唐氏筛查操作SOP文件

唐氏综合征产前筛查操作规程
【项目名称】
唐氏综合征产前筛查
【试剂品牌】
通用名：唐氏综合征产前筛查系统
商品名：贝喜
英文名： Downs Syndrome Screening System
汉语拼音：Tang Shi Zong He Zheng Chan Qian Shai Cha Xi Tong
检验方法：酶联免疫（双抗体夹心）法
【包装规格】
48人份／盒
【试验原理】
唐氏综合征又称先天愚型，是发病率较高的染色体异常病，发病率约为1/750。

本品采用二项血清筛查指标：甲胎蛋白（AFP）和绒毛膜促性腺激素（hCG），即通过AFP、hCG的定量测定和数据分析软件计算唐氏综合征产前筛查危险系数，用于唐氏综合征或胎儿其他染色体异常的产前筛查。

【主要成分】
试剂盒组份数量规格
AFP抗体包被板1包8孔×6条
hCG抗体包被板1包8孔×6条
AFP标准品F 1支冻干品
hCG标准品F 1支冻干品
AFP质控品1 1支冻干品
AFP质控品2 1支冻干品
hCG质控品1 1支冻干品
hCG质控品2 1支冻干品
AFP酶标抗体1瓶 6ml
hCG酶标抗体1瓶 6ml
稀释液2瓶40ml
浓缩清洗液(30×) 1瓶30ml
显色液A 1瓶6ml
显色液B 1瓶6ml
终止液1瓶22ml
AFP标准品稀释管(B、C、D、E) 1包4支
hCG标准品稀释管(B、C、D、E) 1包4支
酶标板架1个96孔
说明书1份/
1.100μl及1000μl单通道可调移液器，配套一次性吸管尖头；
2.Anthos2010酶标仪；
3.电脑
【操作步骤】
一、试剂准备
1.测前，所有试剂置于冰箱（2～8℃）内，临用前取出使用。

2.浓缩清洗液用纯水或蒸馏水稀释30倍，即30ml浓缩清洗液+870ml纯水或蒸馏水，
摇匀备用，作为清洗液。

二、操作步骤
1.标准品的稀释：
(1)向标准品F瓶中加入1.2ml稀释液，混匀；
(2)分别向标准品B、C、D、E管中加入300ul稀释液；
(3)从标准品F瓶中取300ul混匀的液体加入标准品E管中，混匀；
(4)从标准品E管中取300ul混匀的液体加入标准品D管中，混匀；
(5)依此类推，标准品C、B的制备同上，标准品A即为稀释液；标准品稀释后需
在短期内用完。

2.质控品的稀释：
质控品1和2：分别加入1.2ml稀释液，混匀。

3.加样：
(1)选择相应的抗体包被板；
(2)在待测标本的孔中先分别加入80ul稀释液；
(3)分别取6个标准品（A～F）及2个质控品100ul直接加入相应抗体包被板孔内；
(4)直接取20ul待测标本加到已加入80ul稀释液的抗体包被板中；
(5)将加好样的酶标板水平轻轻晃动以混匀样本，置密封袋内，37℃水浴孵育1小
时。

4.洗板：
甩去孔中液体，用稀释好的清洗液加满各孔，略静置一下，甩去板中液体，再加入清洗液，重复操作共5次，拍干。

5.酶标抗体反应：
(1)将置于冰箱内的酶标抗体取出；
(2)将酶标抗体100μl/孔加入相应孔中，加毕，即刻计时；
(3)将酶标板置于密封袋中，37℃水浴孵育15分钟；
(4)重复洗板操作。

6.显色
(1)将置于冰箱内的显色液A、显色液B取出；
(2)将显色液A、显色液B等体积混匀；
(3)每孔加入100μl的混匀显色液，加毕，即刻计时，避光、37℃水浴孵育12分钟；
(4)每孔加入200μl终止液，终止反应。

7.比色：
用酶标仪于450nm波长，并以630nm波长为参考波长，读取光密度值（OD值）。

危险系数的临界值为1/275：
1）当危险系数大于临界值，建议做产前诊断，如抽取羊水，做羊水细胞培养染色体核型分析等；或直接人工流产，终止妊娠；
2）当危险系数小于临界值，则胎儿为唐氏综合征的危险较小，可继续妊娠。

【样本要求】
抽取孕中期（14~20周）孕妇外周血2ml（孕周以B超或末次月经法计算），置一次性采血管内，室温静置1-2小时后2000转/分离心15分钟，吸取血清。

若不能及时检测，血清标本应低温冻存，检测时应将标本融化后混合均匀，并避免反复冻融。

血清标本在4℃冰箱只能存放一个星期。

已稀释的血清不宜存放。

所有标本均看作有潜在感染性的物品，操作和保存时按国家标准执行。

【注意事项】
1.每次检测必须同时做AFP和hCG的标准曲线及质控品，不能使用以前做过的标
准曲线；
2.如果一个试剂盒一次使用不完，且几次检测时间间隔较长，建议将剩余的标准
品及质控品置于低温(0℃以下)冰箱冷冻保存，下一次使用前取出，融化后混
匀再使用(酶标抗体不宜低温冷冻)；
3.建议一个试剂盒(48人份)最好一次使用完，若条件不允许也不要分两次以上使
用，这样不但标准品及质控品不够用，而且会造成浪费(每次都要有8孔来作
标准品及质控品)，同时标准品及质控品的反复多次冻融会对检测结果造成影
响；
4.如果条件允许，建议将标准品和质控品做双孔，结果以两孔的平均值计算；
5.一次未用完之包被板条应密封保存，贮藏及应用时不要将试剂暴露于强热、光
下；
6.本试剂盒仅供体外诊断用，一个盒应作为整体应用，不要将不同批号的试剂混
合用，并请在有效期内使用；
7.含大量脂质、严重黄疸及溶血或加热灭活之标本均可能影响检测结果；
8.建议按《产前诊断技术管理办法》的有关规定，使用本品。