化学发光微粒子免疫分析法检测梅毒螺旋体特异性抗体的应用与评价

梅毒是由梅毒螺旋体感染引起的性传播疾病 ， 具 有高度传染性 。国内诊断梅毒螺旋体特异性抗体 （ 抗 － TP） 常用的方法包括梅毒螺旋体血凝试验 （ TPHA ） 、 梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验 （ TPPA ） 、 梅毒螺旋体荧 光抗体吸 收 试 验 （ FTA － ABS ） 和 酶 联 免 疫 吸 附 试 验
CMIA 与 TPPA 检测抗 － TP 结果
3M61 － 01 。TPPA 试剂盒购自日本富士瑞必欧株式会 社（ 珠 海 丽 珠 试 剂 股 份 有 限 公 司 ） ， 批 号 ： WN00705 。 WB 法 试 剂 盒 购 自 德 国 欧 蒙 公 司 ， 批 号 ： DY 2111 － 1601G。 检测方法 1． 3． 1 CMIA 法测定 1． 3 4 348 份标本用美国雅培公司 I2000 化学发光免疫分析仪检测 。CMIA 从测试到结果
参考文献
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广东医学 2012 年 4 月 第 33 卷第 8 期
Guangdong Medical Journal
Apr． 2012 ，Vol． 33 ，No． 8
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同时也存在一定的假阳性 。为了指导临床医师准确判 实验室需根据自身情 断就医者梅毒感染的真实情况 ， 况制定 CMIA 法检测抗 － TP 的 S / CO 值。 本研究应用 CMIA、 TPPA 和欧蒙免疫印迹 （ WB） 3 种方法对 294 份 标本进行检测 ， 以 WB 为金标准 ， 评价 CMIA 与 TPPA 的敏感性 、 特异性和符合率 ， 采用 ROC 曲线计算出曲 以提高 CMIA 法检测梅毒 线下面积最大时的 cutoff 值， 抗体的灵敏度与特异性 。 1 1． 1 材料与方法 标本来源
3左右同侯晓菁等染梅毒螺旋体后机体主要产生两类抗体一类为抗梅毒螺旋体的特异性抗体另一类是抗梅毒螺旋体破坏患者组织后释放出的某些物质的抗体称为反应素可用于梅毒疗效观察随访和复发的诊断检测所采用的抗原为非特异性抗原该抗原可与其他病原菌刺激机体所产生的抗体相结合呈生物学假阳性反应
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用， 采用受试者操作特性（ ROC） 曲线分析应用 CMIA 检测抗 － TP 最佳的 S / CO 的 cutoff 值， 以提高抗 － TP 检测的 灵敏度和特异度。方法 294 份， 分别用梅毒螺旋体明胶凝集试验 （ TPPA） 和欧蒙免疫印迹法 （ WB ） 进行抗 － TP 检测， 比较 TPPA 与 CMIA 的特异性和敏感性， 采用 SPSS 16. 0 统计软件对抗 － TP S / CO 值绘制 ROC 曲线， 得出 CMIA 在本实验室的 S / CO 最 佳 cutoff 值。结果 CMIA 与 TPPA 的阳性检出率分别为 42. 1% 和 42. 5% ， 以免疫印迹法结果为金标准 ， 敏感性为 100. 0% 和 99. 2% ， 特异性为 88. 2% 和 88. 7% ， 阳性预测值为 86. 1% 和 86. 7% ， 阴性预测值为 100. 0% 和 99. 3% ， CMIA 的特异性为 98. 4% ， 与 WB 的总符合率均为 93. 2% 。ROC 曲线分析其最佳筛查 cutoff 值 S / CO = 3. 125 时， ROC 曲线下面积为 0. 956 ， 敏感性为 97. 2% ， 具有很好的诊断价值。结论 CMIA 法和 TPPA 法具有高敏感性和特 可显著提高实验的特异性 。 异性。采用 ROC 曲线分析得到 CMIA S / CO 的 cutoff 值为 3. 125 时， 【关键词】 梅毒螺旋体特异性抗体； 化学发光免疫分析法； 梅毒螺旋体明胶凝集试验； 免疫印迹法； ROC 曲线
