶或不溶系指溶质1g(ml)在溶剂10000ml中不能完全溶解
阴凉处系指不超过20℃
凉暗处系指避光并不超过20℃
冷处系指2～10℃
常温系指10～30℃
水浴温度除另有规定外,均指98～100℃
热水系指70～80℃
微温或温水系指40～50℃
室温或常温系指10～30℃
冷水系指2～10℃
冰浴系指约0℃
放冷系指放冷至室温
精密称定系指称取重量应准确至所取重量的千分之一
称定系指称取重量应准确至所取重量的百分之一
精密量取系指称取重量应准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求量取系指可用量筒或按照量取体积的有效数位选取量具
约系指用量不得超过规定量的±10%
1.干燥失重的方法
答: ①常压恒温干燥法②减压干燥法③恒温减压干燥法④干燥剂干燥法⑤⑥⑦⑧⑨
2.杂质检查法的要求
答:杂质检查法应专属、灵敏,满足杂质限度检查的要求
3.含量测定方法选择的基本原则
答:①应有针对性,适用于被分析药物的理化和生物学特点,满足其质量的控制要求②应有依据包括文献、理论及试验依据,使建立的方法符合分析规律③并尽量参考和采用药典收载的方法
4.含量测定分析法的验证
答:⑴容量滴定分析方法的验证: ①要求:用规定的方法平行测定5份样本
②精密度:RDS一般应不大于0.2%（n=5）
③准确度（以回收率表示）:一般应在99.7%～100.3%之间（n=5）
⑵分光光度法的验证：①要求：用规定的方法平行测定5份样本
②精密度:RDS一般应不大于1.0 %（n=5）
③准确度：进行制剂的含量测定，则要考察辅料对测定的干扰，即将高、中、低各一定
量药物（标示量的80 %～120 %），分别加到按处方比配制的辅料中，混合均匀，制高、中、低模拟供试品各3份，分别精密称取适量，按规定分析方法测定其回收率，一般在
98.0%～102.0%之间.
④线性关系：配制系列浓度对照液（n≥5），依照规定，习惯度A一般应在0.2～0.8范围。

用A对浓度C进行线性回归分析，相关系数r应达到0.9996（n=5），截距应接近于零。

⑶HPLC法的验证要求：
①精密度：RSD﹤2.0%
②准确度：高、中、低三个浓度，每一浓度平行做三分，结果统计处理，回收率在98.0%～
102.0%之间。

③线性范围: 配制系列浓度对照液（n≥5），用色谱响应（A）对浓度C进行线性回归
分析，相关系数r应大于0.9990，截距应趋近于零。

④专属性：要考察辅料、有关物质或降解产物对成分色谱峰的干扰，如有干扰应设法
排除
⑤灵敏度：即检测限和定量限，分别以S/N=3和10时的检测浓度或检出量表示。

5.中国药典的内容
答：包括凡例，正文和附录
6.检验程序
答：①取样②检验（鉴别、检查、含量测定）③留样④检验报告
7.鉴别实验的条件
答：①溶液的浓度②溶液的温度③溶液的酸碱度④试验时间
8.杂质的来源
答：生产过程中引入、贮存过程中引入
9.丙二酰脲反应
巴比妥类药物含有丙二酰脲母核，鉴别试验就为丙二酰脲反应，丙二酰脲的鉴别反应有银盐反应和铜盐反应。

10.分析方法的验证内容
含量的测定：准确度、精密度、线性范围、专属性、耐用性
杂质定量测定（微量含测）：准确定、精密度、线性范围、专属性、耐用性、定量限
杂质限量检查：检测限、专属性、耐用性
鉴别试验：专属性、检测限、耐用性
11.重金属检查法
酸性：硫代乙酰胺法-试液为硫代乙酰胺，PH 3~3.5
炽灼的硫代乙酰胺法-温度通常为700~800℃，为减少损失，温度控制在500~600℃碱性：硫化钠法-试液硫化钠
12.吩噻嗪类药物的含量测定中，钯离子比色法的适合药物、特点、原理？
适用于吩噻嗪类抗精神病药物的测定。

