2-1检测生物组织中的糖类、脂肪、和蛋白质(课件)高一上学期生物人教版必修一

蛋白质
添加顺序 方法
甲液和乙液等量混合均匀 后再加入
先加双缩脲试剂A液1mL，摇 匀，再加双缩脲试剂B液4滴
反应原理 反应条件
还原糖中的醛基被Cu(OH)2氧 化， Cu(OH)2被还原成Cu2O
50-65℃水浴加热
具有两个以上肽键的化合物在碱 性条件下与Cu2+反应生成络合物
不需加热，摇匀即可
反应现象
注意：多肽也能与双缩脲试剂发生紫 色反应，所以能与双缩脲试剂发生紫 色反应的不一定是蛋白质。
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比较斐林试剂和双缩脲试剂
斐林试剂
双缩脲试剂
甲液
乙液
A液
B液
成分 鉴定物质
0.1g/mL的 NaOH溶液
0.05g/mL的 CuSO4溶液
还原性糖
0.1g/mL的 NaOH溶液
0.01g/mL的 CuSO4溶液
D、在NaOH和 CuSO4混合液中加入蛋白质22稀释液。
3、用苏丹Ⅲ染液对脂肪组织进行
染色时，可用来冲洗CL；
B、H2 O；C
C、50%的酒精； D、无水酒精。
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4、下列哪个实验可能用到显微镜 （）
A、可溶性还原糖的鉴定；
B、蛋白质的鉴定；
C
C、脂肪的鉴定；
D、淀粉的鉴定。
注意：（1）材料不能用西瓜汁、西红柿等，虽然 含糖高，但有颜色，会影响实验结果。
（2）还原糖：葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖、半乳 糖
注：蔗糖、淀粉不是还原糖
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（3）斐林试剂：
甲液：0.1g/mL的NaOH溶液
乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液 配制方法：甲液与等量乙液等量混匀，且现配现用。
（甲液和乙液不稳定，需分别配制、储存）
沸腾时冲出试管,造成烫伤。
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2 脂肪的检测 选材:最好选富含 脂肪 的生物组织,如花生。使用前可提前浸 泡3~4 h,以便于 切片 。
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取材和切片:花生种子(浸泡,去掉种皮),将子叶切成薄片
取最薄的切片，放在载玻片中央 制片 滴2~3滴 苏丹Ⅲ 染液（染色3min）
去浮色（1~2滴体积分数为50%的酒精溶液洗去浮色。） 制成临时装片（滴1滴蒸馏水，盖上盖玻片）
检测生物组织中糖类、 脂肪、蛋白质
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一、实验原理
• 还原糖 ＋
水浴加热，
50-65℃
斐林试剂
砖红色沉淀
❖ 脂肪 ＋
苏丹Ⅲ染液 苏丹Ⅳ染液
橘黄色 红色
❖ 蛋白质 ＋ 双缩脲试剂
紫色
淀粉 + 碘→蓝色
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二. 实验步骤 1。还原糖的检测 选材:还原糖含量较高、颜色为 白色或无色 的植物组织或器官,
如 苹果 、 梨 。
砖红色沉淀
紫色络合物
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实验室中没有双缩脲试剂，有斐林试 剂，能做蛋白质的鉴定实验吗?