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（ 3 ） 利用其结构中 DCN， 特异性阻断 EGFR 高表达所 该嵌合 产生的乳腺癌浸润性生长和转移效应 。 然而 ， 体在转化菌株中主要以包涵体的形式表达 ， 虽采用稀 释及透析等复性方法获得微量有生物活性的重组嵌合 蛋白， 但远不能满足体外细胞学实验 ， 尤其是动物实验 研究的需要。 因此 ， 利用真核表达载体在哺乳动物细胞表达重 组嵌合蛋白是克服上述原核表达载体诸多不足的途径 因具 之一。腺病毒是一种常用的真核细胞表达载体 ， 有转移效率高、 宿主范围广 、 不整合入细胞染色体基因 组、 安全性较高等特点 ， 成为基础研究 、 基因治疗和重 组疫 苗 开 发 等 领 域 中 的 重 要 工 具 。 为 进 一 步 研 究 P2G － DCN 的抗癌作用 ， 我们构建了携带 P2G － DCN 基因的重组腺病毒载体 ， 并在 HEK － 293 细胞中实现 了分泌表达， 为后续系统开展 Ad － P2G － DCN 对恶性 肿瘤的治疗作用奠定了必要的前期工作基础 。
（ 0. 25% ） ， 阳性 133 份（ 3. 06% ） 。 2． 2 CMIA、 TPPA 和 WB 检测抗 － TP 结果 S / CO 分布 294 份血清标本 CMIA、 TPPA、 WB 检测抗 － TP 结果 ： CMIA 与 TPPA 检测 294 份血清标本 ， CMIA 检测阳性 144 份， TPPA 检测阳性 143 份 ， WB 确证阳性 124 份。 见表 1 。
表1 项目 0 ～ 0． 499 0． 5 ～ 0． 999 1． 0 ～ 1． 999 2． 0 ～ 4． 999 ≥5． 0 合计 CMIA、 TPPA 和 WB 检测抗 － TP 结果 S / CO 分布 份 CMIA 0 0 11 17 116 144 TPPA 0 5 5 17 116 143 WB 0 0 1 7 116 124 合计 129 21 11 17 116 294
2． 3
比较 CMIA 与 TPPA 两种方法检测 294 份血清标本抗 － TP 的结果 ， 2 P ＞ 0. 05 ） ， 差异无统计学意义 （ = 0. 10 ， 见表 2 。
表2 CMIA 阳性 阴性 合计 CMIA 与 TPPA 检测抗 － TP 结果 TPPA 阳性 138 5 143 阴性 6 145 151 合计 144 150 294 份
化学发光微粒子免疫分析法检测梅毒螺旋体 特异性抗体的应用与评价
杜静，张泽芸，周薇，陆红
北京大学深圳医院检验科 （ 广东深圳 518036 ） 【摘要】 目的 评价化学发光微粒子免疫分析法 （ CMIA） 检测梅毒螺旋体特异性抗体 （ 抗 － TP ） 的实验室应 收集美国雅培公司 I2000 化学发光免疫分析仪检测的抗 － TP 阴性、 弱阳性、 阳性血清共
收集 2010 年 12 月至 2011 年 3 月期 间临床常规免疫学检查血清标本 ， 共 4 348 份， 用美国
雅培公司 I2000 化学发光微粒子免疫分析仪检测抗 － TP， 留取阳性标本 133 份 （ S / CO≥2. 0 ） ， 弱阳性标本 11 份（ 1. 0 ≤ S / CO ＜ 2. 0 ） ， 灰区标本 21 份 （ 0. 5 ≤ S / CO ＜ 1. 0 ） ， 阴性标本 129 份 （ S / CO ＜ 0. 5 ） ， 共 294 份 ， 年龄 在 19 ～ 91 岁， 平均 （ 41 ± 9. 6 ） 岁 ， 男女比例为 2 ∶ 1 ， 在 － 20℃ 条件下保存血清待测 。 1． 2 仪器和试剂 CMIA 检测 TP 抗体采用美国雅培 公司 I2000 化学发光免疫分析仪及其配套试剂 ， 批号 ：
2． 4
判读均为仪器全自动完成 ， 仪器内置的判断标准抗 － TP 的 S / CO≥1. 0 ， 提示有反应性 。 1． 3． 2 对 294 份血清标本进行抗 － TP 检测， 手工操作 ， 按试剂说明书肉眼判读结果 ， 反应孔 TPPA 法测定
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（ ELISA） 等。但是无论是使用何种方法 ， 检测抗 － TP 均存在一定数量的假阳性和假阴性
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。 化学发光微粒
子 具有特异性好 、 敏感性高 、 可定量 、 全自动操作 、 重复性 好等优点
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， 可作为大规模抗 － TP 检测筛选试验 ， 但