利用了消除药物中氧化产物的干扰的原理。

原理：吩噻嗪类药物在PH2±0.1的缓冲溶液中，和钯离子（Pd2+）形成红色配合物，在500nm 波长附近具有最大吸收，可采用比色法测定其含量。

由于钯离子仅和未被氧化的硫元素配合显色，消除了药物中氧化物对测定的干扰。

比色液的浓度以50-250ug/mg为宜；比色液的颜色在显色10min后可稳定约2h。

13.巴比妥、苯巴比妥、司可巴比妥、含硫巴比妥的区别
巴比妥：母核的丙二酰脲反应（银盐反应、铜盐反应）
苯巴比妥：甲醛—硫酸反应、和硫酸—亚硝酸钠的反应、硝化反应
司可巴比妥：溴量法、和高锰酸钾反应（和碘试液反应）
含硫巴比妥：和铜盐反应、紫外吸收光谱、利用硫元素的鉴别试验
14.常用含量测定法的主要验证项目和要求
（1）容量滴定分析法的验证（要求：用规定的方法平行测定5份样本）
①精密度：RSD相对标准偏差一般应不大于0.2%（n=5）
②准确度（回收率表示）：一般应在99.7%~100.3%之间（n=5）。

（2）分光光度法的验证：
①精密度：用规定的方法平行测定5份样本，精密度RSD一般不大于1.0%（n=5）
②准确度：进行制剂的含量测定，则要考察辅料对测定的干扰，即将高、中、低各一定量药物（标示量的80%~120%),分别加到按处方比配制的辅料中，混合均匀，制备高、中、
低模拟供试品各3份，分别精密称取适量，按规定分析方法测定其回收率，一般应在
98.0%~102.0%之间。

③线性关系：配制系列浓度对照液（n≥5），依法测定吸光度A一般在0.2~0.8范围。

用A 对浓度C进行线性回归分析，相关系数r应达到0.9996（n=5），截距应接近于零。

（3）HPLC法的验证
①精密度：RSD<0.2% ②准确度：高、中、低三个浓度，每一浓度平行做三份，结果统计处理，回收率在98.0%~102.0%之间③线性范围：配制系列浓度对照液（n≥5)，用色谱相应（A）对浓度C进行线性回归分析，相关系数应大于0.9990，截距应趋近于零
④专属性：要考察辅料、有关物质或降解产物对成分色谱峰的干扰，如有干扰应设法排除
⑤灵敏度：即检测限和定量限，分别以S/N=3HE 10时的检测浓度或检出量表示
15.生育酚的来源、何药的杂质、药典中的测定方法和原理？
维生素E 测定方法：硫酸铈滴定法
原理：利用游离生育酚的还原性，可被硫酸铈定量氧化。

故在一定条件下以消耗硫酸铈滴定液（0.01mol/L）的体积来控制游离生育酚的限量。

游离生育酚被氧化成生育酚后失去2个电子，滴定反应的摩尔比为1：2生育酚的分子量为430.7，即1mol的硫酸铈相当和1/2mol 的生育酚。

16.专属性鉴别反应
（1）V B1 ：硫色素荧光反应（2）链霉素：麦芽酚（Maltol）反应、坂口（Sakaguchi）反应（3）喹啉：绿奎宁反应（4）托烷生物碱类：Vitali反应（5）甾体激素：柯柏（Kober）反应 (6)麻黄碱：氨基醇的双缩脲反应脂肪伯胺的Rimini反应
17.双步滴定法优点 P214
（1）消除制剂中加入稳定剂的干扰（2）适合于阿司匹林制剂中杂质的测定18.青蒿素类药物的鉴别P326
（1）过氧桥的氧化反应（碘化钾试液—淀粉）（2）羟钨酸铁反应：含有内酯的化合物，在碱性条件下和羟胺作用，生成羟钨酸；在稀酸中和高铁离子呈色。

