马铃薯种质的健康检验及其无毒苗的再生

Ｍ３ ：ＭＳ Ｎ Ａ ０ ５ｍ ／＋ ＋ Ａ ． ｇ 泛酸钙 ２ｍｇ ＋ Ａ ． ／， ０ Ｌ ／ Ｇ ３ ０ ｍｇ Ｌ ０５ Ｌ
ｐ ＝ ８； Ｈ ５．
原体 、 虫 、 线 昆虫 等 。因为许 多病 毒在 马铃 薯种 质交 换 过 程 中可 以通 过种 、 和花 粉传播 ， 些病 毒极 可能 随 苗 这 之扩散 蔓延 。近 年来 ， 随着科 学技 术 的发展 ， 毒检 测 病 技 术得 到 了很 快 的发展 应用 ，除了传 统 的生物 学测 定 外 ，电镜 、 清 学 检 测 、 酸 探 针 及 Ｐ Ｒ 技 术 等都 被 血 核 Ｃ 用 于病毒 检测 ，大 大提 高 了病毒 检测 的灵敏 度 和准确 率 。与 此 同时 ， 毒治疗 技术 除 了茎尖 脱毒 、 病 热处 理 治 疗外 ，化 学治疗 也有 了新 的发展 。为 了提高 马铃 薯遗 传种 质 的健康水 平 ，我们 对 ３个用 作遗 传种 质 的马铃 薯 进行 了病 毒检 测 研 究 ，发 现 ３个 品种 均 带 Ｐ Ｘ及 Ｖ Ｐ Ｙ 病毒 ， 后经 茎 尖培 养获 得 了这 ３ 品种 的健 康 Ｖ 最 个 无毒 苗 。
穆 艳娥 ， 王拴 福 。 青 云 。 生武 ， 利爱 ， 姬 柴 邓 张东 红 。 维 山 石
（山 西省薯 类脱毒 中心 ，山西 太原 ０ ００ ３０６）
摘 要： 马铃 薯种质有广泛的应用 ， 健康种 质是 马铃 薯生产和品质 改良的基 本要 求 ， 生产无毒马铃薯是提 高其健康水平的 关键措施 。对 ３个用作遗传种质 的马铃薯进行 了病毒检 测， 发现均带 Ｐ Ｘ 及 Ｐ Ｙ病毒 ， Ｖ ｖ 经茎尖培养获得 了这 ３个品种的
任何有 害生 物和 危险性 病 毒 ， 细菌 、 菌 、 菌 、 菌 如 真 病 类
在分 化培养 基 Ｍ１ Ｍ２及 Ｍ３上 ， 、 成苗 后转 至 生长 培养 基 Ｍ０上 ， 断 的茎尖 用 Ｍ 培养 基培 养 。ＭＳ基本 培养 切 基 配方 及配 制方 法如 下 ：
Ｍ０：ＭＳ ｐＨ ： ５． ８；
１ 材 料 与 方 法
Ｍ： ＭＳ＋ ／ ｐ ５． Ｂ９ ５ ｍｇ Ｌ， Ｈ＝ ８。
通 过分 化培养 基上 的成 苗情 况 ，比较 ３种分 化 培 养 基 的效果 。 １ ． 无毒 苗的健 康检 测 ４ 对获 得 的各个无 性 系进行 繁殖 ，到一定 的生 物量 时 各称 取 ５ｇ 通 过指 示 植 物进 行生 物 测 定 、 ， 电镜 观察 及 Ａ蛋 白酶 联进 行针对 Ｐ Ｘ及 Ｐ Ｙ 病 毒 的检 测 。生 Ｖ Ｖ 物测定 及 酶联 检测方 法 同上 ，电镜 观察 采用直 沾 法及 免疫 电镜 。
健康 无毒 苗 。
关键词 ： 马铃薯 ； 康检验 ； 健 无毒 Nhomakorabea ； 再生