能，实际实验中可以用斐林试剂，通过蒸 馏水稀释CuSO4配制双缩脲试剂，或通过 减少斐林试剂乙液的用量进行蛋白质的鉴 定。
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课堂练习
1、用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时， 溶液颜色的变化过程是（ D ） A、无色→砖红色（沉淀） B、浅蓝色→砖红色（沉淀） C、浅蓝色→蓝色→砖红色（沉淀） D、浅蓝色→棕色→砖红色（沉淀）
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2. 实验步骤 选材
砖红色沉淀
结论:组织样液中含有 还原糖
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水浴加热前后的颜色变化：
浅蓝色
棕色
砖红色
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若不加热，试管A、B中的是颜色的？
若溶液中没有还原糖，试管A、B中的是颜色的？
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(1ml) 2ml
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还原糖检测实验的实验结果 9
注意: 加热时试管底部不要接触烧杯底部,同时 试管口不要朝向实验者,以免试管内溶液
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2、在用双缩尿试剂鉴定蛋白质实验时，正确的操作
是（
）
A
A、2ml蛋白质稀释液先加0.1g/ml的NaOH，再加4
滴0.01 g/ml CuSO4溶液。
B、 2ml蛋白质稀释液先加4滴0.01 g/ml CuSO4溶 液，再加0.1g/ml的NaOH
C、2ml蛋白质稀释液，同时加4滴0.01 g/ml CuSO4和0.1g/ml的NaOH 混合液。
注：①样液浓度不宜过高，以免与双缩脲试剂发生反应后 会粘在试管的内壁上,使反应不彻底,试管也不易洗刷干净。
②B液不能过量，多余的B液会与A液反应成蓝色，而 掩盖生成的紫色。
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蛋白质的鉴定原理：
蛋白质分子中含有很多肽键（含二个肽键即可）， 在碱性溶液（即A液可造成碱性环境）中能与双缩脲试 剂中的Cu2+作用，产生紫色络合物。
4滴、1 mL C.黄豆浆、双缩脲、4滴、1 mL D.花生种子研磨液、斐林试剂、
1 mL、4滴
A 28
9下列关于实验操作步骤的叙述中，正确的是
B
()
• (A)用于鉴定可溶性还原糖的斐林试剂甲液和乙液， 可直接用于蛋白质的鉴定
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5、下列哪种试剂在使用过程中，必须
经过加热（
）
A、斐林试剂鉴定可溶性还原糖的过 程中；
B、苏丹Ⅲ 在鉴定动物组织中的脂 肪时；
A C、双缩尿试剂鉴定蛋白质时；
D、碘化钾溶液鉴定淀粉时。
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6、下列糖中能与斐林试剂反应产 生砖红色沉淀的是（ ） A、淀粉； B、果糖； C、蔗糖； D、纤维素。
B
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7.(2019·海南卷，6)下列检测生物分子的实验中，关
于颜色变化的叙述错误的是( )
D
A.淀粉遇碘液可显蓝色
B.葡萄糖与斐林试剂反应呈砖红色
C.蛋白质与双缩脲试剂反应显紫色
D.脂肪被苏丹Ⅳ染液染成橘黄色
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8.下图为鉴定蛋白质的流程图，其中甲、乙、丙、丁的含义分别是
A.黄豆浆、双缩脲、1 mL、4滴 B.花生种子研磨液、双缩脲、
（原因:苏丹Ⅲ易溶于酒精中）
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观察:先低倍镜,再高倍显微镜观察，视野中被染成（ 橘黄色）
的脂肪颗粒清晰可见
结论:说明花生种子中有 脂肪 存在
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蛋白质的检测
A液1ml B液4滴
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（1）选材：鸡蛋清（必须稀释）、大豆。 （2）试剂：双缩脲试剂
A液：0.1g/mL的NaOH溶液， B液：0.01g/mL的CuSO4溶液 （3）步骤： 试管中加样液2mL→加双缩脲试剂A液1mL（造成碱性环境）， 摇匀→加双缩脲试剂B液4滴，摇匀→观察颜色变化（紫色）
可溶性还原糖与斐林试剂发生作用，可生成砖红色的Cu2O沉淀。
CH2OH–(CHOH)4–CHO+2Cu(OH)2 → CH2OH–(CHOH)4–COOH+ Cu2O↓+ 2H2O
（葡萄糖）
（浅蓝色）
（葡萄糖酸）
（砖红色）
C即u：(O还H)原2被糖还中原的成醛砖基红（色–C的HCOu）2O被沉C淀u(OH)2氧化，