19.氯化物的检查（药物不溶时，过滤） P118
氯化物浓度以50ml中含50—80ug的CL为宜。

加硝酸可避免弱酸银盐的干扰，且可加速氯化银沉淀的生成并产生较好的乳浊。

酸度以50ml供试液中含稀硝酸10ml为宜。

20.古蔡氏法原理
（1）原理：利用金属锌和酸作用产生新生态的氢和药物中微量砷盐反应生成具有挥发性的砷化氢，遇溴化汞试纸产生黄色至棕色的砷斑，和标准砷溶液在同样条件下生成的砷斑比较，判断药物中砷盐的限量（2）KI的作用：①还原As5+→As3+②利于砷化氢的生成③抑制锑化氢的生成（3）酸性SnCL2的作用：①还原As5+→As3+ ②生成锌锡齐，起去极化作用③抑制锑化氢的生成④除去I2
（4）醋酸铅棉花的作用：吸收硫化氢气体，生成硫化铅
21.离子对测定药物
原理：药物+离子对试剂→离子对药物：离子试剂
碱性药：①烷基磺酸盐：戊（庚、十二烷基）磺酸盐②酸：高氯酸（钠）、磷酸、三氟（氯）乙酸、枸橼酸（钠）③烷基硫酸盐：十二烷基硫酸盐
酸性：季胺盐类：四丁基氢氧化铵、四丁基溴化铵
22.鉴别对氨基水杨酸钠：其结构中含酚羟基和芳伯氨基。

酚羟基：对氨基水杨酸钠的水溶液加三氯化铁试液即显蓝紫色。

芳伯氨基：可发生重氮化-偶合反应，对氨基水杨酸钠中含有芳伯氨基，在酸性溶液中和亚硝酸钠试液进行重氮化反应，生成的重氮盐再和碱性β-萘酚偶合生成红色偶氮化化合物。

23.硬脂酸镁的干扰及排除：
1）Mg+2可能对EDTA有干扰：①PH10：K M+2待—EDTA＞K Mg-EDTA；②加掩蔽剂：K Mg+2—酒石酸＜K Mg-酒石酸；2）Mg+2可能对非水滴定有干扰。

24.制剂分析的特点：
1）鉴别：考虑辅料是否有干扰，消除干扰。

2）检查：①因为制剂是用检查合格的原料制成的，一般不需要再检查，但是在制剂生产中可能引入或产生的杂质还需要进行检查。

②增加了制剂的常规检查。

2）含量测定：①方法：原料药首选容量分析，制剂首选HPLC。

②计算：原料药用百分含量表示，制剂用百分标示量，表示方法不同。

25.酸性染料比色法的原理、制剂特点、影响因素：
1）原理：在一定条件下，B+H+BH+，HIn离子试剂H++In—，BH++In—BH+In—
2）影响因素：①水相的PH②酸性染料的种类③有机溶剂的种类和性质④有机相中水分的影响⑤酸性染料中的有色杂质。

3）制剂特点：所选用的酸性染料，应该不仅能够和有机碱性药物定量的结合，而且生成的离子对要在有机相中有较大的溶解度，同时要求生成的离子对在其最大吸收波长处有较高的吸光度，染料在有机相中则要不溶或很少溶解。

26.盐酸普鲁卡因注射剂原理、试剂条件、注意事项：
（1）原理：分子结构中具有芳伯氨基的药物，在酸性溶液中可和亚硝酸钠反应，生成重氮盐，因此可用亚硝酸钠滴定法测定其含量，用外指示法确定滴定终点。

（2）试剂条件：亚硝酸钠（分析纯）、对氨基苯甲酸乙醇液（分析纯）、盐酸（0.8％）丙酮（1:9）、对二甲氨基苯甲醛乙醇液（2）。

（3）注意事项：①加入适量KBr加快反应速度。

②加入过量HCl加速反应，但不宜过多。

③反应在室温下进行。

④滴定时宜将滴定管尖端插入液面以下约2/3处，快滴，近终点时，将滴定管取出，缓慢继续滴定。

⑤用永定滴定法指示终点
27.非水碱量法：适用于碱性药物
溶剂：Pkb8~10冰醋酸；PKb10~12冰醋酸-醋酐；PKb＞12醋酐
滴定剂：高氯酸指示剂：结晶紫，电位法
H2SO4在水介质中为二级电离，在非水介质中为一级电离，H2SO4的干扰用计算法消除；
HCI和HBr的干扰：加入醋酸汞HgAc2或改用电位法；
HNO3在非水介质中为弱酸，应采用电位法做指示剂，因为HNO3会破坏指示剂结晶紫
28.反相色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶
流动相：水+甲醇或乙腈；ph应控制在2~8之间，使用ph<2的流动相时，和硅胶相连的化学键合易水解脱落，应使用耐酸的填充剂；使用ph＞8的流动相时可使载体硅胶溶解，应使用耐碱的填充剂。