马铃薯 种质 有广 泛 的应用 ，健 康种 质是 马铃 薯生 产 和品质改 良的基本 要求 。我 国动 植物 检疫 法则 明确 规定 ，由于马铃 薯带 有多 种危 险性 病毒及 其 他有 害生 物 ，禁止进 口种用 马铃 薯块 茎 及其 他 繁殖 材料 。国 内 生产 的马铃 薯原 种也 必须 维持 较高 的健 康水 平 ， 则 ， 否 通过 良种 繁 育 体 系 生 产 的 马 铃 薯 种 薯 就 可 能 先 天 带 毒 ，从 而引起 重 大 的产 量损 失 。健康 种质 是指 不带 有
２ 结 果
２１ 原 始材料 的健 康检 测 ．
１ 材料 来 源 ． １
材 料来 自山东乐 陵希 森马铃 薯产 业集 团 的 ３个 拟 进行病 毒抗 性改 良的马 铃 薯保存 品种 ， 编号 为 Ｐ ， ２ １Ｐ ，
Ｐ３。
２１１ 生物 学测 定 ：将 ３ 品种 的各 个样 品各 接种 到 ． ． 个 套鉴 别 寄主上 ， 结果 在 寄主 昆诺阿藜 上 出现坏 死斑 ， 心 叶烟 上 出现斑驳 ， 日红 上 出现红斑 ， 通烟 上 出现 千 普 局 部坏 死斑 、 叶明脉 、 叶 。 心 花 由此可见 ， ３个 马铃 薯 这
１ － 茎 尖 组 培 脱 毒 ３
品种不 同程 度地带 毒 。 ２１ ．． 酶联 检测 ： ２ 以马铃 薯 Ｘ及 Ｙ病 毒抗 血 清进 行 的 酶 联检 测 ， 果见 表 １ 结 。表 １说 明这 ３个 品种 带 有 马 铃 薯 ｘ 和 Ｙ病 毒 ， 但带 毒种 类及 带 毒率 有所 不 同 。其 中 ， Ｐ 带 毒率最 高 ， Ｐ Ｘ在 ３个 品种上 均可 见 。 以 ｌ 而 Ｖ
一
１ ． 原 始 材 料 的 健 康 检 测 ２
将 ３个 品种分 别种 植 ， 出苗后 编 号 ， 以株为单 位 进 行 抽样 检测 。根据 马铃 薯 可能携 带 的病毒 ，生 物测 定 选 用 昆诺 阿藜 、 日红 、 千 普通 烟 、 陀 萝 等指 示 植 物作 蔓 为鉴别 寄 主 ， 通过 汁 液摩 擦 接 种 ， 温室 中观 察 １ 在 ５天 以上 ； 联 检测 采 用 Ｓ Ａ Ｅ ＩＡ， 马铃 薯 Ｘ及 Ｙ 病 酶 Ｐ — ＬＳ 以 毒 的抗血 清检 测样 品 中有无 Ｐ Ｘ及 Ｐ Ｙ。 Ｖ Ｖ
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种 子科技 ・
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中 图分 类 号 ：Ｓ ５ ２０ ８ ３ ．３ 文 献 标 志码 ：Ａ
・ 实验研 究 ・
文 章 编 号 ：１ ０ —２ ９ ２ １ ） １ ０ ９ ０ ０ ５ ６ ０（ ０ １ ０ —０ ２ — ２
马 铃莺种 质硇 健康楦 验 及其无 毒苗硇再 生
Ｍ１ ＭＳ 泛酸 钙 ２ｍｇ ＋ Ａ ．５ｍｇ ｐ ＝ ．； ： ＋ ／ Ｇ ３ ２ ／ Ｈ ５８ Ｌ ０ Ｌ， Ｍ２ ＭＳ Ｂ ． ｍｇ ＋ 酸 钙 ２ｍｇ ＋ Ａ３ ．５ｍ ／ ， ： ＋ Ａ ０１ ／ 泛 Ｌ ／ Ｇ ２ ｇＬ Ｌ ０
ｐ ＝ ８； Ｈ ５．
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