10、凝胶层析(分子筛层析)分离蛋白质

10、凝胶层析(分子筛层析)分离蛋白质
凝胶层析技术是一种分子筛层析技术，是一种重要的蛋白质纯化技术。

在分子量范围
从1000到10万之间的蛋白质都可以通过凝胶层析技术得到分离和纯化。

凝胶层析技术是一种基于物质分子大小及其交互作用的分离技术，它是利用凝胶作为
固相，使样品在凝胶中轻松穿过，以纯化和分离分子的方法。

其分离原理基于蛋白质分子
大小、形状、电荷共性、亲水性、亲油性等因素，使得不同性质的蛋白质能够在凝胶中被
分离出来。

凝胶层析技术是一种非常灵活的蛋白质纯化方法，可以通过改变凝胶的性质来控制蛋
白质的分离。

通常，不同的凝胶可以使不同质量、形状、电荷、肽段序列、附加物（如金
属离子）等的蛋白质得到分离。

凝胶材料的选择也可以基于其高效分离能力、稳定性和可
重复性，使其成为蛋白质纯化和制备的理想平台之一。

凝胶层析技术主要有四种类型：凝胶渗透层析、离子交换层析、亲和层析和反相层析。

这些层析技术可以单独或联合应用，以便选择最适合特定任务的技术，从而减轻分离的复
杂性和提高分离的效率。

凝胶渗透层析是一种分离溶液中分子大小的分离技术。

它基于分子与凝胶微孔之间的
交互作用。

大分子无法穿过凝胶孔径，所以大分子能够被分离并集中在凝胶上部。

小分子
可以穿过凝胶孔径，溶液中小分子会穿过凝胶，并在凝胶基质上满足体积排除原理而被提取。

离子交换层析是一种基于蛋白质表面电荷性质而进行分离的技术。

其原理是利用带净
电荷的离子交换羧基树脂，将带相反电荷的蛋白质分离开来。

这种层析技术可以通过调整pH、离子强度或洗脱缓冲液性质等条件，实现蛋白质的选择性分离。

亲和层析是一种利用具有选择性的亲和剂与蛋白质或其结构域结合而实现分离。

亲和
剂可以是抗体、酶、染料、金属离子，或者其他化合物。

蛋白质会与亲和剂通过特异的非
共价键结合，被分离和纯化。

反相层析是一种利用分子的亲水性和亲油性的不同，通过逆向相分离进行分离。

也就
是说，油性物质被保留在反相层析柱中，而水性物质穿过柱被洗去。

总之，凝胶层析技术是一种非常重要的蛋白质纯化技术，可以有效地分离不同特性的
蛋白质。

对于许多生物科技和生命科学的领域，这种方法是非常有用的，并已经用于大量
的研究和应用中。